CN105767038A - 一种厚朴、大黄复配农用杀菌剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种厚朴、大黄复配农用杀菌剂及其制备方法。该杀菌剂是以厚朴、大黄和地锦草的复方提取液为主要成分，加入助剂复配而成的水悬浮剂，按重量百分比计由以下成分组成：复方提取液50‑80％，润湿分散剂4‑10％，防冻剂3‑10％，增稠剂0.1～0.5％，余量为水。其制备方法为：(1)将厚朴、大黄和地锦草按比例混合，粉碎，浸渍，60～85％乙醇提取，抽滤，减压浓缩得到1.0～3.0g生药/mL的复方提取液；(2)向复方提取液中依次加入防冻剂、增稠剂混合，加水定容，其中按重量百分比计，复方提取液50‑80％，润湿分散剂4‑10％，防冻剂3‑10％，增稠剂0.1～0.3％，余量为水。本发明的农用杀菌剂，成本低、效果好、无毒无残留、生产工艺简单，适宜工业化生产。

Description

一种厚朴、大黄复配农用杀菌剂及其制备方法

技术领域

本发明属于农药技术领域，涉及一种农用杀菌剂，具体涉及一种厚朴、大黄复配农用杀菌剂及其制备方法。

背景技术

干腐病又名枯萎病，为真菌性病害。主要危害球茎，也危害叶、花、根。球茎受害，表面出现水渍状红褐色至暗褐色小斑，逐渐扩大成圆形或不规则形，略凹陷，呈环状萎缩、腐烂；发病严重时，整个球茎变黑褐色，干腐。目前主要采用化学农药退菌特进行防治。其带来的环保、健康及残留和抗性等问题越来越受到关注。因此，寻求和开发对人类健康及生态环境安全的新型农药的需求越来越迫切。

与化学农药相比，生物农药通常被认为具有无公害、无污染、无残留、不易产生抗性等明显优点。

发明内容

为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种厚朴、大黄复配农用杀菌剂，用于防治果树、蔬菜、中草药等的干腐病。

本发明的另一目的在于提供一种所述厚朴、大黄复配农用杀菌剂的制备方法。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种厚朴、大黄复配农用杀菌剂，该杀菌剂是以厚朴、大黄和地锦草的复方提取液为主要成分，加入助剂复配而成的水悬浮剂，按重量百分比计由以下成分组成：复方提取液50-80％，润湿分散剂4-10％，防冻剂3-10％，增稠剂0.1～0.5％，余量为水。

所述复方提取液的原料按重量百分比计由厚朴40％-60％、大黄30％-50％、地锦草10-20％组成。

所述润湿分散剂为烷基糖苷、茶皂素、吐温80的混合物，其中，混合物的体积比为：烷基糖苷占混合物的10-55％；茶皂素占混合物的25-65％；吐温80占混合物的10-25％。

所述防冻剂为丙二醇或丙三醇。

所述增稠剂为黄原胶。

一种所述厚朴、大黄复配农用杀菌剂的制备方法，包括以下步骤：

1)将厚朴、大黄和地锦草按比例混合，粉碎，乙醇浸泡12小时，回流提取二次，提取时间为2-3小时，温度为60-70℃；合并提取液，滤过，减压浓缩得到1.0～3.0g生药/mL的复方提取液；

2)向复方提取液中依次加入防冻剂、分散湿润剂，研磨机研磨，混合，用已溶解了增稠剂的水溶液定容，其中按体积百分比计，复方提取液50-80％，润湿分散剂4-10％，防冻剂3-10％，增稠剂0.1～0.5％，余量为水。

优选地，所述步骤(1)中微波水提时的料与水之间的重量比为1︰6-10。

优选地，所述步骤(2)中已溶解了增稠剂的水溶液为将增稠剂稀释为1w/v％的水溶液。

本发明的优点在于：

本发明的厚朴、大黄复配农用杀菌剂，成本低、效果好、无毒无残留、生产工艺简单，适宜工业化生产。本发明的农用杀菌剂用于防治作物干腐病的生物农药，符合环保和健康理念，具有很大的市场潜力。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明做进一步说明。

本发明的农用杀菌剂的有效成分为厚朴、大黄、地锦草的水提取物。

厚朴为木兰科、木兰属植物，具有化湿导滞、行气平喘、化食消痰、驱风镇痛之效。厚朴原料资源丰富，价格低廉，性价比高。

大黄是多种蓼科大黄属的多年生草本植物的合称，主治实热便秘；热结胸痞；湿热泻痢；黄疸；淋病；水肿腹满；小便不利；目赤；咽喉肿痛；口舌生疮；胃热呕吐；吐血；咯血；衄血；便血；尿血；蓄血；经闭；产后瘀滞腹痛；症瘕积聚；跌打损伤；热毒痈疡；丹毒；烫伤。其主要成分为大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素甲醚等。

