CN105580763B - 一种四指马鲅人工低盐育苗方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种四指马鲅人工低盐育苗方法，包括以下步骤：(一)苗种孵化，选取亲鱼自然产卵、自然授精的受精卵在自然海水中进行孵化；(二)低盐驯化，(1)第一阶段苗种低盐驯化处理；(2)第二阶段苗种低盐驯化处理；(3)第三阶段苗种低盐驯化处理。该育苗方法通过在仔稚鱼期对苗种进行低盐驯化，从而可以降低苗种的死亡率，使育苗工作简单易行。

Description

一种四指马鲅人工低盐育苗方法
技术领域
本发明属于海水鱼类种苗培育技术领域，具体涉及一种四指马鲅人工低盐育苗方法。
背景技术
四指马鲅( Eleutheronema tetradactylum )，隶属辐鳍鱼纲，鲈形目，马鲅科，四指马鲅属，分布于印度洋和太平洋西部，为浅海底栖鱼类，其肉质细嫩鲜美，生长迅速快，是我国重要的沿海经济鱼类。近年来由于海捕资源量锐减，市场需求又较大，人工养殖四指马鲅具有很大的前景，在池塘养殖、网箱养殖、工厂化养殖等领域都有很大的发展空间。但我国在四指马鲅人工养殖方面才刚刚起步，主要原因是过去没有解决鱼苗人工繁育的问题。直到从2012年开始，南海水产研究所与广东茂名金阳热带海珍养殖有限公司和珠海市龙胜良种鱼苗培育有限公司合作，才在国内首次取得了马鲅全人工繁育技术突破性进展及规模化人工繁育及规模化养殖成功。随着四指马鲅全人工繁育问题得到突破和解决，苗种可以保证持续稳定供应，四指马鲅将有望成为一个发展潜力巨大的新的海水鱼类养殖品种。
目前，重要海水养殖经济鱼类的的淡化养殖已经成为水产养殖的一个重要发展方向，实现四指马鲅低盐度养殖可扩大养殖范围，降低养殖成本，进而增加养殖企业和农户的收入。要实现低盐养殖必须经过低盐驯化的过程，而在苗种培育阶段即开展低盐驯化，使种苗能在低盐度水体中健康生存，利于养殖企业或养殖户在购买苗种后即可直接转入低盐水体中进行养殖，避免了后期驯化的过程，进而降低养殖经济成本。因此，开发一种四指马鲅种苗低盐健康培育方法，对于促进马鲅淡水养殖的推广，扩大马鲅养殖规模，促进马鲅养殖业的持续健康发展，推动我国马鲅产业技术升级具有重要意义。
公开号为CN 103404457A的专利中马友鱼工厂化育苗的技术可理解为通过人为精细控制各种培育条件，最大程度提供适合鱼苗生长发育的海水环境而达到工厂化育苗的目的，其培育的全过程不存在仔鱼的低盐驯化环节，一方面，在整个养殖期需要有较多高盐度海水的使用，增加了成本，制约了该鱼的推广养殖，特别是江河交汇地区；另一方面，鉴于马鲅育苗和养殖技术尚处于不成熟的阶段，如果养殖企业或养殖户想在低盐水体中养殖四指马鲅，那么在购买常规培育的四指马鲅苗种后需要首先将苗种放入等盐度的海水中进行养殖，然后逐渐进行低盐驯化。在后期的低盐驯化过程中，会造成一定比例的苗种的死亡，将加大鱼苗育成的困难。
发明内容
本发明的目的在于提供一种四指马鲅人工低盐育苗方法，该育苗方法通过在仔稚鱼期对苗种进行低盐驯化，从而可以降低苗种的死亡率，使育苗工作简单易行。
本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：一种四指马鲅人工低盐育苗方法，包括以下步骤：
(一)苗种孵化
选取亲鱼自然产卵、自然授精的受精卵在预处理海水中进行孵化，孵化期间，水温28～31℃，盐度28～30‰，pH 7 .8～8 .2，溶氧6 .8～7 .4mg/L，氨氮浓度小于0 .20mg/L，亚硝酸盐浓度小于0 .005mg/L；
(二)低盐驯化
( 1 )第一阶段苗种低盐驯化处理：将在步骤(一)中孵化后的初孵仔鱼转移至消毒好的育苗池中，继续孵化，从孵化后第4天开始，将育苗海水以0 .5～1 .0‰盐度/天的降幅进行第一阶段淡化，待盐度降至22～23‰，完成第一阶段驯化；
( 2 )第二阶段苗种低盐驯化处理：第一阶段驯化后，将育苗海水以1 .5～2‰盐度/天的降幅进行第二阶段淡化，待盐度降至10～12‰，完成第二阶段驯化；
