CN105505823A - 一种复合微生物菌剂及其水溶性肥料和应用 - Google Patents

一种复合微生物菌剂及其水溶性肥料和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105505823A
CN105505823A CN201511021497.6A CN201511021497A CN105505823A CN 105505823 A CN105505823 A CN 105505823A CN 201511021497 A CN201511021497 A CN 201511021497A CN 105505823 A CN105505823 A CN 105505823A
Authority
CN
China
Prior art keywords
psychrophile
conditions
soluble fertilizer
yeast
liquid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201511021497.6A
Other languages
English (en)
Inventor
任莉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BEIJING VOTO BIOTECH Co Ltd
Original Assignee
BEIJING VOTO BIOTECH Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by BEIJING VOTO BIOTECH Co Ltd filed Critical BEIJING VOTO BIOTECH Co Ltd
Priority to CN201511021497.6A priority Critical patent/CN105505823A/zh
Publication of CN105505823A publication Critical patent/CN105505823A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C05FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05BPHOSPHATIC FERTILISERS
    • C05B7/00Fertilisers based essentially on alkali or ammonium orthophosphates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C05FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05GMIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
    • C05G3/00Mixtures of one or more fertilisers with additives not having a specially fertilising activity
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C05FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05GMIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
    • C05G3/00Mixtures of one or more fertilisers with additives not having a specially fertilising activity
    • C05G3/80Soil conditioners
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16Yeasts; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Fertilizers (AREA)

Abstract

