CN105683271A - 生物分解性树脂的分解方法 - Google Patents
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Abstract
本发明的目的在于提供一种有效率地分解生物分解性树脂的方法。尤其是,本发明涉及一种方法,其是在含有最佳pH为7.5以上的生物分解性树脂分解酶的缓冲液中分解生物分解性树脂的方法,上述缓冲液在其缓冲的平衡式的单侧不存在来自缓冲成分的阴离子,且其pH被调整为给予平衡向不存在上述阴离子的一侧移动的条件的pH区域内。进而,本发明涉及一种方法,其是在含有具有最佳浓度的生物分解性树脂分解酶的酶反应液中分解生物分解性树脂的方法,其特征在于,将在最佳浓度的生物分解性树脂分解率设为100%时,在设为60%以上的生物分解性树脂分解率的酶浓度的反应液中进行分解。
Description
技术领域
本发明涉及有效率地分解生物分解性树脂的方法。
背景技术
聚乳酸系树脂等生物分解性树脂以包装材料为代表,也被用于农业领域的地膜、用于地下资源挖掘的钻井法等,其用途逐渐扩大。与此相伴,寻求生物分解性树脂的分解速度的提高、分解触发或分解速度控制技术的开发等用于应对多样用途的技术的开发。在旋转式挖掘法的情况下,通过一边回流泥水一边利用钻孔机进行挖掘的方法,使用脱水调整剂作为完井液,形成被称为泥壁的一种过滤膜,稳定地保持坑壁而防止崩塌或使摩擦减轻。此外,水压破碎法通过将装满坑井内的流体以高压进行加压,在坑井附近使龟裂(压裂)生成,改善坑井附近的渗透率(流体的流动容易性),扩大油、气体等资源向坑井的有效流入断面,扩大坑井的生产率。
在完井液的情况下,主要使用碳酸钙、颗粒盐作为脱水调整剂,但在去除时需要进行酸处理,或由于在坑井的地层发生根部堵塞等而导致生产障碍。此外,水压破碎法中使用的流体也被称为压裂流体,以前使用如凝胶状的汽油那样的粘性流体,但最近,伴随着从存在于较浅的地方的页岩层产出的页岩气等的开发,考虑到对环境的影响,逐渐开始使用使聚合物溶解或分散于水而得的水性分散液。作为这种聚合物,已知聚乳酸。
即,聚乳酸是显示水解性和酶分解性的物质,即使残留于地下,也因地下的水分、酶而分解,因此不会对环境产生不良影响。此外,若将被用作分散介质的水也与汽油等相比,则可以说对环境的影响几乎没有。
此外,将这种聚乳酸的水分散液在坑井中填满,对其加压时,聚乳酸渗透至坑井附近,该聚乳酸进行水解而丧失树脂的形态,在渗透有该聚乳酸的部分生成空间(即,龟裂),因此,当然有可能增大资源向坑井的流入空间。
进而,聚乳酸也作为脱水调整剂发挥功能,也具有抑制被用作分散介质的水向地下的过度渗透、将对地层给予的环境变化抑制为最小限度的功能。由于在地下进行分解,因此也无需酸处理。
此外,作为聚乳酸分解物的乳酸是有机酸的一种,在分解聚乳酸后,乳酸被放出,将页岩层的页岩进行酸侵蚀,由此也具有促进页岩的多孔化的功能。
然而,聚乳酸在100℃以上的温度下可较快地水解,但小于100℃时的水解速度慢,因此,在应用于采集从地下温度低的地方产出的页岩气等时,其效率差,寻求改善。
另一方面,提出了使用聚乙醇酸代替聚乳酸。聚乙醇酸也作为生物分解性树脂而被知晓,而且,与聚乳酸相比水解性高,例如在80℃左右的温度下的水解速度与聚乳酸相比相当快,作为聚乳酸的替代品是有效的。
然而,聚乙醇酸存在与聚乳酸相比成本相当高的问题,这对于使用大量压裂流体的水压破碎法而言成为致命的缺点。此外,在特定的温度条件下,无法得到充分满足的分解性。