( 3 )第三阶段苗种低盐驯化处理：第二阶段驯化后，将育苗转移至池塘中，并保持池塘中育苗海水盐度为10～12‰继续培育3～5天后，将育苗海水以1 .0～1 .5‰盐度/天的降幅进行第三阶段淡化，至盐度降至1 .0～5 .0‰，继续培育至出苗或分塘养殖。
在申请号为201210230266 .6，发明名称为四指马鲅人工育苗方法的专利中，受精卵为人工催熟亲鱼自然产卵，而本发明中四指马鲅亲鱼未经人工催产，均为自然产卵自然受精，受精卵在经过网目筛收集而进行孵化，由于四指马鲅性急躁且对操作及环境应激很敏感，这种方法在很大程度减少了人工操作对亲鱼带来的胁迫应激，有利于亲鱼的存活、体质强化和繁殖，同时卵质较高。
现有马鲅育苗技术中，不涉及低盐驯化过程。本发明中马鲅鱼苗的低盐驯养试验侧重于：严格提供高盐度(自然海水，模拟野生鱼苗存活生长的盐度条件)水体予以受精卵的孵化和初孵仔鱼的暂养以确保仔鱼质量，再采用分阶段缓慢淡化的方式从仔鱼早期发育阶段开始低盐驯养，仔鱼从孵化后第四天( 4DAH )开始进入以0 .5～1 .0‰降幅为期大约4～6天的连续淡化阶段；第二阶段降幅1 .5-2‰盐度/天，为期大约6～10天；第三阶段降幅1 .0～1 .5‰盐度/天，为期大约4～6天；盐度变化为28～30‰至22～23‰至10～12‰至4.0～5 .0‰，淡化周期14～22天。
本发明中的四指马鲅人工低盐育苗方法，驯养周期短，低盐驯养的育苗存活率高、仔鱼生长发育状态良好，培育25～30天规格可达2 .5～3 .6cm。
在上述四指马鲅人工低盐育苗方法中：
步骤(一)中苗种孵化时，孵化密度优选为8～15万/m3。
步骤(一)中苗种孵化时在室内进行。
步骤(二)中第一阶段苗种低盐驯化处理和第二阶段苗种低盐驯化处理时，育苗海水的温度优选为28～31℃，第三阶段苗种低盐驯化处理时，育苗海水的温度优选为25～32℃。
步骤(二)中第一阶段苗种低盐驯化处理、第二阶段苗种低盐驯化处理和第三阶段苗种低盐驯化处理时，育苗海水的氨氮浓度优选小于0 .2mg/L，亚硝酸盐浓度优选小于0.01mg/L，pH值优选为7 .4～8 .2，溶解氧含量优选为5 .2～7 .4mg/L。
步骤(二)中第一阶段苗种低盐驯化处理时，苗种的培育密度优选为2～5万尾/m3，第二阶段苗种低盐驯化处理时，苗种的培育密度优选为0 .5～2万尾/m3，第三阶段苗种低盐驯化处理时，苗种的培育密度优选为100～500万尾/亩。
步骤(二)中低盐驯化时，鱼苗孵化后第3d开口摄食，优选选择ss型臂尾轮虫作为仔鱼的开口饵料，用量为每天20-60个/mL；开口5天后饵料除投喂ss型臂尾轮虫外，同时逐渐增加投喂桡足类，桡足类用量优选每天每尾鱼苗投喂20～60只，开口后10天时完全过渡到投喂桡足类；至进行第三阶段低盐驯化前3天，在投喂桡足类同时添加配合商品饲料，优选商品饲料用量每天4～10g/万尾；第三阶段低盐驯化期间减少桡足类投喂量，过渡到投喂商品饲料，优选商品饲料用量为每天10～40g/万尾，直到低盐驯化完成，可全部投喂商品饲料。
步骤(二)中第一阶段苗种低盐驯化处理和第二阶段苗种低盐驯化处理时，在室内育苗池中进行，第三阶段苗种低盐驯化处理时，在室外池塘中进行。
步骤(一)中采用的自然海水和步骤(二)中采用的育苗海水优选为采用来自海洋的海水经包括粗沙、细沙、活性炭、筛网过滤后，再经黑暗沉淀、化学处理、物理处理、紫外灯照射、曝气和三级沙滤处理后使用。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
( 1 )本发明初孵仔鱼质量佳，本发明涉及的鱼苗来源为自培育的亲鱼自然产卵、自然受精、人工孵化所得，成熟亲鱼在自然状态下产卵、受精，精子、卵子和受精卵质量较好，保证了较高的受精率和孵化率以及后代仔鱼的质量，另一方面，亲鱼未经人工催产，在保存强化亲鱼体质和繁殖能力有十分重要的作用，亲鱼繁殖能力提高保证了鱼苗的供应需求来源；
