CN105616427A - 用于治疗子宫内膜异位症、子宫肌瘤、痛经、乳腺癌的孕酮拮抗剂，例如cdb-4124 - Google Patents

Abstract

用于治疗子宫内膜异位症、子宫肌瘤、痛经、乳腺癌的孕酮拮抗剂，例如CDB-4124。本发明涉及使用含孕酮受体拮抗剂的组合物以治疗雌激素依赖症的方法。发明同时涉及治疗与子宫内膜异位症有关的疼痛的方法。组合物可用于治疗女性的子宫内膜异位症，并可用于女性雌激素和／或选择性雌激素受体效应物(SERM)治疗。在特定实施例中，本发明提供抑制子宫内膜增殖的方法。

Description

用于治疗子宫内膜异位症、子宫肌瘤、痛经、乳腺癌的孕酮拮抗剂，例如CDB-4124

本申请是国际申请号为PCT/US2009/041826、国际申请日为2009年4月27日、发明名称为“用于治疗子宫内膜异位症、子宫肌瘤、痛经、乳腺癌的孕酮拮抗剂，例如CDB-4124”的发明专利申请的分案申请，原申请进入中国国家阶段获得的国家申请号为200980114978.8。

交叉参考相关申请

本申请享有于2008年4月28日提交之美国临时申请61/048,472号的利益，且随附该临时申请的相关内容供参考。

技术领域

本发明与治疗雌激素依赖症的组合物和方法有关。尤其是，本发明与包含一种或几种孕激素拮抗剂的组合物有关，而该等拮抗剂可抑制子宫内膜增殖。

背景技术

雌激素是对多个生理过程至关重要的一组激素，而该等生理过程包括子宫和乳房发育、骨密度的维持以及通过改善血脂状况来保护心血管。雌激素的作用是通过与细胞核内的雌激素受体结合来介导的。

根据经典模型，细胞核内未被占据的雌激素受体在与雌激素结合后，

即能够与雌激素应答基因启动子上的DNA序列产生相互作用。结合在DNA上的雌激素受体可正或负调节该等基因的转录。

已知，雌激素可使乳房和子宫组织快速增殖。例如，人们已经证实，对更年期女性施用无拮抗的雌激素可导致子宫内膜增殖和子宫内膜癌。与此相反，孕激素可显著对抗雌激素依赖的子宫内膜增殖和癌症发生。因此，为对抗无拮抗雌激素的作用，孕激素通常被指定为激素替代疗法(HRT)的一部分。然而，妇女健康倡议(Women’sHealthInitiative)近期的一项大型临床研究表明，结合雌激素和醋酸甲羟孕激素联用可增加心血管疾病、中风、肺栓塞和乳腺癌的患病风险。此外，对猕猴进行手术绝经的实验数据表明，雌激素和孕激素联用方案使乳房增殖和增生的程度高于单独使用雌激素的方案。同时服用孕激素还可引起突破性出血，从而进一步限制其作为阻止雌激素快速增殖作用的试剂的适用性。

许多可影响雌激素受体雌激素依赖活性的化合物的工艺技术已为人所知。根据多种因素，该等化合物可完全起到雌激素的作用(即模拟雌激素)、完全抑制雌激素(即阻碍雌激素的作用)或介于两种作用之间。这种可表现出雌激素和抗雌激素混合特性的化合物称为选择性雌激素受体调节剂(SERM)。SERM以组织特异性的方式发挥其雌激素或抗雌激素作用。这种组织特异性的机制尚不明确，但可能涉及(尤其是)辅阻遏物和辅活化子蛋白的补充，而该等带白的相对表达水平可随组织类型和雌激素受体异构体α和β的组织特异性表达的不同而发生变动。雌激素受体α是一种激活子，而雌激素受体β则可通过与雌激素受体α形成异源二聚体来抑制其活性。

SERM的双重活性可为女性带来多种潜在的好处。SERM的雌激素特性可用于治疗或预防因雌激素缺乏而引起的疾病(如骨质疏松)，同时还可将雌激素的某些不良作用降至最低。相反地，SERM的抗雌激素特性可用于预防或治疗乳腺癌等疾病，而此时，雌激素活性则为不良作用。然而，子宫内膜增殖与SERM疗法有关，因而限制了其使用。

例如，已证明，SERM他莫昔芬(tamoxifen)可在乳房中起到抗雌激素的作用，即抑制雌激素的增殖作用，而且随后还发现，该药物可用于治疗某些类型的乳腺癌。另外，他莫昔芬对骨骼和子宫表现出雌激素作用，并与子宫内膜增殖和子宫内膜癌发病率增加有关，这就限制了其作为抗雌激素的可用性。

一项对灵长类动物开展的初步研究似乎表明，抗孕激素可对子宫内膜起到抗增殖的作用。但让人忧虑的是，长期采用抗孕激素进行治疗可能会因无拮抗雌激素的作用而导致子宫内膜增殖。多项研究已经表明，长期服用抗孕激素的女性子宫内膜增殖加剧，而且随着服药时间的延长，病情不断恶化。

另外，近期对成年女性开展的多项调查显示，用抗孕激素治疗女性子宫内膜组织异常似乎可增加，尤其是突破性出血的风险。上述研究结果劝阻人们不可长期服用抗孕激素。

但仍有必要制定一个适于长期服用抗孕激素的治疗方案，既可抑制雌激素对机体的增殖作用，保持雌激素对机体的有益作用，又可降低或消除长期服药的副作用。

发明概要

本发明与服用组合物(含一种孕激素受体拮抗剂)的方法有关。孕激素拮抗剂可以是一种纯抗孕激素或一种选择性孕激素受体调节剂(SPRM)。在某优选实施例中，孕激素拮抗剂的糖皮质激素受体亲和力较低。在另一个优选实施例中，女性服用孕激素拮抗剂并未充分降低其雌激素的水平。最为优选的是，该孕激素拮抗剂为CDB-4124。

根据本发明，从月经周期的某一时间点开始服用组合物，可使妇女在该周期结束时月经来潮。相应地，最好是从月经周期第14天或该日之后开始服用组合物。例如，可从月经周期第14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25天或该等日期之后开始服用组合物。

在某实施例中，服用该等组合物可使妇女在整个治疗期间不来月经。因此，根据该实施例，在月经周期的某一时间点开始服用组合物，可使妇女在该周期结束时月经来潮；但在治疗期间不来月经。

在另一个实施例中，服用该等组合物可使妇女在治疗期间周期性来月经。例如，间歇性服用组合物，可使受试者在整个治疗期间周期性行经。该方法有望避免与子宫内膜停滞(stagnantendometrium)相关的潜在不良影响，而该等子宫内膜停滞可能伴随孕激素拮抗剂扩展治疗而生。

为预防雌激素依赖症，可服用组合物。组合物可治疗的雌激素依赖症，包括但不限于子宫内膜增殖。

服用组合物还可预防和/或改善与生殖道异常和生殖激素紊乱有关的疼痛。例如，为预防和/或改善性交疼痛、痛经、与月经周期相关的偏头痛、经前期综合症或与功能失调性子宫出血、子宫肌瘤和/或子宫内膜异位症相关的疼痛，可让妇女服用组合物。在一个优选实施例中，某妇女为治疗与子宫内膜异位症相关的疼痛而服用组合物。一方面，长期服用孕激素拮抗剂可治疗与子宫内膜异位症相关的疼痛。

接受雌激素和/或SERM治疗的妇女也可服用组合物。一方面，本发明还提供了预防在接受雌激素和SERM治疗过程中发生子宫内膜增殖和/或子宫内膜癌的方法。

图片概述

图1描述了选择性孕激素受体调节剂对大鼠血清皮质醇的作用。

图2描述了CDB-4124对大鼠血清皮质醇的剂量依赖效应。

图3为妇女月经周期的时间线。子宫内膜上血管和腺体的形成可视作始于月经周期的第5天左右，并在孕激素的影响下于第14天和该日之后急剧增加。

本发明的详细说明

“有效剂量”一词是指足以发挥所需效果(如，抑制子宫内膜增殖或治疗子宫内膜异位症相关疼痛)的组合物活性组分的量。

“雌激素依赖症”包括任何与雌激素相关的疾病，例如(不限于)子宫内膜增殖、突破性出血、少量出血(spotting)和子宫内膜癌。

“选择性孕激素受体调节剂”是指以组织特异性的方式影响孕激素受体功能的化合物。在某些组织(如，子宫)中，该等化合物作为孕激素受体拮抗剂，而在其它组织中，则作为孕激素受体激动剂。

