CN105566458A - 一种杆菌肽及其锌盐的制备方法 - Google Patents

一种杆菌肽及其锌盐的制备方法 Download PDF

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冷凤
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Abstract

本发明公开了一种从杆菌肽发酵液中分离纯化杆菌肽以及制备其锌盐杆菌肽锌的方法。该方法首先将发酵液酸化、过滤，滤液经大孔阳离子交换树脂吸附、解吸，解吸液脱盐、脱色后经萃取、沉淀制备出高活性杆菌肽。萃取液反萃入水相与锌盐反应获得杆菌肽锌。整个工艺简单、易操作，最大限度的保留产品的活性；该工艺高效、低能耗、适合工艺化生产，杆菌肽收率达60%以上，所制备杆菌肽及锌盐均符合美国药典标准。

Description

一种杆菌肽及其锌盐的制备方法
技术领域
本发明属于工业微生物技术领域，具体涉及一种杆菌肽及其锌盐杆菌肽锌的制备方法。
背景技术
杆菌肽（Bacitracin）最初是Johnson从患者伤口污染物中分离出的一株枯草芽孢杆菌，经培养得到的多肽类抗生素。可由枯草芽孢杆菌（bacillussabtilis）和地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）产生。由于其对革兰氏阳性菌有较强的抗菌作用，与金属离子络合后稳定性增强，抗菌活性更高。该药局部应用刺激小，过敏反应少见，耐酶，细菌对其产生耐药性又较慢，获得耐药性菌株极为罕见。而且其活性不受脓液、痰液、血液、渗出液和坏死组织的影响，故迄今常作为局部抗感染药而广泛使用。
杆菌肽是由12个氨基酸组成的多肽类抗生素，其中含有一个7个氨基酸构成的环肽。杆菌肽中含有杆菌肽A、B、C、D、E、F等多个组分，其中杆菌肽Ａ生物活性最强。
美国药典对药用杆菌肽各组分含量有严格的规定；其中杆菌肽A（HPLC相对保留时间为1.0RT）含量不小于40%，杆菌肽B1、B2、B3、A（0.7RT，0.7RT，0.8RT，1.0RT）的峰面积之和不小于70%，杆菌肽B1（0.7RT）之前的峰面积之和不得大于20%，杆菌肽F（2.4RT）的峰面积不大于6%。
杆菌肽为多组分产品，美国药典对各组分含量有严格的规定。国内产品由于达不到国外药典标准多为兽用制品，本产品的提取技术路线国内研究很少，郭淑琴、魏景新发表的《树脂吸附法提取杆菌肽的研究》（沈阳化工1985.03.02），使用离子交换法提纯杆菌肽，可得到纯度54U/mg的杆菌肽，天津大学化工学院研究生刘咏的论文《抗生素杆菌肽锌脱色提纯工艺研究》利用膜分离技术对杆菌肽锌盐进行纯化精制，最终可使产品效价提高到50U/mg以上。这两种方法所获得产品的生物活性均不是很高。
国外对该产品纯化工艺研究较多，US2,457,887以活性氧化铝或活性炭吸附杆菌肽进行提取，由于无机介质对活性物质的吸附量很低，该法不适合工业化。US2,498,165和US2,609,324使用大量有机溶剂多级萃取，有些溶剂毒性较大，该法收率较低，纯化效果也不明显。US2,739,063以沉淀剂将杆菌肽沉淀到无机载体上，该法收率较低，产品稳定性差。GB782,999采用羧酸型阳离子交换树脂提取，解析液经溶媒萃取提纯后制备杆菌肽锌，产品效价可到55U/mg，总收率35%左右，无论产品效价还是总收率均处于较低水平。US2,915,432使用低交联度羧酸型阳离子交换树脂提取，辅以无机盐沉淀法纯化制备出高效价杆菌肽锌总收率51%，产品效价可达76U/mg。该法需要使用大量无机盐，回收困难,该法总收率也偏低。
发明内容
本发明的目的是提供一种操作简便、高效、适合工业化生产的高活性杆菌肽及其盐杆菌肽锌的制备方法。