( 2 )低盐驯养周期短，育成效果理想，现有马鲅培育技术中培育至出苗的周期一般为30～40天，本发明中低盐驯养周期14～22天，总培育周期25～30天达到出苗规格，淡化为从早期发育阶段开始的缓慢渐进的方式，使仔鱼有足够的缓冲和低盐适应期的同时确保鱼苗健康地生长发育，进而保证了理想的鱼苗成活率，另外，淡化的具体操作简单，节省人力；
( 3 )技术的可推广性强，与现有技术相比，低盐驯养的方法一方面，其操作简单易懂，并不需要特别的仪器和技术，鉴于鱼苗需求量大的考虑，此方法在马鲅育苗技术层面上值得推广且易于推广；另一方面该技术能获得数量稳定、品质均匀的鱼苗，使江河交汇地区也能利用低盐度或淡水养殖马鲅，能节约养殖成本达到养殖企业或用户的经营目的，有利于四指马鲅人工养殖业的开展。
附图说明
图1是实施例2-3中的细胞期受精卵的显微结构图；
图2是实施例2-3中的孵化中的受精卵的显微结构图；
图3是实施例2-3中的初孵仔鱼的显微结构图；
图4是实施例2-3中的5DAH仔鱼的显微结构图；
图5是实施例2-3中第三阶段低盐驯化的仔鱼的形貌图；
图6是实施例2-3中出苗时的仔鱼( 30DAH )的形貌图。
具体实施方式
实施例1
本实施例提供的四指马鲅人工低盐育苗方法，包括以下步骤：
(一)孵化桶、室内育苗池和室外育苗土池的准备
孵化桶、室内育苗池和室外育苗土池的准备：孵化桶为商品型塑料材质，推荐容积为2m3的塑料桶，室内育苗池为水泥池，尺寸大约为8m×6m×1.5m，若干个备用，均在育苗车间，室外土池面积1～3亩，水深1 .2～1 .5m，堤坡较大，池底平坦，淤泥要少于5～10cm，附近应有咸淡水水源，且在土池一则应有一台水轮式搅拌型增氧机。
上述设备分别在转移受精卵、鱼苗前6～7天用浓度为2mg/L的强氯精溶液均匀泼洒在孵化桶和育苗池内进行彻底消毒。
(二)育苗用水处理
自然海水用作业式轮船在外海进行抽取通过管道引进车间蓄水池，海水依次经过粗沙、细沙、活性炭、筛网过滤后抽至高位蓄水池(尺寸约为8m×8m×3m )，分别经过以下步骤处理：海水在高位蓄水池内要进行24～48h的黑暗沉淀。进行化学、物理处理，具体为用强氯精(浓度大约为5ppm )进行彻底消毒，大约24h后用硫代硫酸钠(浓度大约为2 .5ppm )进行中和，最后用紫外灯照射大约1h。紫外灯功率约为30w，波长约为200～270nm，垂直悬挂，离地面约为2～2 .5m。处理后的海水进行曝气约48小时以上，并经过高速流水处理。三级沙滤处理：首先经第一级沙滤：小石块、20目筛网、粗沙过滤再经第二级沙滤：为粗沙、80目筛网、细沙过滤，最后是第三级沙滤：活性炭、150目筛网、细沙过滤。
(三)饵料池准备
3 .1配备多个饵料池，规格为1～1 .5亩，水深1～1 .3m，配置浓度为2mg/L的强氯精溶液全池泼洒进行消毒。
3 .2施肥：消毒96～120h后施入基肥，具体为：黄豆浆100kg/亩分2～3次投入，硝酸铵2ppm，磷酸二铵0 .2ppm，视池水肥瘦和肥料种类加以调节水质，当池水透明度达30cm以下时应停止施肥。
3 .3接种小球藻：施肥1～2天后接种小球藻、微藻，培育SS型臂尾轮虫的基础饵料。
3 .4接种轮虫：接种小球藻3～4天后接种休眠期的轮虫卵。
3 .5轮虫培育跟踪：接种轮虫卵后第3天开始，定期取水样检测轮虫的繁殖浓度，根据轮虫的浓度( 2000个/mL )及时收集轮虫，并要添加轮虫卵和小球藻原液，维持轮虫足够密度。
(四)苗种来源和投放
4 .1孵化和育苗准备
根据需要调整孵化桶和育苗池的盐度等条件。
4 .2受精卵的获取和孵化
由自培育的2龄四指马鲅亲鱼(体重366～562g/尾)自然产卵、自然受精而获得的受精卵，用80目筛网收集、分离杂质后选取浮于水面表层的受精卵放在在容积为2立方米的孵化桶进行静水充气孵化，使用时海水再经网滤引入孵化桶，孵化密度为8～15万/立方米。