为了有效率地分解生物分解性树脂,例如,开发出通过配合利用水解放出酸的脂肪族聚酯来提高生物分解性的易分解性树脂组合物(国际公开2008-038648号公报),此外,报告了上述易分解性树脂组合物的分解方法等(日本特开2010-138389号公报)。此外,报告了使用各种水解酶而在溶液中分解生物分解性树脂的方法(日本特开2003-284550公报、日本特开2005-162832号公报)。然而,期望开发使生物分解性树脂的分解速度进一步提高的技术。
发明内容
本发明的目的在于提供一种有效率地分解生物分解性树脂的方法。
本申请发明人等发现,在缓冲液中分解生物分解性树脂时,通过使用规定的生物分解性树脂分解酶和缓冲液,可以高效率地分解生物分解性树脂。
即,本发明在第1方式中提供一种方法,其是在含有最佳pH为7.5以上的生物分解性树脂分解酶的缓冲液中分解生物分解性树脂的方法,上述缓冲液在其缓冲的平衡式的单侧不存在来自缓冲成分的阴离子,且其pH被调整为给予平衡向不存在上述阴离子的一侧移动的条件的pH区域内。
本申请发明人等进一步发现,将生物分解性树脂在溶液中进行分解时,特定的水解酶具有使得生物分解性树脂的分解效率为最大的最佳浓度(即,依赖于酶浓度的分解峰)。
即,本发明在第2方式中提供一种方法,其是在含有具有最佳浓度的生物分解性树脂分解酶的酶反应液中分解生物分解性树脂的方法,其特征在于,将上述最佳浓度的生物分解性树脂分解率设为100%时,在设为60%以上的生物分解性树脂分解率的酶浓度的反应液中进行分解。
根据本发明,能够高速地分解生物分解性树脂。
附图说明
图1表示使用不同种类和pH的缓冲液的聚乳酸膜的分解的结果。
图2表示对于聚乳酸膜的Savinase分解曲线。
图3表示对于聚乳酸树脂的Esperase分解曲线。
图4表示对于聚乳酸树脂的ProteinaseK分解曲线。
具体实施方式
1.本发明的第1方式中,提供一种方法,其是在含有最佳pH为7.5以上的生物分解性树脂分解酶的缓冲液中分解生物分解性树脂的方法,上述缓冲液在其缓冲的平衡式的单侧不存在来自缓冲成分的阴离子,且其pH被调整为给予平衡向不存在上述阴离子的一侧移动的条件的pH区域内。
本发明的第1方式中,生物分解性树脂没有特别限定,通常使用具有生物分解性的脂肪族聚酯等。作为具有生物分解性的脂肪族聚酯,例如可举出聚乳酸系树脂、聚丁二酸丁二醇酯、聚己内酯、聚羟基丁酸酯、聚丁二酸丁二醇酯-己二酸酯共聚物、上述脂肪族聚酯的共聚物、以及聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚萘二甲酸乙二醇酯、聚对苯二甲酸丁二醇等芳香族聚酯与上述脂肪族聚酯的共聚物等。它们可以单独使用,也可以组合使用2种以上。
作为形成上述脂肪族聚酯的共聚物的成分,例如可举出乙二醇、丙二醇、丁二醇、辛二醇、十二烷二醇、新戊二醇、甘油、季戊四醇、山梨糖醇酐、双酚A、聚乙二醇等多元醇;琥珀酸、己二酸、癸二酸、戊二酸、癸烷二羧酸、环己烷二羧酸、对苯二甲酸、间苯二甲酸、蒽二羧酸等二羧酸;乙醇酸、L-乳酸、D-乳酸、羟基丙酸、羟基丁酸、羟基戊酸、羟基己酸、扁桃酸、羟基苯甲酸等羟基羧酸;乙交酯、己内酯、丁内酯、戊内酯、丙内酯、十一烷酸内酯等内酯类等。
作为进行共混的聚合物,可举出纤维素类、几丁质、糖原、壳聚糖、聚氨基酸、淀粉等。另外,使用聚乳酸时的聚合中使用的乳酸可以是L-体或D-体中的任一者,也可以是L-体和D-体的混合物。