本发明公开了一种复合微生物菌剂及其水溶性肥料和应用。本发明的复合微生物菌剂是微生物发酵生产的富含氨基酸的高有机质酵母发酵液体以及中药提取废液的混合物,制备方法简单,无需无菌条件,成本低廉;本发明的复合微生物菌剂以枯草芽孢杆菌、酵母菌、低温菌VT16、低温菌VT19为组合菌株,利用发酵生产的富含氨基酸的高有机质液体和中药提取废液为原料,通过混合接种发酵制备,营养全面,既可以提供作物生长所需要的营养元素,又可以抑制有害微生物的繁殖;该复合微生物菌剂再与作物必需的N、P、K养分结合,添加的养分可提供植物生长所需,并且吸收率高,吸收效果好;添加的微生物能够抑制植物病原菌的生长,预防重茬病害,促进农作物的生长及诱导植物产生抗性。

Description

一种复合微生物菌剂及其水溶性肥料和应用
技术领域
本发明涉及一种农业肥料技术领域,具体的说,涉及一种复合微生物菌剂、含有该复合微生物菌剂的水溶性肥料及其应用。
背景技术
水溶性肥料是一种可以快速、完全地溶于水的多元复合肥料,水溶肥的优势是溶解速度快,无残留,作物吸收利用率高。国外对水溶肥的研究较早,目前在一些工业发达的国家,水溶肥已经被广泛的用来灌溉温室中种植的蔬菜、果树、花卉以及高尔夫球场的草坪,园林绿化植物等,有的甚至还用来养护家庭绿化植物。
与传统的过磷酸钙、造粒复合肥等品种相比,水溶性肥料具有明显的优势,水溶性好、无残渣,可以完全溶解于水中,能被作物的根系和叶面直接吸收利用。采用水肥同施,以水带肥,实现了水肥一体化,它的有效吸收率高出普通化肥一倍多,达到80%-90%;而且肥效快,可解决高产作物快速生长期的营养需求。配合滴灌系统需水量仅为普通化肥的30%,而施肥作业几乎可以不用人工,大大节约了人力成本。
美国在1965年就已经有了片状水溶肥的专利产品。我国水溶肥起步较晚,但近几年发展迅速。2001年山东省农业科学院的卢丽萍等对高浓度多元素液体肥料进行了研究,并申请了专利。其中大量元素质量分数≥30%,微量元素质量分数≥10%,此高浓度多元素液体肥料成本低,养分全,不沉淀,抗盐碱;产品配方中尿素和硝铵合理搭配,引入硝态氮和中微量元素,通过磷酸调控体系酸性,钾源采用硝酸钾和氯化钾的混合物。随着我国水肥一体化进程的迅猛发展,水溶性肥料成为未来肥料发展的重点。
目前市售的水溶性肥料大多仅仅是尿素、硝酸钾、硫酸钾、水溶性磷酸一铵等原料的混配,容易受潮结块,而且杂质过多,水溶性差,严重影响了水溶肥的销售;并且长期大量的使用化肥,会导致土壤中有机肥力不足,养分比例严重失调。由于中国农村人多地少的实际情况,使得大部分种植农户没有多余的土地倒茬,所以在同一块土地上连续种植一种单一的作物,连续吸收某种元素越来越多,重茬时间越长,养分失衡越严重。同时,作物从土壤中吸收养分生长的同时,排泄一些自生的代谢废弃物,也会对作物自身产生毒性,而目前采用的化学防治病害的方法,除了对土壤的肥力有影响外,还会导致土壤微生物菌群的失调。
复合生物肥料本身含有丰富的氨基酸、纤维素,胶体物质以及焦糖等各种有机物,同时含有丰富的氮、磷、钾、有机质等多种营养元素,具有很好的肥效,因此,越来越多的研究集中在含有复合生物肥料的水溶性肥料上。因此,本发明提出了一种含有复合微生物肥料的水溶性肥料。
发明内容
本发明的目的在于提供一种复合微生物菌剂。该复合微生物菌剂特别适用于养护土壤。
本发明的另一目的在于提供一种含有上述复合微生物菌剂的水溶性肥料及其应用。所述水溶性肥料可用于植物叶面的喷施或灌溉,既能抑制植物病原菌的生长,促进农作物的生长及诱导植物产生抗性的作用,还能够养护土壤,维持土壤微生物结构的合理性。
本发明还提供了上述复合微生物水溶性肥料的制备方法。
本发明所述的复合微生物菌剂是由下述菌种联合培养以后得到的,所述菌种为枯草芽孢杆菌、酵母菌、低温菌VT16、低温菌VT19四种菌;所述培养方法的步骤如下:
1)将枯草芽孢杆菌、低温菌VT16、低温菌VT19分别接种于液体NA培养基中,酵母菌接种于液体PDA培养基中,酵母菌15~38℃条件下,100~200r/min摇床培养2~6天,枯草芽孢杆菌15~42℃条件下、100~200r/min摇床培养1~3天,低温菌VT16、低温菌VT19在15~25℃条件下、100~200r/min摇床培养1~3天,单菌种液体培养OD600值2.0-4.0之间时停止培养,制得一级种子;
2)二级种子培养:按液体培养基的体积比为5~20%的接种量,将一级种子分别接种于发酵罐中,酵母菌15~38℃条件下,搅拌速度为100~200r/min,通气量为1:0.5~1.5,培养2~6天,枯草芽孢杆菌15~42℃条件下、搅拌速度为100~200r/min,通气量为1:0.5~1.5,培养1~3天,低温菌VT16、低温菌VT19在15~25℃条件下,搅拌速度为100~200r/min,通气量为1:0.5~1.5,培养1~3天,制得二级种子;
3)混合发酵培养:按体积比为5~20%的接种量,将二级种子分别接种于在酵母发酵的副产物中进行高密度发酵培养;
4)将高密度发酵培养混合物和黄芪或党参或松枝的提取副产物液体按照9~6:1~4的比例进行混合,获得复合微生物菌剂。其中,步骤1)和2)中,所述NA培养基配方为:牛肉膏3g;蛋白胨10g;NaCl5g;琼脂10-20g;水1000mL;pH7.0-7.2,121℃灭菌20min;
所述PDA培养基配方为:土豆200g;蔗糖20g;琼脂15-20g;水1000mL;pH自然,121℃灭菌20min。
固态培养基与液态培养基的区别在于固态培养基在制备过程中添加了适量的琼脂。
步骤3)中,所述的酵母发酵的副产物为酵母发酵后的液体,其中有机质含量为20%~45%,无机氮的含量为1%~6%,无机磷的含量为0.3%~0.8%,无机钾的含量为4.0%~5.5%。酵母发酵后的液体中含有丰富的纤维素,胶体物质以及焦糖等各种复杂的有机物,同时还含有植物生长所必需的大量元素氮、磷、钾等,具有很好的肥效,但是其中大分子有机质的含量也较高,若直接施用,不能被植物吸收利用,也会给环境带来一定的负担,因此需对其进行适当处理后再施用。
步骤3)中,所述的高密度发酵培养采用补料分批培养方式,其中补料碳源为:葡萄糖、甘油、蔗糖、糖蜜其中任一种或其混合物;氮源为:硫酸铵、牛肉膏、蛋白胨其中任一种或其混合物。
步骤3)中,发酵培养过程为有氧培养:起始0~24小时内,间隔通气,保持在有氧条件发酵,通气量1:1~1.5,调控发酵溶解氧5~15%,搅拌转速150-200r/min,搅拌间隔时间1~3小时,搅拌1~3分钟,温度25~35℃。
步骤4)中,所述的黄芪或党参或松枝的提取副产物液体为黄芪、党参或松枝进行有效组分提取以后得到的提取液;
所述的提取有效组分的方法是中药领域常用的提取方法如浸提法、渗漉法、回流提取法等,将上述方法得到的黄芪或党参或松枝的提取液作为原料均可以制备本发明所述的复合水溶性肥料。这种液体浸提液中有机质含量为5%~10%,并含有生物碱、苷类、萜类、黄酮类、甾类、醌类、氨基酸等活性物质,具有抑制作物土传病害的功能。但是,直接采用上述中草药的提取液对土壤有一定毒副作用,不能直接利用,通过微生物发酵可以将原料中的有毒物质分解;另外,该提取液与上述酵母发酵副产物相同,其大分子有机质的含量较高,若直接施用,不能被植物吸收利用,因此需进行微生物发酵后,将其分解为小分子物质方可施用。
优选的,所述的菌种组合重量比,枯草芽孢杆菌:酵母菌:低温菌VT16:低温菌低温菌VT19=(1~3):1:1:(0.5~1)。
本发明还提供一种复合微生物水溶性肥料。
所述的复合微生物水溶性肥料为:在上述复合微生物菌剂中添加以下重量百分比的成分:磷酸一铵4-8%,尿素3-6%,磷酸二氢钾2-6%,然后分装,所述的复合微生物水溶性肥料中的活菌含量大于10亿/mL。一般为中性棕色液体,适用于稀释后喷洒于植物茎叶表面或稀释后浇湿于植株根部土壤。
本发明的复合微生物菌剂主要是微生物发酵富含氨基酸的高有机质含量的发酵副产物,以及中药提取废液制得,制备方法简单,无需无菌条件,成本低廉;
本发明的复合菌剂以枯草芽孢杆菌、酵母菌、低温菌VT16、低温菌低温菌VT19为组合菌株,利用发酵生产的富含氨基酸的高有机质液体和中药提取废液为原料,通过混合接种发酵制备,将酵母发酵后的液体以及中药提取废液中的大分子有机质的含量变成小分子物质,同时还利用了酵母发酵液中丰富的纤维素,胶体物质以及焦糖等各种复杂的有机物,以及中药提取废液中的糖类、蛋白质、木质素等成分,且中药提取废液本身还具有一定的抑制病原微生物生长的作用,低温菌VT16、低温菌低温菌VT19作为低温菌剂能够在低温环境下快速繁殖,并定植于土壤中,能够有效的抑制植物病原菌的生长,因此该微生物复合菌剂营养全面,既可以提供作物生长所需要的营养元素,又可以抑制有害微生物的繁殖;
在此微生物复合菌剂的基础上,再与作物必需的N、P、K养分结合,生产出三合一的水溶肥产品,其中的微生物具有抑制植物病原菌的生长,预防重茬病害,促进农作物的生长及诱导植物产生抗性的作用,所生产的含微生物的水溶肥中添加的养分可提供植物生长所需,并且吸收率高,吸收效果好。实验证明,本发明所述的复合微生物水溶肥产品在作物重茬、病害发生较重的的地区有显著效果。
具体实施方式
为了更好的理解发明实质,下面用实例来详细说明发明的技术内容,但本发明的内容并不局限于此。
本实施例中采用的枯草芽孢杆菌、酵母菌、低温菌VT16、低温菌VT19四种菌均为市售菌种(购自北京沃土天地生物科技股份有限公司)。
实施例1
按照以下步骤制备本发明所述的复合微生物菌剂和复合微生物水溶性肥料。
1)将枯草芽孢杆菌、低温菌VT16、低温菌低温菌VT19接种于液体NA培养基中,酵母菌接种于液体PDA培养基中,酵母菌15℃条件下,200r/min摇床培养2天,枯草芽孢杆菌15℃条件下、100r/min摇床培养1天,低温菌VT16、低温菌VT19在15℃条件下、100r/min摇床培养1天,单菌种液体培养OD600值均达到2.0,制得一级种子;