孵化期间，水温28～31℃，盐度28‰～30‰，pH7 .8-8 .2，溶氧6 .8～7 .4mg/L，氨氮小于0 .20mg/L，亚硝酸盐浓度小于0 .005mg/L。孵化历时13～15h，初孵仔鱼全长1 .4～1 .6mm。
(五)低盐驯化培育过程
5 .1室内育苗
5 .1 .1孵化后的仔鱼在孵化桶暂养2天后(全长1 .8～1 .9mm )用干净的专用容器把幼苗转移至室内水泥池( 8m×6m×1 .5m )培育，转移操作在下午16:30后，操作应谨慎轻柔。
5 .1 .2第一阶段苗种低盐驯化处理：从孵化后第4天开始，育苗海水以降幅0 .5～1 .0‰盐度/天进行第一阶段淡化，为期4～6天。淡化操作如下：利用室内的进水管往育苗池缓慢注入当地河淡水(盐度2～3‰)使原来水位高度0 .7m升高至0 .8～0 .9m，盐度由原来28～30‰降低至22～23‰。
5 .1 .2第二阶段苗种室内低盐驯化处理：第一阶段驯化后，在鱼苗水泥池中育苗海水以降幅1 .5～2‰盐度/天进行第二阶段淡化，为期8～10天，盐度降至10～12‰。操作同第一阶段。
5 .2室外土池放养
5 .2 .1室外育苗池选择选择室外育苗池，清塘，引入育苗海水，调整盐度，加入饵料。
5 .2 .2由于土池经药物清塘，在鱼苗下塘前1～2天需进行试水。
5 .2 .3试水成功后进行放养，鱼苗下唐时要确保水温与室内培育时温度相差不超过3℃，一般适宜在傍晚时转移鱼苗至土池，注意顺风放鱼苗以免被风吹到岸边，下塘后轻轻搅动池水，以免鱼苗集中在一起。
5 .2 .4第三阶段苗种室外低盐驯化处理：将鱼苗转移至育苗池塘后，继续进行培育，3～5天后池塘育苗海水以降幅1 .0～1 .5‰盐度/天进行第三阶段淡化，海水盐度从初始的10～12‰降低至4 .0～5 .0‰。( 4 )育苗海水盐度淡化至4 .0-5 .0‰后继续培育至出苗或分塘养殖。
(六)育苗期间的管理
6 .1培养密度控制
苗种低盐驯化的第一阶段，培育密度为2～5万尾/m3，苗种低盐驯化的第二阶段，培育密度控制为0 .5～2万尾/m3，苗种低盐驯化的第三阶段培育密度为100～500万尾/亩。
6 .2水质管理
苗种低盐驯化的第一阶段和第二阶段水温控制为28～31℃，第三阶段水温范围为25～32℃。
低盐驯化过程中，水体氨氮浓度小于0 .2mg/L，亚硝酸盐浓度小于0 .01mg/L，pH值7 .4～8 .2，溶解氧含量5 .2～7 .4mg/L。
注意预报和天气变化，每天测量水温至少两次，分别是07:00和17:00，同时测量pH、氨氮、亚硝酸盐、溶解氧各指标，检测水质的变化，以便在出现异常时及时做出应对措施。
6 .3饲饵管理
孵化后第3d仔鱼全长2 .416±0 .117mm，头部发达，口和肛门张开，口径平均值为0 .188±0 .045mm，仔鱼开始摄食，游泳能力进一步加强，投喂ss型臂尾轮虫(长径0 .175±0 .002mm，短径0 .149±0 .005mm )作为仔鱼的开口饵料，用量为每天20～60个/ml，分3次投喂，早午晚各一次，每次收集的轮虫液用鱼苗海水稀释后均匀泼洒在鱼苗池并根据鱼苗摄食量进行适当调节；开口后5天后饵料除投喂轮虫投外，同时逐渐增加投喂桡足类，每天每尾鱼苗投喂20～60只，开口后10天时完全过渡到投喂桡足类；至进行第三阶段低盐驯化前3天，在投喂桡足类同时添加商品饲料，每天4～10g/万尾；第三阶段低盐驯化期间减少桡足类投喂量，过渡到投喂商品饲料(常兴牌育苗料，全兴水产饲料有限公司，佛山顺德)，每天10～40g/万尾，直到低盐驯化完成，可全部投喂商品饲料，投喂频率每天早上和傍晚各一次。
6 .4换水和吸污
室内育苗阶段：每天下午16:30后进行吸底换水操作，吸底采用虹吸法，操作应小心谨慎，利用池一则的排水口弃去1/3体积旧的育苗海水，再注入新的鱼苗海水同时注意添加和淡水按淡化目的调节盐度。
室外育苗阶段：每天下午16:30后按1/3比例换水，利用排水口排水和进水管进水，同时要根据淡化目的调整盐度。及时清除水面的昆虫尸体等杂质。
(七)鱼苗拉网锻炼和出池
