CN105628801A - 一种液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法 - Google Patents

Abstract

本发明属分析化学领域，本发明公开了一种用液相色谱法分析3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，该方法选用Waters？T₃色谱柱，以一定的比例无机盐缓冲溶液—有机相为流动相，可以定量测定3-氨基-1,2,4-三氮唑的纯度及杂质含量，从而有效控制3-氨基-1,2,4-三氮唑的质量。本发明方法专属性强，准确度高，操作简便。

Description

一种液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及高效液相方法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，尤其涉及高效液相方法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法。

背景技术

3-氨基-1,2,4-三氮唑作为一种应用广泛的有机中间体，其化学结构式为：

该物质主要用于化工、农药、医药、染料等行业，还可直接用做除草剂、润滑剂以及金属缓蚀剂等。3-氨基-1,2,4-三氮唑的主要杂质是在合成3-氨基-1,2,4-三氮唑的反应过程中生成的，并且这些杂质对产品的品质影响较大。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分析3-氨基-1,2,4-三氮唑的纯度以及有关杂质含量的方法，从而保证3-氨基-1,2,4-三氮唑的纯度，实现其产品质量控制。

本发明的技术解决方案如下：

一种液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特殊之处在于：包括以下步骤：

1)分别制备标准样溶液和样品溶液；

2)利用WatersT₃色谱柱、KromasilC₁₈色谱柱和VenusilXBP-C₁₈色谱柱中的一种分别对标准样溶液和样品溶液进行检测，并记录两种溶液色谱图，三种色谱柱的流动相相同，流动相由无机盐缓冲溶液和有机相组成，有机相与无机盐缓冲液比例为：5～25：95～75(V/V)，无机盐缓冲溶液的pH值为2～6；

3)通过对两种色谱图进行分析，计算3-氨基-1,2,4-三氮唑的纯度。

上述有机相与无机盐缓冲液比例为：20:80。

上述有机相为甲醇。

上述无机盐缓冲溶液中所含无机盐的浓度为0.02mol/L。

上述无机盐缓冲溶液中无机盐选自碳酸盐、磷酸盐、醋酸盐中的一种或几种。

上述无机盐为磷酸盐，磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠或磷酸二氢钾中的一种或几种。

上述无机盐为磷酸二氢钾。

上述流动相的流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为195nm～250nm，色谱柱柱箱温度为20～50℃。

上述流动相流速0.8ml/min，所述检测波长为214nm，色谱柱柱箱温度为35℃。

上述步骤1)具体为：

1.1)取3-氨基-1,2,4-三氮唑标准样品适量，使用纯水溶解，作为标准样品溶液；

1.2)取3-氨基-1,2,4-三氮唑待测样品适量，使用纯水溶解，作为待测样品溶液。

本发明与现有技术相比，优点是：

1、本发明采用C₁₈色谱柱快速准确的实现了3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及有关物质含量的测定，从而实现了3-氨基-1,2,4-三氮唑中杂质的控制，保证了3-氨基-1,2,4-三氮唑的质量可控，具有现实意义。

2、本发明能够有效测定3-氨基-1,2,4-三氮唑的有关物质，方法简单快捷，分析灵敏度高，结果准确可靠。

3、本发明在制样时使用纯水，具有操作简单、经济的优点。

附图说明

图1为标准样品的色谱图；

图2为待测样品的色谱图。

具体实施方式

以下实施例用于进一步理解本发明，是本发明的优选实施例，但本发明不限于本实施例的范围。

实施例1

仪器与条件

液相色谱仪：日本岛津LC-10AT

色谱柱：WatersT₃柱5μm250×4.6mm

检测波长：214nm

流动相：磷酸盐缓冲液(0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，使用磷酸调节pH为3.8)-甲醇(80:20)

柱温：35℃

流速：0.8ml/min

实验步骤

取3-氨基-1,2,4-三氮唑标样约10mg，置于25ml容量瓶中，加纯水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为标准样品溶液。

