CN105473005A - 包含山楂和植物甾醇的乳制品组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用于制备包含植物甾醇和山楂果实组合物的乳制品组合物的方法,并且涉及这种乳制品组合物及其用于治疗、缓解或预防与高胆固醇血症和/或高脂血症相关的疾病的用途。
Description
技术领域
本发明涉及包含功能性配料的乳制品组合物,如食品和饮料。具体地讲,功能性配料对健康有益处,如有益心血管健康。
背景技术
本说明书中对现有技术的任何论述绝不应被视为承认此现有技术是广泛已知的或构成本领域公知常识的一部分。
心血管疾病(CVD)是全球死亡和残疾的主要原因。每年,受到CVD严重影响的人数都比受任何其他原因影响的人数要多。根据WHO的报告,2008年估计有1730万人死于CVD,占全球死亡人数的30%。在这些死亡人数中,估计有730万人死于冠心病,有620万人死于中风。到2030年,预计将有大约2360万人死于CVD,其中大部分将是死于心脏病和中风。根据预测,这些仍将是导致死亡的一大主要因素。
众所周知,山楂和植物甾醇对健康有益。然而,这两种配料有其各自的局限性。
山楂是蔷薇科观花灌木,在心血管疾病应用方面有着悠久的历史,最早可追溯到公元1世纪。山楂属于山楂(Crataegus)属。山楂已被证实在降血脂方面具有发展潜力[1][5]。根据中国的法规,山楂可用作普通食品或功能性食品。根据中国药典的记载,山楂(Crataeguspinnatifida)的果实和树叶用作草药的日推荐剂量分别为9至12g干果(相当于60至80g鲜果)[6]以及3至10g树叶[7]。然而,为了达到生物学上显著的效果,需要每天食用山楂果汁,但这样做常常会因其酸味而导致胃部不适。
由于山楂具有酸性,因此很难把山楂掺到对pH敏感的食品和饮料基质(诸如牛奶和乳制品基质)中而不对此类基质的口感、味道和其他感官特性造成影响。
此外,山楂萃取物在降低血液中甘油三酯方面的效果有限[1],而血脂中的甘油三酯是引起心血管疾病的重要风险因素。
已知植物甾醇能够通过减少内脏中的胆固醇吸收来降低血液中总胆固醇和LDL胆固醇的浓度。每天摄入约1.5g至2.4g的植物甾醇(或其饱和形式,即甾烷醇)与LDL胆固醇降低7%至10.5%相关[2]。通常在前两到三周内就会见效。持续时间长达85周的研究显示,在此期间内一直都有效果。根据目前的发现和研究,EFSANDA专家组还推断,诸如酸奶和牛奶之类的食品,包括低脂酸奶和奶酪、人造黄油型涂酱、蛋黄酱、沙拉酱及其他乳制品最适合为人体提供植物甾烷醇和植物甾醇而产生降胆固醇的作用。至于其他食物,要么缺少信息,要么表现为在降低血胆固醇水平方面不够有效。
然而,植物甾醇也有一些不利的局限性。例如,植物甾醇会抑制α-胡萝卜素和β-胡萝卜素的吸收。β-胡萝卜素是维生素A的重要来源。而维生素A对于生长发育是必不可少的。
当以避免明显不利副作用或肠道不适的低剂量施用时,山楂或植物甾醇对降血脂或胆固醇的作用在统计学上没有显著的效果。
含有乳脂的乳制品是饱和脂肪的主要食物来源,约占美国饮食中总饱和脂肪摄入量的21%。已经假定,食用乳制品会影响CVD风险,因为饱和脂肪的高摄入会增加患CVD的风险。然而,前瞻性队列研究的若干荟萃分析并没有提供一致的证据来证明牛奶及乳制品的更高摄入量(不考虑乳脂水平)与CVD、冠心病(CHD)或中风风险的增加相关[3][4]。此外,低脂和无脂的牛奶和牛奶制品被推荐作为健康饮食的一部分,通过维持健康的血脂和脂蛋白胆固醇水平来降低CVD风险。
授予NestecS.A.的WO2013/117008A1涉及山楂和植物甾醇的协同保护效果,在统计学上山楂和植物甾醇能够显著降低血脂以及降低血液中的LDL胆固醇浓度,同时还能保持足够低的植物甾醇和山楂个体剂量,以免出现不利的副作用和不适。该文献并未描述如何制备山楂果实组合物。