地锦草为大戟科植物。具有清热解毒、利湿退黄、活血止血。主痢疾、泄泻、黄疸；咳血；吐血；尿血；便血；崩漏；乳汁不下；跌打肿痛及热毒疮疡等，其主要成分为没食子酸、没食子甲脂、槲皮甙、槲皮素、肌醇和鞣酸等。

本发明的农用杀菌剂为水悬浮剂，是由不溶或微溶于水的固体原药借助某些助剂，通过研磨比较均匀地分散于水中，形成一种颗粒细小的高悬浮、能流动的稳定的液固态体系。水悬浮剂与乳油相比，不需要有机溶剂，对环境的污染少，制造工艺简单，药效高。

在以下实施例中，分别对制得的水悬浮剂进行悬浮率试验，热稳定性，低温稳定性，pH试验，具体试验过程如下：

1、悬浮率试验

试剂和仪器：标准硬水，硬度以碳酸钙计为0.342g/L、具塞量筒(250mL)、恒温水浴锅(30℃±2℃)。

试验步骤:

称取试样20mL，精确至0.0002g，置于盛有100mL，30℃±2℃标准硬水的量筒中，并用30℃±2℃标准硬水稀释至刻度，盖上塞子，以量筒中部为轴心，将量筒在1min内上下颠倒30次，打开塞子，再垂直放入无振动的恒温水浴中，避免阳光直射，放置30min。用吸管在10s～15s内将内容物的9、10(即225mL)悬浮液移出，不要摇动或挑起量筒内的沉降物，确保吸管的顶端总是在液面下几毫米处。

按高效液相色谱法测的那个试样和留在量筒底部25mL悬浮液中的有效成分质量。当试样的悬浮率大于85％认为该试样合格。

计算：

试样中有效成分悬浮率(％)计算如下：

$w2=\frac{m1-m2}{m1}\×\frac{10}{9}\×100$

m1----配制悬浮液所取试样中有效成分质量，单位为克(g)；

m2---留在量筒底部25mL悬浮液中有效成分质量，单位为克(g)；

----换算系数。

2、热稳定性

仪器：恒温箱(或恒温水浴，54℃士2℃)、安瓶或者54℃仍能密封的具塞玻璃瓶(50mL)、医用注射器(50mL)。

试验步骤：

用注射器将约30mL试样注入洁净的具塞玻璃瓶(避免试样接触瓶颈)，置此安瓶于冰浴中制冷，用高温火焰迅速封口(避免溶剂挥发)，至少封3瓶，冷却至室温称量。将封好的瓶置于金属容器内，再将金属容器放入54℃士2℃恒温箱(或恒温水浴)中，放置14d。取出冷至室温，将安瓶外面拭净分别称量，质量未发生变化的试样为合格。

3、低温稳定性

仪器：制冷器(0℃±2℃)；烧杯(100mL)；量筒(100mL)、离心机、离心管(100mL，管底刻度精确至0.05mL，与离心机配套)。

试验步骤：

取80mL的试样置于100mL烧杯中，在制冷器中冷却至0℃士2℃，保持1h，每间隔15min搅拌一次，每次15s，观察外观有无变化(有无固体物或油状物析出)。将烧杯放回制冷器，在0℃士2℃继续放置7d。7d后，将烧杯取出，恢复至室温，测试悬浮率pH等指标，若贮前与贮后相同或有轻微变化其变化(应在标准范围内)视冷贮合格。

4、pH试验

仪器：pH计、饱和甘汞电极、玻璃电极

试验步骤：

称取1g试祥于100mL烧杯中，加入100mL水，剧烈搅拌1min，静置1min。将冲洗干净的玻璃电极和饱和甘汞电极插入试样溶液中，测其pH值。至少平行测定三次，测定结果的绝对差值应小于0.1，取其算术平均值即为该试样的pH值。pH7～9定为试样合格。

实施例1

1)将原料按照重量份厚朴60份、大黄30份、地锦草10份的比例混合，粉碎，700份80％乙醇浸泡12小时，回流提取二次，提取时间依次为3小时、2小时，温度为60℃；合并提取液，滤过，减压浓缩得到1.0g生药/mL的复方提取液；