“治疗”是指治疗处理和预防剂或预防措施，其目的是预防或缓解(减轻)不希望出现的生理变化或异常。就本发明而言，有益或所需的临床结果包括但不限于，症状得以缓解、疾病得到控制、病情稳定(即不再恶化)、疾病进展推迟或放慢、病情得到改善或缓解以及(部分或整体)好转，且无论该等结果为可检测还是不可检测。与未接受治疗的预期寿命相比，“治疗”亦可指延续生命。需要接受治疗的患者，包括已出现病情或病症，以及可能出现病情或病症，或那些病情或病症可以得到预防的患者。

“孕酮促效剂”指与孕酮受体结合并模仿天然激素作用的化合物。

“孕酮拮抗剂”指与孕酮受体结合并抑制孕酮作用的化合物。

本文所述与子宫内膜组织增殖有关的“抑制”，指相对于相同病况下未经治疗的子宫内膜组织的子宫内膜组织的有丝分裂增殖由于服用孕酮拮抗剂而得到抑制，并不同于细胞死亡(如细胞凋亡)。孕酮拮抗剂对抑制子宫内膜有丝分裂增殖的作用，可在子宫细胞系(举例来说)中进行测试，或(举例来说)通过在细胞中加入溴脱氧尿苷(BrdU)，并使用孕酮拮抗剂进行治疗，以控制(未经治疗的)细胞。

本文所述女性身体中的激素水平“无明显减少”，指在服用发明药物期间，激素水平维持在正常范围内。因此，只要激素水平维持在正常范围内，则可以认为激素水平可能出现某种程度的减低。

本文所述的女性身体中的激素水平“无明显增加”，指在服用发明药物期间，激素水平维持在正常范围内。因此，只要激素水平维持在正常范围内，则可以认为激素水平可能出现某种程度的提升。

本文所述的女性子宫粘膜“无明显增厚”，指在给药期间，通过如前所述的测量方法进行测量，发现女性的子宫粘膜的厚度未超过19毫米。因此，只要女性的子宫粘膜厚度未超过19毫米，则可以认为在给药期间，可能出现某种程度的增厚。正常情况下，在给药期间，女性子宫粘膜的厚度应小于15毫米，但厚度小于10毫米更为理想，而厚度小于7毫米最为理想。与基准测量值相比，女性子宫粘膜增厚可能小于100％，增厚小于50％较为理想，增厚小于25％最为理想。

本发明与包含孕酮拮抗剂的组合物有关，理想的服药量应能够有效抑制子宫内膜增殖。如下所述，在使用CDB-4124进行为期六个月治疗的方案中，使用浓度更高的药物，能够在更大程度上抑制增殖。

相关研究表明，从女性月经周期的第5天开始使用孕酮拮抗剂CDB-4124，能够对子宫内膜的厚度产生反剂量依赖性的效果。也就是说，服用浓度相对较低的CDB-4124，可在治疗期间导致子宫粘膜出现明显增厚。使用浓度较高的CDB-4124，将能够减轻此类作用。由于子宫内膜腺的囊性扩张是使用CDB-4124进行治疗期间出现子宫内膜增厚的主要原因，因此需要针对这一意外情况采取相应对策。

如果治疗从女性月经周期的某个时间点开始，并要求在月经周期结束时不会出现月经来潮(如月经周期的第5天)，导致囊性腺胀大并造成子宫内膜增厚和硬化的任何残余(未阻滞)孕酮，将致使子宫粘膜出现血管化及腺状活动，直至积聚的CDB-412浓度足以阻滞残余的孕酮。增厚的子宫内膜将较为脆弱，并可能在治疗期间出现分裂和出血。病例11中更详细的描述表明，如果在女性月经周期的初期使用浓度相对较低的孕酮拮抗剂CDB-4124，将导致在治疗期间子宫内膜出现增厚，并可能造成出血。

根据本发明，在女性月经周期的黄体期阶段服用孕酮拮抗剂，将在月经周期结束时出现月经来潮。因此，从卵泡期阶段开始用药时，使用浓度较低的孕酮拮抗剂将不会导致子宫内膜增厚。由于任何初步形成的囊腺均可能在月经来潮期间脱落，此时，孕酮拮抗剂浓缩物已积聚到足以抑制任何残余孕酮的程度。所有抗孕激素均具备相同的优点，这点可通过在女性月经周期的卵泡期阶段服用此类药物所观察到的形态异常加以证明。

因此，从某种意义上来说，本发明为治疗雌激素依赖病症提供可行方法，包括从女性月经周期的黄体期开始的一段时间内，让女性服用含有效剂量的孕酮拮抗剂的组合物。女性月经周期的黄体期从月经周期的大约第14天开始。因此，应在月经周期的最迟第14天开始使用孕酮拮抗剂。这样，从女性月经周期的卵泡期阶段开始的用药期间，使用浓度较低的孕酮拮抗剂，将不会导致子宫内膜增厚。

发明方法可能包括在至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31天或更多天的用药期间，使用含有效剂量的孕酮拮抗剂的组合物。组合物也可能用在至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或更多个月的用药期间。组合物也可能用在至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、1O或更多年的用药期间。在用药期间，可每日或定期(如每隔一天、隔月，依此类推)使用组合物。组合物也可间断使用。例如，在1、2、3、4、5或更多个月的用药期间(诸如此类)之后，并在停止用药一段时间后，可在1、2、3、4、5或更多个月的用药期间继续使用组合物。在任何情况下，用药期间应从女性月经周期的黄体期阶段开始。

“间断用药”指在某个用药期间之后，并停药一段时间后，在另一个用药期间继续使用有效治疗剂量的孕酮拮抗剂。

“间断期间”指每日、每周、每月或于其间断续使用孕酮拮抗剂的情况。断续周期可能比用药期间更长或更短，但是，始终长于用药期间的剂量给药间隔时间。例如，当用药期间包括每日、每周，或每月按剂量给药时，断续周期应分别为至少2天、至少8天或至少32天。因此，断续周期应至少为大约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32或更多天。

在一次实施例中，在至少一个断续周期过程中，对经历月经期的受试者间歇使用组合物。此方法应可以避免与郁滞性子宫内膜有关的副作用。至少应有一个，且最好每个断续周期均足够长，以便让受试者经历月经来潮。较为理想的情况是，受试者在每个断续周期经历月经来潮。在特定的优选实施例中，在历时4个月的用药期间之后，且在受试者月经来潮期间的停药周期之后，在为期4个月的用药期间，每日服用组合物。在任何情况下，用药期间应从女性月经周期的黄体期阶段开始。

此外，在停药期间可使用促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂或拮抗剂，以促进子宫内膜的脱落和再生。GnRH激动剂的非限制实例包括那法瑞林、布舍瑞林、亮丙瑞林、曲普瑞林、戈舍瑞林、[DLys⁶]GnRH、[DAla⁶1GnRH等。GnRH的非限制实例包括醋酸组氨瑞林、阿巴瑞克和美国专利号4,409,208、4,547,370、4,565,804、4,569,927及4,619,914中列出的药物，并以引用的方式全部列入本文中。

此外，在停药期间可使用孕激素，以在病人体内形成正常的月经。使用孕激素，理想的情况是形成类似于月经来潮期间孕酮水平自然涨落的孕酮剖象。此类治疗方案在业内为大家所熟知。在停药期间使用孕激素，除服用孕酮拮抗剂的作用以外，还可能产生抑制雌激素的作用，因此，可能有助于治疗雌激素依赖病症，如子宫内膜的增厚。孕激素的非限制实例包括美罗孕酮、甲羟孕酮、甲地孕酮、炔诺酮、孕酮、羟孕酮、乙酸基孕烯醇酮、烯丙雌醇、去乙酰环丙氯地孕酮、去氧孕烯、二甲炔酮、羟脱水孕酮、双醋炔诺酮、孕二烯酮、利奈孕酮等等。

