CN105777875B - 一种抗菌肽cstc24及其应用 - Google Patents

一种抗菌肽cstc24及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105777875B
CN105777875B CN201610357119.3A CN201610357119A CN105777875B CN 105777875 B CN105777875 B CN 105777875B CN 201610357119 A CN201610357119 A CN 201610357119A CN 105777875 B CN105777875 B CN 105777875B
Authority
CN
China
Prior art keywords
antibacterial peptide
cstc24
application
peptide
antibacterial
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610357119.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105777875A (zh
Inventor
张敏
贺淑文
郝磊娜
程顺峰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qingdao Agricultural University
Original Assignee
Qingdao Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qingdao Agricultural University filed Critical Qingdao Agricultural University
Priority to CN201610357119.3A priority Critical patent/CN105777875B/zh
Publication of CN105777875A publication Critical patent/CN105777875A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105777875B publication Critical patent/CN105777875B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明涉及一种抗菌肽CSTC24及其应用，具体涉及一种抗菌肽，其特征在于：所述抗菌肽的序列如SEQ ID No.1所示。该抗菌肽可有效杀伤创伤弧菌、藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌三种鱼类致病菌，以及传染性脾肾坏死病毒。本发明的抗菌肽经实验验证效果优异。

Description

一种抗菌肽CSTC24及其应用
技术领域
本发明涉及分子微生物学领域，具体的说是一种抗菌肽及其应用。
背景技术
近年来，随着水产养殖规模的不断扩大和养殖环境的不断恶化，各种病害也随之频繁发生。目前水产养殖病害控制仍以传统的抗生素药物为主。长期使用抗生素不仅使细菌等病原产生耐药性，还造成药物在动物体内超量残留和养殖环境的严重污染，已严重影响到我国食品安全与养殖业的健康发展。因此，寻找能够替代传统抗生素药物的抗菌物质，实现环境无污染、水产品无药物残留的目标，已成为目前养殖业健康发展的迫切需求。抗菌肽几乎是所有生命物种都有的重要免疫分子,具有广谱抗菌活性和抗病毒、抗真菌、抗寄生虫及抗肿瘤等生物活性，并且抗菌肽具有不易产生耐药性、热稳定性强等传统抗生素药物不可替代优势，因而越来越受到人们的关注。最近研究发现，人类组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)的C末端衍生肽具有广谱抗菌和抗病毒作用，鱼类TFPI的研究仅限于美国红鱼，研究发现其重组蛋白和TFPI-1的C末端衍生肽对迟缓爱德华氏菌具较强的杀菌作用。
发明内容
为了克服上述缺陷，本发明一方面提供了一种抗菌肽，其特征在于：所述抗菌肽的序列如SEQ ID No.1所示。
进一步地，本发明的另一个方面提供了如上所述的抗菌肽在制备抑制细菌的药物中的应用。
进一步地，所述细菌为鱼类致病菌，优选为创伤弧菌、藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌。
进一步地，本发明的另一个方面提供了如上所述的抗菌肽在制备抗病毒的药物中的应用。
进一步地，所述病毒选自传染性脾肾坏死病毒。
有益效果
本发明的抗菌肽具有高效抑菌作用，可以有效抑制多种致病菌和病毒，因此可以应用于鱼类病害防治。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。实施例旨在对本发明进行举例描述，而非以任何形式对本发明进行限制。
实施例1
本发明的抗菌肽CSTC24具序列表SEQ ID No.1中的氨基酸序列。
序列SEQ ID No.1为：RRHCIKKCMKSRKHNERMIRIRRK
序列
(a)序列特征：
长度：24
类型：氨基酸序列
链型：单链
拓扑结构：线性
(b)分子类型：蛋白质
(c)假设：否
(d)反义：否
(e)最初来源：人工合成
本实施例合成的抗菌肽CSTC24按照Fmoc固相多肽合成法，最终得到纯度大于90％的抗菌肽CSTC24。合成时将一个Fmoc-氨基酸衍生物共价交联到树脂上，经过树脂溶胀，脱保护，称料，投料，反应后洗涤，检测，合成完毕后的洗涤和干燥后再连接下一个氨基酸，直至连完最后一个氨基酸，即得到抗菌肽CSTC24的序列，最后脱除N端Fmoc保护的氨基酸上面的保护基Fmoc，使N端裸露出来，并切除树脂，即得到纯化的抗菌肽CSTC24。经检测，所得抗菌肽的序列如SEQ ID No.1所示。本实施例的抗菌肽由苏州泰米克生物科技有限公司(苏州，中国)合成。
实施例2
抗菌肽CSTC24的应用
1)创伤弧菌、藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌的制备。在LB培养基中培养创伤弧菌、藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌分别至OD600为0.80，然后室温离心(5000g)10min，收集菌体，将其悬浮于LB中至终浓度为2×106CFU/ml。
所述PBS组成成分按重量百分比计：0.8％NaCl，0.02％KCl，0.358％，Na2HPO4.12H2O，0.024％NaH2PO4。
2)抗菌肽CSTC24的杀菌活性。将50μl上述步骤1)的菌液加入96孔细胞培养板中，与倍比稀释的CSTC24或PBS混合，28℃培养24h。结果发现，CSTC24对创伤弧菌、藤黄微球菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为：300μM，5μM和40μM；最小杀菌浓度为：300μM，10μM和80μM，而PBS组则完全不能抑制细菌生长。
3)抗菌肽CSTC24的抗病毒活性。将95μM的CSTC24或PBS与1ml传染性脾肾坏死病毒(2×108CFU/ml)的PBS悬液混合，室温放置4h。将实验用鱼半滑舌鳎分成两组，每组15条，然后将传染性脾肾坏死病毒与CSTC24(实验组)或PBS(对照组)的混合物腹腔注射半滑舌鳎，在注射后3d和5d分别在无菌条件下取鱼的脾脏，提取基因组DNA，利用绝对荧光定量PCR检测病毒拷贝数。结果发现，与对照组相比，实验组病毒的拷贝数在感染后3d和5d分别下降了1.25和106倍。说明CSTC24对传染性脾肾坏死病毒具有显著的杀伤作用。
Figure BDA0001000208340000031
Figure IDA0001000208410000011