授予UnileverN.V.的WO2007/039040A1公开了一种包含甾醇和山楂萃取物的食品,这种食品中的甾醇与齐墩果酸和熊果酸总量的重量比为1:10至50:1,并且其中甾醇的重量比在从0.1%至20%的范围内。山楂萃取物通过用有机溶剂进行萃取而获得,例如可利用二氯甲烷进行萃取而获得。应避免使用山楂本身或山楂果汁,因为它们的活性成分(齐墩果酸和熊果酸)的浓度很低。相同作者撰写的一篇文章论述了山楂(Crataeguspinnatifida)的有机溶剂萃取物、其三萜酸(齐墩果酸和熊果酸)含量以及此类萃取物对仓鼠和人体的Caco-2细胞的胆固醇代谢的影响[9]。
CN101361506A论述了发酵乳及其制备方法,该制备方法涉及在水中制备标准山楂萃取物,然后把得到的标准山楂萃取物与牛奶和乳制品发酵剂混合,以制备酸奶类产品。山楂用作乳酸菌生长促进剂。
CN101243810A论述了一种有益于心脏健康的酸奶,这种酸奶包含植物甾醇或植物甾烷醇酯。
因此,很明显,本领域需要的是可安全使用、没有副作用并且能够降低心血管障碍发生风险的天然制剂。还需要克服或减轻现有技术的至少一个缺陷,或者提供一种可用的替代物。具体地讲,需要提供利用山楂和植物甾醇之间的协同效应的食物和饮料产品。特别地,需要提供利用山楂和植物甾醇之间的协同效应而不会影响此类乳制品的性质(包括但不限于口感、味道或从粉末到液体的重构)的乳制品。
发明内容
为此,本发明的第一方面提出一种用于制备包含植物甾醇和山楂果实的乳制品组合物的方法,所述方法包括以下步骤:
1)如下制备山楂果实组合物:a)制备山楂果浆,b)从所述果浆中去除山楂籽,c)将所述果浆进行均质化,d)将所述均质化的果浆的pH值调节到从4至6的范围内,e)对所述果浆进行热处理,以及f)任选将所述热处理的果浆干燥成山楂果实粉末,
2)将所述山楂果实组合物与乳制品基质混合,以及
3)在所述混合步骤2)之前、同时或之后将植物甾醇与所述乳制品基质混合。
本发明的另一个方面提出一种包含植物甾醇和山楂果实的乳制品组合物。这种乳制品组合物可例如通过执行根据本发明第一方面的方法来获得。
本发明的另一个方面提出一种包含植物甾醇和山楂果实的乳制品,这种乳制品用于治疗、缓解或预防与高胆固醇血症和/或高脂血症相关的疾病。
本领域的技术人员在结合附图阅读对本发明实施方案的详细描述后,会更清楚地了解本发明的这些及其他方面、特征和优点。
具体实施方式
除非语境明确另有要求,否则贯穿本说明书,词语“包括”、“包含”等都应解释为与排他性或穷举性含义相反的包容性含义,也就是说,是“包括但不限于”的意思。
如本说明书中所用,单数形式“一/一种”、“该/所述”包括复数指代物,除非语境明确地另有所指。
除非另有说明,否则本说明书中的所有百分比在适用的情况下,都指重量百分比。
除非另有定义,否则所有科技术语都具有并且应当被赋予与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。
在第一方面,本发明涉及用于制备包含植物甾醇和山楂果实的乳制品组合物的方法。该方法包括以下步骤:1)制备山楂果实组合物,2)将所述山楂果实组合物与乳制品基质混合,3)在所述混合步骤2)之前、同时或之后将植物甾醇与所述乳制品基质混合。
制备山楂果实组合物
为了制备山楂果实组合物,首先在水中压碎山楂果实,形成果浆。山楂果实以新鲜的果实,或以干燥的果实被提供。优选地,使用整颗山楂果实(包括果皮、果肉和籽)。优选地,在压碎之前先清洗,以便去除杂质。使用干燥的果实时,可在压碎之前使其复水。之后,用温度在80℃至95℃,优选地85℃至90℃范围内的水烹煮山楂果实。烹煮过程可持续20至60分钟,优选地持续30至45分钟。可使用标准工业烹煮设备。举例来说,山楂果实:水的重量比可以大约是1:1至1:4。优选地,一边烹煮一边搅拌,例如可以使用高速搅拌器。烹煮(任选在搅拌下进行)有助于使果肉与籽分离。同时还会使水果中的酶失去活性。优选地,从水基山楂果浆制备山楂果实组合物。
然后将果浆转移到滤网中,去除果浆中的籽。收集山楂果肉浆并均质化。可使用胶体磨对山楂果肉浆进行均质化。优选地,将山楂果肉研磨到粒度小于700微米,优选地小于500微米。通常,粒度会大于几微米,例如大于1微米,或大于10微米。例如,粒度在从1至700微米的范围内,优选地在1至500微米的范围内。
