CN105602864B - 用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂及应用 - Google Patents

用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂及应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种应用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂及其制备方法与应用，制备该纳豆芽孢杆菌制剂的原料为：纳豆芽孢杆菌菌粉，硫酸粘杆菌素，纳他霉素，L‑丙氨酸，玉米粉，豆粕粉，氯化钾，苏氨酸，红糖；利用纳豆芽孢杆菌制剂中的纳他霉素与硫酸粘杆菌素抑制发酵过程中的病原真菌，酵母菌等真菌，与大肠杆菌，沙门氏菌等革兰氏阴性菌的生长，利用L‑丙氨酸，苏氨酸等芽孢萌发剂快速促进纳豆芽孢的萌发，提高芽孢萌发率；从而实现可以在简陋的畜禽养殖场进行发酵扩繁操作，设施需求简单，用菌量少，成本低，现场发酵的发酵液菌含量高，活性好，具有调节畜禽肠道，防病促生，改善养殖环境，增产提质的效果。

Description

用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂及应用
技术领域
本发明涉及微生物饲料添加剂领域，特别是涉及一种应用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂及应用。
背景技术
据报道纳豆芽孢杆菌可产生许多抗菌素，如杆菌肽，多粘菌素和2，6-吡啶二羧酸，这些物质对痢疾杆菌、原发性大肠杆菌O-157、O-111、O-144、伤寒菌、沙门氏菌等，都有强烈的抑制作用，因此纳豆芽孢杆菌具有强烈的抗菌活性。须见洋行博士对纳豆的抗菌功能作了研究，他们将纳豆加进O-157大肠杆菌4d后，大肠杆菌全部被抑制而死亡。小泽恭辅(1983)研究认为，纳豆芽孢杆菌的芽孢对病原性大肠杆菌(如O-111，O-144)及沙门氏菌具有抗菌作用，还能杀死肠道出血性大肠杆菌O-157。Osawa等人研究表明纳豆芽孢杆菌有抑制沙门氏菌、伤寒菌、痢疾菌及O157:H7大肠杆菌等致病菌作用起到抗菌素的作用, 纳豆芽孢杆菌还可灭活葡萄球菌肠毒素。贾力敏等人初步研究了纳豆芽孢杆菌对致病菌生长的抑制作用。随着现有农业政策的发展，农场规模化，大型化的趋势进一步加强，尽管目前对纳豆芽抱杆菌的益生机理了解的还很少，但它已被广泛用作微生物添加剂应用于动物生产中，并取得了良好效果。Samanya和Yamauchi(2002)的研究证实在鸡日粮中添加纳豆芽孢杆菌，可刺激肠道功能，降低血氨浓度，并有改善饲料转化率的趋势。
Fujiwara(2009)研究证实在肉鸡日粮中添加纳豆芽孢菌发酵大豆对肉鸡生长性能没有影响，但可提高肉鸡盲肠乙酸浓度，从而对肠道微生物活性产生有益影响。chen(2006)等用纳豆芽孢杆菌和啤酒酵母进行两阶段发酵生产的饲料饲喂肉仔鸡，终体重、体增重和饲料转化率提高。日粮添加纳豆芽抱杆菌200mg/kg时，AA鸡平均日增重和平均日采食量分别提高2.47g和5.11g。缪东等(2005)报道，日粮分别添加0.4%、0.3%、0.2%和0.2%纳豆芽抱杆菌制剂，与日粮添加0.4%常用添加剂效果比较，日增重分别提高了21%、18%、15.2%和9.2%。黄俊文(2005)等给18日龄断奶仔猪饲料添加lmg/kg纳豆芽抱杆菌，仔猪血清尿素氮及胆固醇的浓度降低，日增重提高，仔猪腹泻率降低，饲料转化率得到改善。王丽娟等(2006)报道，蜡样芽抱杆菌、地衣芽抱杆菌和纳豆芽抱杆菌对饲料的转化率有显著的改善作用，能显著增强肉鸡勃膜免疫功能，增强抗病力。反刍动物上,张海涛(2009)在断奶后犊牛日粮中添加纳豆芽孢杆菌，可提高犊牛日增重，改善犊牛瘤胃发育。邓露芳(2009)的研究证实，奶牛日粮中添加纳豆芽孢杆菌，可提高奶牛产奶量和改善乳品质。康海英考察了纳豆芽孢杆菌对泌乳初期牛胃肠道发酵的影响，表明纳豆芽抱杆菌具有减少粪便臭味物质排放和改善动物肠道健康的功能。纳豆芽孢杆菌因为具有稳定性好、抗性强、耐高温、耐酸碱，富产淀粉酶，蛋白酶，抑制病原菌繁殖，促进动物营养的消化吸收等优点而被广泛应用于畜禽养殖中。