在一次实施例中，患有子宫内膜异位症的女性患者，使用含有效剂量孕酮拮抗剂的组合物，所用剂量能够在女性月经周期的黄体期开始阶段有效抑制子宫内膜增殖。

在一次相关实施例中，让女性患者使用含有效剂量孕酮拮抗剂的组合物，以便在女性月经周期的黄体期开始阶段，治疗和生殖系病症有关的疼痛，和/或与生殖激素涨落有关的病症。例如，使用孕酮拮抗剂可缓解与子宫内膜病变、功能性月经失调，及纤维瘤有关非疼痛。疼痛是子宫内膜异位症最普遍且最致弱的症状，亦是需要进行内科和外科治疗的主要症状。疼痛可能表现为痛经、骨盆痛、背痛、腹痛、胸部痛、性交痛等。使用孕酮拮抗剂也可缓解子宫内膜病变或子宫肌瘤的严重程度。当前用于治疗子宫内膜异位症的方案包括使用GnRH激动剂，此类药物通过抑制卵巢雌激素分泌以形成假绝经状态，但由于可能造成骨密度损失、人体总钙量损失，以及其它类似于骨质疏松症的副作用，因此不适合长期给药。长期使用发明的组合物，不会造成雌激素水平的显著减少。

使用孕酮拮抗剂以治疗疼痛的方案，部分源自优选抗孕激素CDB-4124具备亲和性并可抑制阿片μ受体(MOP)的意外发现。阿片受体存在于神经细胞或神经元表面，并通过结合内原性阿片配位体以缓解疼痛。阿片μ受体同时作用于女性生殖神经内分泌的多个方面，如控制促性腺激素的释放。CDB-4124结合并抑制阿片μ受体的能力，应可扩展至其它同类抗孕激素(即使用以下通用分子式的药物)。

在另一次实施例中，本发明提供与当前激素治疗有关的雌激素依赖症的治疗方法，并使用雌激素化合物(如雌激素或SERMS)，通过同时使用有效剂量的孕酮拮抗剂以抑制子宫内膜增殖，其中，孕酮拮抗剂的用药周期从女性月经周期的黄体期阶段开始。与当前雌激素/SERM激素治疗有关的雌激素依赖症包括(但不限于)子宫内膜增殖及子宫内膜肿瘤。在此情况下，作为结合激素治疗方案的一部分，可在使用雌激素或SERMS之前、期间或之后使用孕酮拮抗剂。

在每种发明方法的优选实施例中，女性服用孕酮拮抗剂，不会使女性身体内的雌激素水平出现明显降低。因此，相对当前用于治疗子宫内膜异位症的方法(通常采用促性腺激素释放激素(GnRH)，如(利普安)(醋酸亮丙瑞林))，本发明具有优势。

在每种发明方法的另一个优选实施例中，孕酮拮抗剂可降低肾上腺糖皮质激素受体的亲和性。较为理想的情况是，用于孕酮受体的孕酮拮抗剂的结合亲和性，比用于肾上腺糖皮质激素受体的孕酮拮抗剂的结合亲和性，至少大1.5倍。

任何具备上述化合物特性的已知孕酮拮抗剂，均可由技术人员用于本发明。特别有用的化合物包括美国专利号6,900,193中列出的化合物(以引用的方式全部列入本文中)，以及美国专利号6,861,415中列出的化合物(以引用的方式全部列入本文中)，此类化合物为使用通用分子式的21-代用类19-去甲孕甾烷类：

其中：

X可能是，例如烷基、烯基、炔基、氢、卤、单烷基氨基或二烃基氨基，例如N，N-二甲基乙胺；

R₁可能是，例如O、NOH或NO-甲基；

R₂可能是，例如氢或醋酸基；而

R₃可能是，例如甲氧基、甲酸基、醋酸基、酸基、S-烃氧基、乙酰亚硫酰基、甘氨酸酯、乙烯基醚、乙酰氧甲基、碳酸甲酯、卤化物、甲基、羟基，和乙氧基。

21-替代类19-去甲孕甾烷类的实例包括(但不限于)下列24种化合物。

1.CDB-4247(21-丙[[1]]酸基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

2.CDB-4361(21-乙烯基醚-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

3.CDB-4059(21-醋酸基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

4.CDB-4124(21-甲氧基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

5.CDB-4031(21-溴-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

6.CDB-3876(21-氯-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

7.CDB-4058(21-氟-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

8.CDB-4030(21-甲基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

9.CDB-4152(21-羟基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

10.CDB-4167(21-乙氧基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

11.CDB-4101(21-甲氧基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

12.CDB-4110(21-丙酮化合物-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

13.CDB-4111(21-BMD-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

14.CDB-4125(21-(Cyp*-羟基)-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

*Cyp＝3-环戊基丙酰氧基-

15.CDB-4205(3-羟氨酸-21-甲氧基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

16.CDB-4206(3-羟氨酸-21-醋酸基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

17.CDB-4226(3-羟氨酸-21-乙氧基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

18.CDB-4262(3-甲氧基氨基-21-乙氧基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

19.CDB-4223(21-甲硫基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

20.CDB-4119(4-二苯乙醇酮-21-乙酰巯基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

21.CDB-4239(4-二苯乙醇酮-21-甲氧基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

22.CDB-4306(21-甘氨酸酯-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

23.CDB-4352(21-氰基硫-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

24.CDB-4362(21-甲氧基乙酰-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)及以下结构分子式：

11β-上述24种化合物的去甲基衍生物(即，X为N-甲基氨基酸)在实施本发明时亦特别有用。在此情况下，CDB-4453(21-甲氧基-17α-醋酸基-11β-(4N，甲基氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)，CDB-4124的去甲基衍生物，具备比亲体更低的抗糖皮质激素活性。Attardi等，2002年，Mol.Cell.Endocrin.188∶111-123，其内容以引用的方式列入本文中。

虽然应优先选用使用上述通用分子式的化合物及其去甲基衍生物，但任何孕酮拮抗剂均可用于实施本发明，以在孕酮受体上实现拮抗剂作用。较为理想的情况是，孕酮拮抗剂具备以下一种或多种特性：较低的抗糖皮质激素活性、最少的雌激素和抗雌激素活性，并且不会明显提升孕酮水平。

对发明可能有用的抗孕酮包括(但不限于)asoprisnil(苯甲醛，4-(11β，17β)-17-甲氧基-17-(甲氧基甲)-3-氧代雌-4，9-二亚乙基三胺-11-基]-1-(E)-肟；J867)，其代谢物J912(4-[17β-羟基-17α-(甲氧基甲基)-3-氧代雌-4，9-二亚乙基三胺-11β-基]苯甲醛-(1E)-肟)，及DE4332283和DE4332284中所述的其它化合物；CDB-2914(17α-醋酸基-11β-(4-N，N-二甲氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二亚乙基三胺-3,20-二酮)及Stratton等，2000年，Hu.Reprod.15∶1092-1099中所述的其它化合物；JNJ-1250132及Allan等，2006年，Steroids71∶949-954中所述的其它化合物；Zhi等，1998年，J.Med.Chem.41：291-302中所述的5-芳基-1，2-二氢化色烯并[3，4-f]喹啉；美国专利号：6,509,334、6,566,358及6,713,478至Zhang等中所述的1，4-二氢苯并唑[苯二氮类][1，3]嗪-2-酮；美国专利号6,391,907至Fensome等中所述的1，3-二氢吲哚-2-酮；美国专利号6,417,214至Ulrich等中所述的2，3-二氢-1H-吲哚；美国专利号6,380,235至Zhang等中所述的苯并咪唑酮及相似物；美国专利号6,339,098至Collins等中所述的2,1-苯并咪唑酮2，2-二氧化物；美国专利号：6,306,851和6,441,019至Santilli等中所述的环氨基甲酸酯及环酰胺；美国专利号6,369,056至Zhang等中所述的环尿和环酰胺衍生物；以及美国专利号6,358,948至Zhang等中所述的喹唑啉酮及苯并嗪衍生物。

可用于发明的其它抗孕酮包括(但不限于)(6α，11β，17β)-11-(4-二甲氨基苯基)-6-甲基-4’，5’-二氢螺环[雌甾-4，9-二烯-17，2’(3’H)-呋喃]-3-酮(ORG-31710)及美国专利号4,871,724中所述的其它化合物；(11β，17α)-11-(4-乙酰苯基)-17，23-环氧树脂-19，24-二去甲基胆甾-4，9，20-三亚乙基四胺-3-酮(ORG-33628)；(7β，11β，17β)-11-(4-二甲氨基苯基-7-甲基]-4’，5’-二氢螺环[雌甾-4，9-二烯-17，2’(3’H)-呋喃]-3-酮(ORG-31806)及美国专利号4,921,845中所述的其它化合物；ZK-112993及Michna等，1992年，J.SteroidBiochem.Molec.Biol.41：339-348；ORG-31376；ORG-33245；ORG-31167；ORG-31343；RU-2992；RU-1479；RU-25056；RU-49295；RU-46556；RU-26819；LG1127；LG120753；LG120830；LG1447；LG121046；CGP-19984A；RTI-3021-012；RTI-3021-022；RTI-3021-020；RWJ-25333；ZK-136796；ZK-114043；ZK-230211；ZK-136798；ZK-98229；ZK-98734；和ZK-137316中所述的其它化合物。