在此阶段,果浆的pH值通常低于3.5。之后,将均质化果浆的pH值调节到4至6,优选地4.5至5.5的范围内。可使用食品级KOH溶液来调节果浆的pH值。pH值调节是非常重要的一步,有助于避免山楂果实组合物与乳制品基质之间出现不希望的反应,诸如蛋白质沉淀反应。调节pH值还可确保乳制品组合物具有较长的保质期,在使用干果时,还可确保重构之后具有良好的稳定性。
优选地,在pH值调节之后,将山楂果浆进一步均质化至粒度小于300微米,优选地小于200微米。通常,粒度会大于几微米,例如大于1微米,或大于10微米。例如,粒度在1至300微米的范围内,优选地在1至200微米的范围内。在使用干果时,这样可得到在重构之后在乳制品基质中最稳定的粒度。
最后,对果浆进行热处理,优选地采用UHT处理(例如,在137℃下热处理20秒)。任选地,对热处理的果浆进行浓缩,提供山楂果实浓缩物。任选地,对热处理的果浆或山楂果实浓缩物进行干燥,提供山楂果实粉末。可通过例如喷雾干燥或冷冻干燥等传统方式进行干燥处理。
使用水作为溶剂,以去掉籽的完整山楂果实来制备山楂果实组合物。换句话说,使用水作为溶剂,基本上以山楂的果肉和果皮制备山楂果实组合物。这与使用有机溶剂萃取的其他萃取方法不同。事实上,在人或动物食用之前必须去除所有的痕量有机溶剂,而水是最理想的食品级介质。令人惊讶的是,通过这种方法得到的山楂果实组合物保留了有益特性,这与先前发表的文章的结果相反。可以干燥形式提供山楂果实粉末,诸如以粉末的形式,也可以浓缩形式提供山楂果实粉末,诸如以浓缩物的形式,还可以半液体形式提供山楂果实粉末,诸如以果浆或果泥的形式。
制备乳制品基质
乳制品基质使用标准乳制品技术来制备。例如,乳制品基质是乳制品粉末、奶粉、酸奶粉、发酵乳产品、酸奶、乳制品饮料或可饮用的酸奶。优选地,以奶粉作为乳制品基质,诸如脱脂奶粉、半脱脂奶粉或全脂奶粉。甚至更优选地,使用脱脂奶粉作为乳制品基质。
作为另外一种选择,乳制品基质可以是水性乳制品基质,诸如发酵乳产品,例如可饮用的酸奶或舀取式酸奶。
在一个实施方案中,乳制品基质不含乳糖。不含乳糖的产品更适合对乳糖不耐受的消费者。
制备乳制品组合物
乳制品组合物是如下制备的:将所述山楂果实组合物与乳制品基质混合,并且在混合山楂果实组合物之前、同时或之后将植物甾醇与所述乳制品基质混合。在一个实施方案中,乳制品组合物是乳制品粉末、奶粉、酸奶粉、发酵乳产品、酸奶、乳制品饮料或可饮用的酸奶。
优选地,当乳制品基质以粉末诸如奶粉提供时,山楂果实组合物也以粉末形式被提供。使用标准设备把山楂果实粉末和乳制品基质粉干混在一起。
当乳制品基质为水性乳制品基质诸如酸奶或乳饮料时,可以干粉、浓缩物、热处理的果浆或果泥的形式来添加山楂果实组合物。
可用于本发明目的的典型植物甾醇可从植物甾醇、甾烷醇或它们的组合中选择。例如,β-谷甾醇、菜油甾醇和/或豆甾醇。
植物甾醇可以化学上的纯化合物的形式提供。因此,可从植物来源中提纯植物甾醇,或者以化学方式合成植物甾醇。这样可实现非常精确的定量给料。同样,从天然来源或其萃取物中获取植物甾醇可能会更好一些。因此,植物甾醇可以是膳食植物甾醇。可通过植物油、坚果、谷类产品、蔬菜、水果、浆果或它们的萃取物来提供膳食植物甾醇。
优选地,乳制品组合物每份至少包含0.5g、1g或4g(干重)的山楂果实组合物。上面已经描述了山楂果实组合物的制备。山楂果实组合物通常占乳制品组合物干重的不到一半,或占乳制品组合物干重的不到40%。例如,在干性乳制品组合物诸如奶粉中,干性乳制品组合物中的山楂果实粉末占干性乳制品组合物重量的2%至40%。又如,在水性乳制品组合物诸如液体乳制品饮料、酸奶或即饮含乳饮料中,水性乳制品组合物中的山楂果实组合物占水性乳制品组合物重量的0.3%至5%。
