CN105596589A - 一种用于治疗肝癌的中药组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种用于治疗肝癌的中药组合物，所述中药组合物由以下质量份的原料药组成：射干27-33份，黄芪45-55份，虎杖13-17份，陈皮13-17份，猪苓27-33份，车前子13-17份，茵陈9-11份，焦山楂18-22份，蜂房9-11份,青皮4-6份。本发明还提供其制备方法和应用。本发明的中药组合物对肝癌有很好的治疗效果，且对人体的伤害很小。本发明的中药组合物口服液服用剂量小、吸收较快、质量稳定、携带和服用方便、容易保存。

Description

一种用于治疗肝癌的中药组合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于中药技术领域，具体涉及一种用于治疗肝癌的中药组合物及其制备方法和应用。

背景技术

肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一，根据最新统计，全世界每年新发肝癌患者约六十万，居恶性肿瘤的第五位。肝癌在我国属于高发病，一般男性多于女性。我国是乙肝大国，我国的肝癌多在乙肝肝硬化的基础上发展而来，丙肝病人也在逐渐增加，乙肝后也会发展为肝癌。肝癌已经成为严重威胁我国人民健康和生命的一大杀手，其危险性不容小视。而做好肝癌的早期诊断及治疗对于治疗肝癌非常重要。传统的治疗肝癌的方法是手术切除及放化疗，上述方式对人体的伤害极大。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种用于治疗肝癌的中药组合物，该中药组合物能够很好的治疗肝癌，且对人体的伤害很小。

本发明的第一个目的是提供一种用于治疗肝癌的中药组合物，所述中药组合物由以下质量份的原料药组成：射干27-33份，黄芪45-55份，虎杖13-17份，陈皮13-17份，猪苓27-33份，车前子13-17份，茵陈9-11份，焦山楂18-22份，蜂房9-11份,青皮4-6份。

作为优选，所述中药组合物由以下质量份的原料药组成：射干30份，黄芪50份，虎杖15份，陈皮15份，猪苓30份，车前子15份，茵陈10份，焦山楂20份，蜂房10份,青皮5份。

本发明的第二个目的是提供上述中药组合物的制备方法，是将配方量的各组分混合后，先水提后醇沉得到的。

作为优选，所述水提是用水提取两次；

作为优选，第一次水提时间为2小时，第二次水提时间为1.5-2小时；

作为进一步优选，所述第二次水提时间为1.5小时。

作为优选，所述醇沉是用乙醇进行沉淀；

所述乙醇的体积浓度优选为50-60%；

作为进一步优选，所述乙醇的体积浓度为50%。

本发明的第三个目的是提供中药组合物在制备治疗肝癌的药物中的应用。

本发明的第四个目的是提供一种药物，其有效成分为权利要求1或2所述的中药组合物。

作为优选，所述药物的剂型为口服液、汤剂、丸剂、片剂或膏剂。

以本发明的中药组合物为有效成分能够制备成多种剂型的药物，参照现有技术中已有的方法进行制备即可。因为含有本发明的中药组合物，故对肝癌均有一定的治疗效果。

本发明的中药组合物中各原料药的作用如下：

射干：清热解毒，消痰，利咽。用于热毒痰火郁结，咽喉肿痛，痰涎壅盛，咳嗽气喘；

黄芪：补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，托毒排脓，敛疮生肌。用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，内热消渴，血虚萎黄，半身不遂，痹痛麻木，痈疽难溃，久溃不敛；

虎杖：利湿退黄，清热解毒，散瘀止痛，止咳化痰。用于湿热黄疸，淋浊，带下，风湿痹痛，痈肿疮毒，水火烫伤，经闭，癥瘕，跌打损伤，肺热咳嗽；

陈皮：理气健脾，燥湿化痰。用于脘腹胀满，食少吐泻，咳嗽痰多；

猪苓：利水渗湿。用于小便不利，水肿，泄泻，淋浊、带下；

车前子：清热利尿通淋，渗湿止泻，明目，祛痰。用于热淋涩痛，水肿胀满，暑湿泄泻，目赤肿痛，痰热咳嗽；

茵陈：清利湿热，利胆退黄。用于黄疸尿少，湿温暑湿，湿疮瘙痒；

焦山楂：消食健胃，行气散瘀，化浊降脂。用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，瘀血经闭，产后瘀阻，心腹刺痛，胸痹心痛，疝气疼痛，高脂血症；

