CN105524853A - 一种ps琼脂培养基及其应用 - Google Patents

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方清平
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Abstract

本发明为微生物领域,特别涉及一种PS琼脂培养基,所述培养基的组分包括12.0g/L蛋白胨、5.0g/L牛肉浸粉、2g/L牛胆汁物、3g/L酵母浸粉、1.0g/L柠檬酸钠、2g/L葡萄糖、0.5g/L半胱氨酸盐酸盐、0.27g/L氯化钙、0.05g/L磷酸氢二钾、0.05g/L磷酸二氢钾、1.0g/L碳酸氢钠、0.05g/L氯化钠、0.88g/L吐温80、15.0g/L琼脂,pH值为6.9-7.3。本发明培养基组方简单,制备操作方便,成本低,利于推广应用;菌生长迅速,变异率低;便于观察,分析。

Description

一种PS琼脂培养基及其应用
技术领域
本发明为微生物领域,特别涉及一种PS琼脂培养基及其应用。
背景技术
微生物培养(microculture)是生物培养的中的一种。所培养的微生物主要有病毒、细菌、放线菌、真菌等。微生物培养需要用到培养基,根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物培养成功的关键在于无菌操作,如果培养器具和培养基不能彻底灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的。
肠球菌(Enterococcus)属肠球菌属,是人类和动物肠道正常菌群的一部分,通常在引起腹腔和盆腔感染所分离的混合菌丝中发现,既往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌,但近年研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰阳性球菌中,它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌,肠球菌亦可引起院外感染。肠球菌不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染,还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等。
溶血性链球菌,需氧或兼性厌氧菌,营养要求较高,普通培养基上生长不良,需补充血清、血液、腹水,大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃,在20-42℃能生长,最适pH为7.4-7.6。在血清肉汤中易成长链,管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落,不同菌株溶血不一。
粪肠球菌,根据最新分类原则,粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原,根据兰氏(Lancefield)血清学分类,可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠球菌和非肠球菌两类。前者包括粪链球菌(S.faecalis)、屎链球菌(S.faecium)和坚忍链球菌(S.durans),后者有牛链球菌(S.bovis)和马肠链球菌(S.equinus)。
其营养要求低,在普通营养琼脂上也可生长。能在10℃或45℃pH9.6或含6.5%NaCl肉汤培养基中生长,并能耐65℃30分钟。它可利用精氨酸为能源,发酵山梨醇,不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。DNA-DNA杂交结果显示,肠球菌与链球菌属同源程度低,故有学者建议另立肠球菌属,与人类有关者为粪肠球菌(E.faecalis)和屎肠球菌(E.faecium)。
培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。
培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基;根据物理分类为液体培养基、固定培养基和脱水培养基;根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。
发明内容
本发明克服现有技术中的不足,提供一种PS琼脂培养基及其应用。
本发明运用生物化学,微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理,对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选,对培养基的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较,研究出了本发明的培养基。
本发明所采用的技术方案为:
一种PS琼脂培养基,所述培养基的组分包括12.0g/L蛋白胨、5.0g/L牛肉浸粉、2g/L牛胆汁物、3g/L酵母浸粉、1.0g/L柠檬酸钠、2g/L葡萄糖、0.5g/L半胱氨酸盐酸盐、0.27g/L氯化钙、0.05g/L磷酸氢二钾、0.05g/L磷酸二氢钾、1.0g/L碳酸氢钠、0.05g/L氯化钠、0.88g/L吐温80、15.0g/L琼脂,pH值为6.9-7.3。
本发明还公开了一种PS琼脂培养基的应用,用于消化球菌的培养。
蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖提供碳源,磷酸氢二钾和磷酸二氢钾是缓冲剂。氯化钠维持均衡的渗透压,琼脂是培养基凝固剂。
称取本品33.1g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,加热煮沸1分钟,分装于16mm×150mm试管,121℃高压灭菌15分钟制成斜面长4-5cm,底部长2-3cm。
本发明的有益效果:
1、培养基组方简单,制备操作方便,成本低,利于推广应用;
2、菌生长迅速,变异率低;
3、便于观察,分析。
具体实施方式
实施例1:
一种PS琼脂培养基,所述培养基的组分包括12.0g/L蛋白胨、5.0g/L牛肉浸粉、2g/L牛胆汁物、3g/L酵母浸粉、1.0g/L柠檬酸钠、2g/L葡萄糖、0.5g/L半胱氨酸盐酸盐、0.27g/L氯化钙、0.05g/L磷酸氢二钾、0.05g/L磷酸二氢钾、1.0g/L碳酸氢钠、0.05g/L氯化钠、0.88g/L吐温80、15.0g/L琼脂,pH值为6.9-7.3。
称取本品33.1g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,加热煮沸1分钟,分装于16mm×150mm试管,121℃高压灭菌15分钟制成斜面长4-5cm,底部长2-3cm。
上述具体实施方式中的实施例是说明性的而不是限定性的,可按照所限定范围列举出若干个实施例,因此在不脱离本发明总体构思下所做的任何变化和修改,都应属本发明所限定的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种PS琼脂培养基,其特征在于所述培养基的组分包括12.0g/L蛋白胨、5.0g/L牛肉浸粉、2g/L牛胆汁物、3g/L酵母浸粉、1.0g/L柠檬酸钠、2g/L葡萄糖、0.5g/L半胱氨酸盐酸盐、0.27g/L氯化钙、0.05g/L磷酸氢二钾、0.05g/L磷酸二氢钾、1.0g/L碳酸氢钠、0.05g/L氯化钠、0.88g/L吐温80、15.0g/L琼脂,pH值为6.9-7.3。
2.一种根据权利要求1所述的PS琼脂培养基的应用,其特征在于用于消化球菌的培养。
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