还有可用于发明的其它抗孕酮包括(但不限于)美服培酮(11β-[p-(二甲基氨基)苯基]-17β-羟基-17-(1-丙炔基)雌甾-4，9-二烯-3-酮；RU486)及美国专利号：4,386,085、4,447,424、4,519,946及4,634,695中所述的其它化合物；Jiang等，2006年，Steroids71：949-954中所述的磷系17β-侧链米芬普利斯顿类似物；奥那司酮(11β-[p-(二甲基氨基)苯基]-17α-羟基-17-(3-羟丙基)-13α-雌甾-4，9-二烯-3-酮)及美国专利号4,780,461中所述的其它化合物；利洛司酮(((Z)-11β-[(4-二甲基氨基)苯基]-17-β-羟基-17α-(3-羟基-1-丙烯基)雌甾-4，9-二烯-3-酮)及美国专利号4,609,651中所述的其它化合物；11β-替代物19-去甲甾类，如Belagner等，1981年，Steroids37：361-382中所述的11β-(4-甲氧基苯基)-17β-羟基-17α-乙炔基-4，9-雌甾二烯-3-酮；11β-芳基-4-雌甾，如美国专利号5,728,689中所述的(Z)-11β-[(4-二甲基氨基)苯基)]-17β-羟基-17α-(3-羟基-1-丙烯基)雌-4-甾-3-酮；如美国专利号：5,843,933和5,843,931中所述的11-芳基-雌甾衍生物；11-苯甲醛肟-雌甾二烯衍生物，如美国专利号5,693,628中所述的4-[17β-甲氧基-17α-(甲氧基甲基)-3-氧化雌-4，9-二烯-11β-基]苯甲醛-1-(E)-肟；11-苯甲醛肟-17β-甲氧基-17α-甲氧基甲基-雌甾二烯衍生物，如美国专利号5,576,310中所述的4-[17β-甲氧基-17α-(甲氧基甲基)-3-氧化雌-4，9-二烯-11β-基]苯甲醛-1-(E)-[O-(乙胺基)羰基]肟；S-替代物11β-苯甲醛肟-雌甾-4，9-二烯-碳酸巯基酯酶，如WO99/45023中所述的4-[17β-甲氧基-17α-(甲氧基甲基)-3-氧化雌-4，9-二烯-11β-基]苯甲醛-1-(E)-[O-(乙硫基)羰基]肟；甾类酯，如DE19652408、DE4434488、DE4216003、DE4216004及WO98/24803中所述的(Z)-6’-(4-苯腈)-9，11α-二氢-17β-羟基-17α-[4-(1-氧化-3-甲基丁氧基)-1-丁烯基]4’H-萘并[3’，2’，1’；10，9，11]雌-4-甾-3-酮；氟化17α-烷基链甾族化合物，如WO98/34947中所述的11β-(4-乙酰苯基)-17β-羟基-17α-(1，1，2，2，2-氟乙基乙烯基醚)雌甾-4，9-二烯-3-酮；17-螺吡喃-3’-甲叉基甾族化合物，如美国专利号5,292,878中所述的11β-(4-乙酰苯基)-19,24-二去甲基-17，23-环氧-17α-胆甾-4，9，20-三亚乙基四胺-3-酮；(Z)-11β，19-[4-(3-磺胺吡啶)-o-亚苯基]-17β-羟基-17α-[3-羟基-1-丙烯基]-4-雄甾烯-3-酮，及美国专利号5,439,913中所述的其它化合物；13-烃基-11-β-苯基甾烷，如美国专利号5,446,036中所述的11β-[4-(1-甲基乙烯基)苯基]-17α-羟基-17β-(3-羟丙基)-13α-雌甾-4,9-二烯-3-酮；11-芳基甾族化合物，如美国专利号4,921,845中所述的4’，5’-二氢-11β-[4-(二甲基氨基)苯基]-6β-甲基螺[雌甾-4，9-二烯-17β，2’(3’H)-呋喃]-3-酮；如美国专利号4,829,060、4,814,327及5,089,488中所述的11-β-芳基-雌甾二烯；美国专利号5,739,125、5,407,928及5,273,971中所述的11-β-芳基-4，9雌烯及11-β-芳基-13-烃基-4，9-雌烯；EP289073中所述的11-β-芳基-6-烃基(或烯基或炔基)甾族化合物；美国专利号5,093,507中所述的10-β，11-β-桥甾族化合物；美国专利号5,244,886中所述的11-β-芳基-14-β-甾族化合物；美国专利号5,095,129、5,446,178、5,478,956及5,232,915中所述的19，11-β-桥甾族化合物；美国专利号5,684,151中所述的1-芳基磺酰基、芳甲酰基及1-芳基膦酰基-3-苯基-1，4，5，6-四氢哒嗪；美国专利号5,753,655中所述的1-芳基磺酰基、芳甲酰基及芳基硫代羰基吡啶衍生物；美国专利号5,688,808、5,693,646、5,693,647、5,696,127、5,696,130及5,696,133中所述的1，2-二氢-[1，2-g]喹啉衍生物及1，2-二氢-苯并吡喃-[3，4-f]喹啉衍生物；Kang等，2007年，BioorgMed.Chem.Lett.15：907-910中所述的源出(8S，13S，14R)-7-乙二酸-雌甾-4，9-二烯-3，17-二酮1的乙二酸-甾族化合物6；及Kang等，2007年，Bioorg.Med.Chem.Lett.17∶2531-2534中所述的7-乙二酸-甾族化合物4。

在优选实施例中，孕酮拮抗剂为抗孕激素/SPRMCDB-4124(21-甲氧基-17α-醋酸基-11β-(4N，N-二甲基氨基苯基)-19-去甲孕甾-4，9-二烯-3，20-二酮)。范例10说明，从成年女性月经周期的第5天开始，以较低的给药量(25毫克/天和12.5毫克/天)使用CDB-4124，将导致使用较高给药量(50毫克/天)所未观察到的子宫内膜增厚现象。

本发明的孕酮拮抗剂组合物可用于接受任何与子宫内膜增殖或子宫内膜肿瘤增加风险或发生率有关的激素治疗的病人。此类治疗可能包括(但不限于)使用雌激素或使用SERM。本发明的孕酮拮抗剂组合物也可用于接受抗雌激素治疗的病人，因为孕酮拮抗剂组合物对子宫的子宫内膜组织能够起到抗增殖作用，从而让病人受益。

SERM目前可用于治疗各种病症，包括乳腺癌、骨质疏松症、结肠癌、神经变性疾病(如帕金森症和老年痴呆症)、心血管疾病、阴道萎缩症、肥胖症。但是，SERM疗法与子宫内膜增殖和子宫内膜肿瘤有关。例如，使用三苯氧胺治疗乳腺癌，将导致子宫完好的女性出现约20％的非典型增殖发生率。子宫内膜标本呈现非典型性的病人，有25％发展为癌瘤的可能性。使用剂量足够的本发明化合物，可有效抑制使用SERM进行治疗时伴有的增殖。本发明化合物可结合SERM，用于治疗前面提到过的任何病症。

本发明中列出的化合物，可在子宫内起到孕酮拮抗剂的作用。本发明的化合物可能适于接受激素替补治疗(就其它症状而言)的绝境病人长期使用。充分考虑剂量后，化合物仅具有较低的糖皮质激素受体结合活性，因此，化合物不会与糖皮质激素受体的机能发生抵触。因此，使用化合物可降低副作用，如情绪波动、精神疲劳及体重减轻，当使用对糖皮质激素受体具有较高亲和性的抗孕激素时，上述症状较为常见。

在另一个实施例中，本发明提供用于确认化合物是否具备选择性孕酮受体结合活性的方法。此类方法包括受体结合和体内生物检定，如抗-McGinty、抗-Clauberg、糖皮质激素、雌激素、雄激素、抗糖皮质激素(AG)、抗雌激素、抗雄激素活性，以及生交后和抗排卵活性，其中，本发明的化合物作为参考。