为了能够利于生产，运输，我们生产产品中的芽孢菌主要是以孢子的状态存在，但其应用于畜禽体内或养殖环境，都需要的主要是营养态细胞，因此，在畜禽上使用芽孢杆菌制剂，在使用前会经过活化，即使芽孢状态的芽孢杆菌转化为营养态细胞，但传统上的活化主要是加入一些红糖，或葡萄糖，培养基之类的营养物质诱导其生长繁殖，如芽孢杆菌制剂：红糖：水以1：1：10的比例进行“活化”，但传统上的“活化”存在以下几个方面的问题：
一是高营养培养基加水后易使空气与水中的酵母菌，乳酸菌繁殖迅速，消耗培养基中营养，迅速降低培养液中PH，抑制芽孢的萌发与生长；
二是芽孢萌发前期需要时间长，一般需要4小时，芽孢才会开始萌发，而此时，由于“活化”液中酵母菌与乳酸菌的大量繁殖导致PH下降迅速，已经可以抑制芽孢的萌发与繁殖，从而大大影响芽孢萌发；
三是高营养培养基中也易感染大肠杆菌，原著的植物病害菌等有害杂菌，导致施用后效果差仍致有反作用；
四是芽孢菌用量大，效果不稳定。
然而到目前为止还没有公开过有关一种应用于畜禽养殖场现场发酵扩繁的能够较好控制杂菌与促进纳豆芽孢快速萌发的纳豆芽孢杆菌制剂。
发明内容
为了克服现有技术的缺点，本发明提供一种应用于农场现场发酵扩繁的能够较好控制杂菌与促进芽孢快速萌发的纳豆芽孢杆菌制剂及其应用方法，具体说是提供一种可应用于农场现场发酵扩繁，利用纳他霉素与多粘菌素抑制病原真菌，酵母菌等真菌与大肠杆菌，沙门氏菌等革兰氏阴性菌的生长，利用L-丙氨酸，苏氨酸等芽孢萌发剂，能快速促进芽孢的萌发，提高芽孢萌发效率，减少芽孢萌发时间，从而快速使用纳豆芽孢杆菌能在简易的发酵条件下，水与空气未经过灭菌的条件下，快速繁殖而占据优势菌种，而更好的抑制其他的杂菌与有害菌，从而得到一种活菌含量高，活性好，杂菌低的纳豆芽孢杆菌发酵液。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂，所述纳豆芽孢杆菌制剂的原料组成为：纳豆芽孢杆菌菌粉80-200份，硫酸粘杆菌素10-50份，纳他霉素1-10份， L-丙氨酸20-50份，苏氨酸20-80份，玉米粉50-200份，豆粕粉50-200份，氯化钾10-100份，红糖50-200份；
其中，用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的的制备方法：硫酸粘杆菌素10-50份，纳他霉素1-10份， L-丙氨酸20-50份，苏氨酸20-80份，玉米粉50-200份，豆粕粉50-200份，氯化钾10-100份，红糖50-200份；放置密封搅拌罐中搅拌20-30分钟，混合均匀，再将纳豆芽孢杆菌菌粉80-200份加入搅拌罐中搅拌均匀后，分装500克每包，抽真空包装，即得到用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂。
为了上实现上述目的，用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的应用包括以下步骤：
、畜禽场现场发酵
将权利要求2所制备的纳豆芽孢杆菌制剂与水的比例按1：10至1：30的比例搅拌均匀，调PH至8-8.2，前12小时每分钟通气量液气比为1：0.6， 12小时后通气量为1：1，培养24小时后即为现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液；
、畜禽养殖场的应用
利用步骤所制备现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液在畜禽养殖场中畜禽饮水，饲料，圈舍处理中的应用；
其中，所述的畜禽饮水中的应用是指，将现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液以0.5‰-1‰的比例加入饮水中；