蜂房：攻读杀虫，祛风止痛。用于疮疡肿毒，乳痈，皮肤顽癣，压痛，风湿痹痛；

青皮：疏肝破气，消积化滞。用于胸胁胀痛，疝气疼痛，乳癖，乳痈，食积气滞，脘腹胀痛。

诸药合伍，具有疏肝解气，镇痛、抗瘤，增强免疫力的功效。

经试验，本发明的中药组合物对肝癌有很好的治疗效果，且对人体的伤害很小。本发明的中药组合物口服液服用剂量小、吸收较快、质量稳定、携带和服用方便、容易保存。

附图说明

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：

图1为本发明的中药组合物口服液的制备工艺流程图；

图2为本发明的中药组合物口服液中虎杖的鉴别；

图3为本发明的中药组合物口服液中黄芪的鉴别；

图4为本发明的中药组合物提取液中射干苷的鉴别。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市售。

本发明的用于治疗肝癌的中药组合物的配方如下：

射干27-33g，黄芪45-55g，虎杖13-17g，陈皮13-17g，猪苓27-33g，车前子13-17g，茵陈9-11g，焦山楂18-22g，蜂房9-11g,青皮4-6g。

本申请人对中药组合物的提取方法进行了研究，发现，当将上述中药组合物先水提再醇沉时，得到的提取液中射干苷含量最高。

方中主药射干，又名乌扇，《本草纲目》云：“仲景《金匮要略》治疟母用鳖甲煎丸，亦用乌扇（射干）烧过。皆取其降厥阴相火也，火降则血散肿消，而痰结自解癥瘕自除矣。”射干中所含有效成份射干苷实验证明能有效地抑制血管增生和诱导肿瘤坏死因子，具有明显的抗肿瘤活性，故选择其作为指标成分。

本申请人进一步对水提醇沉方法中的参数进行了优化，并对得到的中药组合物提取液的质量进行了鉴定，过程如下：

1、仪器与试药

美国Waters1525型高效液相色谱仪，天津HS6150型超声波清洗器，METTLERAE240电子天平。

乙腈（色谱纯），水为纯净水，其余化学试剂均为分析纯；射干苷对照品购自中国药品生物制品检定所（编号为111632-200501）。

2、方法与结果

2.1正交试验设计

采用L₉(3⁴)正交表实验，以射干苷为指标，考察了煎煮法中的加水量（A）、煎煮次数（B）、煎煮时间（C）以及醇沉浓度（D）4个因素，每个因素设3个水平。其因素水平见表1。

表1正交试验因素水平表

按L₉(3⁴)正交试验设计要求，称取处方量的各药材9份，每份100g，分别置9个烧杯中，分别加入纯化水800ml（1～3份）、1000ml（4～6份）、1200ml（7～9份），浸泡0.5小时后煎煮。煎煮次数分别为1次（1、4、7份），2次（2、5、8份），3次（3、6、9份）。煎煮时间分别为1h（1、6、8份），2h（2、4、9份），3h（3、5、7份），滤过，合并滤液，浓缩，9份均浓缩至相当于原药材重量1：1的体积，即浓缩至100ml。加乙醇分别为100ml（1、5、9份），150ml（2、6、7份），200ml（3、4、8份）。静置48小时，滤过，滤液回收至无醇味后，放至室温，加蒸馏水至100ml，即得样品。

2.2样品中射干苷含量的测定

2.2.1色谱条件

色谱柱：SymmetryC₁₈柱（5μm，4.6×250mm）；流动相：乙腈-水（体积比30:70），流速：1.0mL·min^-1；柱温：室温；检测波长：265nm。

2.2.2对照品溶液的制备

精密称取射干苷对照品适量，加甲醇溶解并定容于10ml容量瓶中，制成每毫升含射干苷0.250mg的对照品溶液。

2.2.3供试品溶液的制备

精密吸取各工艺下的样品10ml，置25ml容量瓶中，加甲醇适量，超声处理15分钟并定容至刻度，过滤，弃去初滤液，取续滤液，作为供试品溶液。

2.2.4测定结果

分别吸取对照品溶液及供试品溶液各工艺下的溶液10μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以外标法计算样品中射干苷的含量。结果见表2和表3。

