CN105535969B - 一种光控茶黄酮锌纳米制剂及其制备方法和用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及医药领域，公开了一种光控茶黄酮锌纳米制剂及其制备方法和用途。所述方法为(1)将茶黄酮用酸的乙醇溶液酸解，浓缩，沉淀，得到沉淀物；(2)将沉淀物溶解，加入无水碳酸钠和锌盐，回流反应，调节pH至8～10，静置沉淀，洗涤，干燥，得茶黄酮锌配合物；(3)将茶黄酮锌配合物加入有机溶剂中，加入乳化剂和水，搅拌，得到囊心溶液；(4)将囊材用有机溶剂配成囊材溶液，加入中药光敏剂和乳化剂，搅拌，得到混合物溶液；(5)将囊心溶液滴加到混合物溶液中，搅拌，过微孔滤膜，旋蒸去除溶剂，得到光控茶黄酮锌纳米制剂。该纳米制剂具有显著保护神经细胞、防神经退化的效果。

Description

一种光控茶黄酮锌纳米制剂及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及医药领域，特别涉及一种具有神经保护作用的光控茶黄酮锌纳米制剂及其制备方法，以及其作为抗神经退化性疾病药物的应用。
背景技术
植物黄酮类化合物具有显著的抗氧化作用，许多植物都含有黄酮类化合物，然而不同类型和来源的黄酮化合物其生理活性有较大差异。茶籽中含有黄酮为山萘酚结构，山萘酚具有抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗菌和抗病毒等多种药理作用。
黄酮化合物最大缺点是稳定性、靶向性差。在体内存在时间短，限制了它的应用效果。虽然目前有去糖基化、酯化、糖基化、甲基化等结构修饰方法，但工艺复杂，效果并不明显。
将茶黄酮与锌配位，制备成光控纳米制剂，实现光控组织靶向，并作为新型抗神经退化药物的研究未见报道。
发明内容
为了克服现有技术中的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种光控茶黄酮锌纳米制剂。
本发明的另一目的在于提供上述光控茶黄酮锌纳米制剂的制备方法。
本发明的再一目的在于提供上述光控茶黄酮锌纳米制剂作为抗神经退化的药物制剂的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种光控茶黄酮锌纳米制剂，是由含中药光敏剂的囊壳和含茶黄酮锌配合物的囊心组成的纳米粒子，在可见光照下可加速茶黄酮锌释放；所述茶黄酮锌配合物是由茶黄酮苷元与锌配合而成。
上述光控茶黄酮锌纳米制剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)将茶黄酮用酸的乙醇溶液酸解，得到酸解液；浓缩，得到浓缩液；将浓缩液采用沉淀剂进行沉淀，得到沉淀物；
(2)将沉淀物溶解，加入无水碳酸钠和锌盐，回流反应，调节pH至8～10，静置沉淀，洗涤，干燥，得茶黄酮锌配合物；
(3)将茶黄酮锌配合物加入有机溶剂中，得到配合物溶液；加入乳化剂和水，搅拌，得到囊心溶液；
(4)将囊材用有机溶剂配成囊材溶液，加入中药光敏剂和乳化剂，搅拌，得到混合物溶液；
(5)将囊心溶液滴加到步骤(4)的混合物溶液中，搅拌，过微孔滤膜，旋蒸去除溶剂，得到光控茶黄酮锌纳米制剂。
步骤(1)中所述的茶黄酮是自茶叶、茶树籽或油茶籽中提取的黄酮化合物。