其中，所述的畜禽饲料中的应用是指，将现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液以0.1%-1%的比例均匀加入饲料中；
其中，所述的畜禽圈舍中的应用是指，每隔3-5天，将现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液以300-1000倍的稀释液进行全圈舍喷洒；
其中，所述的纳豆芽孢杆菌菌粉的芽孢含量不低于100亿cfu/g。
其中，所述的纳豆芽孢杆菌菌粉可采用现有技术，比如可湿性粉剂，普通菌粉，水分分散剂都可，本发明提供以下方法：
取出菌种保藏管，用LB固体培养基划平板进行复苏，30℃培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升LB培养基中，在培养箱中30℃震荡培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至5L大三角瓶中，装液量为2L的LB培养基，37℃震荡培养20-28小时，检测其菌液浓度，活菌含量超过20亿/毫升，即可作为芽孢杆菌液体菌种接种至1000L发酵培养基，接种量为5%，开搅拌120r/min，每分钟通气量为液/气1：0.8，37℃培养16-24小时，待芽孢含量不低于60亿/毫升，即可结束发酵，板框过滤除水，剩下菌体加轻质碳酸钙，调节菌浓度为10亿/克，粉碎过100目即得到芽孢杆菌菌粉。其中所述LB培养基：蛋白胨5g，牛肉膏3g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.2，固体培养基中加入琼脂2%。其中所述发酵培养基：葡萄糖10g/L，可溶性淀粉20 g/L， 玉米浆粉10 g/L，豆粕粉20 g/L，硫酸镁0.5 g/L，硫酸锰0.5 g/L，磷酸二氢钠0.5 g/L，磷酸氢二钠2.3 g/L，pH7.2。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。
其中，最佳纳豆芽孢杆菌制剂的原料组成为：纳豆芽孢杆菌菌粉100份，硫酸粘杆菌素20份，纳他霉素2份， L-丙氨酸22份，苏氨酸36份，玉米粉60份，豆粕粉120份，氯化钾20份，红糖120份。
该纳豆芽孢杆菌制剂中含有纳他霉素，纳他霉素是26种多烯大环内酯类抗真菌抗生素的一种，主要由3种链霉菌产生，分别是恰努加链霉菌(Streptomyceschattanovgensis)、纳塔尔链霉菌Streptomyxes natalensis)和褐黄孢链霉菌(Streptomyxes gilvosporeus)，经发酵、提取、精制获得的具有广谱、双效的生物防腐剂。它既可以抑制各种霉菌、酵母的生长引起的食品腐败，又能抑制真菌毒素的产生，防止造成毒素型食物中毒。1996年，我国批准纳他霉素用于干酪、肉制品、月饼、糕点、果汁原浆以及易发霉的食品加工器皿的表面防腐。纳他霉素也被批准直接添加到发酵酒、酸奶和色拉酱中，限量为10mg/kg。纳他霉素对人体无毒，而且无致突变、致癌、致畸和致敏作用，并且很难被哺乳动物消化道吸收。给动物饲喂高剂量的纳他霉素，90%以上以原型及其分解产物随粪便排出。研究表明，自然条件下，微生物很难产生对纳他霉素的抗性。纳他霉素的临床医学应用范围也很广泛，可以用于抗皮肤、粘膜、阴道和肺部的真菌感染。纳他霉素是国际上唯一获得批准的抗真菌生物防腐剂，是一种高效、安全的新型生物防腐剂。纳他霉素是一种多烯烃大环内酯类抗真菌剂，多烯是一平面大环内酯环状结构，与细胞上甾醇化合物相互作用具有高度亲和性，由此引发细胞膜结构改变而破裂，导致细胞内容物的渗漏，使细胞死亡。但有些微生物如细菌的细胞壁及细胞质膜不存在这些甾醇化合物，所以纳他霉素对细菌没有作用。
本发明该纳豆芽孢杆菌制剂中含有粘杆菌素(Colistin)又名抗敌素、多粘菌素E。1950年，由日本小山康夫等从福岛县土壤中分离到一株多粘芽胞杆菌抗敌素变株(Bacillus polymyxa var colistin)培养液中产生的一种锁环状多肽抗生素。它与敏感菌胞浆膜中脂蛋白的游离磷酸盐相结合，使胞浆膜表面张力降低，通透性增加，导致胞浆膜失去屏障作用而使细胞内嘌岭、嘧啶、核苷酸等外漏而死亡，属杀菌类抗生素。粘杆菌素对大部分革兰氏阴性菌有较强的抗菌作用，如大肠杆菌、沙门氏菌、假单胞菌等，但对革兰氏阳性菌及真菌几乎无效。