鱼苗在土池培育10～15天后，全长可达2 .5～3 .6cm，此时应拉网锻炼，及时将鱼苗分塘进行培育或出苗，拉网锻炼选择在晴朗的天气09:00～10:00进行，操作应小心，避免损伤鱼体。
实施例2
本实施例提供的四指马鲅人工低盐育苗方法，包括以下步骤：
(一)孵化桶、室内育苗池和室外育苗土池的准备
本次育苗选用育苗车间的1号孵化桶(容积2m3 )和7号育苗池( 8m×6m×1 .5m )进行低盐驯养试验。
2015年6月1日用浓度为2mg/L的强氯精溶液均匀泼洒在孵化桶和育苗池内进行彻底消毒。
(二)育苗用水处理
2015年6月5日引进自然海水，依次经过粗沙、细沙、活性炭、筛网过滤后抽至高位蓄水池( 8m×8m×3m )进行24～48h的黑暗沉淀后进行化学、物理处理，具体为用强氯精5ppm进行彻底消毒，24h后用硫代硫酸钠2 .5ppm进行中和，最后用紫外灯照射1h。紫外灯30w，波长200～270nm，垂直悬挂，离地面2～2 .5m。处理后的海水进行曝气48小时以上，并经过高速流水处理。最后进行三级沙滤处理：首先经第一级沙滤：小石块、20目筛网、粗沙过滤再经第二级沙滤：为粗沙、80目筛网、细沙过滤，最后是第三级沙滤：活性炭、150目筛网、细沙过滤。
(三)饵料池准备
3 .1选用储备车间的1号池作为饵料池，规格为1 .5亩。2015年6月1日配置浓度为2mg/L的强氯精溶液全池泼洒进行消毒。2015年6月4日引入经过上述(二)中预处理的海水，水深1 .3m。
3 .2于2015年6月5日施入基肥，具体为：黄豆浆100kg/亩分2～3次投入，硝酸铵2ppm，磷酸二铵0 .2ppm，视池水肥瘦和肥料种类加以调节水质，当池水透明度达30cm以下时应停止施肥。
3 .3 2015年6月7日接种小球藻、微藻，培育SS型臂尾轮虫的基础饵料。
3 .4 2015年6月10日接种轮虫：接种轮虫，密度为10～15个/mL。
(四)苗种来源和投放
4 .1孵化和育苗准备
2015年6月12日在孵化桶内引入上述(二)经预处理的海水，水深1 .3m，用YSI55-12便携式溶解氧测定仪测定盐度，按照生产要求调整孵化盐度为29‰，放置1个8孔的气室至底部。同一天在7号池引入育苗海水上述(二)经预处理的海水，调整盐度为28‰，水深0.7m，在池底等距离放入8个气室。
4 .2受精卵获取和孵化
2015年6月13日早上07:00用80目筛网收集受精卵(合计32 .20万粒，受精卵为由自培育的2龄四指马鲅亲鱼(体重366～562g/尾)自然产卵、自然受精而获得的受精卵，其显微镜结构图如图1-2中所示。)，经分离杂质后转移到孵化桶进行净水充气孵化，孵化期间不能搅动水面，其中孵化用水盐度调节为29‰～31‰，使用时海水再经网滤引入孵化桶，孵化密度为8～15万/立方米。
孵化期间，水温28～31℃，盐度28‰～30‰，pH7 .8-8 .2，溶氧6 .8～7 .4mg/L，氨氮小于0 .20mg/L，亚硝酸盐浓度小于0 .005mg/L。当日下午16:30全部孵化，通过计算受精率为86 .67％，孵化率为73 .81％，初孵化仔鱼全长1 .4～1 .6mm，其显微镜结构图如图3中所示。
(五)低盐驯化培育过程
5 .1室内育苗过程
5 .1 .12015年6月15日下午17:00将孵化桶内2DAH( day after hatch，孵化后第2天)的仔鱼(全长1 .8～1 .9mm )转移到7号育苗池，共投入20 .45万尾。
5 .1 .2第一阶段淡化：2015年6月19日，育苗池海水盐度为27‰，于当日下午开始往后连续4天每天在池内加入河淡水(盐度2～3‰)，至2015年6月22日(淡化第4天)时水位1m，盐度降低变化为26‰、25‰、24‰、23‰。第一阶段低盐驯化结束时，计算鱼苗成活率为89 .6％。孵化后5天的仔鱼的显微结构图如图4中所示。