步骤(1)中所述酸为盐酸、硫酸或甲酸中的一种以上，所述酸的乙醇溶液中酸在乙醇中的质量浓度2～5％，酸的乙醇溶液的用量为茶黄酮质量的3～8倍；所述酸解温度为70～80℃，酸解时间为5～8小时。
步骤(1)所述浓缩的条件为于50～80℃和0.01～0.1个大气压下进行浓缩。
步骤(1)所述浓缩液为酸解液体积的1/3。
步骤(1)所述沉淀剂为水，所述沉淀剂的加入量为浓缩液体积的3～5倍。
步骤(2)中所述无水碳酸钠加入量为茶黄酮质量的30～50％，所述锌盐加入量为茶黄酮质量的30～50％。
步骤(2)中回流反应温度为70～80℃，回流反应时间为5～10小时。
步骤(2)所述沉淀物溶解是指采用无水乙醇溶解沉淀物；所述无水乙醇的用量为沉淀物质量的3～5倍；所述锌盐为醋酸锌，所述调节pH的物质为氨水，所述静置沉淀的时间为8～24小时，所述洗涤是指采用乙醇进行洗涤，所述干燥的条件为于50～80℃干燥3～6小时。
步骤(3)中所述有机溶剂为二甲基亚砜、四氢呋喃或二甲基甲酰胺的一种以上；所述乳化剂为吐温60、聚氧乙烯硬脂酸酯或蔗糖脂肪酸酯中的一种以上。
步骤(3)所述有机溶剂的用量与茶黄酮锌配合物的用量相同；步骤(3)所述乳化剂的加入量为茶黄酮锌配合物质量的0.5～3％，所述水的用量为茶黄酮锌配合物质量的5～10倍，步骤(3)所述搅拌转速为200～2000转/分钟，所述搅拌时间为0.5～2小时。
步骤(4)中所述囊材为卵磷脂/胆固醇复配物、聚乳酸乙醇酸(Aldrich公司)、聚乙丙交酯PLGA75、聚乙丙交酯PLGA50或聚乙丙交酯PLGA85(Aldrich公司)的一种以上。所述卵磷脂/胆固醇复配物中卵磷脂：胆固醇质量比为(2～3)：1。
步骤(4)中所述有机溶剂为乙醇、丙酮或二氯甲烷。
步骤(4)中所述中药光敏剂为脱镁叶绿酸、姜黄素或竹红菌素的一种以上。所述竹红菌素为竹红菌甲素或竹红菌乙素一种以上。
步骤(4)中所述乳化剂为司盘60、单硬脂酸甘油酯或月桂酸单甘油酯中的一种以上。
步骤(4)所述囊材溶液的质量浓度1～5％，步骤(4)所述中药光敏剂加入量为囊材质量的0.1～1％，所述乳化剂为囊材质量的0.5～3％，步骤(4)所述搅拌转速为200～2000转/分钟，所述搅拌时间为0.5～2小时。
步骤(5)所述囊心溶液与混合物溶液质量比为1：(1～12.5)，步骤(5)所述搅拌转速为500～5000转/分钟，所述搅拌时间为0.5～2小时；所述微孔滤膜的孔径为0.1～0.5μm，所述旋蒸去除溶剂的条件为于40～60℃和0.01～0.1个大气压下蒸出溶剂；所述滴加速度为20～80滴/分钟。
所述光控茶黄酮锌纳米制剂用作神经保护药物，具有防治神经退化疾病的作用。
本发明与现有技术相比具有如下优点和效果：
(1)本发明制备的光控茶黄酮锌纳米制剂，易进入组织细胞，并在可见光照射下，可以靶向释放茶黄酮锌，实现黄酮锌的靶向神经保护作用；
(2)本发明通过茶黄酮酸解获得黄酮苷元，再与锌配合，形成茶黄酮锌配合物，最后通过两步乳化法制备光控茶黄酮锌纳米制剂，中药光敏剂位于外层，茶黄酮锌包在内层，形成的纳米囊结构稳定，黄铜苷元与锌配合使用，具有协同作用，增强纳米制剂的抗神经退化的作用；
(3)所述制备工艺简单，适合工业化生产。
附图说明