本发明的纳豆芽孢杆菌制剂中含有L-丙氨酸，苏氨酸等芽孢萌发剂，自然界中芽孢萌发受外源营养物质的影响，这类营养物质被称之为“萌发剂”，通常情况下，芽孢和促进萌发的芽孢萌发剂混合后数秒钟之内，萌发剂快速跨过芽孢衣和皮层到达芽孢内膜的表面，与位于芽孢内膜上的受体蛋白相互作用，激发芽孢进入萌发状态，接着启动一连串萌发事件，之后的萌发过程不会因移走萌发剂而停止。
当营养物质接触到芽孢时，芽孢内部会发生一系列变化，（1）、芽孢核内部H十和Zn2+释放出来，致使芽孢核内部pH由弱酸性上升至弱碱性；(2)、芽孢核内部Ca2+--DPA的大量释放；(3)、芽孢核水合，内部Ca2+--DPA被水所替代，芽孢的耐热性下降；(4)、芽孢皮层的芽孢肤聚糖层水解，芽孢核膨胀；(5)、芽孢核进一步水合，芽孢核内部蛋白质流动性增强，酶活性加强，合成ATP；(6)、降解SASP蛋白，以释放芽孢DNA，进而引导芽孢生长过程中RNA、蛋白质、DNA的合成。
本发明中含有L-丙氨酸，L-丙氨酸作为一种高效的芽孢萌发剂已经被广泛地应用在食品生产，检验检疫等多个领域，未用在微生态制剂的研究领域上。
本发明中含有大量的玉米粉，豆粕粉，红糖，都是适合促进芽孢杆菌发酵繁殖的营养剂，一旦芽孢萌发则会快速促进芽孢杆菌的繁殖与倍增。
本发明采用上述方案的有益效果：该纳豆芽孢杆菌制剂与水按1：10-1:30的比例混合后，调节PH到8-8.2，较高的PH下，在现场发酵前期能较好的抑制乳酸菌的生长，其中纳豆芽孢杆菌制剂中含有的纳他霉素与多粘菌素能够较好的抑制水中与通入的空气中所含的酵母菌，病原真菌与大肠杆菌，沙门氏菌等有害菌的生长，而其中的芽孢萌发剂：L-丙氨酸，苏氨酸等快速促进芽孢萌发，缩短芽孢萌发时间，而纳豆芽孢杆菌制剂中的玉米粉，豆粕粉，红糖，都是适合促进芽孢杆菌发酵繁殖的营养剂，一旦芽孢萌发则会快速促进芽孢杆菌的繁殖与倍增，从而快速增加其芽孢杆菌的菌体含量，从而快速使芽孢杆菌繁殖而占据优势菌种，而更好的抑制其他的杂菌与有害菌。在有纳他霉素，硫酸粘杆菌素这两种抑菌剂的存在下，再配上纳豆芽孢萌发剂，这三类物质的有机的结合起来，则可以在畜禽养殖场现场进行发酵，无需对水，发酵设备，空气进行灭菌，即可培养出杂菌少，纳豆芽孢杆菌含量高的发酵液。
具体实施方式
实施例1
下面通过试验说明本发明现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂与传统的芽孢“活化”的优越性
试验组：将硫酸粘杆菌素20份，纳他霉素2份， L-丙氨酸22份，苏氨酸36份，玉米粉60份，豆粕粉120份，氯化钾20份，红糖120份，放置密封搅拌罐中搅拌20-30分钟，混合均匀，再将纳豆芽孢杆菌菌粉100份加入搅拌罐中搅拌均匀后，取1kg做试验，将所取的1kg的芽孢杆菌药肥与水的比例按1：20的比例搅拌均匀，调PH至8，前12小时每分钟通气量液气比为1：0.6， 12小时后通气量为1：1，培养24小时后即为现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液；
对照组：将玉米粉60份，豆粕粉120份，氯化钾20份，红糖120份，放置密封搅拌罐中搅拌20-30分钟，混合均匀，再将纳豆芽孢杆菌菌粉100份加入搅拌罐中搅拌均匀后，取样0.84kg与水20kg进行试验，调PH至8.1，前12小时每分钟通气量液气比为1：0.6， 12小时后通气量为1：1，培养24小时后即为现场“活化”的发酵液。与试验组的芽孢杆菌含量相同，营养成份基本相同；
在相同的培养条件下，检测其24小时培养过程中发酵液的PH，芽孢，活菌总数，杂菌数的变化情况如附图1，附图2，附图3所示。