表2L₉（3⁴）正交试验因素水平表

表3射干苷提取率方差分析表

F_0.01(1,2)＝99F_0.05(1,2)=19

2.2.5实验结果分析

由表2可知，R值直观分析结果为B＞A＞D＞C；K值可知提取工艺为A₁B₂C₂D₂，即加8倍量水，提取2次，每次2h，醇沉浓度为60%（体积浓度）。结合表3方差分析结果中B因素P值小于0.05，即提取次数有显著性差异，A、C、D无显著性差异。因此，为了节约成本及减少工时，将提取时间定为第一次2h第二次1.5h，醇沉浓度定为50%。即最佳提取工艺为A₁B₂C₂D₁：加8倍量水，提取2次，第一次2h，第二次1.5h，醇沉浓度为50%（体积浓度）。

2.3最佳工艺

取本发明的中药组合物185g，加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并两次滤液，浓缩至一定量相对密度约为1.01，用体积百分比为50%的乙醇进行醇沉，静置48小时，抽取上清液，回收乙醇至无醇味，过滤，加蒸馏水至100ml，搅拌均匀，分装，灭菌即得。

3本发明的中药组合物提取液的质量标准鉴定（参照中国药典2010年版各药物项下）：

3.1仪器与试药

美国Waters1525型高效液相色谱仪，天津HS6150型超声波清洗器，METTLERAE240电子天平。乙腈（色谱纯），水为纯净水，其余化学试剂均为分析纯；射干苷对照品购自中国药品生物制品检定所（编号为111632-200501）；射干、黄芪、虎杖等药均由医院中药房提供，药材完全符合《中国药典》2010年版（一部）规定。

3.2薄层色谱定性鉴别

3.2.1虎杖的鉴别

取本发明的中药组合物提取液20ml，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并提取液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取虎杖对照药材1g，加甲醇20ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液。取无虎杖的模拟配方（即不含虎杖的本发明的中药组合物），照供试品溶液的制备方法制得阴性对照液。照薄层色谱法（附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（体积比为15：2：1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯下，检视。结果参见图2，其中1为虎杖对照药材；2、3为供试品；4为阴性对照。由图2可以看出，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

3.2.2黄芪的鉴别

取本发明的中药组合物提取液20ml，加甲醇30ml，超声处理20min，蒸干，加水20ml，用水饱和的正丁醇提取2次，每次30ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，弃氨试液，再用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次30ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每毫升含1mg黄芪甲苷的溶液，作为对照品溶液。取无黄芪的模拟配方（即不含黄芪的本发明的中药组合物），照供试品溶液的制备方法制得阴性对照液。照薄层色谱法（附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（体积比13：7：2）10℃放置的下层溶液为展开剂，取出，晾干。喷以10%硫酸乙醇，于105℃加热至斑点显色清晰，结果参见图3，其中1为黄芪甲苷对照品；2、3为供试品；4为阴性对照。由图3可以看出，在与对照品色谱相应的位置上，供试品显相同颜色的斑点；阴性对照则无相应的斑点。

3.3本发明的中药组合物提取液中射干苷的含量测定

系统适用性试验色谱柱：SymmetryC₁₈柱（5μm，4.6×250mm）；流动相：乙腈-水（体积比为30:70）；流速：1.0mL·min^-1；柱温：室温；检测波长：265nm。

对照品溶液的制备精密称取射干苷对照品适量，加甲醇溶解并定容于10ml容量瓶中，制成每毫升含射干苷0.268mg的对照品溶液。

供试品溶液的制备精密吸取本发明的中药组合物提取液5ml，置10ml容量瓶中，加甲醇适量，超声(功率150W，频率40kHz)处理15分钟，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

阴性对照试验阴性对照溶液的制备：按样品处方比例制备不含射干药材的样品，依照供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10μl按上述色谱条件进行测定，结果参见图4，其中，A为对照品溶液，B为供试品溶液，C为阴性对照；由图4可知，阴性样品无干扰（即无相应峰出现）。

线性关系的考察精密吸取对照品溶液2μl、4μl、6μl、8μl、10μl按上述色谱条件，注入液相色谱中，记录色谱图，测定峰面积。以峰面积对进样浓度进行线性回归，得到射干苷的回归方程为Y=79098+167634X，r=0.9989。结果表明，射干苷在0.536-2.680μg范围内峰面积与进样浓度有良好的线性关系。

精密度试验精密吸取对照品溶液10μl，重复进样5次，计算得到射干苷峰面积的RSD为0.86%.