本发明所提供的杆菌肽的制备方法，包括以下步骤：
1）杆菌肽发酵液以水稀释、加入酸化剂调节pH值为3.0-4.0，过滤，得到杆菌肽滤液。
2）将滤液调节PH为6.0-9.0，通过大孔强酸型阳离子交换树脂吸附，再以碱性解吸剂解吸，得杆菌肽解吸液。
3）解吸液通过大孔阳离子交换树脂脱盐，再通过脱色树脂进行脱色，得到脱色液。
4）将脱色液以有机溶剂萃取，得萃取液。
5）向萃取液中加入沉淀剂沉淀，经过滤、干燥，得到杆菌肽。
其中步骤1）所述酸化剂为盐酸、草酸、醋酸、硫酸中任意一种。其中以草酸和醋酸更优；调节pH值为3.0-4.0之间，以3.0-3.5为更优。过滤之前加入助滤剂，常用的助滤剂有硅藻土、珍珠岩等，有助于过滤操作。
其中步骤2）所述大孔强酸型阳离子交换树脂为D001、HD8树脂中的任意一种。所用解吸剂为弱碱性水溶液，该弱碱性水溶液以2%-4%的氨水为优。
其中步骤3）所述阳离子交换树脂为001X2、001X7、001X8中的一种。
其中步骤3）所述脱色树脂为D315、D304、D301中的任意一种。
其中步骤4）中所述有机溶剂为正丁醇、异丁醇、乙酸丁酯中的一种，萃取pH为6.0-8.0。优选萃取pH为6.0-6.5。
其中步骤5）所述沉淀剂为丙酮，用量为萃取液体积的5-8倍。
本发明还提供了一种由杆菌肽制备杆菌肽锌的制备方法，所述方法由步骤1）到步骤5）制得的萃取液加入水，加酸化剂调节pH为3.0-5.0，萃取得水相，水相调节pH为7.5-9.0，向水相中加入硫酸锌沉淀，经过滤、干燥制得。
其中加酸化剂调节pH为3.5-4.0，其中所述酸化剂为盐酸、草酸、醋酸、硫酸中任意一种。
其中萃取得到的水相调节pH为8.0-8.5。
本发明有效除去了微生物发酵代谢中产生的杂蛋白、色素、多糖等，使杆菌肽的纯度大幅提高，各种活性组分得到很好的保留，各组分比例达到美国药典标准。整条工艺简便易行、适合工业化生产。所制备的杆菌肽生物效价到达78U/mg，杆菌肽锌生物效价到达76U/mg，杆菌肽总收率可达60%以上。杆菌肽锌收率可达到60%，各组分比例符合美国药典标准。工艺中所用溶剂毒性小、易回收利用，方便工业化生产。
具体实施例
下述实例仅用于阐述实现本发明的方法，不应理解为对本发明的限制。所有基于本发明思路做出的修改和变化都应归于本发明的保护范围。
本发明所使用的杆菌肽发酵液由华北制药集团新药研究开发有限责任公司提供。大孔强酸型阳离子交换树脂D001、HD8，上海华震科技有限公司生产；阳离子交换树脂为凝胶型阳离子交换树脂001X8、001X7、001X2，南开树脂厂生产。大孔弱碱性阴离子交换树脂D315、D304、D301上海华震科技有限公司生产。正丁醇、乙醇、硫酸锌等试剂均为市售。本发明使用的高效液相色谱仪为996型检测器，515泵（Waters公司）。
实施例1
杆菌肽发酵液15L，发酵单位840U/ml。加入冰醋酸调pH值至4.0，加入珍珠岩助滤剂800克，过滤，得到杆菌肽滤液。滤液加3%氢氧化钠溶液调节pH6.0后通入大孔阳离子交换树脂柱HD8进行吸附，树脂装量1L，树脂柱高径比为8:1，流速1.5L/hr。以2%氨水解吸，流速0.5L/h，当解吸出口有杆菌肽流出时，串联001X8树脂柱和D315树脂柱进行脱盐、脱色，脱盐和脱色树脂的装量均为500ml。收集含有杆菌肽的脱色液。
将上述脱色液以3%氢氧化钠溶液调节pH值至6.0，用正丁醇800ml分两次萃取，得到正丁醇萃取液，正丁醇萃取液在50摄氏度下真空浓缩，浓缩液200ml，加入1600ml丙酮，杆菌肽沉淀析出。将其过滤、50摄氏度下真空干燥得到杆菌肽精粉98克，生物效价78U/mg，收率60.7%。杆菌肽A的峰面积占总面积的76.638%，杆菌肽B1之前的峰面积占总面积的10.998%，杆菌肽F占3.446%。
实施例2