5 .1 .3第二阶段淡化：为期10天( 2015年6月22～7月1日)，从2015年6月22日下午17:00开始每天在育苗池按比例加入河淡水，使育苗海水以降幅1 .5‰盐度/天进行第二阶段的淡化，盐度降至11‰。操作同第一阶段，盐度变化为24 .5‰、23‰、21 .5‰、20‰、18.5‰、17‰、15 .5‰、14‰、12 .5‰、11‰。第二阶段低盐驯化结束时，鱼苗成活率为86.7％。
5 .2室外育苗过程
5 .2 .1选用室外土池B区-3号塘育苗，面积3亩，水深1 .5m，堤坡较大，池底平坦，淤泥要少于5～10cm，附近应有咸淡水水源，且在土池一则有一台水轮式搅拌型增氧机。在2015年6月20日用生石灰( 100kg/亩)进行清塘。2015年25日引入上述(二)经预处理的海水，调整盐度为11‰。2015年6月21日加入黄豆浆100kg/亩(分2～3次投入)、硝酸铵2ppm、磷酸二铵0 .2ppm培育基础生物饵料。
5 .2 .2鱼苗试水，2015年6月29日进行试水，从7号池随即取出100～200尾鱼苗放入3号塘进行试水，定期观察以鱼苗各方面的状态，至2015年7月1日上午10:00，仔鱼状态均表现良好，即试水成功。
5 .2 .3 2015年7月2日17:00将鱼苗转移至3号塘，确保水温与室内培育时温度相差不超过3℃，注意顺风放鱼苗以免被风吹到岸边，下塘后轻轻搅动池水，以免鱼苗集中在一起。
5 .2 .4第三阶段苗种室外低盐驯化处理：将鱼苗转移至育苗池塘后，继续进行培育，从2015年7月5日开始往池塘注入河淡水使育苗海水以降幅1 .0‰盐度/天进行第三阶段淡化，为期6天，海水盐度变化为10‰、9‰、8‰、7‰、6‰、5‰。淡化结束后，鱼苗继续培育，育苗海水盐度保持在4～5‰之间，至7月15日，仔鱼30DAH时可进行出苗。此次试验中室外育苗到出苗时成活率43 .2％。第三阶段低盐驯化的仔鱼的照形貌如图5中所示。
(六)育苗期间的管理
6 .1培养密度控制
苗种低盐驯化的第一阶段，培育密度为2～5万尾/m3，苗种低盐驯化的第二阶段，培育密度控制为0 .5～2万尾/m3，苗种低盐驯化的第三阶段培育密度为100～500万尾/亩。
6 .2水质管理
苗种低盐驯化的第一阶段和第二阶段水温控制为28～31℃，第三阶段水温范围为25～32℃。
低盐驯化过程中，水体氨氮浓度小于0 .2mg/L，亚硝酸盐浓度小于0 .01mg/L，PH值7 .4～8 .2，溶解氧含量5 .2～7 .4mg/L。
注意预报和天气变化，每天测量水温至少两次，分别是07:00和17:00，同时测量pH、氨氮、亚硝酸盐、溶解氧各指标，检测水质的变化，以便在出现异常时及时做出应对措施。
6 .3饲饵管理
孵化后第3d仔鱼全长2 .416±0 .117mm，头部发达，口和肛门张开，口径平均值为0 .188±0 .045mm，仔鱼开始摄食，游泳能力进一步加强，投喂ss型臂尾轮虫(长径0 .175±0 .002mm，短径0 .149±0 .005mm )作为仔鱼的开口饵料，用量为每天20～60个/mL，分3次投喂，早午晚各一次，每次收集的轮虫液用鱼苗海水稀释后均匀泼洒在鱼苗池并根据鱼苗摄食量进行适当调节；开口后5天后饵料除投喂轮虫投外，同时逐渐增加投喂桡足类，每天每尾鱼苗投喂20～60只，开口后10天时完全过渡到投喂桡足类；至进行第三阶段低盐驯化前3天，在投喂桡足类同时添加商品饲料，每天4～10g/万尾；第三阶段低盐驯化期间减少桡足类投喂量，过渡到投喂商品饲料(常兴牌育苗料，全兴水产饲料有限公司，佛山顺德)，每天10～40g/万尾，直到低盐驯化完成，可全部投喂商品饲料，投喂频率每天早上和傍晚各一次。
6 .4换水和吸污
室内育苗阶段：每天下午16:30后进行吸底换水操作，吸底采用虹吸法，操作应小心谨慎，利用池一则的排水口弃去1/3体积旧的育苗海水，再注入新的鱼苗海水同时注意添加和淡水按淡化目的调节盐度。
室外育苗阶段：每天下午16:30后按1/3比例换水，利用排水口排水和进水管进水，同时要根据淡化目的调整盐度。及时清除水面的昆虫尸体等杂质。
(七)鱼苗拉网锻炼和出池