作为优选的具有生物分解性的脂肪族聚酯,可举出聚乳酸系树脂、聚丁二酸丁二醇酯等,特别优选为聚乳酸系树脂。
作为具有生物分解性的脂肪族聚酯的分子量,没有特别限定,若考虑使用含有脂肪族聚酯的生物分解性树脂制造容器等时的机械特性或加工性,则以重均分子量计优选为5000~1000000的范围,更优选为10000~500000的范围。
对于通过本发明的第1方式的方法而分解的生物分解性树脂,也可以根据需要配合公知的增塑剂、热稳定剂、光稳定剂、抗氧化剂、紫外线吸收剂、阻燃剂、着色剂、颜料、填料、填充剂、脱模剂、防静电剂、香料、润滑剂、发泡剂、抗菌·抗霉剂,成核剂等添加剂。此外,也可以在不损害本发明的效果的范围内配合具有生物分解性的脂肪族聚酯以外的树脂。例如,除聚乙二醇、聚乙烯醇等水溶性的树脂以外,还可以配合聚乙烯、聚丙烯、乙烯-丙烯共聚物、酸改性聚烯烃、乙烯-甲基丙烯酸共聚物、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、离聚物树脂、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚对苯二甲酸丁二醇酯、聚乙酸乙烯酯、聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚酯橡胶、聚酰胺橡胶、苯乙烯-丁二烯-苯乙烯共聚物等。
另外,为了提高分解性,上述酶分解性树脂也可以配合酯分解促进性的水解树脂(以下有时简称为“酯分解性树脂”)。
该酯分解性树脂在其单独时未示出酯分解能力,但与水分混合时会放出作为酯分解的催化剂发挥功能的酸或碱。
这种酯分解性树脂通常均匀地被分散于上述难水解性的水解性树脂的内部,为了迅速地促进利用从该酯分解性树脂放出的酸或碱的水解性树脂的水解,例如,使用其重均分子量为1000~200000左右的树脂。
此外,该酯分解树脂中,作为碱放出性的物质,可使用丙烯酸钠等丙烯酸的碱金属盐、藻酸钠等,但是由于碱放出对环境产生的不良影响大,因此特别适合使用酸放出性的物质。
作为酸放出性的酯分解树脂,特别优选使用0.005g/ml浓度的水溶液或水分散液中的pH(25℃)示出4以下、尤其是示出3以下,且与水混合时容易地水解而放出酸的聚合物。
作为上述聚合物,例如,可举出聚草酸酯、聚乙醇酸等。它们可以为共聚物,可以单独使用,也可以组合使用2种以上。
作为形成共聚物的成分,例如可举出乙二醇、丙二醇、丁二醇、辛二醇、十二烷二醇、新戊二醇、甘油、季戊四醇、山梨糖醇酐、双酚A、聚乙二醇等多元醇;琥珀酸、己二酸、癸二酸、戊二酸、癸烷二羧酸、环己烷二羧酸、对苯二甲酸、间苯二甲酸、蒽二羧酸等二羧酸;乙醇酸、L-乳酸、D-乳酸、羟基丙酸、羟基丁酸、羟基戊酸、羟基己酸、扁桃酸、羟基苯甲酸等羟基羧酸;乙交酯、己内酯、丁内酯、戊内酯、丙内酯、十一烷酸内酯等内酯类等。
另外,本说明书中,在均聚物、共聚物、混合物中,将至少聚合草酸作为一个单体的聚合物作为聚草酸酯。
尤其是,上述聚草酸酯、聚乙醇酸是易水解性的水解性树脂,快速地水解,因此难水解性树脂的水解促进能力优异。这些之中,聚草酸酯、尤其是聚草酸亚乙酯(polyethyleneoxalate)示出与聚乙醇酸相比显著提高的水解促进能力,即使在80℃以下的温度下也可以显著促进聚乳酸等难水解性树脂的水解,而且,与聚乙醇酸相比还相当廉价,成本的优点也极大。