2)向复方提取液中依次加入润湿分散剂、防冻剂，研磨机研磨，混合，加入增稠剂混合，加水定容，其中按体积百分比计：复方提取液500mL，烷基糖苷25mL，茶皂素15mL，吐温80 10mL，丙三醇80mL，加1％黄原胶胶体溶液至1000mL。该农用杀菌剂的其悬浮率，热稳定性，低温稳定性，pH均合格。实施例2

1)将原料按照重量份厚朴55份、大黄35份、地锦草10份的比例混合，粉碎，800份75％乙醇浸泡12小时，回流提取二次，提取时间依次为3小时、2小时，温度为65℃；合并提取液，滤过，减压浓缩得到1.5g生药/mL的复方提取液；

2)向复方提取液中依次加入湿润分散剂、防冻剂，研磨机研磨，加入增稠剂混合，加水定容，其中按体积百分比计：复方提取液600mL，烷基糖苷20mL，茶皂素30mL，吐温8010mL，丙三醇90mL，加1％黄原胶胶体溶液至1000mL。该农用杀菌剂的其悬浮率，热稳定性，低温稳定性，pH均合格。

实施例3

1)将原料按照重量份厚朴50份、大黄40份、地锦草10份的比例混合，粉碎，900份70％乙醇浸泡12小时，回流提取二次，提取时间依次为3小时、2小时，温度为70℃；合并提取液，滤过，减压浓缩得到3.0g生药/mL的复方提取液；

2)向复方提取液中依次加入湿润分散剂、防冻剂，研磨机研磨，加入增稠剂混合，加水定容，其中按体积百分比计：复方提取液700mL，烷基糖苷10mL，茶皂素30mL，吐温8010mL，丙三醇100mL，加1％黄原胶胶体溶液至1000mL。该农用杀菌剂的其悬浮率，热稳定性，低温稳定性，pH均合格。

实施例4

1)将原料按照重量份厚朴55份、大黄35份、地锦草10份的比例混合，粉碎，1000份65％乙醇浸泡12小时，回流提取二次，提取时间依次为3小时、2小时，温度为65℃；合并提取液，滤过，减压浓缩得到2.0g生药/mL的复方提取液；

2)向复方提取液中依次加入湿润分散剂、防冻剂，研磨机研磨，加入增稠剂混合，加水定容，其中按体积百分比计：复方提取液600mL，烷基糖苷25mL，茶皂素35mL，吐温8010mL，丙三醇80mL，加1％黄原胶胶体溶液至1000mL。该农用杀菌剂的其悬浮率，热稳定性，低温稳定性，pH均合格。

实施例5

1)将原料按照重量份厚朴50份、大黄35份、地锦草15份的比例混合，粉碎，600份85％乙醇浸泡12小时，回流提取二次，提取时间依次为3小时、2小时，温度为70℃；合并提取液，滤过，减压浓缩得到2.5g生药/mL的复方提取液；

2)向复方提取液中依次加入湿润分散剂、防冻剂，研磨机研磨，加入增稠剂混合，加水定容，其中按体积百分比计：复方提取液600mL，烷基糖苷20mL，茶皂素20mL，吐温8010mL，丙二醇50mL，加1％黄原胶胶体溶液至1000mL。该农用杀菌剂的其悬浮率，热稳定性，低温稳定性，pH均合格。

实施例6

1)将原料按照重量份厚朴60份、大黄30份、地锦草10份的比例混合，粉碎，900份70％乙醇浸泡12小时，回流提取二次，提取时间依次为3小时、2小时，温度为70℃；合并提取液，滤过，减压浓缩得到1.8g生药/mL的复方提取液；

2)向复方提取液中依次加入湿润分散剂、防冻剂，研磨机研磨，加入增稠剂混合，加水定容，其中按体积百分比计，复方提取液650mL，烷基糖苷20mL，茶皂素40mL，吐温8010mL，丙三醇100mL，加1％黄原胶胶体溶液至1000mL。该农用杀菌剂的其悬浮率，热稳定性，低温稳定性，pH均合格。

实施例7

厚朴、大黄复配农用杀菌剂对苹果干腐病EC₅₀测定，具体步骤：配置带药(实施例6制得的杀菌剂)PDA培养基的终浓度分别为100.0000、50.0000、25.0000、12.5000、6.250、3.125、1.5625、0.7813、0.30605mg生药/mL，并有一组PDA培养基加入等量的无菌水作为空白对照组，每组浓度设置三个重复，取出培养好的干腐病菌平板，无菌操作条件下，用打孔器打取菌块，每次打取菌块直径约为6mm，接种菌块贴到各个培养基平板的中心处(菌丝朝下)，共计3×10＝30个平板。待菌块贴好后(培养约24h)倒置平板，26℃恒温培养箱培养。用十字交叉法测定菌径大小，每隔24h记录一次生长情况，据此通过式1、式2计算抑制率。