杆菌肽发酵液8L，发酵单位893U/ml。加入草酸调pH值至3.0，加入珍珠岩助滤剂400克，过滤，得到杆菌肽滤液。滤液调pH6.5通入大孔阳离子交换树脂D001柱进行吸附，树脂装量0.8L，流速1.5L/hr。以2.5%氨水解吸，流速0.4L/hr，当解吸出口有杆菌肽流出时，串联001X7树脂柱和D304树脂柱进行脱盐脱色，脱盐和脱色树脂的装量均为250ml。收集含有杆菌肽的脱色液0.98L。
将上述脱色液以5%氢氧化钠溶液调pH值至6.5，以正丁醇分两次萃取，正丁醇萃取液50摄氏度真空浓缩，得浓缩液150ml,加入丙酮750ml，杆菌肽沉淀析出。将其过滤、45摄氏度下真空干燥得到杆菌肽精粉59克，生物效价76U/mg，收率62.8%。杆菌肽A的峰面积占总面积的76.233%，杆菌肽B1之前的峰面积占总面积的11.252%，杆菌肽F占4.169%。
实施例3
杆菌肽发酵液7.2L，发酵单位851U/ml。加入2mol/l硫酸水溶液调节pH值至3.5，加入珍珠岩助滤剂300克，过滤，得到杆菌肽滤液。滤液以1%氢氧化钠溶液调节pH9.0通入大孔阳离子交换树脂HD8柱进行吸附，树脂装量0.55L，流速1.0L/hr。以4%氨水解吸，流速0.25L/hr，当解吸出口有杆菌肽流出时，串联001X2树脂柱和D301树脂柱进行脱盐脱色，脱盐和脱色树脂的装量均为250ml。收集含有杆菌肽的脱色液。
将上述脱色液以5%氢氧化钠调pH值至8.0，以正丁醇分两次萃取，正丁醇萃取液加醋酸水溶液调pH3.0反萃，杆菌肽转入水相，以1%氢氧化钠调pH7.5，加入硫酸锌30克，生成杆菌肽锌盐沉淀，经过滤、45摄氏度下真空干燥，得到杆菌肽锌53克，生物效价74U/mg，收率64%，其中杆菌肽A的峰面积占总面积的76.701%，杆菌肽B1之前的峰面积占总面积的12.008%，杆菌肽F占2.050%。
实施例4
杆菌肽发酵液320L，发酵单位880U/ml。加入草酸调pH值至4.0，加入珍珠岩助滤剂16公斤，过滤，得到杆菌肽滤液。滤液加入Na2CO3溶液调节pH6.0后，通入大孔阳离子交换树脂HD8柱进行吸附，树脂装量25L，流速50L/hr。以2.0%氨水解吸，流速25L/hr，当解吸出口有杆菌肽流出时，串联12L001X8树脂柱和10LD304树脂柱进行脱盐脱色，收集含有杆菌肽的脱色液。
将上述脱色液以5%氢氧化钠调pH值至7.0，以正丁醇分两次萃取，正丁醇萃取液加1mol/l硫酸水溶液调节pH5.0反萃，杆菌肽转入水相，以5%氢氧化钠溶液调节pH9.0，加入硫酸锌1720克，生成杆菌肽锌盐沉淀，经过滤、40摄氏度下真空干燥，得到杆菌肽锌2.47公斤，生物效价73U/mg，收率为64%，杆菌肽A的峰面积占总面积的76.077%，杆菌肽B1之前的峰面积占总面积的11.633%，杆菌肽F占3.435%。
实施例5
杆菌肽发酵液8L，发酵单位954U/ml。加入草酸调pH值至4.0，加入珍珠岩助滤剂400克，过滤，得到杆菌肽滤液。滤液加入Na2CO3溶液调节pH6.0后，通入大孔阳离子交换树脂HD8柱进行吸附，树脂装量700mL，流速1.4L/hr。以2.0%氨水解吸，流速0.35L/hr，当解吸出口有杆菌肽流出时，串联400mL001X8树脂柱和400mLD304树脂柱进行脱盐脱色，收集含有杆菌肽的脱色液。
将上述脱色液以5%氢氧化钠调pH值至7.0，以正丁醇分两次萃取，正丁醇萃取液加1mol/l硫酸水溶液调节pH3.5反萃，杆菌肽转入水相，以5%氢氧化钠溶液调节pH8.0，加入硫酸锌42克，生成杆菌肽锌盐沉淀，经过滤、40摄氏度下真空干燥，得到杆菌肽锌68克，生物效价76U/mg，收率为67.7%，杆菌肽A的峰面积占总面积的75.924%，杆菌肽B1之前的峰面积占总面积的12.471%，杆菌肽F占4.538%。
实施例6