图1为实施例1～3制得的光控茶黄酮锌纳米制剂有无光照的累积释药率。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
(1)茶叶黄酮1kg，加入4kg质量浓度为2.5％盐酸的乙醇溶液，73℃酸解8小时，得到酸解液；在80℃和0.1个大气压下浓缩至酸解液体积的1/3，得到浓缩液；加3.5倍浓缩液体积的水进行沉淀，得到沉淀物；
(2)将沉淀物用3.5倍沉淀物质量的无水乙醇溶解，加入无水碳酸钠300g，醋酸锌450g，75℃反应5h；用氨水调节pH至9，静置沉淀8小时，收集沉淀用乙醇洗涤后，80℃真空干燥3小时，制得760g的茶黄酮锌配合物；
(3)取茶黄酮锌配合物100g，用100g二甲基亚砜溶解，加入1g蔗糖脂肪酸酯和700g水，500转/分钟搅拌1小时，制成囊心溶液；
(4)另取聚乳酸乙醇酸(Aldrich公司)200g，用乙醇制成质量浓度4％的囊材溶液，加入1g的姜黄素和4g月桂酸单甘油酯，500转/分钟搅拌1小时制成混合物溶液；
(5)将囊心溶液滴加到混合物溶液中，滴加速度为20滴/min，搅拌1.5小时，搅拌的转速为2000转/分钟；过0.5μm微孔滤膜，滤液在60℃和0.02个大气压下蒸出乙醇0.5小时，制得光控茶黄酮锌纳米制剂405g。
实施例2
(1)油茶籽黄酮1kg，加入7kg 4.5wt％甲酸的乙醇溶液，78℃酸解7小时，得到酸解液；在50℃和0.01个大气压下浓缩至酸解液体积的1/3，得到浓缩液；加5倍浓缩液体积水进行沉淀；
(2)将沉淀物用3倍沉淀物质量的无水乙醇溶解，加入无水碳酸钠470g，醋酸锌300g，78℃反应8h，用氨水调节pH至9，静置沉淀12小时，收集沉淀用乙醇洗涤后，60℃真空干燥4小时，制得650g的茶黄酮锌配合物；
(3)取茶黄酮锌配合物100g，用100g的四氢呋喃溶解，加入2g蔗糖脂肪酸酯和600g水，200转/分钟搅拌2小时，制成囊心溶液；
(4)另取PLGA50(Aldrich公司)200g，用二氯甲烷制成质量浓度2％的囊材溶液，加入2g姜黄素和6g月桂酸单甘油酯，200转/分钟搅拌2小时制成混合物溶液；
(5)将囊心溶液滴加到混合物溶液中，滴加速度为80滴/min，滴加完继续搅拌2小时，搅拌的转速为1000转/分钟；过0.4μm微孔滤膜，滤液在50℃和0.05个大气压下蒸出二氯甲烷1小时，制得光控茶黄酮锌纳米制剂410g。
实施例3
(1)茶籽黄酮1kg，加入6kg 3.5wt％硫酸的乙醇溶液，76℃酸解时间5.5小时，得到酸解液；在70℃和0.05个大气压下浓缩至酸解液体积的1/3，得到浓缩液；加4.5倍浓缩液体积的水进行沉淀；
(2)将沉淀物用4.5倍沉淀物质量的无水乙醇溶解，加入无水碳酸钠350g，醋酸锌400g，76℃反应6h，用氨水调节pH至9.5，静置沉淀16小时，收集沉淀用乙醇洗涤后，50℃真空干燥6小时，制得740g的茶黄酮锌配合物。
(3)取茶黄酮锌配合物100g，用100g的二甲基甲酰胺溶解，加入3g吐温60和800g水，1000转/分钟搅拌0.5小时制成囊心溶液；
(4)另取PLGA75(Aldrich公司)150g，用丙酮制成质量浓度3％的囊材溶液，加入0.7g的脱镁叶绿酸和1g单硬脂酸甘油酯，1000转/分钟搅拌0.5小时制成混合物溶液；