取标准样品溶液10μL，按上述色谱条件进行分析，记录色谱图，结果见图1。

图1中保留时间为3.65min的色谱峰为3-氨基-1,2,4-三氮唑的色谱峰，其余的色谱峰为3-氨基-1,2,4-三氮唑杂质色谱峰。在上述条件下3-氨基-1,2,4-三氮唑及其杂质的色谱峰分离度良好，可以满足分析测试的要求。

实施例2

仪器与条件

液相色谱仪：日本岛津LC-10AT

色谱柱：WatersT₃柱5μm250×4.6mm

检测波长：214nm

流动相：磷酸盐缓冲液(0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，使用磷酸调节pH为3.8)-甲醇(80:20)

柱温：35℃

流速：0.8ml/min

实验步骤

取3-氨基-1,2,4-三氮唑样品约10mg，置于25ml容量瓶中，加纯水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为待测样品溶液。

取待测样品溶液10μL，按上述色谱条件进行分析，记录色谱图，结果见图2。

图2中保留时间为3.65min的色谱峰为3-氨基-1,2,4-三氮唑的色谱峰，其余的色谱峰为3-氨基-1,2,4-三氮唑杂质色谱峰，根据外标峰面积法计算其纯度。上述实例结果表明：本发明的方法，可以清楚地将3-氨基-1,2,4-三氮唑与其杂质分离，并可以准确进行定量检测，计算出3-氨基-1,2,4-三氮唑的纯度及杂质含量，从而有效控制3-氨基-1,2,4-三氮唑的产品质量。

对3-氨基-1,2,4-三氮唑这种物质的检测，我们从色谱柱的选择、流动相的选择及流动相的PH值浓度及其余的工艺条件的制定，我们都进行了大量的摸索研究，一种条件不合适，有可能就会导致测定的失败，比如在该方法开发过程中，流动相中水相的PH值对色谱峰峰型影响较大，色谱柱适用的PH范围内，PH值太小，峰型前伸严重，而PH太大，峰型拖尾严重且分离效果较差。我们经过了反复多次的实验研究最终得到了测定3-氨基-1,2,4-三氮唑有关物质的方法，该方法准确度高、简单可行，重复性好，适用于3-氨基-1,2,4-三氮唑工业化生产的质量控制。

Claims (10)

1.一种液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)分别制备标准样溶液和样品溶液；

2)利用WatersT₃色谱柱、KromasilC₁₈色谱柱和VenusilXBP-C₁₈色谱柱中的一种分别对标准样溶液和样品溶液进行检测，并记录两种溶液色谱图，三种色谱柱的流动相相同，流动相由无机盐缓冲溶液和有机相组成，有机相与无机盐缓冲液比例为：5～25：95～75(V/V)，无机盐缓冲溶液的pH值为2～6；

3)通过对两种色谱图进行分析，计算3-氨基-1,2,4-三氮唑的纯度。

2.根据权利要求1所述的液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：

所述有机相与无机盐缓冲液比例为：20:80。

3.根据权利要求2所述的液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：

所述有机相为甲醇。

4.根据权利要求2所述的液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：

所述无机盐缓冲溶液中所含无机盐的浓度为0.02mol/L。

5.根据权利要求1所述的液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：

所述无机盐缓冲溶液中无机盐选自碳酸盐、磷酸盐、醋酸盐中的一种或几种。

6.根据权利要求5所述的液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：

所述无机盐为磷酸盐，磷酸盐选自磷酸氢二钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钠或磷酸二氢钾中的一种或几种。

7.根据权利要求6所述的液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：

所述无机盐为磷酸二氢钾。

8.根据权利要求1所述的液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：

所述流动相的流速为0.5～2.0ml/min，检测波长为195nm～250nm，色谱柱柱箱温度为20～50℃。

9.根据权利要求8所述的液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：

所述流动相流速0.8ml/min，所述检测波长为214nm，色谱柱柱箱温度为35℃。

10.根据权利要求1所述的液相色谱法测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度及杂质含量的方法，其特征在于：所述步骤1)具体为：

1.1)取3-氨基-1,2,4-三氮唑标准样品适量，使用纯水溶解，作为标准样品溶液；

1.2)取3-氨基-1,2,4-三氮唑待测样品适量，使用纯水溶解，作为待测样品溶液。