从附图1中可以看出试验组的pH变化较慢，pH一直维持在7以上，而对照组的pH在8小时后就快速降低至5以下，到24小时后，pH降低至4以下，这时已经较适合酵母菌，乳酸菌的生长，较低的pH能抑制芽孢的萌发及生长。从附图2中可以明显看出，试验组的芽孢在4小时后，其芽孢萌发率已经达到了85%以上，而对照组的芽孢发酵24小时以后其芽孢萌发率才到50%左右；
从附图3中明显可以看到试验组的发酵24小时后，其总菌数约达到19.2亿CFU/ml，杂菌数检测后基本上低于0.1亿CFU/ml，而对照组的总菌含量约为12.1亿CFU/ml，但杂菌含量则达到了3.4亿CFU/ml。因此说明试验组加入防腐剂：硫酸粘杆菌素，纳他霉素，与芽孢萌发剂L-丙氨酸，苏氨酸等就可以明显的抑制杂菌生长，促进行纳豆芽孢杆菌的快速繁殖，其作用效果是非常显著的。
其中，附图1是试验组与对照现场扩培中pH的变化曲线。
其中，附图2是试验组与对照组残余芽孢的变化曲线。
其中，附图3是试验组与对照组活菌总数与杂菌数的变化曲线。
实施例2
纳豆芽孢杆菌制剂的现场发酵液在断奶仔猪养殖试验的效果
实验时间：2014年8月1日至2014年8月20日，共20天
实验地点：萧山某十万头规模养殖场
实验方案：为改善断奶保育猪的健康状态，减少断奶造成的仔猪的腹泻率与死淘率,减少僵猪率,在萧山区某养殖场利用纳豆芽孢杆菌制剂现场发酵液进行饮水与添加饲料进行断奶仔猪试验；
选择25日龄健康无病的断奶仔猪2000头，公/母猪各半，按体重相近、性别比例相同的原则随机分4个处理组每个组为500头。实验组1断奶开始后全程饲喂含0.5%现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液的饲料，饮水：以1‰现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液的比例加入饮水中；实验组2为实验组的平行组；实验组3与实验组4为空白对照组.
日粮配制:利用某生物公司的40%乳猪浓缩料+60%玉米粉
试验结果
从表1中，可看出日采食量与日增重量的结果可以看出,饲喂纳豆芽孢杆菌现场发酵液组的两个实验组的日采饲料比对照组的只有稍许增加，每头猪比对照组每天只多采食了不到7克饲料，而从日平均增重来看，实验组每头猪比对照组的每头猪每天多增重40克左右，这说明通过饮水与饲料中加入纳豆芽孢杆菌发酵液后,饲料的利用率大大增加，料肉比明显减少。实验组的料肉比约为1.4,而对照组达到了1.59以上，也表明试验组的饲料的吸收利用率明显提高了。
表1现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂发酵液在断奶仔猪养殖试验的结果
实施例3
纳豆芽孢杆菌制剂的现场发酵液在肉鸡养殖试验的效果
1、实验对象
对照组： 1日龄2500只肉鸡
试验组： 1日龄2500只肉鸡
2、试验方法
肉鸡饮水：试验组：将现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液以1‰的比例加入饮水中；对照组正常饮水；
鸡饲料的处理：将现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液以0.5%的比例均匀加入饲料中；对照组加入等量清水；
鸡舍的处理：每隔4天，将现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液以800倍的稀释液进行全圈舍喷洒；对照组用清水喷洒；
3、试验结果：从表2可以看出，试验组死亡率只有5%，而对照组死亡率达到了7.8%，最后试验组均重为3.2千克，而对照组只有3.05千克，试验组每只比对照组每只重5%左右，试验组总重要比对照组重375千克，按每公斤8元计算，则可多获利3000元，具有明显的经济效益。这也充分说明纳豆芽孢杆菌现场发酵液可预防和治疗肉鸡的各种疾病的发生；
纳豆芽孢杆菌能够维持肠道内的平衡，提高机体的免疫能力，产生多种抗生物质，如乳酸素、嗜酸菌素、杆菌肽等，以及产生有机酸、H202等物质，能够抑制病愿菌的繁殖。另外，通过占位、粘附、竞争性排斥、营养物质的争夺，抑制有害菌的定植和生长，起到生物拮抗的作用，从而能防治家畜的疾病；