Claims (1)

1.一种如SEQ ID No.1所示的抗菌肽在制备抗病毒的药物中的应用，所述病毒为传染性脾肾坏死病毒。
CN201610357119.3A 2016-05-26 2016-05-26 一种抗菌肽cstc24及其应用 Active CN105777875B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610357119.3A CN105777875B (zh) 2016-05-26 2016-05-26 一种抗菌肽cstc24及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610357119.3A CN105777875B (zh) 2016-05-26 2016-05-26 一种抗菌肽cstc24及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105777875A CN105777875A (zh) 2016-07-20
CN105777875B true CN105777875B (zh) 2020-02-11

Family

ID=56379523

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610357119.3A Active CN105777875B (zh) 2016-05-26 2016-05-26 一种抗菌肽cstc24及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105777875B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107298706B (zh) * 2017-07-31 2020-05-08 河南科技学院 一种荷斯坦奶牛脾脏源抗菌肽及其制备方法与应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101400365A (zh) * 2005-05-06 2009-04-01 诺华有限公司 利用tfpi治疗严重细菌感染
CN102070711A (zh) * 2010-11-05 2011-05-25 中国科学院海洋研究所 组织因子途径抑制物及其制备和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101400365A (zh) * 2005-05-06 2009-04-01 诺华有限公司 利用tfpi治疗严重细菌感染
CN102070711A (zh) * 2010-11-05 2011-05-25 中国科学院海洋研究所 组织因子途径抑制物及其制备和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
C-terminal peptides of tissue factor pathway inhibitor are novel host defense molecules;Praveen papareddy等;《The journal of biological chemistry》;20100903;第285卷(第36期);28387-28398 *
Fragmented tissue factor pathway inhibitor(TFPI) and TFPI C-terminal peptides eliminate serum-resistant escherichia coli from blood cultures;Sabine Schirm等;《The jouranl of infectious diseases》;20090615;第199卷;1807-1814 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN105777875A (zh) 2016-07-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wang et al. Identification, expression analysis, and antibacterial activity of NK-lysin from common carp Cyprinus carpio
Arasu et al. Bacterial membrane binding and pore formation abilities of carbohydrate recognition domain of fish lectin
CN105801680B (zh) 一种石斑鱼piscidin4多肽及其应用
CN115536737A (zh) 眼镜王蛇抗菌肽oh-cath30在抗水产动物致病菌中的应用
Huo et al. Molecular characterization, antibacterial activity and mechanism analyzation of three different piscidins from black rockfish, Sebastes schlegelii
KR20180060228A (ko) 유산균 유래 단백질 및 이의 제조방법
CN117586352A (zh) 一种基于宽体金线蛭唾液腺的抗菌多肽aph220及其应用
CN105777875B (zh) 一种抗菌肽cstc24及其应用
Li et al. Two isoforms of piscidin from Malabar grouper, Epinephelus malabaricus: Expression and functional characterization
CN106632606B (zh) 抗菌脂肽bacaucin衍生物及其在抑制细菌感染中的应用
CN105777876B (zh) 一种抗菌肽tc38及其应用
KR102267302B1 (ko) 항균 활성을 갖는 서양종 꿀벌 유래의 신규 펩타이드 및 이의 용도
Dai et al. Identification of two carcinin isoforms (MnCarc1 and MnCarc2) and their function in the antimicrobial immunity of Macrobrachium nipponense
CN106632611B (zh) 一种能抑制和杀灭多种耐药性细菌的新多肽
Peng et al. Tissue distribution, expression, and antimicrobial activity of Anas platyrhynchos avian β-defensin 6
CN113880933A (zh) 一种抗菌肽SsNKL27及其应用
CN106519000B (zh) 一种抗菌肽to2-24及其应用
US10150795B2 (en) Peptide having antimicrobial activity against pathogens and antimicrobial peptide composition comprising the same
Kasthuri et al. Genomic characterization, expression analysis, and antimicrobial function of a glyrichin homologue from rock bream, Oplegnathus fasciatus
KR20220037035A (ko) 왕전복에서 유래한 항균 펩타이드
Meng et al. pik3r3b, a novel immune-related gene in Nile tilapia (Oreochromis niloticus): Identification, expression and analysis of antibacterial activity
CN111848817A (zh) 一种兼具抗菌、抗病毒、免疫调节和抗炎活性的多功能杂合肽及其制备方法和应用
Konishi et al. Molecular cloning and multifunctional characterization of host defense peptides from the bullfrog Harderian gland with special reference to catesbeianalectin
CN1144597C (zh) 转基因抗菌肽蝇蛆中制备兽用基因抗菌肽药品的方法及其应用
US20230080731A1 (en) Bactericidal protein for control of campylobacter and listeria

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant