CN104651470A - 一种Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明为微生物领域，特别涉及一种Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基，所述培养基的组分包括20.8g/L肉浸液肉汤、5.0g/L酵母浸粉钠、8g/L牛胆汁物、1.0g/L柠檬酸钠、0.5g/L柠檬酸铁铵、0.27g/L叠氮化钠、1.0g/L七叶苷、15.0g/L琼脂，pH值为6.9-7.3。所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、蛋白胨12.0g、磷酸氢二钾2.0g。本发明培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；菌生长迅速，变异率低；便于观察，分析。
Description
技术领域
本发明为微生物领域，特别涉及一种Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基及其应用。
背景技术
微生物培养（microculture)是生物培养的中的一种。所培养的微生物主要有病毒、细菌、放线菌、真菌等。微生物培养需要用到培养基，根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物培养成功的关键在于无菌操作，如果培养器具和培养基不能彻底灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的。
肠球菌（Enterococcus）属肠球菌属，是人类和动物肠道正常菌群的一部分，通常在引起腹腔和盆腔感染所分离的混合菌丝中发现，既往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌，但近年研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰阳性球菌中，它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌，肠球菌亦可引起院外感染。肠球菌不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染，还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等。
溶血性链球菌，需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃，在20-42℃能生长，最适pH为7.4-7.6。在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落，不同菌株溶血不一。
粪肠球菌，根据最新分类原则，粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原，根据兰氏（Lancefield）血清学分类，可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠球菌和非肠球菌两类。前者包括粪链球菌（S.faecalis）、屎链球菌（S.faecium）和坚忍链球菌（S.durans）,后者有牛链球菌（S.bovis）和马肠链球菌(S.equinus)。
其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10℃或45℃ pH 9.6或含6.5%NaCl肉汤培养基中生长，并能耐65℃ 30分钟。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。DNA-DNA杂交结果显示，肠球菌与链球菌属同源程度低，故有学者建议另立肠球菌属，与人类有关者为粪肠球菌（E.faecalis）和屎肠球菌（E.faecium）。
培养基（Medium）是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。
培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。
发明内容
本发明克服现有技术中的不足，提供一种Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基及其应用。
本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了本发明的培养基。
本发明所采用的技术方案为：
一种Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基，所述培养基的组分包括20.8g/L肉浸液肉汤、5.0g/L酵母浸粉钠、8g/L牛胆汁物 、1.0g/L柠檬酸钠、0.5g/L柠檬酸铁铵 、0.27g/L叠氮化钠、1.0g/L七叶苷 、15.0 g/L琼脂，pH值为6.9-7.3 。
在以上方案的基础上，所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、蛋白胨12.0g、磷酸氢二钾2.0g。
本发明还公开了所述的Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基的应用，用于粪链球菌的选择性分离和计数。
蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素；柠檬酸钠、牛胆汁物和叠氮化钠为选择性抑菌剂，抑制非链球菌的细菌；琼脂是培养基的凝固剂。
称取本品 56.8g，加热溶解于1000ml 蒸馏水中，加热煮沸 1分钟，分装于 16mm× 150mm试管，121℃高压灭菌 15 分钟制成斜面长 4-5cm，底部长2-3cm。
本发明的有益效果：
1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；
2、菌生长迅速，变异率低；
3、便于观察，分析。
具体实施方式
实施例1：
一种Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基，所述培养基的组分包括20.8g/L肉浸液肉汤、5.0g/L酵母浸粉钠、8g/L牛胆汁物 、1.0g/L柠檬酸钠、0.5g/L柠檬酸铁铵 、0.27g/L叠氮化钠、1.0g/L七叶苷 、15.0 g/L琼脂，pH值为6.9-7.3 。
所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、蛋白胨12.0g、磷酸氢二钾2.0g。
称取本品 56.8g，加热溶解于1000ml 蒸馏水中，加热煮沸 1分钟，分装于 16mm× 150mm试管，121℃高压灭菌 15 分钟制成斜面长 4-5cm，底部长2-3cm。
质控菌株接种后，于35±0.5℃培养24h，
| 菌 名 | 生长状况 | 培养特征 |
| 粪链球菌 | 良好 | 棕黑色，具有棕色晕轮 |
| 金黄色葡萄球菌 | 被抑制 | —— |
| 大肠埃希氏菌 | 被抑制 | —— |
Claims (3)
1.一种Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基，其特征在于所述培养基的组分包括20.8g/L肉浸液肉汤、5.0g/L酵母浸粉钠、8g/L牛胆汁物 、1.0g/L柠檬酸钠、0.5g/L柠檬酸铁铵 、0.27g/L叠氮化钠、1.0g/L七叶苷 、15.0 g/L琼脂，pH值为6.9-7.3 。
2.根据权利要求1所述的Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基，其特征在于所述的肉浸液肉汤为每升肉浸液肉汤中含有牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、蛋白胨12.0g、磷酸氢二钾2.0g。
3.一种根据权利要求1所述的Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基的应用，其特征在于用于粪链球菌的选择性分离和计数。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| CN201310599688.5A CN104651470A (zh) | 2013-11-25 | 2013-11-25 | 一种Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基及其应用 |
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Publications (1)
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| CN104651470A true CN104651470A (zh) | 2015-05-27 |
Family
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| CN201310599688.5A Pending CN104651470A (zh) | 2013-11-25 | 2013-11-25 | 一种Pfizer肠球菌选择性琼脂培养基及其应用 |
Country Status (1)
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|---|---|
| CN (1) | CN104651470A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105936929A (zh) * | 2016-06-20 | 2016-09-14 | 中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所 | 一种用于检测水中肠球菌的酶底物培养基及其应用 |
| CN106434843A (zh) * | 2016-10-27 | 2017-02-22 | 江南大学 | 一种选择性分离培养b群链球菌的培养基及其制备方法 |
| CN108165511A (zh) * | 2018-01-22 | 2018-06-15 | 四川农业大学 | 一种筛选培养基及制备方法和应用与微生物的筛选培养方法 |
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2013
- 2013-11-25 CN CN201310599688.5A patent/CN104651470A/zh active Pending
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