CN105769844A - 一种含精氨酸的组合物及制剂 - Google Patents

一种含精氨酸的组合物及制剂 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种含精氨酸的组合物及制备剂，含精氨酸的组合物其特征是按质量百分比由1％‑99％的精氨酸或精氨酸盐酸盐，1％‑99％的海藻糖组成。试验证明，本发明的一种含精氨酸的组合物及其制剂，无刺激，吸水性强，能有效吸收渗出液，同时本发明组合物不与创面发生粘连，即移除时不会产生疼痛感，为伤口提供湿性愈合环境，有效促进创面愈合，并且制备方法简单，生产周期短，处方精简，成本低。

Description

一种含精氨酸的组合物及制剂
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，具体的涉及一种含精氨酸的组合物及含有这种组合物的制剂。
背景技术
随着国内经济的迅速发展及人们水平的提高，人们生活方式也发生了巨大的改变，慢性疾病随之而来，慢性伤口就是其中一种。慢性伤口是指因为各种原因所致的皮肤组织受伤，其愈合大于8周的伤口，如溃疡性伤口、糖尿病伤口、压力性溃疡和手术后愈合不良的伤口。
通常而言，形成慢性伤口的病因较复杂，主要原因有静脉功能不全、外伤瘢痕和伤口感染等，而伤口处生长因子减少、新生的肉芽组织易受损及伤口抑制素失衡是延迟了伤口愈合的原因。因为绝大多数的慢性伤口由急性伤口发展而来，故慢性伤口的愈合时间会比正常伤口的愈合时间长5周左右，借助外力促使伤口加速愈合对患者便具有更重要意义。近年来，随着国内一些慢性疾病患者和慢性伤口患者人数的日益增加，如何提高慢性伤口的治疗疗效已成为临床界面临的重大难题之一。
精氨酸是人体内所有组织的蛋白质合成的必须底物，也是唯一的一种脒供体氨基酸，参与多胺、肌酸合成，也是尿素循环的重要参与者。精氨酸在正常成年人中是半必需氨基酸，儿童及饥饿、创伤和严重应激的成年人自身合成的精氨酸很低，必须有外源补充，此时精氨酸为必须氨基酸。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种含精氨酸的组合物。
本发明的第二个目的是提供一种含有上述组合物的制剂。
本发明的技术方案概述如下：
一种含精氨酸的组合物，按质量百分比由1％-99％的精氨酸或精氨酸盐酸盐，1％-99％的海藻糖组成。
包含上述组合物的凝胶剂，按重量百分比由1％-20％的含精氨酸的组合物，1％-20％的保湿剂，1％-15％的增稠剂，64％-78％的水制成。
保湿剂优选为甘油、丙二醇和1-3丁二醇中的至少一种。
增稠剂优选为羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、黄原胶和瓜尔豆胶中的至少一种。
还可以按常规技术制备喷剂、膏剂等。
试验证明，本发明的一种含精氨酸的组合物及其制剂，无刺激，吸水性强，能有效吸收渗出液，同时本发明组合物不与创面发生粘连，即移除时不会产生疼痛感，为伤口提供湿性愈合环境，有效促进创面愈合，并且制备方法简单，生产周期短，处方精简，成本低。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1
一种含精氨酸的组合物，按质量百分比由1％的精氨酸和99％的海藻糖组成。
实施例2
一种含精氨酸的组合物，按质量百分比由99％的精氨酸和1％的海藻糖组成。
实施例3
一种含精氨酸的组合物，按质量百分比由33.33％的精氨酸和66.67％的海藻糖组成。
实施例4
一种含精氨酸的组合物，按质量百分比由72％的精氨酸盐酸盐和28％的海藻糖组成。
实施例5
一种含精氨酸的组合物，按质量百分比由45％的精氨酸和55％的海藻糖组成。
实施例6
包含含精氨酸的组合物的凝胶剂，按质量百分比由实施例1的含精氨酸的组合物1％，甘油10％，丙二醇10％，羟乙基纤维素0.66％，瓜尔豆胶0.34％，水78％制成。
实施例7
包含含精氨酸的组合物的凝胶剂的制备，按质量百分比由实施例2的含精氨酸的组合物20％，1-3丁二醇1％，羧甲基纤维素钠6％，黄原胶9％，水64％制成。
实施例8
包含含精氨酸的组合物的凝胶剂的制备，按质量百分比由实施例3的含精氨酸的组合物3％，甘油18％，黄原胶4.5％，水74.5％制成。
实施例9
包含含精氨酸的组合物的凝胶剂的制备，按质量百分比取：实施例4的含精氨酸的组合物8％，丙二醇6.6％，1-3丁二醇3.4％，瓜尔豆胶12％，水70％制成。
实施例10
包含含精氨酸的组合物的凝胶剂的制备，按质量百分比由实施例5的含精氨酸的组合物14％，甘油8％，羟乙基纤维素1.6％，黄原胶6.4％，水70％制成。
实施例11
凝胶剂的制作方法：
(1)分别按实施例6-10之一的配方称取原料；