优选地每份乳制品组合物至少包含0.25g、0.5g或0.6g的植物甾醇。优选地,每份乳制品组合物含有多达2.4g、1.8g或1.2g的植物甾醇。例如,在干性乳制品组合物诸如奶粉中,干性乳制品组合物中的植物甾醇占干性乳制品组合物重量的1%至6%。又如,在水性乳制品组合物诸如液体乳制品饮料、酸奶或即饮含乳饮料中,水性乳制品组合物中的植物甾醇占水性乳制品组合物重量的0.14%至0.75%。
例如,一份对应于10至25克奶粉(或体积相当的液态奶或液体乳制品组分),或对应于80至180克酸奶。优选地,推荐日摄入量为每天一份、两份或三份。日摄入量可取决于消费者的年龄、体重和饮食。在乳制品组合物中,乳制品基质是主要配料,这意味着它占组合物重量的一半以上。
例如,干性乳制品组合物,诸如上面提到的那些,包含重量占2%至40%的山楂果实粉末以及重量占1%至6%的植物甾醇,其余配料为乳制品基质,诸如奶粉、酸奶粉或其他乳制品粉末配料。干性乳制品组合物还可包含添加的维生素和/或矿物质。干性乳制品组合物还可包含甜味剂、乳化剂、亲水胶体、风味料和/或色素。干性乳制品组合物可不含乳糖。
例如,水性乳制品组合物,诸如上面提到的那些,包含重量占0.3%至5%的山楂果实组合物以及重量占0.14%至0.75%的植物甾醇,其余为乳制品基质,诸如牛奶、酸奶、含乳饮料或含酸奶饮料、或其他乳制品配料。水性乳制品组合物还可包含添加的维生素和/或矿物质。水性乳制品组合物还可包含甜味剂、乳化剂、亲水胶体、风味料和/或色素。水性乳制品组合物可不含乳糖。
山楂和植物甾醇的协同效应
发明人已经在仓鼠模型中发现,当同时施用山楂和植物甾醇时,山楂和植物甾醇会产生协同作用,在统计学上显著降低血脂和血液中LDL胆固醇浓度,同时还能保持足够低的植物甾醇和山楂个体剂量,以免出现不利的副作用和不适。
不希望被理论所束缚,本发明的发明人认为这种有益效果是因为山楂和植物甾醇同时增强了胆固醇排泄并减少了胆固醇吸收。
因此,本发明部分涉及一种包含植物甾醇和山楂的乳制品组合物,这种乳制品组合物用于治疗、缓解或预防与高脂血症和/或高胆固醇血症相关的疾病。
本发明还涉及植物甾醇和山楂在制备用于治疗、缓解或预防与高脂血症和/或高胆固醇血症相关的疾病的乳制品组合物中的用途。
优选地,用于治疗、缓解或预防与高脂血症和/或高胆固醇血症相关的疾病的乳制品组合物可以是干性乳制品组合物或水性乳制品组合物,如上所述。
与高脂血症和/或高胆固醇血症相关的疾病是本领域的技术人员所熟知的(参见(例如)以引用方式并入本文的BhatnagarD.etal.,BMJ2008;337:a993(BhatnagarD.等人,BMJ.2008,337:a993))。例如,高胆固醇血症是动脉粥样硬化或冠心病的一个主要原因。高脂血症以血液中的任何或所有脂质和/或脂蛋白水平异常升高为特征。例如,与高脂血症和/或高胆固醇血症相关的疾病可为心血管障碍。
心血管障碍是一组心脏和血管障碍,包括冠心病、脑血管疾病、外周动脉疾病、风湿性心脏病、深静脉血栓和肺栓塞等。“心血管障碍”泛指影响心血管系统的任何疾病,特别是指与动脉粥样硬化(动脉病变)有关的疾病。这些病症通常具有相似的起因、机制和治疗方法。
动脉粥样硬化是动脉内壁上积累的脂肪沉积物(诸如胆固醇),称为斑块。等到发现心脏问题时,动脉粥样硬化通常已经在几十年的时间里发展到了一定的程度。最常见的是,斑块突然破裂,导致形成血栓,迅速阻挡血流,只需5分钟就可致使周围组织坏死。这一灾难性的事件称为梗死。其中一种最普遍公认的情形称为冠状动脉血栓形成,这种情形会导致心肌梗死(心脏病发作)。这一过程如果发生在脑部动脉中,则俗称为中风。另一种发生在疾病极晚期的常见情形是,腿部供血不足引起的跛行,这通常是由于狭窄和动脉瘤段因凝块而变窄两者共同作用而发生的。
动脉粥样硬化的主要成因尚不明了,但是动脉粥样硬化是一种影响动脉血管的症候群,也是一种动脉壁的慢性炎症反应,很大程度上是因为巨噬细胞累积而功能性高密度脂蛋白(HDL)又未充分移除巨噬细胞中的脂肪和胆固醇所引起的,并且会被低密度脂蛋白(LDL,携带胆固醇和甘油三酯的血浆脂蛋白)加剧。动脉粥样硬化通常称为动脉的硬化或生垢。这是由于动脉内形成了多个斑块所致。
