CN105567755A - 一种磷酯酰丝氨酸的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种磷酯酰丝氨酸的制备方法，包括以下步骤：在温水中加入磷脂胆酰碱，L-丝氨酸，氯化钙及酶，充分反应后，得到含有磷酯酰丝氨酸的混合溶液，然后加入正己烷，将磷酯酰丝氨酸萃取出来，进行加热使正己烷挥发后得到含有磷酯酰丝氨酸的产物，向产物加入乙醇搅拌进一步去除杂质，最后过滤烘干得到本产品；本发明采用用水代替有机溶剂，在温和条件下的绿色合成，该制备方法具有高收率、短周期，低能耗的特点，适用于规模化工业生产，有效促进磷脂产业的发展。
Description
技术领域
本发明属于生物工程领域，特别涉及一种磷酯酰丝氨酸的制备方法。
背景技术
磷脂酰丝氨酸的制备方法主要有提取法和酶转化法，其中，提取法主要是从植物细胞、动物卵磷脂中提取PS，植物中的PS含量较少，所以提取法以动物的卵磷脂中提取为主，从动物的卵磷脂中提取PS主要是从动物的大脑及内脏中提取，目前，国外大部分以牛、羊、兔、马、驴等家禽的动物脑为原料来提取PS。近年来，由于疯牛病等动物疾病的原因，利用动物卵磷脂提取PS的方法的安全性受到人们的质疑。
酶转化法主要是以天然的卵磷脂为基质，加入丝氨酸，在磷脂酶的作用下，生成磷脂酰丝氨酸。现有技术中，磷脂酰丝氨酸的酶促合成多采用“有机相-缓冲液”的液液双相反应体系，通常使用氯仿、苯、丁酸乙酯、乙酸乙酯或乙醚等有机溶剂能够获得较高的反应转化率。但由于上述有机溶剂沸点很低，易燃易爆，有毒有害，容易造成环境污染，不适于工业化生产。
发明内容
为了解决现有技术中的问题，本发明提出了一种绿色环保的磷酯酰丝氨酸的制备方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
包括以下步骤：
（1）向反应容器内加入纯净水，水浴升温至50-60℃，并保持温度固定不变；
（2）再向容器内中加入以下重量组分的物质：磷脂酰胆碱50份，L-丝氨酸100份，氯化钙1份，搅拌1-2小时，使其充分乳化；
（3）乳化完全后再向溶液中加入20份酶，待其充分反应7-9小时，得到含有磷酯酰丝氨酸产物的混合物；
（4）向反应完成的混合物中加入正己烷，萃取磷酯酰丝氨酸，搅拌8-15分钟，待其分层，分离出正己烷溶液，再向剩余的溶液中再次加入正己烷进行进一步萃取，分离，将两次得到的正己烷溶液混合；加热正己烷溶液使其挥发，得到粗质的磷酯酰丝氨酸产物；
（5）将得到粗质的磷酯酰丝氨酸产物加入乙醇进一步去除杂质，搅拌5-7个小时后，过滤，再进行烘干后得到磷酯酰丝氨酸产品。
进一步的是，步骤（1）中，所述纯净水重量组分为200份。
进一步的是，步骤（4）中两次分别加入正己烷和步骤（5）中加入乙醇的体积比为4：1：4。
本发明的有益效果在于：本发明反应体系中采用纯净水代替传统的有机溶剂，条件温和，绿色环保，多次萃取和去除杂质，得到高纯度的磷酯酰丝氨酸，该制备方法具有高收率、短周期，低能耗的特点，适用于规模化工业生产，有效促进磷脂产业的发展。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明做详细说明。
实施例1
按照如下步骤制备：
（1）向1L三颈瓶内加入200ml纯净水，水浴升温至55℃，并保持温度固定为55℃；
（2）再向容器内中加入以下物质：磷脂酰胆碱50g，L-丝氨酸100g，氯化钙1g，搅拌1小时，使其充分乳化；
（3）乳化完全后再向溶液中加入20g酶，待其充分反应8小时，得到含有磷酯酰丝氨酸产物的混合物；
（4）向反应完成的混合物中加入200ml正己烷，萃取磷酯酰丝氨酸，搅拌10分钟，待其分层，分离出正己烷溶液，再向剩下的溶液中再次加入50ml正己烷进行进一步萃取，分离，将两次得到的正己烷溶液混合；加热正己烷溶液使正己烷挥发，得到粗质的磷酯酰丝氨酸产物；
（5）将以上粗质的磷酯酰丝氨酸产物加入乙醇进一步去除杂质，搅拌5个小时后，过滤掉乙醇，将得到的产物进行烘干得到磷酯酰丝氨酸产品33.5g，其磷脂酰丝氨酸含量为54.2％。
实施例2
按照如下步骤制备：
（1）向1L三颈瓶内加入200ml纯净水，水浴升温至50℃，并保持温度固定为50℃；
（2）再向容器内中加入以下物质：磷脂酰胆碱50g，L-丝氨酸100g，氯化钙1g，搅拌1小时，使其充分乳化；
（3）乳化完全后再向溶液中加入20g酶，待其充分反应8小时，得到含有磷酯酰丝氨酸产物的混合物；
（4）向反应完成的混合物中加入200ml正己烷，萃取磷酯酰丝氨酸，搅拌10分钟，待其分层，分离出正己烷溶液，再向剩下的溶液中再次加入50ml正己烷进行进一步萃取，分离，将两次得到的正己烷溶液混合；加热正己烷溶液使正己烷挥发，得到粗质的磷酯酰丝氨酸产物；
（5）将以上得到的粗质的磷酯酰丝氨酸产物加入乙醇进一步去除杂质，搅拌5个小时后，过滤掉乙醇，将得到的产物进行烘干得到磷酯酰丝氨酸产品32.7g，其磷脂酰丝氨酸含量为52.6％。
实施例3
按照如下步骤制备：
（1）向1L三颈瓶内加入200ml纯净水，水浴升温至60℃，并保持温度固定为60℃；
（2）再向容器内中加入以下物质：磷脂酰胆碱50g，L-丝氨酸100g，氯化钙1g，搅拌1小时，使其充分乳化；
（3）乳化完全后再向溶液中加入20g酶，待其充分反应8小时，得到含有磷酯酰丝氨酸产物的混合物；