PDA培养基配方:
土豆200g、蔗糖20g、琼脂20g,水1000mL、pH自然,121℃灭菌20min。
NA培养基配方:
牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、琼脂20g、水1000mL、pH7.0,121℃灭菌20min。
2)二级种子培养:按液体培养基的体积比为5%的接种量,将一级种子分别接种于发酵罐中,酵母菌15℃条件下,搅拌速度为100r/min,通气量为1:0.5,培养2天,枯草芽孢杆菌15℃条件下、搅拌速度为100r/min,通气量为1:0.5,培养1天,低温菌VT16、低温菌VT19在15℃条件下,搅拌速度为100r/min,通气量为1:0.5,培养1天,制得二级种子液;
3)混合发酵培养:分别以体积比为5%的接种量接种二级种子液于高有机质液体和中药提取废液发酵罐中,进行高密度发酵培养。
4)将发酵好的高有机质液体和中药提取废液按照6:4的比例进行混合,获得半成品。
其中,所述的高密度发酵培养采用补料分批培养方式,其中补料碳源为:葡萄糖、甘油、蔗糖、糖蜜其中任一种或其混合物;氮源为:硫酸铵、牛肉膏、蛋白胨其中任一种或其混合物,
高密度发酵培养过程为有氧培养:起始0~24小时内,间隔通气,保持在有氧条件发酵,通气量1:1,调控发酵溶解氧5%,搅拌转速150r/min,搅拌间隔时间3小时,搅拌1分钟,温度25℃。
5)向发酵好的高有机质液体和中药提取废液混合液体中添加磷酸一铵4%、尿素3%,磷酸二氢钾2%,添加的总养分量9%以内。
6)将5)制备的产品进行分装,制得含微生物的水溶肥料。
所述复合微生物水溶性肥料中,复合微生物的构成如下:
实施例2
按照以下步骤制备本发明所述的复合微生物菌剂和复合微生物水溶性肥料。
1)将枯草芽孢杆菌、低温菌VT16、低温菌VT19接种于液体NA培养基中,酵母菌接种于液体PDA培养基中,酵母菌38℃条件下,200r/min摇床培养6天,枯草芽孢杆菌42℃条件下、200r/min摇床培养3天,低温菌VT16、低温菌VT19在25℃条件下、200r/min摇床培养3天,单菌种液体培养OD600值均达到4.0,制得一级种子;
PDA培养基配方:
土豆200g、蔗糖20g、琼脂15g,水1000mL、pH自然,121℃灭菌20min。
NA培养基配方:
牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、琼脂20g、水1000mL、pH7.0,121℃灭菌20min。
2)二级种子培养:按液体培养基的体积比为20%的接种量,将一级种子分别接种于发酵罐中,酵母菌38℃条件下,搅拌速度为200r/min,通气量为1:1.5,培养6天,枯草芽孢杆菌42℃条件下、搅拌速度为200r/min,通气量为1:1.5,培养3天,低温菌VT16、低温菌VT19在25℃条件下,搅拌速度为200r/min,通气量为1:1.5,培养3天,制得二级种子;
3)混合发酵培养:分别以体积比为20%的接种量接种二级种子液于高有机质液体和中药提取废液发酵罐中,进行高密度发酵培养。
4)将发酵好的高有机质液体和中药提取废液按照7:3的比例进行混合,获得半成品。
其中,所述的高密度发酵培养采用补料分批培养方式,其中补料碳源为:葡萄糖、甘油、蔗糖、糖蜜其中任一种或其混合物;氮源为:硫酸铵、牛肉膏、蛋白胨其中任一种或其混合物。
发酵培养过程为有氧培养:起始0~24小时内,间隔通气,保持在有氧条件发酵,通气量1:1.5,调控发酵溶解氧15%,搅拌转速200r/min,搅拌间隔时间1小时,搅拌3分钟,温度35℃。
5)向发酵好的高有机质液体和中药提取废液混合液体中添加磷酸一铵6%、尿素8%,磷酸二氢钾6%,添加的总养分量20%以内。
6)将5)中的产品进行分装,制得含微生物的水溶肥料。
所述复合微生物水溶性肥料中,复合微生物的构成如下:
实施例3
按照以下步骤制备本发明所述的复合微生物菌剂和复合微生物水溶性肥料。
1)将枯草芽孢杆菌、低温菌VT16、低温菌VT19接种于液体NA培养基中,酵母菌接种于液体PDA培养基中,酵母菌30℃条件下,150r/min摇床培养4天,枯草芽孢杆菌37℃条件下、150r/min摇床培养2天,低温菌VT16、低温菌VT19在20℃条件下、150r/min摇床培养2天,单菌种液体培养OD600值均达到3.0,制得一级种子;
PDA培养基配方:
土豆200g、蔗糖20g、琼脂15g,水1000mL、pH自然,121℃灭菌20min。
NA培养基配方:
牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、琼脂15g、水1000mL、pH7.1,121℃灭菌20min。
固态培养基与液态培养基的区别在于固态培养基在制备过程中添加了适量的琼脂。
2)二级种子培养:按液体培养基的体积比为10%的接种量,将一级种子分别接种于发酵罐中,酵母菌30℃条件下,搅拌速度为150r/min,通气量为1:1,培养4天,枯草芽孢杆菌37℃条件下、搅拌速度为150r/min,通气量为1:1,培养2天,低温菌VT16、低温菌VT19在20℃条件下,搅拌速度为150r/min,通气量为1:1,培养2天,制得二级种子;
3)混合发酵培养:分别以体积比为10%的接种量接种二级种子液于高有机质液体和中药提取废液发酵罐中,进行高密度发酵培养。
4)将发酵好的高有机质液体和中药提取废液按照9:1的比例进行混合,获得半成品。
其中,所述的高密度发酵培养采用补料分批培养方式,其中补料碳源为:葡萄糖、甘油、蔗糖、糖蜜其中任一种或其混合物;氮源为:硫酸铵、牛肉膏、蛋白胨其中任一种或其混合物,
发酵培养过程为有氧培养:起始0~24小时内,间隔通气,保持在有氧条件发酵,通气量1:1.3,调控发酵溶解氧10%,搅拌转速180r/min,搅拌间隔时间2小时,搅拌2分钟,温度30℃。
5)向发酵好的高有机质液体中添加磷酸一铵5%、尿素6%,磷酸二氢钾4%,添加的总养分量15%以内。
6)将5)中的产品进行分装,制得含微生物的水溶肥料。
所述复合微生物水溶性肥料中,复合微生物的构成如下:
实验例1
实验对象:选取连续种植番茄三茬的大棚,继续种植番茄,并设置对照组。
实验方法:种植前,将实施例3所述的肥料稀释200倍,对种子进行浸种处理,对照组不处理。在植物生长期,用实施例3所述的水溶肥稀释液(200倍)进行叶面喷施,一般10~15天一次,对照组利用清水进行叶面喷施。
实验结果:试验结束时,使用本水溶肥的番茄株均鲜重为4.2克,干重为0.3克。对照组番茄均鲜重为2.2克,干重为0.1克。
实验组番茄株发病率为3%-7%;对照组的番茄株发病率为20%-37%。发病率计算为:死苗数/定植苗数。
防治效果(%)为92%-65%,防治效果(%)=(对照发病率-处理发病率)/对照发病率*100。
实验例2
实验对象:选取连续种植黄瓜两茬的大棚,继续种植黄瓜,并设置对照组。
实验方法:种植前,将实施例7所述的肥料稀释500倍,对种子进行浸种处理,对照组不处理。在植物生长期,用实施例7所述的水溶肥稀释液(500倍)进行叶面喷施,一般7~10天一次。对照组利用市售的EM菌剂进行叶面喷施。
实验结果:试验结束时,使用本水溶肥的黄瓜株均鲜重为4.6克,干重为0.4克;对照组黄瓜株均鲜重为3.3克,干重为0.2克。
实验组黄瓜的发病率为3%-8%,对照组黄瓜的发病率为33%-45%,发病率计算为:发病株/施用肥料总株数。
发病株主要表现为死苗,枯秧等现象。防治效果(%)为93%-76%,防治效果(%)=(对照发病率-处理发病率)/对照发病率*100
上面对本发明的实施例作了详细说明,但是本发明并不限于上述实施例,在本领域普通技术人员所具备的知识范围内,还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出得各种变化,也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种复合微生物菌剂,其特征在于,所述的复合微生物菌剂是由下述菌种联合培养以后得到的,所述菌种为枯草芽孢杆菌、酵母菌、低温菌VT16、低温菌VT19四种菌;所述培养方法的步骤如下:
1)将枯草芽孢杆菌、低温菌VT16、低温菌VT19分别接种于液体NA培养基中,酵母菌接种于液体PDA培养基中,酵母菌15~38℃条件下,100~200r/min摇床培养2~6天,枯草芽孢杆菌15~42℃条件下、100~200r/min摇床培养1~3天,低温菌VT16、低温菌VT19在15~25℃条件下、100~200r/min摇床培养1~3天,单菌种液体培养OD600值2.0-4.0之间时停止培养,制得一级种子;
2)二级种子培养:按液体培养基的体积比为5~20%的接种量,将一级种子分别接种于发酵罐中,酵母菌15~38℃条件下,搅拌速度为100~200r/min,通气比为1:0.5~1.5,培养2~6天,枯草芽孢杆菌15~42℃条件下、搅拌速度为100~200r/min,通气比为1:0.5~1.5,培养1~3天,低温菌VT16、低温菌VT19在15~25℃条件下,搅拌速度为100~200r/min,通气比为1:0.5~1.5,培养1~3天,制得二级种子;
3)混合发酵培养:按体积比为5~20%的接种量,将二级种子分别接种于在酵母发酵的副产物中进行高密度发酵培养;
4)将高密度发酵培养混合物,与黄芪或党参或松枝的提取副产物液体按照9~6:1~4的比例进行混合,获得复合微生物菌剂。