在另一个实施例中，本发明表明，通过对潜在SPRM进行分析，可了解它们对人体细胞内转录活性的影响。当本发明中所列的SPRM用作参考时，此分析可提供以下相关信息：(1)SPRM与受体的相互作用，(2)激活受体与其它转录因素的相互影响，(3)孕酮应答元件(PRE)转录合成物的激活；以及它对基因表达的最终影响。在此类实验中，当PRE-依赖启动子进入HeLa、HepG2或T47D细胞时，质粒表达hPR-B能够与相关领域技术人员所熟知的任何报告体发生共转染。报告体可能包括(但不限于)荧光素酶、β-半乳糖苷酶、绿色荧光蛋白质、红色荧光蛋白质或黄色荧光蛋白质。转染后，使用测试化合物或本应用SPRM所列化合物的其中一种，作为阳性对照物。治疗后，检定细胞以报告表达。

在另一个实施例中，本发明表明，通过对预期SPRM进行测试，可了解它们对抑制人体淋巴细胞系CEM-7中的地塞米松引导细胞死亡的能力，并与本规格标准中所列SPRM的效果进行对比。在此类实验中，可添加一定浓度的地塞米松，以有效杀死细胞。然后，使用RU486、本发明的SPRM之一，或浓度在10^-6和10^-8M之间的测试化合物，以处理细胞。

依据本发明进行使用的孕酮拮抗剂化合物，可使用业内公认的合成化学技术(如美国专利号6,861,415中所列的技术)进行合成。需要注意的是，在反应条件下，特定功能团可能与其它反应体或反应剂相抵触，因此可能需要采取临时防护措施。保护基的使用如“有机合成中的保护基”的第2版，T.W.Greene&P.G.M.Wutz，Wiley-Interscience(1991)中所述。

在一个实施例中，发明组合物包括一种或多种孕酮拮抗剂，或药学上允许的盐。取决于处理条件，获得的盐化合物可能是中性或盐形态。盐形态包括水合及其它溶剂化物，以及多晶型物。此类最终产品的游离基和盐，均可依据发明进行使用。

在某种意义上，使用基础因子(如碱)或通过离子交换作用，可将酸加成盐转化为游离基。获得的游离基也可以和有机或无机酸共同形成盐。

在配置酸加成盐的过程中，最好使用可形成药学上允许的盐形态的酸剂。例如，此类酸剂可以是盐酸、硫磺酸、磷酸、硝酸、脂族酸、环酸或磺酸，如蚁酸、醋酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、葡萄糖醛酸、延胡索酸、马来酸、羟基丙二酸、丙酮酸、天门冬胺酸、谷氨酸、对羟基苯甲酸、扑酸、乙基磺酸、羟乙基磺酸、苯乙酸、扁桃酸、卤素和苯磺酸、甲苯磺酸、粘酸、半乳糖醛酸或萘磺酸。依据发明，可使用所有多晶形物。

依据发明也可使用基加成盐，并将游离酸形态与剂量充分的选定基剂接触进行制备，形成传统意义上的盐。通过让盐形态接触酸，可再生游离酸形态，并离析传统意义上的游离酸。药学上允许的基加成盐可通过金属或胺形成，如碱和碱土金属或有机胺。例如，作为阳离子的金属可以是钠、钾、钙、镁等。一些适用的胺为氨基酸，如赖氨酸、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、N-甲基葡萄糖胺等。

对前面提到过的效用，本发明的化合物可通过任何常规途径让病人使用，并确保孕酮拮抗剂发挥效用。例如，本发明的孕酮拮抗剂可以口服、胃肠外给药、舌下给药、皮肤给药、直肠给药、穿粘膜给药、局部给药、通过吸入给药、通过颊部给药或多种方法结合以进行使用。肠胃外给药包括(但不限于)静脉注射、动脉注射、腹膜内注射、皮下注射、肌内注射、鞘内注射、关节内注射、脑池内注射及心室内注射。给药形式可以是药片、胶囊、药丸、鼻腔喷剂、气雾剂、小丸、植入物(或其它针剂注射给药方法)等等。

治疗所需的组合物的治疗有效剂量，根据采用的特定化合物、给药方式、病症的严重程度、选择的治疗持续时间，连同其它因素而有所不同，并由主治医师最终确定。多数情况下，特定化合物的有效给药量应足以抑制子宫内膜的增殖。但是，一般而言，治疗病人的剂量通常在每天大约0.001毫克/公斤至大约500毫克/公斤之间，例如，每天大约1μ克/公斤至大约1毫克/公斤或每天大约1μ克/公斤至大约100u克/公斤。对于多数大型哺乳动物，每天总给药量为大约1至100毫克，建议给药量为大约2至80毫克。通过调整给药方案，以获得最佳的治疗效果。确定给药量后，可按合理的间隔时间，以单次或多次剂量进行合理用药，例如，每天服用2次、3次、4次或更多次。

举例说明，受试者使用发明组合物时，可以按大约1μ克/公斤至大约1毫克/公斤体重的用药量使用孕酮拮抗剂，例如、约1μ克/公斤、约25μ克/公斤、约50μ克/公斤、约75μ克/公斤、约100μ克/公斤、约125μ克/公斤、约150μ可/公斤、约175μ克/公斤、约200μ克/公斤、约225μ克/公斤、约250μ克/公斤、约275μ克/公斤、约300μ克/公斤、约325μ克/公斤、约350μ克/公斤、约375μ克/公斤、约400μ克/公斤、约425μ克/公斤、约450克/公斤、约475μ克/公斤、约500μ克/公斤、约525μ克/公斤、约550μ克/公斤、约575μ克/公斤、约600μ克/公斤、约625μ克/公斤、约650μ克/公斤、约675μ克/公斤、约700μ克/公斤、约725μ克/公斤、约750μ克/公斤、约775μ克/公斤、约800μ克/公斤、约825μ克/公斤、约850μ克/公斤、约875μ克/公斤、约900μ克/公斤、约925μ克/公斤、约950μ克/公斤、约975μ克/公斤或约1毫克/公斤体重。

本发明的组合物可能含约25至约90％的活性成分连同载体，按重量计算通常大约在5％至60％之间。

固体载体可能包括淀粉、乳糖、磷酸二钙、微晶纤维素、蔗糖和高岭土，而液态载体可能包括无菌水、聚乙二醇、非离子型表面活性剂和食油，如玉米油、花生油和芝麻油，并适用活性成分的属性和选定的特殊用药方式。增香剂、着色剂、防腐剂，及抗氧化剂，例如，制剂中可能含维生素E和抗坏血酸。在正常储存和使用条件下，制剂可能含防腐剂，以防止微生物滋生。

本发明的组合物可使用相关领域技术人员所熟知的技术，在压片机中配制为药片。此外，依据发明，也可将活性成分分别压入两层药片中。依据本发明，药片可能含抗雌激素药、雌激素或SERM，并作为活性成分的一部分。本发明的组合物也可配制为油溶液。