通过本发明的第1方式的方法分解的生物分解树脂可采用颗粒、膜、粉末、单层纤维、芯鞘纤维、胶囊等形态,但不限定于它们,可以通过其自身公知的方法进行制造。
作为本发明的第1方式中使用的生物分解性树脂分解酶,只要是最佳pH为7.5以上且通常分解分解生物分解性树脂的分解酶,则没有特别限定,本领域技术人员可使用任意的分解酶。上述酶的最佳pH更优选为8.0以上,进一步优选为8.5以上。作为这种酶,优选为碱性蛋白酶、碱性纤维素酶、酯酶、角质酶、脂肪酶等,例如,可使用novozymes公司制的Savinase。本领域技术人员可以适当决定酶的量,例如能够以每个使用的酶的活性单元为基准对应于要分解的生物分解性树脂的种类等而决定。
作为本发明的第1方式中使用的缓冲液,使用在其缓冲的平衡式的单侧不存在来自缓冲成分的阴离子,且其pH被调整为给予平衡向不存在上述阴离子的一侧移动的条件的pH区域内的缓冲液。作为这种缓冲液,例如可举出具有Tris-盐酸缓冲液(三氨基甲烷)或2-环己基氨基乙烷磺酸(CHES)缓冲液、Bis-Tris缓冲液、MOPS缓冲液、HEPES缓冲液等Good’s缓冲液作为缓冲成分的缓冲液等,将上述缓冲液以成为给予平衡向不存在来自缓冲成分的阴离子的一侧移动的条件的pH区域的范围内的方式进行调整而使用。此外,以满足上述pH条件为前提,缓冲液的pH进一步优选为7.5以上,更优选为8.0以上,特别优选为8.5以上、9.0以上、9.5以上、10.0以上。
本发明的第1方式中,“给予平衡向不存在(来自缓冲成分的)阴离子的一侧移动的条件的pH区域”并不是完全排除在缓冲液中存在来自缓冲成分的阴离子的情况。在通常情况下,给予平衡向不具有阴离子的一侧移动的条件的pH区域能够以平衡的pKa值为基准,以(根据平衡式)大于或小于该pKa值的范围来决定。只要满足上述条件,缓冲液的pH即使在该缓冲pH范围外也没关系。
例如,使用Tris-盐酸缓冲液(三氨基甲烷)(pKa=8.06)(参照后述的实施例1-1)作为缓冲液时,可以将pH设为大于8.06,例如设为8.5以上,9.0以上、10.0以上、10.5以上等。同样地,使用CHES缓冲液(pKa=9.3)(参照后述的实施例1-2)时,可以将pH设为小于9.3,例如设为9.0以下、8.5以下、8.0以下等,但若考虑使用的酶的活性pH区域,则作为缓冲液的pH的下限,优选为7.5以上、8.0以上、8.5以上等。
此外,本领域技术人员能够适当决定缓冲液的浓度,例如可使用设为10mM~200mM、优选设为50mM~150mM作为盐浓度的缓冲液。
进而,对于将生物分解性树脂在缓冲液中进行分解时的时间、温度等条件,本领域技术人员可以根据使用的酶或生物分解性树脂的种类或量而适当决定。
2.此外,本发明的第2方式中,提供一种方法,其是在含有具有最佳浓度的生物分解性树脂分解酶的酶反应液中分解生物分解性树脂的方法,其特征在于,将在上述最佳浓度的生物分解性树脂分解率设为100%时,在设为60%以上的生物分解性树脂分解率的酶浓度的反应液中进行分解。
本发明的第2方式中使用的生物分解性树脂没有特别限定,与上述本发明的第1方式同样地使用通常具有生物分解性的脂肪族聚酯等。除具体的脂肪族聚酯的种类以外,在包括形成能够使用的共聚物的成分、添加剂、酯分解性树脂、能够采用的形态等的全部方面,均可以使用与上述本发明的第1方式中记载的内容相同的内容。