高脂血症是动脉粥样硬化最重要的风险因素,也是心血管疾病的主要原因。高脂血症还可根据水平升高的脂质类型直接分为高胆固醇血症、高甘油三酯血症或混合型高脂血症。脂蛋白水平升高也可被划分为一种高脂血症形式。
如今大家都努力让自己的胆固醇保持在低水平。降低胆固醇水平的典型措施包括减少摄入膳食胆固醇,服用某些药物,以及很少用到的其他治疗手段,包括外科手术。本发明现在提供一种方便的饮食方法来降低胆固醇水平。
因此,本发明的乳制品组合物可用于降低血浆总胆固醇水平,特别是血浆LDL胆固醇的水平。低LDL胆固醇浓度可降低心血管障碍的风险。
如果同时具有低LDL水平与高HDL胆固醇水平,这种效果会更显著。可通过减肥和/或锻炼使HDL胆固醇水平提高。
因此,最好是以限制热量的方案施用本发明的组合物并且/或者受试者规律地进行耗氧锻炼。
可利用本发明的组合物预防、改善或治疗的典型心血管障碍可为如下几种中的一种或多种:动脉粥样硬化、心肌梗死、冠心病、中风、外周血管疾病。
除此之外或作为另外一种选择,本发明的乳制品组合物还可用于治疗或预防血液中的高甘油三酯水平和/或与之相关的障碍。
公众关注的一个重要领域是心脏健康。根据本发明针对本文所述的组合物展示的效果,本发明的组合物可用于促进心脏健康和/或治疗、缓解或预防心脏健康受损。
在治疗应用中,将根据本发明的乳制品组合物以足以至少部分地治愈或抑制疾病的症状和/或其并发症的量施用。足以实现这一点的量被定义为“治疗有效剂量”。有效实现该目的的量将取决于本领域技术人员已知的许多要素,诸如疾病的严重程度以及患者的体重和一般情况。
在预防应用中,将根据本发明的乳制品组合物以足以至少部分地降低发生疾病的风险的量施用给易患特定疾病或者处于特定疾病风险中的患者。这样的量被定义为“预防有效剂量”。同样,精确用量取决于患者的若干具体要素,例如患者的健康状态和体重。
本发明的组合物在施用后,将遵循剂量-反应曲线发挥效用。可以治疗有效剂量或预防有效剂量施用本发明的组合物。技术人员将能够准确地确定这种剂量。例如,本发明的组合物可包含至少每天每kg体重7mg山楂,以及每天每kg体重至少15mg植物甾醇。作为另外一种选择,本发明的组合物可包含至少每天每kg体重14mg山楂,以及每天每kg体重至少50mg植物甾醇。还作为另外一种选择,本发明的组合物可包含至少每天每kg体重42mg山楂,以及每天每kg体重至少100mg植物甾醇。
为避免不利副作用诸如异味或抑制维生素A的吸收,应将剂量保持在合理的低水平。例如,山楂的剂量可不超过每天每kg体重2.5g[6],植物甾醇的剂量可不超过每天每kg体重40mg[8]。
山楂可以适合施用于人或动物的任何形式提供。优选地,山楂可以新鲜果实、干燥的果实、果泥、果实粉末或果实浓缩物的形式被提供。最优选地,以如上所述的山楂果实组合物提供山楂果实。
这种组分可以是适合人类或动物食用的任何组分。因此,所述乳制品组合物可选自食物产品、饮料、功能保健食品、营养剂、食品添加剂、营养配方和宠物食品。
与高脂血症和/或高胆固醇血症相关的疾病通常随着年龄变老而发生,因此可将本发明的组合物施用给成年人或中老年人(theelderly)。
出于本发明的目的,如果受试者的年龄超过其出生地人口平均预期寿命的二分之一,优选地超过其出生地人口平均预期寿命的三分之二,更优选地超过其出生地人口平均预期寿命的四分之三,最优选地超过其出生地人口平均预期寿命的五分之四,那么就认为该名受试者是“中老年人”。
例如,可将本发明的组合物施用给年龄超过45岁、50岁、55岁、60岁、65岁、70岁、75岁或80岁的人。
由于不仅人类会出现与高脂血症和/或高胆固醇血症相关的疾病,动物也会,所以可向人类或动物(例如猫或狗之类的伴侣动物)施用本发明的组合物。
根据美国心脏协会、NIH和NCEP就空腹HDL水平和心脏病风险提供的指导方针,男性的HDL胆固醇水平低于40mg/dL时,女性的HDL胆固醇水平低于50mg/dL时,会导致更高的心脏病风险。女性50至60mg/dL的HDL胆固醇水平以及男性40至60mg/dL的HDL胆固醇水平被认为是正常范围。
