CN105624245A - 一种胶原蛋白的修饰改性方法 - Google Patents

一种胶原蛋白的修饰改性方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105624245A
CN105624245A CN201610093509.4A CN201610093509A CN105624245A CN 105624245 A CN105624245 A CN 105624245A CN 201610093509 A CN201610093509 A CN 201610093509A CN 105624245 A CN105624245 A CN 105624245A
Authority
CN
China
Prior art keywords
collagen protein
collagen
modification method
catalyst
acetic acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610093509.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105624245B (zh
Inventor
邵晨
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hunan life yuan special Medical Biotechnology Co.,Ltd.
Original Assignee
Suzhou Weico Biotechnology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Suzhou Weico Biotechnology Co Ltd filed Critical Suzhou Weico Biotechnology Co Ltd
Priority to CN201610093509.4A priority Critical patent/CN105624245B/zh
Publication of CN105624245A publication Critical patent/CN105624245A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105624245B publication Critical patent/CN105624245B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/06Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/78Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

本发明涉及一种胶原蛋白的修饰改性方法,它包括以下步骤:(a)将胶原蛋白溶于醋酸溶液中,形成胶原蛋白饱和溶液;(b)向所述胶原蛋白饱和溶液中加入蛋白水解酶,在40~50℃加热反应1~3小时;(c)向步骤(b)的产物中加入壳聚糖乙酸溶液和催化剂,在40~50℃加热反应0.5~2小时即可;所述催化剂由Sm2O3、Eu2O3和Gd2O3组成,其质量含量分别为15~25%、25~35%、和45~60%。通过在蛋白水解酶反应后的胶原蛋白饱和溶液中加入壳聚糖乙酸溶液和催化剂,有利于胶原蛋白与壳聚糖乙酸反应形成交联物质,从而提高了胶原蛋白的凝胶强度,克服了其力学性能差的缺点,能在食品、医药领域中得到应用。