使用本发明组合物进行治疗的病人，应定期监控雌性激素和糖皮质激素水平。

通过提供以下非限制范例，以帮助了解本发明的效用。

本文中的所有专利、专利申请和参考出版物，在相关法律的允许下，均以引用的方式，最大限度地列入本文中。

范例1。可用于制备药片的本发明配方。

要获得药片以实施本发明，需将以下成分一起压入压片机中：

要获得双层药片以实施本发明，需将以下成分一起压入压片机中：

要获得含抗雌激素的药片以实施本发明，举例来说，需将以下成分一起压入压片机中：

要获得油制剂以实施本发明，举例来说，需将以下成分彼此混合并装入安瓿中：

100.0毫克CDB-4124

343.4毫克蓖麻油

608.6毫克苯酸苄酯

范例2。本发明的化合物可能仅具有较弱的抗糖皮质激素受体结合活性。

特定抗孕激素在受体结合测定中进行测试，以了解它们结合兔孕激素受体(rbPR)及糖皮质激素受体(rbGR)的能力。简而言之，含PR或GR的细胞液分别在以雌二酮作为引物的兔未成熟子宫或胸腺的TEGMD缓冲剂(10毫摩三羧甲基氨基甲烷，pH7.2、1.5毫摩EDTA、0.2毫摩钼酸钠、10％丙三醇、1毫摩DTT)中制备。对于PR结合，可使用6毫微摩1，2-[³H]孕酮(50.0Ci/毫摩尔)培养细胞液，并按2至100毫微摩的浓度添加竞争剂。为结合GR，可使用6毫微摩6.7-[³H]地塞米松(40Ci/毫摩尔)培养细胞液，并按20至100毫微摩的浓度添加测试化合物。以4C持续培养一整夜后，结合与非结合[³H]甾类化合物通过添加葡聚糖被覆活性炭，并在4C下以2100xg离心过滤15分钟。含[3H]-甾类化合物受体化合物的上清液，被移入含4毫升闪烁液(PackardInstrumentCo.)的小瓶中，在30分钟的液体闪烁计时中，使液体呈涡流状，并使其均衡，然后计时2分钟。通过将计时数据输入四参数S形曲线计算机程序(RiaSmart免疫测定数据简化程序，PackardInstrumentCo.，Meriden，Conn.)，以决定每条标准曲线和每条复曲线的EC₅₀(有效浓度)。使用以下等式以计算每种化合物的相对结合亲和性(RBA)：标准EC₅₀/测试化合物x100的EC₅₀。PR和GR分析标准分别为无标号孕酮和地塞米松。此类实验的结果汇总于表1，提供每种化合物的相对结合亲和性比率，用于rbPR和rbGR受体(rbPR/rbGR)。此差异反映拥有2个受体和必要的转录余因数的细胞或组织中化合物的相对活性。

通过抗-McGinty和抗-Clauberg分析，表1中同时提供兔子宫内的相同化合物的相对生物活性。化合物CDB-2914(列于表格末端)作用此类实验的对照或参考化合物(兔生物活性＝1.00)，因为使用CDB-2914的实验结果已在(Hild-Petito等，1996年；Passaro等，1997年；Reel等，1998年；Larner等，2000年)之前公布。在抗-McGinty测试中，对未成熟雌兔连续6天每日皮下注射5μ克雌二酮(含10％乙醇/芝麻油)。到第7天，通过结扎两个子宫角的3-4厘米分节，对动物实施腹部绝育手术。将经过适当稀释的测试化合物通过管腔注入一个子宫角的结扎分节，并将媒介物单独注入另一个子宫角。在接下来的3天内，每天为每只兔子皮下注射孕酮的刺激性剂量(267μ克/天)，以促使子宫内膜增殖。在第10天，处死所有实验动物以摘除子宫，并取出结扎中心分节，置于10％中性缓冲福尔马林中，以便进行组织学处理。使用显微镜观察染有苏木精和苦辛的5微米切片，以确定子宫内膜腺的增殖程度。计算每只实验兔的子宫内膜增殖抑制百分比，并对5只动物一组的记录值进行平均。在抗-Clauberg测试中，对未成熟雌兔连续6天每日皮下注射5μ克雌二酮(含10％乙醇/芝麻油)。从第7天开始，连续5天对动物皮下注射孕酮(160μ克/天)，并通过皮下注射或以适合的媒介物口服试验化合物。一组实验兔仅使用孕酮。使用最后一剂药物后24小时，处死所有实验动物以摘除子宫，去除所有脂肪和连接组织后，确保重量接近0.2毫克，并将子宫放入10％中性缓冲福尔马林中，以进行后续组织学处理。使用显微镜观察染有苏木精和曙红的5微米切片，以确定子宫内膜腺的增殖程度。通过单独对比孕酮刺激动物，取得测试化合物各种剂量水平的子宫内膜增殖抑制百分比。表1中显示的数据(兔生物活性)反映出通过与CDB-2914有关的抗-McGinty和抗-Clauberg分析得出的每种化合物的平均结果。

如表1所列，根据用于兔PR与兔GR的每种化合物的选择性，对受测抗孕激素进行分级。同时，根据兔子宫内的生物活性，对抗孕激素进行分级。表1中显示的数据，表明用于孕酮受体的导联化合物的亲和性，比用于糖皮质激素受体的亲和性，至少大1.5倍。

此类研究的结果同时表明，与RU486和CDB-2914相比，两种导联化合物CDB-4124和CDB-4059在兔子宫内具备较强的抗孕激素活性。两种化合物均缺少雌激素、雄激素、抗雌激素和抗雄激素活性。两种化合物均具备最小的抗糖皮质激素受体活性，此特征有别于在糖皮质激素受体结合中具备中度活性的RU486和CDB-2914。在此类试验中，CDB-4124的效用略优于CDB-4059。

表1。-SPRM的受体结合及生物活性

范例3。测量皮质醇。

多个不同实验系统支持RU486增加皮质醇的结论，因为RU486在人类和灵长类动物体内具备较强的抗糖皮质激素特性。

但是，如图1所示，使用RU486，以10毫克/公斤的剂量进行治疗的实验鼠，皮质醇水平未出现显著差异。相反，使用CDB-4124或CDB-4059，以相同剂量进行治疗的实验鼠，较之对照组的实验鼠，具备更高的血清皮质醇水平。

最高水平在3-4微克/分升(30-40毫微克/毫升)范围内。作用依据剂量而定，增加CDB-4124的剂量将导致皮质醇增加(图2)。

RU486与CDB-4124或CDB-4059对皮质醇水平的作用各有不同，并可通过下述方法进行说明，即假定慢性用药21天后，较之两种CDB化合物，RU486能够更好地被鼠肝脏所代谢。

范例4。测量皮质甾酮。

皮质甾酮是鼠中数量最多的糖皮质激素。SPRM对图1和2中的皮质醇的作用，可能次于对皮质甾酮的强烈作用。为更好地解释这一现象，应分组测量皮质甾酮水平，并以皮质醇水平显示最强的变化，如使用CDB-4124，以20毫克/公斤或10毫克/公斤的剂量进行治疗。为进行比较，可同时测试以下分组：一组使用20毫克/公斤CDB-4124外加10毫克/公斤孕酮，一组使用10毫克/公斤CDB-4124外加10毫克/公斤孕酮，一组使用10毫克/公斤RU486，一组单独使用10毫克/公斤孕酮，一个对照组。皮质甾酮水平比皮质醇水平高出10-40倍。但是，观察平均皮质甾酮水平时，各组之间几乎无差别。治疗前(p＝0.43，Kruskal-Wallis检验)，治疗21天后(p＝0.57，Kruskal-Wallis检验)，或治疗28天后并处死(p＝0.061，Kruskal-Wallis检验)。

为评估外源性孕酮对血清皮质甾酮的作用，可对比3个配对组(它们之间的差别在于是否使用外源性孕酮)的皮质甾酮水平(如对比对照物和孕酮，或按20毫克/公斤使用CDB-4124与按20毫克/公斤使用CDB-4124外加孕酮，或按10毫克/公斤使用CDB-4124与按10毫克/公斤使用CDB-4124外加孕酮)。经统计，发现存在明显差异：使用孕酮进行治疗的动物，在治疗21天后(p＝0.029，Mann-WhitneyWilcoxon检验，双尾)，皮质甾酮水平较低。此作用未在处死时取得的血清中加以验实。孕酮和CDB-4124组之间，孕酮和RU-486组之间，或RU-486组和CDB-4124组之间，血清皮质甾酮并无差别。

同时将检查每组中的血清皮质醇和血清皮质甾酮之间的关系。按20毫克/公斤使用CDB-4124(r2＝0.78)，按10毫克/公斤使用CDB-4124(r²＝0.82)，及使用RU486(r²＝0.85)，两者之间具备较强的正线性关联。向开头两个CDB-4124组添加孕酮，将显著减弱两组之间的关系(分别为，第10组r²＝0.34及第11组r²＝0.37)。孕酮本身并不具备此类正关系(r²＝-1.0)。对照组显示两种糖皮质激素之间并无关系(r²＝0.064)。因此，使用CDB-4124的组中皮质醇水平出现增加，与皮质甾酮水平有关，原因可能是皮质甾酮在转化时得到某种程度的加强。这与上述CDB-4124的作用相一致：作用于负责孕酮和皮质醇水平的代谢酶类。

虽然未发现CDB-4124对实验鼠的主要糖皮质激素有较强影响，但是，出于安全原因，应对在第一临床实验阶段使用CDB-4124或CDB-4059的病人进行监控，观察病人可能出现的抗糖皮质激素反应，包括皮质醇、皮质甾酮或ACTH可能增加的情况。