2.根据权利要求1所述的复合微生物菌剂,其特征在于,步骤1)和2)中,所述NA培养基配方为:牛肉膏3g;蛋白胨10g;NaCl5g;琼脂10-20g;水1000mL;pH7.0-7.2,121℃灭菌20min;
所述PDA培养基配方为:土豆200g;蔗糖20g;琼脂15-20g;水1000mL;pH自然,121℃灭菌20min。
3.根据权利要求1所述的复合微生物菌剂,其特征在于,步骤3)中,高密度发酵培养过程为有氧培养:起始0~24小时内,间隔通气,保持在有氧条件发酵,通气量1:1~1.5,调控发酵溶解氧5~15%,搅拌转速150-200r/min,搅拌间隔时间1~3小时,搅拌1~3分钟,温度25~35℃,至活菌数总数大于10亿/mL且小于100亿/mL时,停止培养。
4.根据权利要求1或3所述的复合微生物菌剂,其特征在于,步骤3)中,所述高密度发酵培养采用补料分批培养方式,其中补料碳源为:葡萄糖、甘油、蔗糖、糖蜜其中任一种或其混合物;氮源为:硫酸铵、牛肉膏、蛋白胨其中任一种或其混合物。
5.根据权利要求1所述的复合微生物菌剂,其特征在于,所述菌种组合为下述重量比的组合:枯草芽孢杆菌:酵母菌:低温菌VT16:低温菌VT19=(1~3):1:1:(0.5~1)。
6.根据权利要求1-5任意一项所述的复合微生物菌剂的复合微生物水溶性肥料,其特征在于,所述的复合微生物水溶性肥料为:在权利要求1-5任意一项所述的复合微生物菌剂中添加以下重量百分比的成分:磷酸一铵4-8%,尿素3-6%,磷酸二氢钾2-6%,然后分装,使复合微生物水溶性肥料中的活菌含量大于10亿/mL。
7.根据权利要求1-5任意一项所述的复合微生物菌剂的应用,其特征在于,用于制备水溶性肥料。
8.根据权利要求6所述的水溶性肥料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将枯草芽孢杆菌、低温菌VT16、低温菌VT19分别接种于液体NA培养基中,酵母菌接种于液体PDA培养基中,酵母菌15~38℃条件下,100~200r/min摇床培养2~6天,枯草芽孢杆菌15~42℃条件下、100~200r/min摇床培养1~3天,低温菌VT16、低温菌VT19在15~25℃条件下、100~200r/min摇床培养1~3天,单菌种液体培养OD600值2.0-4.0之间时停止培养,制得一级种子;
2)二级种子培养:按液体培养基的体积比为5~20%的接种量,将一级种子分别接种于发酵罐中,酵母菌15~38℃条件下,搅拌速度为100~200r/min,通气量为1:0.5~1.5,培养2~6天,枯草芽孢杆菌15~42℃条件下、搅拌速度为100~200r/min,通气量为1:0.5~1.5,培养1~3天,低温菌VT16、低温菌VT19在15~25℃条件下,搅拌速度为100~200r/min,通气量为1:0.5~1.5,培养1~3天,制得二级种子;
3)混合发酵培养:按体积比为5~20%的接种量,将二级种子分别接种于在酵母发酵的副产物中进行高密度发酵培养;
4)将高密度发酵培养混合物和黄芪或党参或松枝的提取副产物液体按照9~6:1~4的比例进行混合,获得复合微生物菌剂;5)向复合微生物菌剂中添加以下重量百分比的成分:磷酸一铵4-8%,尿素3-6%,磷酸二氢钾2-6%,然后分装,使复合微生物水溶性肥料中的活菌含量大于10亿/mL。
9.根据权利要求6所述的复合微生物水溶性肥料的应用。
CN201511021497.6A 2015-12-31 2015-12-31 一种复合微生物菌剂及其水溶性肥料和应用 Pending CN105505823A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511021497.6A CN105505823A (zh) 2015-12-31 2015-12-31 一种复合微生物菌剂及其水溶性肥料和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511021497.6A CN105505823A (zh) 2015-12-31 2015-12-31 一种复合微生物菌剂及其水溶性肥料和应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105505823A true CN105505823A (zh) 2016-04-20

Family

ID=55714124