稳定性试验精密吸取新鲜配制的供试品溶液，每隔2h测定一次，连续测定6次，计算得到射干苷峰面积的RSD为1.52%。表明供试品在12h内稳定性较好。

加样回收率测定精密吸取已知含量(批号：20101110)的本发明的中药组合物提取液5ml，平行取6份，分别加入射干苷对照品适量，照“3.3”项下的方法制备供试液并测定含量，计算回收率，结果见表4。

表4回收率试验结果

样品的含量测定取供试品，照“3.3”项下的制备供试液，按上述色谱条件进行测定，另取“3.3”项下的方法制备的对照品溶液10μl。同法测定，记录色谱图(见图4)，测定峰面积，以外标法计算样品中射干苷的含量(结果见表5)。

表5样品含量测定结果（n=4）

实施例1

本发明的中药组合物的配方如下：

射干30g，黄芪50g，虎杖15g，陈皮15g，猪苓30g，车前子15g，茵陈10g，焦山楂20g，蜂房10g,青皮5g。

本发明的中药组合物的制备方法为：

取射干30g，黄芪50g，虎杖15g，陈皮15g，猪苓30g，车前子15g，茵陈10g，焦山楂20g，蜂房10g,青皮5g，加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并两次滤液，浓缩至一定量，用体积百分比为50%的乙醇进行醇沉，静置48小时，抽取上清液，回收乙醇至无醇味，过滤，加蒸馏水至100ml，搅拌均匀，分装，灭菌即得。

实施例2

本发明的中药组合物的配方如下：

射干27g，黄芪45g，虎杖13g，陈皮13g，猪苓33g，车前子17g，茵陈11g，焦山楂18g，蜂房9g,青皮4g。

本发明的中药组合物的制备方法为：

取射干27g，黄芪45g，虎杖13g，陈皮13g，猪苓33g，车前子17g，茵陈11g，焦山楂18g，蜂房9g,青皮4g，加水煎煮两次，第一次2小时，第二次2小时，合并两次滤液，浓缩至一定量，用体积百分比为55%的乙醇进行醇沉，静置48小时，抽取上清液，回收乙醇至无醇味，过滤，加蒸馏水至100ml，搅拌均匀，分装，灭菌即得。

实施例3

本发明的中药组合物的配方如下：

射干33g，黄芪55g，虎杖17g，陈皮17g，猪苓27g，车前子13g，茵陈9g，焦山楂22g，蜂房11g,青皮6g。

本发明的中药组合物的制备方法为：

取射干33g，黄芪55g，虎杖17g，陈皮17g，猪苓27g，车前子13g，茵陈9g，焦山楂22g，蜂房11g,青皮6g，加水煎煮两次，第一次2小时，第二次2小时，合并两次滤液，浓缩至一定量，用体积百分比为60%的乙醇进行醇沉，静置48小时，抽取上清液，回收乙醇至无醇味，过滤，加蒸馏水至100ml，搅拌均匀，分装，灭菌即得。

实施例4

本发明的中药组合物的配方如下：

射干28g，黄芪50g，虎杖16g，陈皮14g，猪苓30g，车前子17g，茵陈10g，焦山楂20g，蜂房9g,青皮5g。

本发明的中药组合物的制备方法为：

取射干28g，黄芪50g，虎杖16g，陈皮14g，猪苓30g，车前子17g，茵陈10g，焦山楂20g，蜂房9g,青皮5g，加水煎煮两次，第一次2小时，第二次2小时，合并两次滤液，浓缩至一定量，用体积百分比为50%的乙醇进行醇沉，静置48小时，抽取上清液，回收乙醇至无醇味，过滤，加蒸馏水至100ml，搅拌均匀，分装，灭菌即得。