杆菌肽发酵液8.3L，发酵单位895U/ml。加入草酸调pH值至4.0，加入珍珠岩助滤剂400克，过滤，得到杆菌肽滤液。滤液加入Na2CO3溶液调节pH6.0后，通入大孔阳离子交换树脂HD8柱进行吸附，树脂装量700mL，流速1.4L/hr。以2.5%氨水解吸，流速0.35L/hr，当解吸出口有杆菌肽流出时，串联300mL001X7树脂柱和300mLD304树脂柱进行脱盐脱色，收集含有杆菌肽的脱色液。
将上述脱色液以5%氢氧化钠调pH值至7.0，以正丁醇分两次萃取，正丁醇萃取液加1mol/l盐酸水溶液调节pH4.0反萃，杆菌肽转入水相，以5%氢氧化钠溶液调节pH8.5，加入硫酸锌40克，生成杆菌肽锌盐沉淀，经过滤、40摄氏度下真空干燥，得到杆菌肽锌67克，生物效价75U/mg，收率为67.6%，其中杆菌肽A的峰面积占总面积的75.892%，杆菌肽B1之前的峰面积占总面积的12.437%，杆菌肽F占3.874%。

Claims (10)

1.一种杆菌肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）杆菌肽发酵液以水稀释、加入酸化剂调节pH值为3.0-4.0，过滤，得到杆菌肽滤液；
2）将滤液调节PH为6.0-9.0，通过大孔强酸型阳离子交换树脂吸附，再以碱性解吸剂解吸，得杆菌肽解吸液；
3）解吸液通过大孔阳离子交换树脂脱盐，再通过脱色树脂进行脱色，得到脱色液；
4）将脱色液以有机溶剂萃取，得萃取液；
5）向萃取液中加入沉淀剂沉淀，经过滤、干燥，得到杆菌肽。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其中步骤2）所述大孔强酸型阳离子交换树脂为D001、HD8树脂中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其中步骤2）所述碱性解吸剂为2%-4%的氨水溶液。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其中步骤3）所述大孔阳离子交换树脂为001X2、001X7、001X8中的一种。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其中步骤3）所述脱色树脂为D315、D304、D301中的任意一种。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其中步骤4）中所述有机溶剂为正丁醇、异丁醇、乙酸丁酯中的一种，萃取pH为6.0-8.0。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其中步骤5）所述沉淀剂为丙酮，用量为萃取液体积的5-8倍。
8.一种由杆菌肽制备杆菌肽锌的制备方法，所述方法由权利要求1制得的萃取液加入水，加酸化剂调节pH为3.0-5.0，萃取得水相，水相调节pH为7.5-9.0，向水相中加入硫酸锌沉淀，经过滤、干燥制得。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其中加酸化剂调节pH为3.5-4.0，水相调节pH为8.0-8.5。
10.根据权利要求1或7所述的制备方法，其中所述酸化剂为盐酸、草酸、醋酸、硫酸中任意一种。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106359898A (zh) * 2016-08-30 2017-02-01 齐鲁制药（内蒙古）有限公司 一种杆菌肽锌预混剂的制备方法
CN106729613A (zh) * 2016-12-29 2017-05-31 山东宝利甾体生物科技有限公司 一种高效浓缩杆菌肽锌发酵液的方法