(5)将囊心溶液滴加到混合物溶液中，滴加速度为60滴/min，滴加完继续搅拌1小时，搅拌的转速为3000转/分钟；过0.3μm微孔滤膜，滤液在40℃和0.1个大气压下蒸出丙酮0.5小时，制得光控茶黄酮锌纳米制剂355g。
实施例4
(1)茶叶黄酮1kg，加入3kg 5wt％盐酸的乙醇溶液，80℃酸解时间5小时，得到酸解液；在60℃和0.01个大气压下浓缩至酸解液体积的1/3，得到浓缩液；加3倍浓缩液体积的水进行沉淀；
(2)将沉淀物用5倍沉淀物质量的无水乙醇溶解，加入无水碳酸钠400g，醋酸锌500g，70℃反应10h，用氨水调节pH至8，静置沉淀24小时，收集沉淀用乙醇洗涤后，70℃真空干燥4小时，制得775g的茶黄酮锌配合物；
(3)取茶黄酮锌配合物100g，用100g二甲基亚砜溶解，加入0.5g吐温60、0.5g蔗糖脂肪酸酯和500g水，800转/分钟搅拌1.5小时，公司制成囊心溶液；
(4)另取PLGA85(Aldrich)共聚物150g，用二氯甲烷制成质量浓度5％的囊材溶液，加入0.2g竹红菌甲素和1.5g司盘60，800转/分钟搅拌1.5小时制成混合物溶液；
(5)将囊心溶液滴加到混合物溶液中，滴加速度为40滴/min，滴加完继续搅拌0.5小时，搅拌的转速为5000转/分钟；过0.2μm微孔滤膜，滤液在50℃和0.1个大气压下蒸出二氯甲烷2小时，制得光控茶黄酮锌纳米制剂375g。
实施例5
(1)油茶籽黄酮1kg，加入5kg 3wt％甲酸的乙醇溶液，75℃酸解时间6小时，得到酸解液；在65℃和0.03个大气压下浓缩至酸解液体积的1/3，得到浓缩液；加4倍浓缩液体积的水进行沉淀；
(2)将沉淀物用4倍沉淀物质量的无水乙醇溶解，加入无水碳酸钠500g，醋酸锌400g，80℃反应7h，用氨水调节pH至8.5，静置沉淀10小时，收集沉淀用乙醇洗涤后，60℃真空干燥5小时，制得720g的茶黄酮锌配合物；
(3)取茶黄酮锌配合物100g，用100g四氢呋喃溶解，加入1g聚氧乙烯硬脂酸酯和500g水，1500转/分钟搅拌0.5小时，制成囊心溶液；
(4)另取卵磷脂/胆固醇(2：1质量比)复配物300g，用丙酮制成质量浓度5％的囊材溶液，加入1.5g的竹红菌甲素和3g单硬脂酸甘油酯，1500转/分钟搅拌0.5小时，制成混合物溶液；
(5)将囊心溶液滴加到混合物溶液中，滴加速度为50滴/min，滴加完继续搅拌2小时，搅拌的转速为500转/分钟；过0.1μm微孔滤膜，滤液在40℃和0.1个大气压下蒸出丙酮1小时，制得光控茶黄酮锌纳米制剂536g。
实施例6
(1)茶籽黄酮1kg，加入8kg 2wt％硫酸的乙醇溶液，70℃酸解时间8小时，得到酸解液；在75℃和0.04个大气压下浓缩至酸解液体积的1/3，得到浓缩液；加5倍浓缩液体积的水进行沉淀；
(2)将沉淀物用3倍沉淀物质量的无水乙醇溶解，加入无水碳酸钠450g，醋酸锌450g，70℃反应10h，用氨水调节pH至10，静置沉淀20小时，收集沉淀用乙醇洗涤后，65℃真空干燥5小时，制得755g的茶黄酮锌配合物；
(3)取茶黄酮锌配合物100g，用100g二甲基甲酰胺溶解，加入0.5g吐温60和1000g水，2000转/分钟搅拌0.5小时制成囊心溶液；