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201511021497.6A Pending CN105505823A (zh) 2015-12-31 2015-12-31 一种复合微生物菌剂及其水溶性肥料和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105505823A (zh)

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106064974A (zh) * 2016-06-06 2016-11-02 烟台中惠化肥有限公司 一种含生物菌的水溶肥及其制备工艺
CN108456058A (zh) * 2018-02-28 2018-08-28 北京沃土天地生物科技股份有限公司 一种液体复合微生物肥料及其制备方法
CN109912354A (zh) * 2019-04-22 2019-06-21 广西微保农生物技术有限公司 一种利用微生物高温发酵农用废弃物制备生物有机肥的方法
CN110100552A (zh) * 2018-03-29 2019-08-09 湖北格林凯尔精准农业研究院 一种平衡水溶肥栽培黄瓜的施肥方法
CN110438019A (zh) * 2019-06-06 2019-11-12 浙江工业大学 一种复合菌剂及其发酵餐厨垃圾制备有机液体肥料的应用
CN110467488A (zh) * 2019-09-15 2019-11-19 钟建勇 一种含聚能酶的水溶性肥料及其制备方法
CN111019848A (zh) * 2019-12-26 2020-04-17 郑州浩创农业科技有限公司 一种抗病型功能菌剂及其制备方法
CN111758856A (zh) * 2020-07-10 2020-10-13 福建省恒祥渔业有限公司 一种利用水产加工副产物生产微生态营养液的方法
CN112602511A (zh) * 2020-11-20 2021-04-06 云士智能科技(上海)有限公司 一种柑橘栽培中柑橘黄龙病的抑制方法
CN114516772A (zh) * 2021-08-30 2022-05-20 鹤壁市禾盛生物科技有限公司 一种高氮有机液肥快速发酵制备方法
CN111302857B (zh) * 2020-02-26 2022-07-05 新疆农垦科学院 一种滴灌西红柿用水溶性有机生物菌肥及制备方法
CN117778222A (zh) * 2023-09-19 2024-03-29 中国科学院兰州化学物理研究所 一种党参专用复合微生物菌剂及其制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1762917A (zh) * 2005-09-01 2006-04-26 孙明坤 一种微生物有机肥及其制备方法
CN102815974A (zh) * 2011-06-07 2012-12-12 山西昌鑫生物农业科技有限公司 复合微生物冲施肥制备方法
CN104973899A (zh) * 2014-04-02 2015-10-14 绿丰源(天津)生物科技有限公司 一种生物有机肥料及其制备方法
CN105039210A (zh) * 2015-06-29 2015-11-11 北京沃土天地生物科技有限公司 一种复合菌剂及其水溶肥和应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1762917A (zh) * 2005-09-01 2006-04-26 孙明坤 一种微生物有机肥及其制备方法
CN102815974A (zh) * 2011-06-07 2012-12-12 山西昌鑫生物农业科技有限公司 复合微生物冲施肥制备方法
CN104973899A (zh) * 2014-04-02 2015-10-14 绿丰源(天津)生物科技有限公司 一种生物有机肥料及其制备方法
CN105039210A (zh) * 2015-06-29 2015-11-11 北京沃土天地生物科技有限公司 一种复合菌剂及其水溶肥和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
司丽娜: "微生物菌肥菌种分离、鉴定及混合发酵", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库》 *
张培寅: "工农业废渣无公害有机肥的研究", 《节能与环保》 *

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106064974A (zh) * 2016-06-06 2016-11-02 烟台中惠化肥有限公司 一种含生物菌的水溶肥及其制备工艺
CN108456058A (zh) * 2018-02-28 2018-08-28 北京沃土天地生物科技股份有限公司 一种液体复合微生物肥料及其制备方法