CN107998871A (zh) * 2017-12-13 2018-05-08 深圳易普乐环保科技有限公司 一种优势微生物处理杆菌肽锌废气的系统及方法
CN109608522A (zh) * 2018-11-23 2019-04-12 江苏九阳生物制药有限公司 一种发酵生产杆菌肽的方法
CN113248571A (zh) * 2021-06-30 2021-08-13 华东理工大学 利用热响应型聚合物npe-108分离纯化杆菌肽的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB770248A (en) * 1954-05-21 1957-03-20 Pfizer & Co C Improvements in or relating to the preparation of bacitracin
CN102153633A (zh) * 2010-12-27 2011-08-17 江苏九阳生物制药有限公司 一种提取分离杆菌肽的方法
CN102161693A (zh) * 2010-12-27 2011-08-24 江苏九阳生物制药有限公司 一种杆菌肽锌的制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB770248A (en) * 1954-05-21 1957-03-20 Pfizer & Co C Improvements in or relating to the preparation of bacitracin
CN102153633A (zh) * 2010-12-27 2011-08-17 江苏九阳生物制药有限公司 一种提取分离杆菌肽的方法
CN102161693A (zh) * 2010-12-27 2011-08-24 江苏九阳生物制药有限公司 一种杆菌肽锌的制备方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
《无机化学演示实验编写组》: "《无机化学演示实验》", 31 March 1981, 人民教育出版社 *
张玉明 等: "杆菌肽生产菌种选育及发酵新工艺研究", 《科学技术与工程》 *
胡岳华: "《矿物浮选》", 31 March 2014, 中南大学出版社 *
顾学裘: "《药物制剂辛剂型选编》", 30 April 1984, 人民卫生出版社 *
顾觉奋 等: "《离子交换与吸附树脂在制药工业上的应用》", 30 April 2008, 中国医药科技出版社 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106359898A (zh) * 2016-08-30 2017-02-01 齐鲁制药（内蒙古）有限公司 一种杆菌肽锌预混剂的制备方法
CN106729613A (zh) * 2016-12-29 2017-05-31 山东宝利甾体生物科技有限公司 一种高效浓缩杆菌肽锌发酵液的方法
CN107998871A (zh) * 2017-12-13 2018-05-08 深圳易普乐环保科技有限公司 一种优势微生物处理杆菌肽锌废气的系统及方法
CN109608522A (zh) * 2018-11-23 2019-04-12 江苏九阳生物制药有限公司 一种发酵生产杆菌肽的方法
CN109608522B (zh) * 2018-11-23 2022-11-18 江苏九阳生物制药有限公司 一种发酵生产杆菌肽的方法
CN113248571A (zh) * 2021-06-30 2021-08-13 华东理工大学 利用热响应型聚合物npe-108分离纯化杆菌肽的方法

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