因此,可将本发明的组合物施用给空腹HDL胆固醇水平低于60mg/dL、低于50mg/dL或低于40mg/dL的人。
美国心脏协会、NIH和NCEP还提供了一组有关空腹LDL胆固醇水平和心脏病风险的指导方针。
100至129mg/dL的空腹LDL胆固醇水平对应于近似最佳的LDL水平,这种情况会更快发展成有症状的心血管疾病事件。
130至159mg/dL的空腹LDL胆固醇水平对应于接近临界值的高LDL水平,这种情况会更快发展成有症状的心血管疾病事件。
160至199mg/dL的空腹LDL胆固醇水平对应于高LDL水平,这种情况发展成有症状的心血管疾病事件的速度会快得多。
最后,高于200mg/dL的空腹LDL胆固醇水平对应于极高的LDL水平,这种情况发展成有症状的心血管疾病事件的速度最快。
因此,可将本发明的组合物施用给空腹LDL胆固醇水平高于100mg/dL、高于130mg/dL、高于160mg/dL或高于200mg/dL的人。
有利的是,本发明的组合物可在食用高脂肪或高LDL胆固醇餐食之前片刻、同时或之后片刻食用。如果一顿餐食中包含的脂肪超过日推荐脂肪摄入量的60%、80%或100%,则被认为是高脂肪的餐食。相似地,如果一顿餐食中包含的胆固醇超过日推荐胆固醇摄入量的60%、80%或100%,则被认为是高胆固醇的餐食。
因此,可在食用高脂肪和/或高胆固醇餐食之前的1小时到餐后1小时的时间范围内施用本发明的组合物。
根据下面的实施例和附图,本发明的其他优点和特征是显而易见的。
图1示出与HFD安慰剂相比,相同剂量的山楂和植物甾醇的组合治疗明显协同降低了血胆固醇。通过单因素方差分析,然后通过Tukey多重比较检验和未配对样本t检验分析了数据。均值±标准误差均值(SEM);n=8-12;*P<0.05,相比对照物;相比HFD安慰剂。
图2示出与HFD安慰剂相比,相同剂量的山楂和植物甾醇的组合治疗明显协同降低了LDL胆固醇。通过单因素方差分析,然后通过Tukey多重比较检验和未配对样本t检验分析了数据。均值±标准误差均值(SEM);n=8-12;*P<0.05,相比对照物;相比HFD安慰剂。
图3示出相同剂量的山楂和植物甾醇的组合治疗明显协同导致了HFD仓鼠血甘油三酯的稳固下降。通过单因素方差分析,然后通过Tukey多重比较检验和未配对样本t检验分析了数据。均值±标准误差均值(SEM);n=8-12;*P<0.05,相比对照物;相比HFD安慰剂。
实施例
在本研究中,将得自北京维通利华实验动物技术有限公司的雄性叙利亚金仓鼠(n=54;体重=120~130g)饲养在23℃、12/12小时光暗周期的动物房中。让仓鼠在这种环境中适应2周,在此期间向它们喂食颗粒状的谷类鼠饲料。之后,将所有仓鼠随机分成五个组(每组n=10~12只),并喂食如下表所示配制的五种饲料中的一种。每天向仓鼠喂食新鲜饲料,吃剩下的饲料直接丢弃。
在整个饲养期中,动物自由获取食物和饮用水。例行完成临床观察,每周测量24小时食物摄入和体重增长,每周收集每笼总粪便。对先前描述的配方(Chan等人,1999年)进行修改,制备出五种饲料。将配料混合在一起,制备出不含胆固醇的阴性对照饲料(对照物)。在对照饲料中添加0.1%(w/w)的胆固醇和10%的猪油,以相似的方法制备高胆固醇对照饲料(高脂肪膳食,HFD)。分别在HFD饲料中添加山楂泥(HFD-H)、植物甾醇酯(HFD-PS)以及山楂泥加植物甾醇酯(HFD-H/PS),制备出另外三种实验饲料。
a提供的矿物质合剂AIN-76(单位为g/kg合剂):磷酸氢钙,500;氯化钠,74;柠檬酸钾一水合物,220;硫酸钾,52;氧化镁,24;碳酸锰,3.5;柠檬酸铁,6;碳酸锌,1.6;碳酸铜,0.3;碘酸钾,0.01;亚硒酸钠,0.01;硫酸铬钾十二水合物,0.55;细磨蔗糖,118.03;美国宾夕法尼亚州伯利恒Dyets公司(Dyets,Bethlehem,PA,USA)。