鱼苗在室外土塘培育10天后，全长可达2 .5～3 .6cm，此时应拉网锻炼，作出苗准备，拉网锻炼选择在晴朗的天气09:00～10:00进行，操作应小心，避免损伤鱼体。出苗时的仔鱼( 30DAH )的形貌如图6中所示。
实施例3
本实施例提供的四指马鲅人工低盐育苗方法，包括以下步骤：
(一)孵化桶、室内育苗池和室外育苗土池的准备
本次育苗选用育苗车间的2号孵化桶(容积2m3 )和6号池育苗池( 8m×6m×1 .5m)、2号饵料池(1 .5亩)、室外B区-5号土塘( 3亩)进行低盐驯养试验。
(二)育苗用水处理和(三)饵料池准备同实施例2。
(四)苗种来源和投放
4 .1孵化和育苗准备
2015年7月12日在孵化桶内引入经预处理的海水，水深1 .3m，用YSI55-12便携式溶解氧测定仪测定盐度，按照生产要求调整孵化盐度为29‰，放置1个8孔的气室至底部。同一天在6号池引入育苗海水，调整盐度为28‰，水深0 .7m，在池底等距离放入8个气室。
4 .2受精卵获取和孵化
2015年7月13日早上07:00用80目筛网收集受精卵(合计24 .09万粒，其显微镜结构图如图1-2中所示，经分离杂质后转移到孵化桶进行净水充气孵化，孵化期间不能搅动水面，孵化期间，水温28～31℃，盐度28‰～30‰，pH7 .8-8 .2，溶氧6 .8～7 .4mg/L，氨氮小于0 .20mg/L，亚硝酸盐浓度小于0 .005mg/L。当日下午16:30全部孵化，通过计算受精率为84 .07％，孵化率为75 .93％，初孵化仔鱼全长1 .4～1 .5mm。
受精卵为由自培育的2龄四指马鲅亲鱼(体重366～562g/尾)自然产卵、自然受精而获得的受精卵，用80目筛网收集、分离杂质后选取浮于水面表层的受精卵放在在容积为2m3的孵化桶进行静水充气孵化，使用时海水再经网滤引入孵化桶，孵化密度为8～15万/立方米。其显微镜结构图如图3中所示。
(五)低盐驯化培育过程
5 .1室内育苗过程
5 .1 .1 2015年7月15日下午17:00将孵化桶内2DAH的仔鱼(全长1 .8～2 .0mm )转移到7号育苗池，共投入15 .38万尾。
5 .1 .2第一阶段淡化：降幅0 .7‰，为期6天。从2015年7月19日开始至2015年7月25日，每天下午17:00在池内按比例加入河淡水(盐度2～3‰)，至(淡化第6天)时水位1m，苗池海水盐度从开始时的27‰经历梯度变化为26 .3‰、25 .6‰、24 .9‰、24 .2‰、23.5‰、22 .8‰。第一阶段低盐驯化结束时，计算鱼苗成活率为92 .36％。孵化后5天的仔鱼的显微结构图如图4中所示。
5 .1 .2第二阶段淡化：为期6天( 2015年7月26～7月31日)，从2015年7月26日下午17:00开始每天在育苗池按比例加入河淡水，使育苗海水以降幅2‰盐度/天进行第二阶段的淡化，盐度降至10 .5‰。操作同第一阶段，盐度变化为20 .5‰、18 .5‰、16 .5‰、14.5‰、12 .5‰、10 .5‰。第二阶段低盐驯化结束时，鱼苗成活率为82 .23％。
5 .2室外育苗过程
5 .2 .1鱼苗试水，2015年7月29日进行试水，从6号池随即取出100～200尾鱼苗放入3号塘进行试水，定期观察以鱼苗各方面的状态，至2015年7月31日上午10:00，仔鱼状态均表现良好，即试水成功。
5 .2 .2 2015年8月2日17:00将鱼苗转移至5号塘，确保水温与室内培育时温度相差不超过3℃，注意顺风放鱼苗以免被风吹到岸边，下塘后轻轻搅动池水，以免鱼苗集中在一起。
5 .2 .3第三阶段苗种室外低盐驯化处理：将鱼苗转移至育苗池塘后，继续进行培育，从2015年8月5日开始往池塘注入河淡水使育苗海水以降幅1 .5‰/天进行第三阶段淡化，为期5天，海水盐度变化为9‰、7 .5‰、6‰、4 .5‰、3‰。淡化结束后，鱼苗继续培育，育苗海水盐度保持在3～4‰之间，至8月15日，仔鱼30DAH时可进行出苗。此次试验中室外育苗到出苗时成活率33 .62％。第三阶段低盐驯化的仔鱼的照形貌如图5中所示。