（4）向反应完成的混合物中加入200ml正己烷，萃取磷酯酰丝氨酸，搅拌10分钟，待其分层，分离出正己烷溶液，再向剩下的溶液中再次加入50ml正己烷进行进一步萃取，分离，将两次得到的正己烷溶液混合；加热正己烷溶液使正己烷挥发，得到粗质的磷酯酰丝氨酸产物；
（5）将以上得到的粗质的磷酯酰丝氨酸产物加入乙醇进一步去除杂质，搅拌5个小时后，过滤掉乙醇，将得到的产物进行烘干得到磷酯酰丝氨酸产品31.4g，其磷脂酰丝氨酸含量为49.2％。
从3个实施例中可以看出，当温度为55℃时，得到的产品产量和纯度更高。
下表为不同温度和不同酶含量的实验结果表
从表中可以看出，当温度为55℃，酶添加量为20g时，反应得到的磷脂酰丝氨酸产量最高。
应当理解的是，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，而所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (3)
1.一种磷酯酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）向反应容器内加入纯净水，水浴升温至50-60℃，并保持温度固定不变；
（2）再向容器内中加入以下重量组分的物质：磷脂酰胆碱50份，L-丝氨酸100份，氯化钙1份，搅拌1-2小时，使其充分乳化；
（3）乳化完全后再向溶液中加入20份酶，待其充分反应7-9小时，得到含有磷酯酰丝氨酸产物的混合物；
（4）向反应完成的混合物中加入正己烷，萃取磷酯酰丝氨酸，搅拌8-15分钟，待其分层，分离出正己烷溶液，再向剩余的溶液中再次加入正己烷进行进一步萃取，分离，将两次得到的正己烷溶液混合；加热正己烷溶液使正己烷挥发后，得到粗质的磷酯酰丝氨酸产物；
（5）将得到的粗质的磷酯酰丝氨酸产物加入乙醇进一步去除杂质，搅拌5-7个小时后，过滤，再进行烘干后得到磷酯酰丝氨酸产品。
2.根据权利要求1所述的一种磷酯酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述纯净水重量组分为200份。
3.根据权利要求1所述的一种磷酯酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，步骤（4）中两次加入正己烷和步骤（5）中加入乙醇的体积比为4：1：4。
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110938090A (zh) * | 2019-12-24 | 2020-03-31 | 南通励成生物工程有限公司 | 一种磷脂酰丝氨酸的纯化方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101230365A (zh) * | 2008-01-08 | 2008-07-30 | 西安皓天生物工程技术有限责任公司 | 一种粉末磷脂酰丝氨酸的制备方法 |
| CN101319237A (zh) * | 2008-07-11 | 2008-12-10 | 天津科技大学 | 磷脂酰丝氨酸合成酶催化合成磷脂酰丝氨酸的方法 |
| CN102277394A (zh) * | 2011-07-22 | 2011-12-14 | 天津科技大学 | 一种细胞表面展示磷脂酶d酵母全细胞催化剂催化制备磷脂酰丝氨酸的方法 |
| CN103555783A (zh) * | 2013-10-24 | 2014-02-05 | 陕西源邦生物技术有限公司 | 一种制备磷脂酰丝氨酸的方法 |
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2016
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101230365A (zh) * | 2008-01-08 | 2008-07-30 | 西安皓天生物工程技术有限责任公司 | 一种粉末磷脂酰丝氨酸的制备方法 |
| CN101319237A (zh) * | 2008-07-11 | 2008-12-10 | 天津科技大学 | 磷脂酰丝氨酸合成酶催化合成磷脂酰丝氨酸的方法 |
| CN102277394A (zh) * | 2011-07-22 | 2011-12-14 | 天津科技大学 | 一种细胞表面展示磷脂酶d酵母全细胞催化剂催化制备磷脂酰丝氨酸的方法 |
| CN103555783A (zh) * | 2013-10-24 | 2014-02-05 | 陕西源邦生物技术有限公司 | 一种制备磷脂酰丝氨酸的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 杜阳吉: "磷脂酶D单一水相法催化合成磷脂酰丝氨酸工艺研究", 《中国食品添加剂》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110938090A (zh) * | 2019-12-24 | 2020-03-31 | 南通励成生物工程有限公司 | 一种磷脂酰丝氨酸的纯化方法 |
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