b提供的维生素合剂AIN-76A(单位为g/kg合剂):盐酸硫胺素,0.6;盐酸吡哆醇,0.7;烟酸,3;泛酸钙,1.6;叶酸,0.2;生物素,0.02;维生素B12,0.1;维生素A棕榈酸酯(500,000IU/g),0.8;维生素D3(400,000IU/g),0.25;维生素E醋酸酯(500IU/g),10;亚硫酸氢钠甲萘醌,0.08;细磨蔗糖,981.15;美国宾夕法尼亚州伯利恒Dyets公司(Dyets,Bethlehem,PA,USA)。
1.植物甾醇(PS)和山楂(H)对降低血总胆固醇和LDL胆固醇的协同 效应。
背景:血胆固醇水平异常升高(高胆固醇血症),尤其是伴有更高浓度的LDL时,与心血管疾病密切相关,因为这些症状会促进动脉粥样化发展。这一疾病过程会导致心肌梗死(心脏病发作)、中风以及周围性血管疾病。
1.1血总胆固醇:在治疗6周后,高脂肪膳食(HFD)使血胆固醇明显升高了67mg/dL(表1.1,HFD安慰剂对比对照物)。与HFD安慰剂相比,同时使用植物甾醇或山楂的治疗没有明显改变高血胆固醇(图1,HFD-H、HFD-PS对比对照物,*P<0.05;HFD-H、HFD-PS对比HFD安慰剂,P>0.05)。虽然这两种单独配料本身没有显示出明显的保护效果,但与HFD安慰剂相比,相同剂量的山楂和植物甾醇的组合治疗明显协同降低了血胆固醇(图1,HFD-PS/H对比HFD安慰剂,)。此外,相比单独治疗,组合治疗显示出了对高血胆固醇的协同降低效果(表1.1)。
表1.1.山楂(H)和植物甾醇(PS)对食用高脂肪膳食(HFD)的仓鼠的血总胆
固醇(TC)的降低效果。
1.2LDL胆固醇:在治疗6周后,高脂肪膳食(HFD)使LDL胆固醇明显升高了27mg/dL(表1.2,HFD安慰剂对比对照物)。与HFD安慰剂相比,同时使用植物甾醇或山楂的治疗没有明显改变高LDL胆固醇(图1,HFD-H、HFD-PS对比对照物,*P<0.05;HFD-H、HFD-PS对比HFD安慰剂,P>0.05)。虽然这两种单独配料本身没有显示出明显的保护效果,但与HFD安慰剂相比,相同剂量的山楂和植物甾醇的组合治疗明显协同降低了LDL胆固醇(图2,HFD-PS/H对比HFD安慰剂,)。此外,相比单独治疗,组合治疗显示出了对LDL胆固醇的协同降低效果(表1.2)。
表1.2.山楂(H)和植物甾醇(PS)对食用高脂肪膳食(HFD)的仓鼠的LDL 胆固醇的降低效果。
2.植物甾醇(PS)和山楂(H)对降低血甘油三酯(TG)的协同效应。
背景:在医学上,高甘油三酯血症意味着血液中甘油三酯浓度高,甘油三酯是大多数生物体中最丰富的脂肪分子。高甘油三酯血症与动脉粥样硬化有关,即使没有出现高胆固醇血症(高胆固醇水平)也如此。浓度过高时(即在甘油三酯浓度高于1000mg/dL或12mmol/L时,并且通常高出很多时),高甘油三酯血症还会导致胰腺炎。
血甘油三酯:在治疗6周后,高脂肪膳食使血甘油三酯明显升高了126mg/dL(表2,HFD安慰剂对比对照物)。单独的植物甾醇显示出了对HFD仓鼠的血甘油三酯的稳固降低效果(图3,HFD-PS对比对照物,P>0.05;HFD-PS对比HFD安慰剂,)。虽然单独的山楂没有显示出降低效果,但它使植物甾醇降低血甘油三酯的效果增加了8.8mg/dL。
表2.山楂(H)和植物甾醇(PS)对高脂肪膳食(HFD)仓鼠的血甘油三酯(TG) 的降低效果。
3.植物甾醇(PS)和山楂(H)在调节胆固醇方面的协同效应的潜在机 制。
背景:在胃肠道上皮细胞上发现了NPC1L1(尼曼-皮克C1型蛋白1)蛋白。这种蛋白对于将胆固醇和植物甾醇摄取到肠上皮细胞中至关重要。ACAT-2(胞质乙酰-CoA乙酰转移酶)是一种负责合成胆固醇酯(脂蛋白的一部分)并且将其进一步运输到血液循环中的酶。
CYP7A1(胆固醇7α-羟化酶或细胞色素P4507A1)是一种参与从胆固醇合成胆汁酸的酶。胆固醇水平高时,这种酶被LXR(肝脏X受体)上调。LXRα是LXR的亚型。LXRα和CYP7A1与中性和胆汁酸的产生量及排泄量的增加有关。PPARa(过氧化物酶体增殖物活化受体α)是一种转录因子,是肝脏中脂类代谢作用的重要调节剂。PPARa的活化能够上调参与脂肪酸转运、结合和活化的基因来促进脂肪酸的摄入、利用和分解代谢,并且促进过氧化物酶体脂肪酸和线粒体脂肪酸的β氧化。