Description

一种胶原蛋白的修饰改性方法
技术领域
本发明属于蛋白质的加工领域,具体涉及一种胶原蛋白的修饰改性方法。
背景技术
胶原蛋白是动物体内最丰富的一种蛋白质,由于其特殊的结构与功能,胶原蛋白已被广泛应用于医学、食品和化妆品等领域。同时,胶原蛋白也是人体组织的主要支撑结构,是人体的主要结构蛋白,构成人体约30%的蛋白质。胶原蛋白具有抗原性低、与细胞亲和力大、可促进细胞生长、与血小板产生凝血作用等特点,而且由于其优良的生物相容性,胶原蛋白堪称最合适的组织工程材料,但以天然胶原制作的组织工程产品和缝合线等医疗植入物机械强度地,力学性能较差,降解速率过快,不能满足长期执行细胞支架功能的需要。
现有关于胶原蛋白改性的研究虽有一些报道,如采用化学交联剂京尼平、戊二醛和MgSO4等对胶原蛋白进行改性等。但京尼平、戊二醛等化学交联剂具有很强的细胞毒性,中性盐改性过程中引入了高浓度的Mg2+离子,因此只限于在制革行业中使用,而不能在食品、医药领域中得到应用。
发明内容
本发明目的是为了克服现有技术的不足而提供一种胶原蛋白的修饰改性方法。
为达到上述目的,本发明采用的技术方案是:一种胶原蛋白的修饰改性方法,它包括以下步骤:
(a)将胶原蛋白溶于醋酸溶液中,形成胶原蛋白饱和溶液;
(b)向所述胶原蛋白饱和溶液中加入蛋白水解酶,在40~50℃加热反应1~3小时;
(c)向步骤(b)的产物中加入壳聚糖乙酸溶液和催化剂,在40~50℃加热反应0.5~2小时即可;所述催化剂由Sm2O3、Eu2O3和Gd2O3组成,其质量含量分别为15~25%、25~35%和45~60%。
优化地,步骤(a)中,所述醋酸溶液的浓度为0.5~2mol/L。
进一步地,步骤(a)中,将过量的所述胶原蛋白溶于醋酸溶液中,在40~50℃加热搅拌溶解,过滤后得所述胶原蛋白饱和溶液。
优化地,步骤(b)中,所述胶原蛋白饱和溶液和所述蛋白水解酶的质量比为1000~10000:1。
优化地,步骤(c)中,所述步骤(b)的产物与所述壳聚糖乙酸溶液的体积比为5~10:1,所述壳聚糖乙酸溶液的质量浓度为2~5%;所述步骤(b)的产物与所述催化剂的质量比为10~100:1。
优化地,所述胶原蛋白采用鲥鱼或鳕鱼的鱼皮或鱼鳞中提取出的,或者采用牛或猪的前蹄髈中提取出的。
由于上述技术方案运用,本发明与现有技术相比具有下列优点:本发明胶原蛋白的修饰改性方法,通过在蛋白水解酶反应后的胶原蛋白饱和溶液中加入壳聚糖乙酸溶液和催化剂,有利于胶原蛋白与壳聚糖乙酸反应形成交联物质,从而提高了胶原蛋白的凝胶强度,克服了其力学性能差的缺点,能在食品、医药领域中得到应用。
具体实施方式
本发明胶胶原蛋白的修饰改性方法,它包括以下步骤:(a)将胶原蛋白溶于醋酸溶液中,形成胶原蛋白饱和溶液;(b)向所述胶原蛋白饱和溶液中加入蛋白水解酶,在40~50℃加热反应1~3小时;(c)向步骤(b)的产物中加入壳聚糖乙酸溶液和催化剂,在40~50℃加热反应0.5~2小时即可;所述催化剂由Sm2O3、Eu2O3和Gd2O3组成,其质量含量分别为15~25%、25~35%和45~60%。通过在蛋白水解酶反应后的胶原蛋白饱和溶液中加入壳聚糖乙酸溶液和催化剂,有利于胶原蛋白与壳聚糖乙酸反应形成交联物质,从而提高了胶原蛋白的凝胶强度,克服了其力学性能差的缺点,能在食品、医药领域中得到应用。
步骤(a)中,所述醋酸溶液的浓度优选为0.5~2mol/L;具体为将过量的所述胶原蛋白溶于醋酸溶液中,在40~50℃加热搅拌溶解,过滤后得所述胶原蛋白饱和溶液。步骤(b)中,所述胶原蛋白饱和溶液和所述蛋白水解酶的质量比优选为1000~10000:1,蛋白水解酶的含量不能太高,否则会造成胶原蛋白的严重分解。步骤(c)中,所述步骤(b)的产物与所述壳聚糖乙酸溶液的体积比优选为5~10:1,所述壳聚糖乙酸溶液的质量浓度为2~5%;所述步骤(b)的产物与所述催化剂的质量比为10~100:1,此时的胶原蛋白制得的凝胶强度最优,应用效果最佳。胶原蛋白采用鲥鱼或鳕鱼的鱼皮或鱼鳞中提取出的,或者采用牛或猪的前蹄髈中提取出的;或者采用市售的即可。
下面将结合实施例对本发明进行进一步说明。
实施例1
本实施例提供一种胶原蛋白的修饰改性方法,它包括以下步骤:
(a)将50g胶原蛋白(市售)溶于0.5mol/L、500ml的醋酸溶液中,在40℃加热搅拌溶解,过滤去除未溶解的部分形成胶原蛋白饱和溶液;
(b)取上述胶原蛋白饱和溶液100g(89.5ml),向其中加入0.01g蛋白水解酶,在40℃加热反应3小时;
(c)向步骤(b)的产物中加入8.95ml壳聚糖乙酸溶液(浓度为2wt%)和催化剂10g,在40℃加热反应2小时即可;所述催化剂由0.2gSm2O3、0.3gEu2O3和0.5gGd2O3组成。
实施例2
本实施例提供一种胶原蛋白的修饰改性方法,它包括以下步骤:
(a)将50g胶原蛋白(采用现有技术提取至鲥鱼鱼皮)溶于1.5mol/L、500ml的醋酸溶液中,在50℃加热搅拌溶解,过滤去除未溶解的部分形成胶原蛋白饱和溶液;
(b)取上述胶原蛋白饱和溶液400g(358ml),向其中加入0.4g蛋白水解酶,在50℃加热反应1小时;
(c)向步骤(b)的产物中加入71.6ml壳聚糖乙酸溶液(浓度为2wt%)和催化剂4g,在50℃加热反应0.5小时即可;所述催化剂由0.6gSm2O3、1gEu2O3和2.4gGd2O3组成。
实施例3