实施例5

本发明的中药组合物的配方如下：

射干20g，黄芪50g，虎杖15g，陈皮14g，猪苓33g，车前子17g，茵陈11g，焦山楂20g，蜂房10g,青皮6g。

本发明的中药组合物的制备方法为：

取射干20g，黄芪50g，虎杖15g，陈皮14g，猪苓33g，车前子17g，茵陈11g，焦山楂20g，蜂房10g,青皮6g，加水煎煮两次，第一次2小时，第二次1.5小时，合并两次滤液，浓缩至一定量，用体积百分比为55%的乙醇进行醇沉，静置48小时，抽取上清液，回收乙醇至无醇味，过滤，加蒸馏水至100ml，搅拌均匀，分装，灭菌即得。

实施例6本发明的中药组合物的药效学试验

本发明的中药组合物对H22小鼠实体瘤抑瘤及免疫镇痛作用研究：

1.试验器材及动物

旋转蒸发仪（瑞士，BUCHI）；生物显微镜（OLYMPUS，BX60）；分析天平（北京SartoriusBL121SS）；热板测痛仪（RB-200智能热板仪，成都泰萌科技有限公司）；低速冷冻离心机(KDC-2044，科大创新股份有限公司中佳分公司)；流式细胞仪（XL，BECKMAN，U.S.A）。

KM小鼠，SPF级，雌雄兼用，90只，体重18～22g，由甘肃中医学院科研实验中心提供，实验设施使用证SYXK(甘)2004～0006，实验动物质量合格证SCXK(甘)2004～0006，发证单位甘肃省科技厅。

动物按性别分笼饲养，食固体饲料，食水自由，饲料由甘肃中医学院实验动物中心提供。室温20～25℃，相对湿度45%～52%。

2试验方法及结果

2.1对H₂₂小鼠实体瘤模型的抑瘤作用及提高免疫作用

动物模型的复制：在超净工作台上无菌操作，取荷肝癌(H₂₂)小鼠腹水，用0.9%生理盐水稀释至含瘤细胞2×10⁶个/ml，每鼠右腋皮下接种0.2ml，复制肿瘤模型。

分组及处理：实验前将KM小鼠50只随机分为5组，即空白组、模型组、实验组（分为药物高剂量组和药物低剂量组）、5-氟尿嘧啶组（阳性药对照组）。空白组不接种瘤株，灌服生理盐水；模型组接种瘤株并灌服生理盐水；药物高、低剂量组均接种瘤株并分别灌服相应剂量（19.28、9.64g/kg）的本发明的中药组合物提取液；5-氟尿嘧啶组接种瘤株并腹腔注射5-氟尿嘧啶。接种瘤株的次日开始给药,每日灌胃剂量为0.2ml/10g，每日1次，给药14天后，停药次日，摘取眼球取血，全血采用EDTA-K₂抗凝，用流式细胞仪按照试剂盒说明书进行CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺检测，实验结果见表9；断颈处死小鼠,观察不同处理方法对H₂₂荷瘤小鼠体重、胸腺指数、脾脏指数、瘤质量、抑瘤率的影响，实验结果见表6、7、8。

抑瘤率（%）＝[（模型组平均瘤重－实验组平均瘤重）/模型组平均瘤重)]×100%

脏器指数＝脏器质量（mg）/小鼠体重（g）。

表6对H₂₂实体瘤小鼠体重的影响（±SD）

与空白组比较^▲P<0.05，^▲▲P<0.01；与模型组比较^※P<0.05，^※※P<0.01。

实验结果表明，H₂₂实体瘤小鼠的体重明显下降，与空白组比较差异具有统计学意义（P＜0.01）,治疗各组较模型组的体重均有所增加，其中药物高剂量组与模型组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

表7对H₂₂实体瘤小鼠瘤质量与抑制率的比较（±SD）

与模型组比较^※P<0.01。

实验结果表明，药物高剂量组、药物低剂量组、5-氟尿嘧啶组（阳性药对照组）实体瘤的质量均低于模型组，说明各治疗药物均有一定的抑瘤作用，其中药物高剂量组的瘤质量与模型组比较差异具有统计学意义（P＜0.05），三组的抑瘤率分别为14.2%、9.4%、33.0%。