(2)将含精氨酸的组合物、水加入到水相罐中混合，加热至85℃，保温20min；
(3)将增稠剂与保湿剂混合，均匀后，倒入乳化罐中，将乳化罐加热至85℃；
(4)将步骤(2)中的混合物加入到乳化罐中，真空均质5min，搅拌20min；
(5)降温至40℃，即得。
试验：
下述试验中所使用的对照品及其制备方法如下：
对照1组：
(1)称取精氨酸1g，黄原胶4.5g，丙二醇18g，水74.5g；
(2)将精氨酸、水加入到水相罐中混合，加热至85℃，保温20min；
(3)将黄原胶与丙二醇混合，均匀后，倒入乳化罐中，将乳化罐加热至85℃；
(4)将步骤(2)中的混合物加入到乳化罐中，真空均质5min，搅拌20min；
(5)降温至40℃，即得。
对照2组：
(1)称取海藻糖2g，黄原胶4.5g，丙二醇18g，水74.5g；
(2)将海藻糖、水加入到水相罐中混合，加热至85℃，保温20min；
(3)将黄原胶与丙二醇混合，均匀后，倒入乳化罐中，将乳化罐加热至85℃；
(4)将步骤(2)中的混合物加入到乳化罐中，真空均质5min，搅拌20min；
(5)降温至40℃，即得。
对照3组：
(1)称取黄原胶4.5g，丙二醇18g，水74.5g；
(2)将丙二醇加热至85℃，保温20min，；加黄原胶搅拌25min，至均匀；
(3)降温至40℃，即得。
对照4组：藻酸盐敷料[泰州市榕兴抗粘敷料有限公司(苏食药监械(准)字2014第2640061号)]
下述试验中，各实施例组所使用的实验品均按照各实施例的百分含量，按照实施例11制成的凝胶剂。
实施例12
吸湿性试验
参照《2015版中国药典(第四部)》指导原则9103药物引湿性试验指导原则
1、取干燥的具塞玻璃称量瓶(外径为50mm，高为15mm)于前一天置于适宜的25℃±1℃恒温干燥器(下部放置氯化铵或硫酸铵饱和溶液)内，精密称重(m1)。
2.取实施例6-10制备的实验品、对照1组、对照2组，对照4组适量，置上述称量瓶中并平铺于称量瓶内，供试品厚度一般约为1mm，精密称重(m2)。
3.将称量瓶敞口，并与瓶盖同置于上述恒温恒湿条件下24小时。
4.盖好称量瓶盖子，精密称重(m3)。
增重百分率＝(m3-m2)/(m2-m1)×100％
5.引湿性特征描述与引湿性增重的界定。
潮解：吸收足量水分形成液体。
极具引湿性：引湿增重不小于15％。
有引湿性：引湿增重小于15％但不小于2％。
略有引湿性：引湿增重小于2％但不小于0.2％。
无或几乎无引湿性：引湿增重小于0.2％。
表1、引湿性实验结果
增重百分率(％) 引湿性
实施例6 15.71％ 极具引湿性
实施例7 15.32％ 极具引湿性
实施例8 16.43％ 极具引湿性
实施例9 15.38％ 极具引湿性
实施例10 15.09％ 极具引湿性
对照1组 12.84％ 有引湿性
对照2组 13.53％ 有引湿性
对照4组 10.37％ 有引湿性
实施例13
凝血：即血液凝固是指血液由流动的液体状态变成不能流动的凝胶状态的过程，是生理性止血的重要环节。血液凝固的实质就是血浆中的可溶性纤维蛋白原变成不可溶的纤维蛋白的过程。
试剂：氯化钙溶液、去离子水、抗凝血浆(柠檬酸钠：SD大鼠血＝1:6混匀)。
凝血试验：取直径为8mm的玻璃试管，每管分别加入0.05mg上述粉末、0.95ml去离子水,再加入氯化钙溶液1ml；摇匀后于各管内同时加入抗凝血浆1ml，轻摇、混匀，放入37摄氏度的水浴锅中观察，从加入抗凝血浆开始计时，至混合液凝固为止，计时停止。
表2、凝血实验结果(单位：秒)
组别 时间 组别 时间
实施例6 172.47±2.01△* 对照1组 326.84±2.67
实施例7 169.36±2.25△* 对照2组 344.52±2.08
实施例8 167.59±1.97△* 对照3组 血液无明显变化
实施例9 177.37±2.09△* 对照4组 285.37±2.48△
实施例10 174.58±1.99△*
△与对照1组比P＜0.05，*与对照2组比P＜0.05
实施例14
创面愈合试验
(一)
取100只Balb/c雄性小鼠，背部脱毛，用生理盐水清理干净。小鼠用1％戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，背部注射表柔比星(2mg/ml)。将形成溃疡性创面的小鼠随机分为10组，空白对照组不作任何处理，各组在涂抹对应实验品前，先用生理盐水清洗伤口，涂抹后用无菌纱布固定包扎伤口，每2天换药1次，观察伤口愈合情况。
每日观察并记录各组动物的生理、行为特征，创面形态及创面分泌物及动物死亡情况。
(1)创面愈合率＝(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积。对于原始创面及未愈合创面均用透明方格纸画创面形状的方法，以imageJ软件处理图片，计算创面愈合率。