(4)另取卵磷脂/胆固醇(3：1质量比)复配物100g，用乙醇制成质量浓度1％的囊材溶液，加入0.1g脱镁叶绿酸和0.5g司盘60，2000转/分钟搅拌0.5小时制成混合物溶液；
(5)将囊心溶液滴加到混合物溶液中，滴加速度为30滴/min，滴加完继续搅拌0.5小时，搅拌的转速为4000转/分钟；过0.3μm微孔滤膜，滤液在60℃和0.01个大气压下蒸出乙醇2小时，制得光控茶黄酮锌纳米制剂315g。
实施例7
实施例1-6制得的光控茶黄酮锌纳米制剂的粒径和包封率实验
方法：采用2010年中国药典第二部附录IXE粒度和粒度分布测定方法第三法光散射法测定纳米粒径；采用高效液相法测定包封率，色谱柱为ODS C18(4.6mm×250mm)；流动相为80％甲醇；紫外检测器波长为370nm；进样量为20μL；流速为1mL/min；柱温为30℃。以山萘酚标准品浓度x(μg.mL-1)为横坐标，峰面积y为纵坐标，制作标准曲线，得y＝0.317C+208.5(R2＝0.9998)。以实施例1-6制得的光控茶黄酮锌纳米制剂进样，查标准曲线，可算得游离的茶黄酮量，包封率＝(茶黄酮用量－游离茶黄酮量)/茶黄酮用量。结果见表1。
结果：光控茶黄酮锌纳米制剂粒径范围在200～1000nm之间，包封率在76～89％。这表明该采用实施例1～6法制得的光控茶黄酮锌纳米制剂粒径分布较均匀，具有较高的包封率。
表1 光控茶黄酮锌纳米制剂粒径分布和包封率
实施例8
实施例1、2、3制得的光控茶皂苷元纳米制剂的光控释药实验
实验方法：取2g实施例1、2、3制得的光控茶黄酮锌纳米制剂，加入到50mLpH＝7.5磷酸缓冲液中，搅拌转速50rpm。每隔1小时取样1mL，并补回1mL pH＝7.5磷酸缓冲液，直至12h。将样品进行高效液相色谱分析，分析条件为同实施例7。测定茶黄酮峰面积，计算累积释放率。同时测定实施例1、2、3制得的光控茶黄酮锌纳米制剂在30W白炽灯照射下的累积释放率。结果见图1，图1为实施例1～3制得的光控茶黄酮锌纳米制剂在光照下的累积释放率即累积释药率。
实验结果：实施例1、2、3制得的光控茶黄酮锌纳米制剂在无光照下释药缓慢，8～10h后累计释药90％，但光照后，其在3～4h释药达90％，表明光照加速了药物释放。
本发明的光控茶黄酮锌纳米制剂具有显著神经保护作用，通过以下实验得以证实。
(1)对谷氨酸(Glu)损伤大鼠海马组织的保护性实验
方法：取4～5月龄雄性Wistar大鼠40只，体重(200±20)g，随机分为假手术组、Glu损伤组、光控茶黄酮锌纳米制剂非光照组和光照组、山萘酚组，每组8只。给药组预先尾静脉给药10d，其余组注射等量生理盐水。光照组在给药后给予30W白炽灯光照1小时。鼠经腹腔注射硫喷妥钠麻醉后，固定于脑立体定位仪，切开颅顶正中皮肤及骨膜，清晰暴露前囟，在前囟后0.8mm，矢状缝右侧旁1.5mm处钻开颅骨，用微量注射器行侧脑室注射Glu 4μL(1mg/kg)，进针深度3.8mm，留针5min。取针后观察大鼠行为学改变，以出现癫痫样发作的表现为模型成功。注射Glu溶液2h后，将大鼠断头处死，迅速取全脑，分离出海马，称重后加入生理盐水配制成1：10(重量体积比)的海马组织匀浆。取各组海马组织匀浆，严格按照试剂盒说明书操作，用多功能酶标仪检测其中MDA含量、SOD和GSH-Px活性。结果见表2。