表8对H₂₂实体瘤小鼠脾脏及胸腺指数的影响（±SD）

与空白组比较^▲P<0.05，^▲▲P<0.01；与模型组比较^※P<0.05，^※※P<0.01。

实验结果表明，H₂₂实体瘤小鼠脾脏及胸腺指数与空白组比较均明显下降，药物高剂量组、药物低剂量组、5-氟尿嘧啶组（阳性药对照组）小鼠的脾脏及胸腺指数均有所升高，其中药物高剂量组对脾脏和胸腺指数的影响与模型组比较差异均具有统计学意义（P＜0.05，P＜0.01）。

表9对H₂₂实体瘤小鼠外周血T细胞亚群的影响（±SD）

与空白组比较^▲P<0.05，^▲▲P<0.01；与模型组比较^※P<0.05^※※P<0.01。

对荷瘤小鼠外周血T细胞亚群的影响实验结果表明，与空白组比较，模型组外周血总T淋巴细胞(CD3⁺T淋巴细胞)、CD4⁺T淋巴细胞亚群、CD8⁺T淋巴细胞亚群比例下降,CD4⁺/CD8⁺明显下降差异均具有统计学意义（P＜0.01）。药物高剂量组可使外周血中CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺T淋巴细胞亚群比例升高,使CD4⁺/CD8⁺上升，与模型组相比差异具有统计学意义（P＜0.05）。

2.2镇痛作用的研究热板法

调节热板测痛仪温度在55±0.5℃，每次取雌性小鼠一只，放入热板测痛仪外罩内，记录从放入热板测痛仪外罩至出现舔后足所需时间，作为该小鼠的痛阈值，30秒内不出现舔足者，5秒内出现舔足者或跳跃者弃之不用，取预选合格的SPF级昆明种雌性小鼠40只，每组10只，随机分为4组，重新测痛阈一次，将两次痛阈的平均值作为该鼠给药前的痛阈值。4组分别为空白组、药物高剂量组、药物低剂量组、5-氟尿嘧啶组（阳性药对照组）。空白组不接种瘤株，灌服生理盐水；药物高、低剂量组均接种瘤株并分别灌服相应剂量（19.28、9.64g/kg）的药物；5-氟尿嘧啶组接种瘤株并腹腔注射5-氟尿嘧啶。接种瘤株的次日开始给药,每日灌胃剂量为0.2ml/10g，每日1次，给药14天，最后一次给药后30分钟，测定小鼠痛阈值,若小鼠在热板上60秒仍无痛觉反应,应立即取出按60秒计，然后计算痛阈提高百分率，试验结果见表10。

痛阈提高百分率=[(用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值)/用药前平均痛阈值]×100%。

表10对痛阈及痛阈提高百分率的影响（热板法±SD）

注：与给药前比较^※P<0.05，^※※P<0.01；与空白组比较^◇P<0.05，^◇◇P<0.01。

实验结果表明，药物高剂量组能够提高小鼠的痛阈和痛阈提高百分率，与空白组和给药前的痛阈比较差异均具有统计学意义（P<0.05）。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种用于治疗肝癌的中药组合物，其特征在于：所述中药组合物由以下质量份的原料药组成：射干27-33份，黄芪45-55份，虎杖13-17份，陈皮13-17份，猪苓27-33份，车前子13-17份，茵陈9-11份，焦山楂18-22份，蜂房9-11份,青皮4-6份。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于：所述中药组合物由以下质量份的原料药组成：射干30份，黄芪50份，虎杖15份，陈皮15份，猪苓30份，车前子15份，茵陈10份，焦山楂20份，蜂房10份,青皮5份。

3.权利要求1或2所述的中药组合物的制备方法，其特征在于：是将配方量的各组分混合后，先水提后醇沉得到的。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述水提是用水提取两次；

作为优选，第一次水提时间为2小时，第二次水提时间为1.5-2小时；

作为进一步优选，所述第二次水提时间为1.5小时。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述醇沉是用乙醇进行沉淀；

所述乙醇的体积浓度优选为50-60%；

作为进一步优选，所述乙醇的体积浓度为50%。

6.权利要求1或2所述的中药组合物在制备治疗肝癌的药物中的应用。

7.一种药物，其有效成分为权利要求1或2所述的中药组合物。

8.根据权利要求7所述的药物，其特征在于：所述药物的剂型为口服液、汤剂、丸剂、片剂或膏剂。