CN110100552A (zh) * 2018-03-29 2019-08-09 湖北格林凯尔精准农业研究院 一种平衡水溶肥栽培黄瓜的施肥方法
CN109912354A (zh) * 2019-04-22 2019-06-21 广西微保农生物技术有限公司 一种利用微生物高温发酵农用废弃物制备生物有机肥的方法
CN110438019B (zh) * 2019-06-06 2021-04-06 浙江工业大学 一种复合菌剂及其发酵餐厨垃圾制备有机液体肥料的应用
CN110438019A (zh) * 2019-06-06 2019-11-12 浙江工业大学 一种复合菌剂及其发酵餐厨垃圾制备有机液体肥料的应用
CN110467488A (zh) * 2019-09-15 2019-11-19 钟建勇 一种含聚能酶的水溶性肥料及其制备方法
CN111019848A (zh) * 2019-12-26 2020-04-17 郑州浩创农业科技有限公司 一种抗病型功能菌剂及其制备方法
CN111302857B (zh) * 2020-02-26 2022-07-05 新疆农垦科学院 一种滴灌西红柿用水溶性有机生物菌肥及制备方法
CN111758856A (zh) * 2020-07-10 2020-10-13 福建省恒祥渔业有限公司 一种利用水产加工副产物生产微生态营养液的方法
CN112602511A (zh) * 2020-11-20 2021-04-06 云士智能科技(上海)有限公司 一种柑橘栽培中柑橘黄龙病的抑制方法
CN112602511B (zh) * 2020-11-20 2023-08-22 云士智能科技(上海)有限公司 一种柑橘栽培中柑橘黄龙病的抑制方法
CN114516772A (zh) * 2021-08-30 2022-05-20 鹤壁市禾盛生物科技有限公司 一种高氮有机液肥快速发酵制备方法
CN117778222A (zh) * 2023-09-19 2024-03-29 中国科学院兰州化学物理研究所 一种党参专用复合微生物菌剂及其制备方法
CN117778222B (zh) * 2023-09-19 2024-05-28 中国科学院兰州化学物理研究所 一种党参专用复合微生物菌剂及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105505823A (zh) 一种复合微生物菌剂及其水溶性肥料和应用
CN103964946B (zh) 一种水稻专用复合微生物肥料及其制备方法
CN104609979B (zh) 一种改良盐碱土壤的微生物菌肥及其制备方法
CN103571766B (zh) 一种液体微生物叶面肥、其生产方法及应用
CN102010240B (zh) 植物用酵素叶面肥及其制备方法
CN105039210B (zh) 一种复合菌剂及其水溶肥和应用
CN104789490B (zh) 一种复合微生物腐熟菌剂、制备方法及应用
CN106748341A (zh) 马铃薯专用微生物菌肥及其制备方法
CN104496712B (zh) 豆角芸豆专用肥料及其制备方法和施肥方法
CN102965319B (zh) 冬枣专用微生物菌剂、生物有机肥及其制备方法
CN103467185A (zh) 生物复合有机菌肥
CN105859395A (zh) 一种微生物抗逆抗病叶面肥的生产方法
CN106242829A (zh) 一种克服丹参重茬障碍的土壤修复有机肥、制备方法及其用途
CN104692961A (zh) 一种微生物有机物料腐熟剂及其制备方法和应用
CN109721421A (zh) 一种含海藻多糖和黄腐酸复合增效磷肥的制备及应用
CN104058875A (zh) 一种绿色蔬菜的培养土及其制备方法
CN106007824B (zh) 一种复合菌肥及其制备方法和应用
CN112573970A (zh) 一种用于改良盐碱地的固态复合微生物叶面肥及其应用
CN111348957A (zh) 一种功能全面的酵素生物冲施肥及制备工艺
CN102219613B (zh) 绿色多功能复合生态有机液肥及其加工方法
CN106380269A (zh) 一种克服西瓜重茬障碍的土壤修复有机肥、制备方法及其用途
CN107686418A (zh) 液体有机肥料及其制备方法
CN106495936A (zh) 一种有机肥料
CN102775233A (zh) 新型杀虫抑菌生物肥料及其制备方法
CN111302857B (zh) 一种滴灌西红柿用水溶性有机生物菌肥及制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20160420