本实施例提供一种胶原蛋白的修饰改性方法,它包括以下步骤:
(a)将50g胶原蛋白(采用现有技术提取至猪蹄前肘)溶于2mol/L、500ml的醋酸溶液中,在50℃加热搅拌溶解,过滤去除未溶解的部分形成胶原蛋白饱和溶液;
(b)取上述胶原蛋白饱和溶液400g(358ml),向其中加入0.1g蛋白水解酶,在45℃加热反应1.5小时;
(c)向步骤(b)的产物中加入75ml壳聚糖乙酸溶液(浓度为2wt%)和催化剂1g,在45℃加热反应2小时即可;所述催化剂由0.25gSm2O3、0.3gEu2O3和0.45gGd2O3组成。
实施例4
本实施例提供一种胶原蛋白的修饰改性方法,它包括以下步骤:
(a)将胶原蛋白(市售)溶于醋酸溶液中,形成胶原蛋白饱和溶液,醋酸溶液的浓度为1mol/L;
(b)向胶原蛋白饱和溶液中加入蛋白水解酶,在40℃加热反应3小时,胶原蛋白饱和溶液和蛋白水解酶的质量比为1000:1;
(c)向步骤(b)的产物中加入壳聚糖乙酸溶液(浓度为5wt%)和催化剂,在40℃加热反应2小时即可;催化剂由Sm2O3、Eu2O3和Gd2O3组成,其质量含量分别为15%、25%和60%。
实施例5
本实施例提供一种胶原蛋白的修饰改性方法,它包括以下步骤:
(a)将胶原蛋白(市售)溶于醋酸溶液中,形成胶原蛋白饱和溶液,醋酸溶液的浓度为1.6mol/L;
(b)向胶原蛋白饱和溶液中加入蛋白水解酶,在42℃加热反应1.5小时,胶原蛋白饱和溶液和蛋白水解酶的质量比为10000:1;
(c)向步骤(b)的产物中加入壳聚糖乙酸溶液(浓度为5wt%)和催化剂,在42℃加热反应1.5小时即可;催化剂由Sm2O3、Eu2O3和Gd2O3组成,其质量含量分别为25%、30%和45%。
对比例1
本实施例提供一种胶原蛋白的修饰改性方法,其制备步骤与实施例1中的基本相同,不同的是其步骤(c)中未使用催化剂。
对比例2
本实施例提供一种胶原蛋白的修饰改性方法,其制备步骤与实施例1中的基本相同,不同的是其步骤(b)中加入蛋白水解酶质量为0.5g。
实验例1
采用质构仪和流变仪对实施例1至实施例5、以及对比例1和对比例2中制得的修饰改性的胶原蛋白溶液进行表征,其结果列于表1中。
表1胶原蛋白溶液的性能测试
实施例序号 弹性模量(mPa) 黏性模量(mPa)
实施例1 830 5350
实施例2 800 5300
实施例3 790 5200
实施例4 850 5500
实施例5 860 5500
对比例1 650 3500
对比例2 670 3800
上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点,其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施,并不能以此限制本发明的保护范围,凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种胶原蛋白的修饰改性方法,其特征在于,它包括以下步骤:
(a)将胶原蛋白溶于醋酸溶液中,形成胶原蛋白饱和溶液;
(b)向所述胶原蛋白饱和溶液中加入蛋白水解酶,在40~50℃加热反应1~3小时;
(c)向步骤(b)的产物中加入壳聚糖乙酸溶液和催化剂,在40~50℃加热反应0.5~2小时即可;所述催化剂由Sm2O3、Eu2O3和Gd2O3组成,其质量含量分别为15~25%、25~35%和45~60%。
2.根据权利要求1所述的胶原蛋白的修饰改性方法,其特征在于:步骤(a)中,所述醋酸溶液的浓度为0.5~2mol/L。
3.根据权利要求2所述的胶原蛋白的修饰改性方法,其特征在于:步骤(a)中,将过量的所述胶原蛋白溶于醋酸溶液中,在40~50℃加热搅拌溶解,过滤后得所述胶原蛋白饱和溶液。
4.根据权利要求1所述的胶原蛋白的修饰改性方法,其特征在于:步骤(b)中,所述胶原蛋白饱和溶液和所述蛋白水解酶的质量比为1000~10000:1。
5.根据权利要求1所述的胶原蛋白的修饰改性方法,其特征在于:步骤(c)中,所述步骤(b)的产物与所述壳聚糖乙酸溶液的体积比为5~10:1,所述壳聚糖乙酸溶液的质量浓度为2~5%;所述步骤(b)的产物与所述催化剂的质量比为10~100:1。
6.根据权利要求1所述的胶原蛋白的修饰改性方法,其特征在于:所述胶原蛋白采用鲥鱼或鳕鱼的鱼皮或鱼鳞中提取出的,或者采用牛或猪的前蹄髈中提取出的。
CN201610093509.4A 2016-02-19 2016-02-19 一种胶原蛋白的修饰改性方法 Active CN105624245B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610093509.4A CN105624245B (zh) 2016-02-19 2016-02-19 一种胶原蛋白的修饰改性方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610093509.4A CN105624245B (zh) 2016-02-19 2016-02-19 一种胶原蛋白的修饰改性方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105624245A true CN105624245A (zh) 2016-06-01
CN105624245B CN105624245B (zh) 2020-05-22