结果：侧脑室注射Glu可引起大鼠海马组织中MDA含量升高，SOD和GSH-Px的活性降低(p<0.05)；与Glu损伤组比较，药物组MDA含量均降低，SOD和GSH-Px的活性均升高，光照组较非光照组差异达显著水平(p<0.05)，表明光控茶黄酮锌纳米制剂可提高脑内抗氧化酶的活性而拮抗Glu的神经毒性，具有神经保护作用，其效果优于山萘酚组。光照增强了药物的神经保护作用。
表2 光控黄酮苷元锌配合物对海马组织中抗氧化酶活性影响
(2)对MPTP所致小鼠多巴胺神经元损伤的保护实验
方法：取5～6月龄雄性小鼠50只，体重(20±2)g，随机分为正常对照组、MPTP组、光控茶黄酮锌纳米制剂非光照组和光照组、山萘酚组，每组10只。给药组预先腹腔注射给药3d，每天1次，其余组腹腔注射等量生理盐水。第4d除正常组外，其它均注射MPTP溶液4mg/kg。7d后，将小鼠断头处死，迅速取全脑，分离出纹状体，称重后加入PE缓冲液配制成1：10(重量体积比)的组织匀浆。匀浆液离心后，经HPLC测定多巴胺(DA)含量。结果见表3。
结果：MPTP组DA含量较正常组显著降低(p<0.05)，表明MPTP造成了多巴胺神经元的损伤。光控茶黄酮锌纳米制剂给药组DA含量与MPTP照组比显著提高(p<0.05)，光照组显著高于非光照组，说明光控茶黄酮锌纳米制剂对MPTP所致多巴胺神经元的损伤有较好的保护作用，光照增强了保护作用。
表3 光控黄酮苷元锌配合物对纹状体DA含量的影响
组别 剂量(mg/kg) DA(pmol)
正常组 0 68.2±5.7
MPTP组 4 21.9±4.5
光控茶黄酮锌纳米制剂(非光照) 30 45.3±5.1
光控茶黄酮锌纳米制剂(光照) 30 58.6±5.6
山萘酚 30 39.4±4.6

Claims (9)

1.一种光控茶黄酮锌纳米制剂，其特征在于：是由含中药光敏剂的囊壳和含茶黄酮锌配合物的囊心组成的纳米粒子；所述茶黄酮锌配合物是由茶黄酮苷元与锌配合而成；
所述光控茶黄酮锌纳米制剂通过以下方法制备得到：
（S1）将茶黄酮锌配合物加入有机溶剂中，得到配合物溶液；加入乳化剂和水，搅拌，得到囊心溶液；
（S2）将囊材用有机溶剂配成囊材溶液，加入中药光敏剂和乳化剂，搅拌，得到混合物溶液；
（S3）将囊心溶液滴加到步骤（S2）的混合物溶液中，搅拌，过微孔滤膜，旋蒸去除溶剂，得到光控茶黄酮锌纳米制剂；
步骤（S1）所述乳化剂为吐温60、聚氧乙烯硬脂酸酯或蔗糖脂肪酸酯中的一种以上；
步骤（S2）中所述囊材为卵磷脂/胆固醇复配物、聚乳酸乙醇酸、聚乙丙交酯PLGA75、聚乙丙交酯PLGA50或聚乙丙交酯PLGA85的一种以上；
步骤（S2）中所述中药光敏剂为脱镁叶绿酸、姜黄素或竹红菌素的一种以上；步骤（S2）中所述乳化剂为司盘60、单硬脂酸甘油酯或月桂酸单甘油酯中的一种以上；
步骤（S1）所述乳化剂的加入量为茶黄酮锌配合物质量的0.5～3%，所述水的用量为茶黄酮锌配合物质量的5～10倍；
步骤（S2）所述囊材溶液的质量浓度为 1～5％，步骤（S2）所述中药光敏剂加入量为囊材质量的0.1～1％，所述乳化剂为囊材质量的0.5~3%；
步骤（S3）所述囊心溶液与混合物溶液质量比为1：（1～12.5）。