范例5。测试SPRM在子宫细胞内的抗增殖作用。

任何子宫细胞系均能使用。在96微孔滴定板中测量增殖。向每个微孔加入5X10³细胞。使用PerkinE1merCetusPRO/PETTE，向微孔中添加培养基和药料溶液。培养基为IMEM，并添加5％胎牛血清。8种药物浓缩物接受测试，一式两份，从0.078微摩尔至10微摩尔。测试实例包括单独测试三苯氧胺，及测试本规格中的每种化合物连同三苯氧胺。

经过4天的培育后，用含药物的介质替换原有介质，经过总共7天的培育后，用三氯乙酸凝固细胞单层，并用磺酰罗丹明染料进行染色。使用TitertekMultiscan微孔板读取器测量浸出染液的吸收度(492nm)。绘制剂量反应曲线(对照物吸收度与药片浓度的百分比)，以便评估用于抑制50％增殖，并作为药片浓度(微摩尔级)进行定义的IC₅₀值。IC₅₀值与用于抑制细胞增殖的受测药物的效价强度有关，并可提供用于确认化合物是否适于抑制子宫细胞过量增殖所需的信息。

范例6。CDB-4124降低食蟹猴中的黄体期孕酮

使用CDB-4124或RU-486，按1.0毫克/公斤/天或配合安慰剂(对照物)，对食蟹猴(Macacafascicularis)(n＝14)实施为期36周的口服治疗，另一组(n＝14)每月一次使用(利普安)IM。在研究中间阶段的一个月(第14-17周)，及研究的最后一个月(第33-36周)，测量每只动物的泌尿孕酮水平。结果如下所示：

范例7。CDB-4124未降低食蟹猴体内的卵泡期雌激素。

在研究中间阶段的一个月(第14-17周)，及研究的最后一个月(第33-36周)，测量范例6的每只动物的泌尿雌激素水平。卵泡期结果基于35基线排卵周期。结果如下所示：

范例8。CDB-4124和(利普安)，而非RU486，可抑制食蟹猴子宫内膜上皮细胞增殖。

在第36周，将范例6每组3只动物处死后，于24小时内注射胸腺嘧啶类似物溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)，一种增殖细胞及其后代的标识物，以评估组织增殖。用显微镜观察经过染色的全厚度子宫切片，查找就使用BrdU的％细胞阳性而言的增殖证据：

范例9。CDB-4124和RU486而非(利普安)可增强食蟹猴子宫内膜上皮细胞的细胞凋亡

通过脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术，在同一只动物的组织载玻片上评估细胞凋亡。凋亡细胞百分比如下所示：

范例10。从女性月经周期的黄体期开始的用药期间，低浓度CDB-4124可增加子宫内膜厚度。

39位患有子宫内膜异位症的绝经前成年女性，作为受试者参加为期6个月的Proellex^TM(CDB-4124)子宫内膜异位症治疗研究。此项研究包括3种剂量水平的CDB-4124以及阳性对照小组。阳性对照物为(亮丙瑞林)，一种GnRH兴奋剂，通常用于治疗子宫内膜异位症(又称(利普安))。CDB-4124作为每日口服胶囊，按12.5毫克/天(n＝2)、25毫克/天(n＝3)及50毫克/天(n＝3)的剂量，从女性月经周期第5天开始，使用双盲法用药。另一组(n＝4)每月注射一次(亮丙瑞林)缓释剂以作为阳性对照。

所有CDB-4124剂量，及(亮丙瑞林)剂量，均可在为期6个月的用药期间，缓解与疼痛有关的病症，50毫克CDB-4124剂量，比起12.5毫克或25毫克剂量，能够更有效地缩短疼痛的持续时间并降低强度，并且，在研究过程中，能够比(亮丙瑞林)更有效地(p＝0.0012)减少疼痛天数。相比使用活性对照物(亮丙瑞林)，能够更快速地缓解疼痛。在本研究中，疼痛治疗反应以两种方式进行分析。参加研究的病人，坚持每天写疼痛日记，以记录疼痛的严重性及发生频率。此外，每次就诊时，病人将填写子宫内膜异位症状调查表，包括用于评估发病时疼痛强度的问卷，并通过0-10分进行评分，其中10分表示最强烈的疼痛。每日疼痛日记表明，在治疗的前3个月内，使用(亮丙瑞林)的女性，平均有19.4天感到疼痛。使用50毫克CDB-4124的女性，在相同周期内疼痛天数减少1天。使用25毫克及12.5毫克CDB-4124的女性，比起使用最高剂量CDB-4124或(亮丙瑞林)的女性，疼痛天数更多。这表明剂量依赖性对缓解疼痛有所影响。在为期180天的治疗期间，疼痛日记表明使用50毫克CDB-4124剂量的女性，有170天或96％的无疼痛天数(标准偏差＝8.86天)。从统计数据来看，疼痛持续时间的缩短，要好于(p＝0.0012)使用(亮丙瑞林)所获得的117.8天(74％，标准偏差51.4天)无疼痛天数。并且，在无疼痛天数方面，CDB-4124的50毫克剂量的统计数据要好于25毫克和12.5毫克剂量。使用CDB-412412.5毫克及25毫克剂量的病人，无疼痛天数分别为115.9天(66％；标准偏差69.2天)及133.6天(75％；标准偏差27.4天)。此类结果清楚地说明CDB-4124的剂量反应。从统计数据来看，25毫克和12.5毫克剂量的CDB-4124，与(亮丙瑞林)并无差别。在接受治疗的第一个月结束时，从统计数据来看，与基准而非其它三个试验组相比，50毫克Proellex组(p＝0.031)的疼痛天数明显减少。疼痛的强烈程度通过以下问题进行评估：“在1-10分中，0分表示无疼痛，10分表示剧烈疼痛，在出现疼痛的日子，您的疼痛剧烈程度如何？”CDB-4124组和(亮丙瑞林)组的基准疼痛强度的平均得分分别为6.3和6.1。从统计数据来看，在25毫克和50毫克Proellex组中，第一个月内疼痛得到明显缓解。在第三个月，从统计数据来看，与基准相比，所有4个有效试验组均能够有效缓解疼痛，并获得以下得分：12.5毫克CDB-4124为3.7(p＝0.03)，25毫克CDB-4124为3.2(p＝0.03)，50毫克CDB-4124为1.6(p＝0.015)而(亮丙瑞林)为1.5(p＝0.016)。与剂量有关的的疼痛缓解持续到第6个月，疼痛强度值分别为2.0(p＝0.008)、2.8(p＝0.023)、0.6(p＝0.004)及0.7(p＝0.016)。停止治疗2个月后，所有4个试验组均恢复为相同的疼痛强度。

在研究中使用(亮丙瑞林)的女性，到第三个月，平均雌激素水平减至绝经后水平(＜20pg/m1)，并在为期6个月的治疗期间保持这一水平。从统计数据来看，此结果与第三个月和基准值相比较的骨吸收生物标志物的显著增加(p＝0.023)有关，因此将增加骨损失的风险。在第六个月以及随访观察的一个月内，使用(亮丙瑞林)进行治疗的女性，仍存在骨吸收标志物增加的情况。CDB-4124的所有剂量，能够将雌激素浓度保持在明显高于使用(亮丙瑞林)所获得的浓度，并保持在较低的正常范围内(平均＞40pg/m1)。需要注意的是，在3个月和6个月的治疗期间，在CDB-4124的任何剂量小组中，骨吸收生物标志物均未出现重大变化。雌激素处于绝经后水平的女性，出现骨损失和其他病状的风险比较大。因此，使用(亮丙瑞林)的治疗时间不应超多6个月。

CDB-4124的副作用一般较温和，并且不会系统涉及单独的器官系统。虽然这是一次小规模研究，且未能从安全数据得出决定性结论，但未观察到单独的安全征象。

对参加研究的女性，应密切观察她们的子宫内膜结构变化。从此类诊察数据可以看出，CDB-4124对子宫内膜厚度具有反剂量依赖作用(根据超声波测量结果)。将子宫内膜厚度的一次超声波测量结果与基准进行对比。临床数据显示，使用CDB-4124的所有三种剂量，均出现子宫内膜逐渐增厚的情况。子宫内膜增厚在使用12.5毫克剂量进行治疗时最明显，25毫克和50毫克剂量则较不明显。经过为期6个月的治疗，从统计数据可看出，使用12.5毫克剂量进行治疗时，子宫内膜厚度与基准相比明显增加10.9毫米(p0.016)，而25毫克和50毫克剂量则分别出现9.8毫米和3.9毫米的轻微变化。