作为本发明的第2方式中使用的生物分解性树脂分解酶,只要通常在溶液中具有使得生物分解性树脂的分解效率最大的最佳浓度(即,依赖于酶浓度的分解峰),则没有特别限定。上述生物分解性树脂分解酶是本领域技术人员可通过试验等适当选出的,例如碱性蛋白酶通常具有生物分解性树脂分解活性的最佳浓度,本发明的第2方式中,可优选使用Savinase和Esperase等。此外,作为本发明的第2方式中使用的生物分解性树脂分解酶的最佳pH,优选为7.5以上,更优选为8.0以上,进一步优选为8.5以上。
作为本发明的第2方式的生物分解性树脂的分解方法中使用的反应液中的酶浓度,将使生物分解性树脂的分解为最大的最佳浓度的生物分解性树脂分解率设为100%时,使用设为60%以上、优选设为70%以上、更优选设为80%以上、特别优选设为90%以上的生物分解性树脂分解率的酶浓度。该最佳浓度可以通过在具有不同的酶浓度的多个反应液中将生物分解性树脂实际地分解而以实验方法求出。本发明的第2方式中,优选以分解前的生物分解性树脂的单位表面积的酶浓度为基准,对应于分解的生物分解性树脂而决定酶的最佳浓度,可以对应于膜、颗粒、粉末等任意的形体和重量的生物分解性树脂的表面积,以实验方法求出在本申请规定的反应液中使该生物分解性树脂的分解率为最大的酶浓度。
对于膜形态的生物分解性树脂,生物分解性树脂的表面积可以方便地使用基于膜的表面和背面的二维尺寸而计算的表面积,此外,对于颗粒、粉末、单层纤维、芯鞘纤维、胶囊等,可以设为通过利用透射法、气体吸附法、基于尺寸测定的表面积计算而测定的表面积。
作为本发明的第2方式中使用的缓冲液,只要是通常以使pH稳定化为目的而使用的缓冲液,则没有特别限定。作为这种缓冲液,可举出甘氨酸-盐酸缓冲液、磷酸缓冲液、Tris-盐酸(三氨基甲烷)缓冲液、2-环己基氨基乙烷磺酸(CHES)缓冲液、乙酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、柠檬酸-磷酸缓冲液、硼酸缓冲液、酒石酸缓冲液、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液等。此外,也可以是固体的中和剂,例如可举出碳酸钙、壳聚糖、去质子离子交换树脂等。本发明的第2方式中,优选使用在pH7~12的范围内具有缓冲能力的缓冲液,更优选使用在pH8~11范围内、进一步优选使用在pH8.5~10.5范围内具有缓冲能力的缓冲液。本发明的第2方式中,优选为Tris-盐酸(三氨基甲烷)缓冲液和2-环己基氨基乙烷磺酸(CHES)缓冲液,特别优选为2-环己基氨基乙烷磺酸(CHES)缓冲液。
对于缓冲液的pH,本领域技术人员可以根据使用的酶的种类等而适当决定,优选为7.5以上,更优选为8.0以上,特别优选为8.5以上、9.0以上、9.5以上、10.0以上。
此外,对于缓冲液的浓度,本领域技术人员能够适当决定,例如可使用设为10mM~200mM、优选设为50mM~150mM作为盐浓度的缓冲液。
进而,对于将生物分解性树脂在缓冲液中分解时的时间、温度等条件,本领域技术人员可以根据使用的酶或生物分解性树脂的种类或量而适当决定。
实施例
以下,通过实施例具体地说明本发明。
1.对根据本发明的第1方式的生物分解性膜的酶分解试验
在制备为100mM、pH10.5(关于CHES缓冲液,仅为pH9.0和pH10.5)的各缓冲液30ml中添加Savinase酶液100μL而制成分解液,将剪切成2cm×2cm(120mg)的聚乳酸膜进行浸渍,以45℃、100rpm使之振动16小时。在16小时后取出膜而以70℃使其干燥3小时,设为膜的初期重量-分解后重量=分解量(mg)。