2.根据权利要求1所述光控茶黄酮锌纳米制剂的制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
（1）将茶黄酮用酸的乙醇溶液酸解，得到酸解液；浓缩，得到浓缩液；将浓缩液采用沉淀剂进行沉淀，得到沉淀物；
（2）将沉淀物溶解，加入无水碳酸钠和锌盐，回流反应，调节pH至8～10，静置沉淀，洗涤，干燥，得茶黄酮锌配合物；
（3）将茶黄酮锌配合物加入有机溶剂中，得到配合物溶液；加入乳化剂和水，搅拌，得到囊心溶液；
（4）将囊材用有机溶剂配成囊材溶液，加入中药光敏剂和乳化剂，搅拌，得到混合物溶液；
（5）将囊心溶液滴加到步骤（4）的混合物溶液中，搅拌，过微孔滤膜，旋蒸去除溶剂，得到光控茶黄酮锌纳米制剂。
3.根据权利要求2所述光控茶黄酮锌纳米制剂的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述酸为盐酸、硫酸或甲酸中的一种以上，所述酸的乙醇溶液中酸在乙醇中的质量浓度为 2～5％；
步骤（2）中所述无水碳酸钠加入量为茶黄酮质量的30～50%，所述锌盐加入量为茶黄酮质量的30～50%；
步骤（1）中所述酸解温度为70～80℃，酸解时间为5～8小时；
步骤（2）中回流反应温度为70～80℃，回流反应时间为5~10小时。
4.根据权利要求2所述光控茶黄酮锌纳米制剂的制备方法，其特征在于：步骤（1）中所述酸的乙醇溶液的用量为茶黄酮质量的3～8倍。
5.根据权利要求2所述光控茶黄酮锌纳米制剂的制备方法，其特征在于：步骤（1）所述沉淀剂为水，步骤（2）所述沉淀物溶解是指采用无水乙醇溶解沉淀物，所述无水乙醇的用量为沉淀物质量的3～5倍；步骤（2）所述锌盐为醋酸锌；
步骤（3）所述搅拌转速为200~2000转/分钟，所述搅拌时间为0.5~2小时；
步骤（4）所述搅拌转速为200~2000转/分钟，所述搅拌时间为0.5~2小时；
步骤（5）所述搅拌转速为500~5000转/分钟，所述搅拌时间为0.5～2小时。
6.根据权利要求2所述光控茶黄酮锌纳米制剂的制备方法，其特征在于：步骤（1）所述浓缩的条件为于50～80℃和0.01～0.1个大气压下进行浓缩；步骤（1）所述浓缩液为酸解液体积的1/3；步骤（1）所述沉淀剂的加入量为浓缩液体积的3～5倍；
步骤（2）所述调节pH的物质为氨水，所述静置沉淀的时间为8～24小时，所述洗涤是指采用乙醇进行洗涤，所述干燥的条件为于50～80℃干燥3～6小时；
步骤（1）中所述的茶黄酮是自茶叶、茶树籽或油茶籽中提取的黄酮化合物。
7.根据权利要求2所述光控茶黄酮锌纳米制剂的制备方法，其特征在于：步骤（3）中所述有机溶剂为二甲基亚砜、四氢呋喃或二甲基甲酰胺的一种以上；步骤（3）所述有机溶剂的用量与茶黄酮锌配合物的用量相同；
步骤（4）中所述有机溶剂为乙醇、丙酮或二氯甲烷。
8.根据权利要求2所述光控茶黄酮锌纳米制剂的制备方法，其特征在于：步骤（5）所述微孔滤膜的孔径为0.1~0.5µm，所述旋蒸去除溶剂的条件为于40~60℃和0.01~0.1个大气压下蒸出溶剂；所述滴加速度为20～80滴/分钟。
9.根据权利要求1所述光控茶黄酮锌纳米制剂的应用，其特征在于：所述光控茶黄酮锌纳米制剂用于制备神经保护药物。
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