(六)育苗期间的管理和(七)鱼苗拉网锻炼和出池同实施例2。
出苗时的仔鱼( 30DAH )的形貌如图6中所示。
实施例2和实施例3两次育苗结果比较如下表1。
表1实施例2和实施例3育苗结果
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种四指马鲅人工低盐育苗方法，其特征是包括以下步骤：
(一)苗种孵化
选取亲鱼自然产卵、自然授精的受精卵在预处理海水中进行孵化，孵化期间，水温28～31℃，盐度28～30‰，pH 7 .8～8 .2，溶氧6 .8～7 .4mg/L，氨氮浓度小于0 .20mg/L，亚硝酸盐浓度小于0 .005mg/L；
(二)低盐驯化
( 1 )第一阶段苗种低盐驯化处理：将在步骤(一)中孵化后的初孵仔鱼转移至消毒好的育苗池中，继续孵化，从孵化后第4天开始，将育苗海水以0 .5～1 .0‰盐度/天的降幅进行第一阶段淡化，待盐度降至22～23‰，完成第一阶段驯化；
( 2 )第二阶段苗种低盐驯化处理：第一阶段驯化后，将育苗海水以1 .5～2‰盐度/天的降幅进行第二阶段淡化，待盐度降至10～12‰，完成第二阶段驯化；
( 3 )第三阶段苗种低盐驯化处理：第二阶段驯化后，将育苗转移至池塘中，并保持池塘中育苗海水盐度为10～12‰继续培育3～5天后，将育苗海水以1 .0～1 .5‰盐度/天的降幅进行第三阶段淡化，至盐度降至1 .0～5 .0‰，继续培育至出苗或分塘养殖。
2.根据权利要求1所述的四指马鲅人工低盐育苗方法，其特征是：步骤(一)中苗种孵化时，孵化密度为8～15万/m3。
3.根据权利要求1所述的四指马鲅人工低盐育苗方法，其特征是：步骤(一)中苗种孵化时在室内进行。
4.根据权利要求1所述的四指马鲅人工低盐育苗方法，其特征是：步骤(二)中第一阶段苗种低盐驯化处理和第二阶段苗种低盐驯化处理时，育苗海水的温度为28～31℃，第三阶段苗种低盐驯化处理时，育苗海水的温度为25～32℃。
5.根据权利要求1所述的四指马鲅人工低盐育苗方法，其特征是：步骤(二)中第一阶段苗种低盐驯化处理、第二阶段苗种低盐驯化处理和第三阶段苗种低盐驯化处理时，育苗海水的氨氮浓度小于0 .2mg/L，亚硝酸盐浓度小于0 .01mg/L，pH值为7 .4～8 .2，溶解氧含量为5 .2～7 .4mg/L。
6.根据权利要求1所述的四指马鲅人工低盐育苗方法，其特征是：步骤(二) 中第一阶段苗种低盐驯化处理时，苗种的培育密度为2～5万尾/m3，第二阶段苗种低盐驯化处理时，苗种的培育密度为0 .5～2万尾/m3，第三阶段苗种低盐驯化处理时，苗种的培育密度为100～500万尾/亩。
7.根据权利要求1所述的四指马鲅人工低盐育苗方法，其特征是：步骤(二)中低盐驯化时，鱼苗孵化后第3d开口摄食，选择ss型臂尾轮虫作为仔鱼的开口饵料，用量为每天20-60个/mL；开口5天后饵料除投喂ss型臂尾轮虫外，同时逐渐增加投喂桡足类，桡足类用量每天每尾鱼苗投喂20～60只，开口后10天时完全过渡到投喂桡足类；至进行第三阶段低盐驯化前3天，在投喂桡足类同时添加商品饲料，商品饲料用量每天4～10g/万尾；第三阶段低盐驯化期间减少桡足类投喂量，过渡到投喂商品饲料，商品饲料用量为每天10～40g/万尾，直到低盐驯化完成，可全部投喂商品饲料。
8.根据权利要求1所述的四指马鲅人工低盐育苗方法，其特征是：步骤(二)中第一阶段苗种低盐驯化处理和第二阶段苗种低盐驯化处理时，在室内育苗池中进行，第三阶段苗种低盐驯化处理时，在室外池塘中进行。
9.根据权利要求1所述的四指马鲅人工低盐育苗方法，其特征是：步骤(一)中采用的预处理海水和步骤(二)中采用的育苗海水为采用来自海洋的海水经包括粗沙、细沙、活性炭、筛网过滤后，再经黑暗沉淀、化学处理、物理处理、紫外灯照射、曝气和三级沙滤处理后使用。
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