聚乳酸膜的制作
使用LaboPlastoMill(株式会社东洋精机制作所制)以210℃将聚乳酸(Natureworks公司制)制膜为厚度100μm的聚乳酸膜。
使用的生物分解性树脂分解酶如下所述。
Savinase酶液
使用Savinase16.0L(novozymes公司)。
使用以下缓冲液。
(i)Tris缓冲液(7.0~9.0pKa=8.06)
(ii)CHES缓冲液(8.6~10.0pKa=9.3)
(iii)磷酸缓冲液(5.8~8.0pKa1=2.12pKa2=7.21pKa3=12.67)
(iv)Bicine(N,N-二羟乙基甘氨酸)缓冲液(7.0~9.0pKa=8.06)
(v)TAPS缓冲液(7.5~9.4pKa=8.44)
(vi)Tricine(三羟甲基甘氨酸)缓冲液(7.2~9.1pKa1=2.3pKa2=8.15)
对于上述(ii)CHES缓冲液,准备pH9.0和pH10.5这2种,对于其它缓冲液,使用调节为pH10.5的缓冲液。
(实施例1-1)
在制备为100mM、pH10.5的Tris缓冲液30ml中添加Savinase酶液100μL而制成分解液,将剪切成2cm×2cm(120mg)的聚乳酸膜进行浸渍,以45℃、100rpm使之振动16小时。在16小时后取出膜而以70℃使其干燥3小时,设为膜的初期重量-分解后重量=分解量(mg)。
(实施例1-2)
除了设为将缓冲液制备为100mM、pH9.0的CHES缓冲液以外,与实施例1-1同样地进行。
(比较例1-1)
除了将缓冲液设为磷酸缓冲液以外,与实施例1-1同样地进行。
(比较例1-2)
除了将缓冲液设为Bicine缓冲液以外,与实施例1-1同样地进行。
(比较例1-3)
除了将缓冲液设为TAPS缓冲液以外,与实施例1-1同样地进行。
(比较例1-4)
除了将缓冲液设为Tricine缓冲液以外,与实施例1-1同样地进行。
(比较例1-5)
除了将CHES缓冲液的pH设为10.5以外,与实施例1-2同样地进行。
将实施例1-1~1-2和比较例1-1~1-5中的聚乳酸膜的分解的结果示于下述的表1和图1。
根据这些结果可理解,使用了本申请规定的缓冲液的实施例1-1、1-2可高度地分解聚乳酸膜。
[表1]
表1
缓冲液的种类 | 缓冲液的pH | 重量减少量(mg) | |
实施例1-1 | Tris | 10.5 | 55.65 |
实施例1-2 | CHES | 9.0 | 35.37 |
比较例1-1 | 磷酸 | 10.5 | 0 |
比较例1-2 | Bicine | 10.5 | 0.08 |
比较例1-3 | TAPS | 10.5 | 0.72 |
比较例1-4 | Tricine | 10.5 | 1.89 |
比较例1-5 | CHES | 10.5 | 2.00 |
2.对根据本发明的第2方式的生物分解性膜的酶分解试验
在添加Savinase、Esperase或ProteinaseK(蛋白酶K)酶液且制成分解液的100mMCHES缓冲液(pH9.0)30ml中浸渍剪切成2cm×2cm(120mg)的聚乳酸膜,以45℃、100rpm使之振动16小时。在16小时后取出膜而以70℃使其干燥3小时,设为膜的初期重量-分解后重量=分解量(mg)。制成在纵轴设为分解量(mg)/初期膜表面积(8cm2)=单位面积的分解量、在横轴设为初期酶浓度(mg/mL)/初期膜表面积(8cm2)=单位面积的初期酶添加量的图,在将最佳浓度的存在的酶设为○、将除此以外的酶设为×、将在最佳浓度的分解量设为100%时,将可看到60%以上的分解量的浓度设为○,将小于60%的情况设为×。