在研究中，4位出现严重出血的受试者，其子宫内膜厚度均超过20毫米，并已接受5个月或更长时间的治疗。在单独的研究中，对有子宫肌瘤的女性，在每位女性月经周期第5天起的3个月内，使用每日剂量为12.5毫克、25毫克或50毫克的CDB-4124。使用12.5毫克或25毫克剂量的受试者，均未出现明显出血，她们的平均子宫内膜厚度测量值小于20毫米。此类数据表明，出血的风险与治疗的持续时间和子宫内膜厚度的增加有关。

范例11：对CDB-4124试验组中的女性进行子宫内膜活组织检查

对使用12.5毫克、25毫克或50毫克剂量的CDB-4124，进行为期6个月治疗的女性，以及患有子宫肌瘤，并使用12.5或25毫克剂量的CDB-4124，进行为期3个月治疗的女性，进行子宫内膜活组织检查。标本使用盲式治疗方法进行评估，并采用WHO诊断方案(Silverberg等，子宫主体上皮细胞瘤的肿瘤及相关病变。TavassoliFA，StrattonMR，reditors。WHO肿瘤分类：胸部肿瘤和女性生殖器官的机能病理学和遗传学。法国里昂：IARC出版社，2003年：221-232)。每个样本均以多数票方式(三位病理学家中的两位或以上表示同意)确定一致的主要最终结论，如果所有病理学家均不同意，将采用“最差”的诊断结论。其它已得数据将使用结构数据采集仪器进行记录。所有原始数据将提供给负责评估的病理学家，他们将执行独立分析，并基于分析结果得出结论。

分析结果表明，在具有病良性子宫内膜，未出现任何过度增殖，子宫内膜上皮内瘤样病变或癌瘤，并接受CDB-4124治疗的所有受试者中，主要诊断结论相一致。因此，CDB-4124能够在各种浓缩试验中抑制子宫内膜的增殖。在患有子宫内膜异位症或子宫肌瘤的受试者，或接受3个月或6个月治疗的受试者，或使用三种不同剂量进行治疗的受试者之间，主要诊断结论并不无差异。

通过对“良性”分类中的其它次要数据进行分析，发现存在腺囊性扩张症的情况，此症状与近期接受其它孕酮受体效应物(如asoprisnil、米非司酮和CDB-2914)治疗的女性所出现的组织学症状相似。在此类囊肿中，腺上皮的外观各有不同，但均含有未发育完全的分泌腺的非生理性组合活性，凋亡细胞(凋亡小体)及罕见的有丝分裂。其它囊性腺由无活性上皮细胞界定。使用低剂量CDB-4124时出现罕见的腺状有丝分裂，在使用50毫克剂量时消失，这表明通过增加剂量可实现抗增殖作用。此一系列囊肿和上皮细胞新发现属于孕酮受体效应物范围，并与近期使用其它同类化合物所出现的子宫内膜变化有关。但是，CDB-4124不会诱发使用其它孕酮受体效应物所出现的血管壁增厚和格状毛细管特征。

重要的是，对于所有试验剂量，均能够观察到，在通过超声波测量所发现的子宫内膜增厚，与负责评估的病理学家作出的囊腺诊断之间存在正相关。但是，在使用最低剂量CDB-4124的女性中，囊腺在数量和尺寸上要高于使用最高剂量的女性。在使用12.5毫克剂量的试验组中存在明显的趋势，即，在3至6个月之间，厚度和囊肿数量均有所增加。子宫内膜厚度与组织学囊肿的综合作用，随治疗持续时间的增加，将变得更加强烈，这表明子宫内膜的增厚是由腺体扩张的发展所导致。值得注意的是，从女性月经周期的第5天开始，让各个试验组使用CDB-4124，结果，任何试验组中的女性均未出现月经来潮，直至停止用药。

并且，在第5天后不久，开始出现子宫内膜床大范围腺化。请参阅图3。从第14天左右开始，在孕酮的作用下，血管化和更多腺状活动速度加快。通过突破理论束缚的思维，可以认为，与使用50毫克剂量的试验组中的女性所出现的情况相反，CDB-4124在使用12.5毫克和25毫克剂量的试验组中的女性体内所积聚的浓度，并不足以在女性第一阶段过程中完整阻滞孕酮，并导致囊腺的尺寸和数量在残存(未阻滞)孕酮的影响下得到增加。

从女性月经周期的黄体期阶段开始(即，第14天或其后)使用CDB-4124，将让女性在初始周期阶段来月经。可以认为，任何早期形成的囊腺将在此月经期脱落，然后，CDB-4124浓度应足以阻滞孕酮，并因此抑制孕酮对子宫内膜产生血管和腺体作用。因此，本发明为治疗，尤其是，雌激素依赖症提供剂量给药方案，包括使用浓度相对较低的孕酮拮抗剂(如CDB-4124)，不会造成子宫内膜增厚和增加脆弱性等不利影响。因此，上述剂量给药方案将有效缓解或消除，例如，子宫内膜增厚、脆弱所导致的突破出血，并且无需在使用孕酮拮抗剂进行治疗时诱发周期性月经。可以认为，从女性月经周期的黄体期阶段开始，在一段时间内使用浓度较高的CDB-4124，也能够获得效好的治疗效果(相对较小的程度上)。因此，以使用50毫克剂量的CDB-4124为例，从女性月经周期的黄体期的某一时点开始使用一段时间，能够进一步缓解与在范例10中使用50毫克剂量的试验组(用药周期从每位女性月经周期的第5天开始)中所观察到的结果有关的子宫内膜增厚现象。

范例12：使用低浓度孕酮拮抗剂以治疗子宫内膜异位症

将子宫内膜异位症的女性患者分为两组：第一组从每位女性的月经周期的第5天开始，在6个月内使用12.5毫克的CDB-4124；第二组从每位女性的月经周期的第15天开始，在6个月内使用12.5毫克的CDB-4124。在6个月内，定时监控子宫内膜厚度。第二组女性的子宫内膜增厚程度，较第一组女性低，如果子宫内膜未见增厚，将有助于缓解子宫内膜引发的疼痛。

Claims (9)

1.每日2mg至80mg的CDB-4124在制造药物方面的应用，根据间断用药方案，用于雌激素依赖症的长期治疗，同时避免与郁滞性子宫内膜有关的副作用，所述雌激素依赖症选自子宫内膜异位症和子宫肌瘤，其中，将CDB-4124用药于需要这样的治疗的女性达用药期间，用药期间从女性月经周期的黄体期阶段开始，并且在用药期间每日使用组合物达至少30天，然后停止用药达间断期间，所述停止用药是通过连续不治疗达数天期间来实现的，所述连续不治疗足以使女性月经来潮，然后将组合物每日用药达至少30天的期间，然后通过连续不治疗达数天期间停止用药，所述连续不治疗足以使女性月经来潮并且重复这种用药方式，其中在每次停药期间使用孕激素以诱发月经来潮。

2.根据权利要求1的应用，其中雌激素依赖症是子宫内膜异位症。

3.根据权利要求1的应用，其中从该女性的月经周期的第14天至第25天开始，施用该药物。

4.根据权利要求1的应用，其中以每日12.5mg至25mg的剂量施用所述药物。

5.根据权利要求1的应用，其中所述药物施用至少6个月的治疗期间，在该期间中药物间断用药。

6.根据权利要求1的应用，其中女性体内的雌激素水平未因服用该药物而明显降低。

7.根据权利要求1的应用，其中施用所述药物至少12个月的治疗期间，在该期间中药物间断用药。

8.根据权利要求1的应用，其中间断用药方案包括将CDB-4124用药于女性达用药期间，用药期间从女性月经周期的黄体期阶段开始，并且在用药期间每日使用组合物达4个月，然后通过连续不治疗达足以使女性月经来潮的数天期间停止用药达间断期间，然后将CDB-4124每日用药达4个月，然后通过连续不治疗达足以使女性月经来潮的数天期间停止用药并且重复这种用药和停止用药的方式长达为完成治疗病症所需的时间。

9.根据权利要求1的应用，其中孕激素选自美罗孕酮、甲羟孕酮、甲地孕酮、炔诺酮、孕酮、羟孕酮、乙酸基孕烯醇酮、烯丙雌醇、去乙酰环丙氯地孕酮、去氧孕烯、二甲炔酮、羟脱水孕酮、双醋炔诺酮、孕二烯酮和利奈孕酮。