同时，纳豆芽孢杆菌可产生各种消化酶、维生素、有机酸和促生长因子等多种生物活性物质，有利于提高饲料转化率，促进营养物质的吸收，因而能提高产蛋量，进而提高生产性能；
而且，纳豆芽孢杆菌能够阻止和抑制病原菌的入侵和定植，抑制肠内腐败菌的增殖，从而减少有毒物质的产生；同时，与体内原有的正常菌群协同作用，提高饲料的转化率，减少蛋白质向氨及胺的转化，减少亚硝氨、氨、吲哚、粪臭素等有害物质的产生，消除恶臭气味，减少这些物质污染环镜，净化了环镜。
表2现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂发酵液在肉鸡养殖试验的结果
组 别 天数 只数 期末只均体重（KG） 日增重（g） 总耗料（KG） 只均耗料量（KG） 期末总体重（KG） 料肉比 死亡率
试验组 50 2500 3.2 64 17200 6.88 8000 2.15：1 5%
对照组 50 2500 3. 05 61 16775 6.71 7625 2.2：1 7.8%

Claims (2)

1.一种用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂，其特征在于，所述纳豆芽孢杆菌制剂的原料组成为：纳豆芽孢杆菌菌粉80-200份，硫酸粘杆菌素10-50份，纳他霉素1-10份， L-丙氨酸20-50份，苏氨酸20-80份，玉米粉50-200份，豆粕粉50-200份，氯化钾10-100份，红糖50-200份；该用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的的制备方法为：硫酸粘杆菌素10-50份，纳他霉素1-10份， L-丙氨酸20-50份，苏氨酸20-80份，玉米粉50-200份，豆粕粉50-200份，氯化钾10-100份，红糖50-200份；放置密封搅拌罐中搅拌20-30分钟，混合均匀，再将纳豆芽孢杆菌菌粉80-200份加入搅拌罐中搅拌均匀后，分装500克每包，抽真空包装，即得到用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂；该用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的应用包括以下步骤：
、畜禽场现场发酵
将上述制备的纳豆芽孢杆菌制剂与水的比例按1：10至1：30的比例搅拌均匀，调PH至8-8.2，前12小时每分钟通气量液气比为1：0.6， 12小时后通气量为1：1，培养24小时后即为现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液；
、畜禽养殖场的应用
利用步骤所制备现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液在畜禽养殖场中畜禽饮水，饲料，圈舍中的应用；
其中，所述的畜禽饮水中的应用是指，将现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液以0.5‰-1‰的比例加入饮水中；
其中，所述的畜禽饲料中的应用是指，将现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液以0.1%-1%的比例均匀加入饲料中；
其中，所述的畜禽圈舍中的应用是指，每隔3-5天，将现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂的发酵液以300-1000倍的稀释液进行全圈舍喷洒；
其中，所述的纳豆芽孢杆菌菌粉的芽孢含量不低于100亿cfu/g。
2.根据权利要求1所述的一种用于畜禽养殖场现场发酵的纳豆芽孢杆菌制剂，其特征在于，所述纳豆芽孢杆菌制剂的原料组成为：纳豆芽孢杆菌菌粉100份，硫酸粘杆菌素20份，纳他霉素2份， L-丙氨酸22份，苏氨酸36份，玉米粉60份，豆粕粉120份，氯化钾20份，红糖120份。
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