菌落直径(mm)＝测量菌落直径平均值(mm)-6(mm) (式1)

杀菌剂对干腐病病抑制率(％)＝(空白对照组菌落直径-带药组菌落直径)/空白对照组菌落直径×100％ (式2)

根据查找机率值换算表将计算得到的抑制率换算成机率值，以浓度对数为横坐标，机率值为纵坐标，采用最小二乘法做回归直线，并作图法得到机率值50.0时的厚朴、大黄复配农用杀菌剂浓度对数，据此计算出杀菌剂对苹果干腐病病的EC₅₀。

厚朴、大黄复配农用杀菌剂抑制苹果干腐病菌EC₅₀测定结果：EC₅₀＝0.5mg生药/mL。

实施例8大田试验

供试作物：苹果树，时间：2014年4月下旬开始。试验组和对照组均按常规果树管理进行。

试验设计及方法：小区试验为随机排列。重复3次，小区面积视实际情况而定。供试药剂使用实施例2中制备的农用杀菌剂按有效成分的含量分别稀释成浓度为100倍。药效试验方法共设2个处理：厚朴、大黄复配农用杀菌剂、40％福美砷(作为阳性对照)，均稀释100倍，清水为对照。采用树干涂抹法用药。施药前将病部树皮用刀刮剥到韧皮部，将药液涂抹于其上，每个处理重复3次，前两次间隔7天，后两次间隔10天。20天后再重复处理2次。分别在三个小区同时进行，并标记。采用随机排列，用药后在半年后和一年后分别调查处理病斑，计算不同小区的愈合率和复发率(见式3)式4，统计相对防效(式4)具体结果见表1。

计算：

表1两种药剂对苹果树干腐病的大田试验结果

由上表可以看出，厚朴、大黄复配农用杀菌剂稀释100倍时，苹果树干腐病愈合率相对防效为78.8％，复发率为8.3％；而阳性对照40％福美砷，40％福美砷100倍液对果树干腐病愈合率相对防效为46.7％，复发率为36.7％。可见厚朴、大黄复配农用杀菌剂对苹果干腐病防治效果优于40％福美砷可湿性粉剂。同时，该农用杀菌剂对于其他作物的干腐病也具有良好的防治效果。

Claims (8)

1.一种厚朴、大黄复配农用杀菌剂，其特征在于，该杀菌剂是以厚朴、大黄和地锦草的复方提取液为主要成分，加入助剂复配而成的水悬浮剂，按体积百分比计由以下成分组成：复方提取液50-80％，润湿分散剂4-10％，防冻剂3-10％，增稠剂0.1～0.5％，余量为水。

2.根据权利要求1所述的厚朴、大黄复配农用杀菌剂，其特征在于，所述复方提取液的原料按重量百分比计由厚朴40％-60％、大黄30％-50％、地锦草10-20％组成。

3.根据权利要求1或2所述的厚朴、大黄复配农用杀菌剂，其特征在于，所述润湿分散剂为烷基糖苷、茶皂素、吐温80的混合物，其中，混合物的体积比为：烷基糖苷占混合物的10-55％；茶皂素占混合物的25-65％；吐温80占混合物的10-25％。

4.根据权利要求1或2所述的厚朴、大黄复配农用杀菌剂，其特征在于，所述防冻剂为丙二醇或丙三醇。

5.根据权利要求1或2所述的厚朴、大黄复配农用杀菌剂，其特征在于，所述增稠剂为黄原胶。

6.一种权利要求1-5中任一项所述厚朴、大黄复配农用杀菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将厚朴、大黄和地锦草按比例混合，粉碎，65-85％乙醇溶液浸泡12小时，回流提取二次，每次提取时间为2～3小时，温度为60-70℃；合并提取液，滤过，减压浓缩得到1.0～3.0g生药/mL的复方提取液；

2)向复方提取液中依次加入防冻剂、润湿分散剂，研磨机研磨，混合，用已溶解了增稠剂的水溶液定容至1000mL，其中按复方提取液50-80％，润湿分散剂4-10％，防冻剂3-10％，增稠剂0.1～0.5％，余量为水。

7.根据权利要求6所述的厚朴、大黄复配农用杀菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中乙醇提取时的原料与乙醇溶液之间的重量比为1︰6～10。

8.根据权利要求6所述的厚朴、大黄复配农用杀菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中已溶解了增稠剂的水溶液为将增稠剂稀释为1w/v％的水溶液。