表3创面情况表
*与空白对照组比P＜0.01；△与对照1组比P＜0.01
(二)
创面分泌物溶菌酶含量测定
溶菌酶是构成机体非特异性免疫力的一种重要抗菌质，广泛存在正常体液和各种分泌液中，主要由巨噬细胞释放，溶菌酶能水解细胞壁中的粘肽分子，使细菌溶解，而祈祷抗感染作用，同时，其含量的提高，促进了各种补体、抗体、纤维素及杀菌物质的增多，这些物质都是局部消炎、组织重建的重要条件，有利于创面的愈合。
参照“琼脂免疫扩散法”进行，在涂抹实验品3天、5天、10天时用脱脂棉吸取各组小鼠创面分泌物，置入装有1ml生理盐水试管中，反复震荡，洗液经3000r/min离心15min，取上清20ul，注入含金黄色葡萄球菌菌平皿孔内，25℃温育18h后，测量小孔中卫溶菌酶环直径。以同样方法，用不同浓度梯度的溶菌酶标准液绘制标准曲线。从曲线上查得分泌物中溶菌酶含量。
表4各组小鼠创面分泌物溶菌酶含量(mg/l)
组别 3天 5天 10天
实施例6 201.75±21.06 227.14±20.69*△ 293.69±22.48*△
实施例7 201.69±20.42 227.96±20.85*△ 294.74±21.36*△
实施例8 203.68±20.53 228.57±21.41*△ 297.35±20.68*△
实施例9 202.68±20.59 227.63±20.25*△ 295.44±20.67*△
实施例10 202.39±20.73 226.98±20.56*△ 296.37±21.05*△
对照1组 200.37±21.65 214.23±21.45* 272.69±22.08*
对照2组 200.65±21.82 215.78±20.12* 270.41±21.27*
对照3组 197.18±20.93 205.75±20.69 235.28±20.91
对照4组 199.64±21.07 208.39±20.46 246.38±20.65
空白对照组 198.34±20.36 205.36±21.39 230.38±21.08
*与空白对照组比P＜0.05；△与对照1组比P＜0.05
(三)
重复上述实验，分别于5天、10天每组随机选出5只小鼠，取创面处组织约30mg放入50ml锥形瓶中，加入6M盐酸10ml，置于电热鼓风干燥箱105℃下水解16小时，调pH至6.8-6.9，按羟脯氨酸试剂盒依次加入试剂液，混匀，60℃水浴15分钟，冷却后，3500转/分离心10分钟，取上清液在550nm处，1cm光径，测吸光度。根据试剂盒中公式计算出羟脯氨酸含量。
表5创面羟脯氨酸含量(ug/g)
组别 5天 10天
实施例6 22.3±1.9 31.2±1.8
实施例7 21.5±1.8 31.6±1.8
实施例8 23.2±2.0 32.5±2.0
实施例9 22.4±1.7 31.8±1.9
实施例10 22.6±1.7 31.7±1.9
对照1组 20.7±1.8 27.1±1.7
对照2组 20.5±1.9 27.2±2.0
对照3组 19.4±1.8 24.6±2.0
对照4组 20.1±2.1 25.6±1.7
空白对照组 19.3±1.6 23.4±1.7
实施例15
皮肤刺激性试验
采用健康新西兰白色纯种大白兔27只，体重不低于2kg，实验前4h将动物背部脊柱两侧被毛除去，范围约为5cm*5cm，作为试验和观察部位，随机分为9组，将实验品涂抹在左侧，右侧作为空白对照，将左侧涂抹实验品后用绷带固定4h，结束后拆除绷带，用蒸馏水洗去残留实验品。观察拆除绷带后1h，24h，48h和72h涂抹实验品部位及周围皮肤组织反应，包括红斑、焦痂、水肿和坏死等并做好记录。
表6、皮肤刺激性实验结果
以上述实施例仅表达了本发明的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (4)

1.一种含精氨酸的组合物，其特征是按质量百分比由1％-99％的精氨酸或精氨酸盐酸盐，1％-99％的海藻糖组成。
2.包含权利要求1所述组合物的凝胶剂，其特征在于按重量百分比由1％-20％的含精氨酸的组合物，1％-20％的保湿剂，1％-15％的增稠剂，64％-78％的水制成。
3.根据权利要求2所述的凝胶剂，其特征是所述保湿剂为甘油、丙二醇和1-3丁二醇中的至少一种。
4.根据权利要求2所述的凝胶剂，其特征是所述增稠剂为羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、黄原胶和瓜尔豆胶中的至少一种。
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