聚乳酸膜的制作
使用LaboPlastoMill(株式会社东洋精机制作所制)以210℃将聚乳酸(Natureworks公司制)制膜为厚度100μm的聚乳酸膜。
使用的生物分解性树脂分解酶如下所述。
(i)Savinase酶液
使用Savinase16.0L(novozymes公司)。
(ii)Esperase酶液
使用Esperase8.0L(novozymes公司)。
(iii)proK(ProteinaseK)酶液
使来自Tritirachiumalbum的ProteinaseK粉末20mg溶解于含有50w/w%甘油的0.05MTris-HCl缓冲液(pH8.0)1ml,制成proK(ProteinaseK)酶液而使用。
(实施例2-1)
添加Savinase酶液50μl,在100mMCHES缓冲液(pH9.0)30ml中浸渍剪切成2cm×2cm(120mg)的聚乳酸膜,以45℃、100rpm使之振动16小时。在16小时后取出膜而以70℃使其干燥3小时,设为膜的初期重量-分解后重量=分解量(mg)。
(实施例2-2~2-6、比较例2-1~2-18)
采用与实施例2-1同样的缓冲液、乳酸膜和分解条件,如下述表2所示地改变酶液及其量而进行酶分解试验。
将各实施例和比较例的试验条件和分解试验的结果示于以下的表2和图2~4。
[表2]
表2
由图2、3可理解,对于作为本申请的第2方式规定的分解酶的Savinase和Esperase,若使单位表面积的酶浓度发生改变,则存在生物分解性树脂的分解成为最大的最佳浓度。与此相对,如图4所示,在作为以往的分解方法中主要使用的酶的蛋白酶K的情况下,不存在生物分解性树脂的分解成为最大的最佳浓度。此外,以往即使在假定使用具有最佳浓度的生物分解性树脂分解酶的情况下,也没有认识到以生物分解性树脂的单位表面积的酶浓度为基准而存在分解峰,在无法得到高度分解的酶浓度条件下进行了分解。本发明的第2方式是发现在将生物分解性树脂在缓冲液中分解的条件下规定的酶具有最佳浓度这样的性质用于提高分解率而得到的。
Claims (6)
1.一种方法,是在含有最佳pH为7.5以上的生物分解性树脂分解酶的缓冲液中分解生物分解性树脂的方法,所述缓冲液在其缓冲的平衡式的单侧不存在来自缓冲成分的阴离子,且其pH被调整为给予平衡向不存在所述阴离子的一侧移动的条件的pH区域内。
2.如权利要求1所述的方法,其中,缓冲液的缓冲成分为三氨基甲烷或2-环己基氨基乙烷磺酸。
3.一种方法,其特征在于,是在含有具有最佳浓度的生物分解性树脂分解酶的酶反应液中分解生物分解性树脂的方法,将在最佳浓度的生物分解性树脂分解率设为100%时,在设为60%以上的生物分解性树脂分解率的酶浓度的反应液中进行分解。
4.如权利要求1~3中任一项所述的方法,其中,生物分解性树脂分解酶为碱性蛋白酶。
5.如权利要求1~4中任一项所述的方法,其中,生物分解性树脂含有聚乳酸系树脂。
6.如权利要求1~5中任一项所述的方法,其中,生物分解树脂为颗粒、膜、粉末、单层纤维、芯鞘纤维或胶囊的形态。
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