Family

ID=56039587

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610093509.4A Active CN105624245B (zh) 2016-02-19 2016-02-19 一种胶原蛋白的修饰改性方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105624245B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109400700A (zh) * 2018-11-06 2019-03-01 安徽怡发生物科技有限公司 一种易吸收的胶原蛋白低聚肽的制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100998897A (zh) * 2006-12-27 2007-07-18 天津大学 具有双重可控释放涂层的可吸收镁合金支架及其制备方法
CN101798345A (zh) * 2009-02-05 2010-08-11 颜建华 一种修饰胶原蛋白的方法
CN103819685A (zh) * 2014-03-11 2014-05-28 武汉理工大学 鱼鳞胶原蛋白接枝壳聚糖及其制备方法、用途

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100998897A (zh) * 2006-12-27 2007-07-18 天津大学 具有双重可控释放涂层的可吸收镁合金支架及其制备方法
CN101798345A (zh) * 2009-02-05 2010-08-11 颜建华 一种修饰胶原蛋白的方法
CN103819685A (zh) * 2014-03-11 2014-05-28 武汉理工大学 鱼鳞胶原蛋白接枝壳聚糖及其制备方法、用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
徐新宇: "胶原的提取、改性、交联及其应用", 《透析与人工器官》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109400700A (zh) * 2018-11-06 2019-03-01 安徽怡发生物科技有限公司 一种易吸收的胶原蛋白低聚肽的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105624245B (zh) 2020-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106589424B (zh) 一种注射用交联透明质酸凝胶及其制备方法
CN103230617B (zh) 一种胶原/壳聚糖微纳纤维复合止血膜材料及其制备方法
CN102526795A (zh) 壳聚糖基止血海绵及其制备方法
CN106729984A (zh) 一种鱼胶原蛋白修复海绵及其制备方法
CN105597144A (zh) 一种可吸收胶原止血粉及其制备方法
CN102462640A (zh) 海洋鱼皮胶原蛋白保湿抗衰老化妆品及其制备方法
CN102743796B (zh) 用聚乙烯醇制成的丝素蛋白多孔支架及其制备方法和用途
CN101695581A (zh) 一种规模制备类人胶原蛋白止血海绵的方法
CN103756005A (zh) 一种复合胶原海绵及其制备方法
CN105331662A (zh) 一种动物软骨源的未变性ii型胶原及其制备方法
CN103059333A (zh) 利用植物蛋白及其水解物制备复水性细菌纤维素膜的方法
WO2015096170A1 (zh) 一种ε-聚赖氨酸水凝胶及其制备方法和应用
CN107354192A (zh) 一种纯化ⅰ型胶原蛋白的方法
CN103044693A (zh) 一种细菌纤维素/聚乙烯醇复合水凝胶的制备方法
CN103386144A (zh) 一种鱼胶原蛋白复合壳聚糖生物敷料的制备方法
CN112877384A (zh) 一种细菌纤维素的制法、细菌纤维素-壳聚糖复合凝胶护肤面膜及其制法
CN107441547B (zh) 一种创伤修复材料及其制备方法和用途
CN103386145B (zh) 一种含有卡拉胶的创伤修复敷料及其制备方法和应用
CN103357060A (zh) 一种细菌纤维素复合鱼胶原蛋白伤口敷料的制备方法
CN104436283A (zh) 一种医用胶原膜材料及其制备方法
CN107029281A (zh) 一种可吸收止血材料的制备方法
CN100402097C (zh) 琼脂/胶原皮肤创伤修复敷料及其制备方法和应用
WO2017107996A1 (zh) 一种具有结构记忆特性的细胞生长支架
CN103301504A (zh) 一种γ-聚谷氨酸/丝胶水凝胶敷料的制备方法
CN105624245A (zh) 一种胶原蛋白的修饰改性方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20160713

Address after: 215100 Suzhou, Wuzhong District, Li Feng commercial center, block, room 2, building 2406, room A

Applicant after: Shimao (Suzhou) Biotechnology Co., Ltd.

Address before: Wuzhong District Wuzhong Economic Development Zone Suzhou city Jiangsu province 215104 the River Street Wuzhong Road No. 2599 Building 1, 4 floor, room 406, 405 404

Applicant before: SUZHOU WEICO BIOTECHNOLOGY CO., LTD.

C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20200423

Address after: No.2, Hangkong Road, Wangcheng economic and Technological Development Zone, Changsha City, Hunan Province

Applicant after: Hunan lifeyuan Medicine Co., Ltd

Address before: 215100 Suzhou, Wuzhong District, Li Feng commercial center, block, room 2, building 2406, room A

Applicant before: SHIMAO (SUZHOU) BIOTECHNOLOGY Co.,Ltd.

TA01 Transfer of patent application right
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20210917

Address after: 410200 No.2 Hangkong Road, Wangcheng economic and Technological Development Zone, Changsha City, Hunan Province

Patentee after: Hunan life yuan special Medical Biotechnology Co.,Ltd.

Address before: 410200 No.2 Hangkong Road, Wangcheng economic and Technological Development Zone, Changsha City, Hunan Province

Patentee before: Hunan lifeyuan Medicine Co.,Ltd.

TR01 Transfer of patent right