基因表达:比较了接受山楂和植物甾醇组合治疗的仓鼠以及接受高脂肪膳食安慰剂的仓鼠的肠组织和肝组织的基因表达。
根据观察,与HFD安慰剂相比,HFD-H/PS仓鼠的NPC1L1和ACAT-2明显下调(表3.1,FD-H/PS对比HFD安慰剂,*P<0.05)。
此外,LXRα和CYP7A1的上调还可有助于更多地清除HFD-H/PS仓鼠肝细胞中的胆固醇,而且HFD-H/PS仓鼠的PPARa的上调可能与脂肪酸新陈代谢增强有关(表3.2,HFD对比对照物,*P<0.05;HFD-H/PS对比HFD安慰剂,)。
组合膳食H/PS的作用可导致PPARα活化并进一步降低血浆甘油三酯水平,PPARα的活化在减少富含甘油三酯的VLDL的产生方面具有重要的作用。
表3.1.肠组织基因表达
对照物 | HFD安慰剂 | HFD-H/PS | |
肠mRNA | |||
NPC1L1 | 1.00±0.34 | 0.96±0.27 | 0.71±0.14* |
ACAT-2 | 1.00±0.27 | 1.07±0.22 | 0.73±0.17* |
表3.2.肝脏组织基因表达
虽然已在说明书中结合特定实施例公开了优选的实施方案,但应认识到,本发明并不限于这些优选的实施方案。本领域技术人员将理解,在不脱离本文所公开的本发明范围的前提下,他们可以自由地组合本文所述的本发明的所有特征。具体地讲,针对本发明的用途描述的特征可应用于本发明的组合物,反之亦然。各种变型形式对本领域的技术人员而言可变得显而易见并且可在实施本发明的过程中获得。
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Claims (15)
1.用于制备包含植物甾醇和山楂果实的乳制品组合物的方法,所述方法包括以下步骤:
1)如下制备山楂果实组合物:a)制备山楂果浆,b)从所述果浆中去除山楂籽,c)将所述果浆进行均质化,d)将所述均质化的果浆的pH值调节到4至6的范围内,e)对所述果浆进行热处理,以及f)任选将所述热处理的果浆干燥成山楂果实粉末,
2)将所述山楂果实组合物与乳制品基质混合,以及
3)在所述混合步骤2)之前、同时或之后将植物甾醇与所述乳制品基质混合。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述山楂果浆是如下制备的:在水中将山楂果实压碎,然后以80℃至95℃范围内的温度烹煮,任选在搅拌下进行烹煮。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中在所述pH值调节d)之后,将所述果浆进一步均质化至粒度小于300微米。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其中所述热处理e)是UHT处理。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中在所述热处理e)之后进行所述山楂果浆的浓缩步骤,以提供山楂果实浓缩物。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中所述干燥f)是通过喷雾干燥或冷冻干燥进行的。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中所述山楂果实组合物以粉末形式被提供,并且与乳制品基质干混。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其中所述乳制品基质选自乳制品粉末、奶粉、酸奶粉、发酵乳产品、酸奶、乳制品饮料和可饮用的酸奶。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法,其中所述山楂果实以新鲜果实或干燥的果实的形式被提供。
10.包含植物甾醇和山楂果实的乳制品组合物,其可通过根据权利要求1至9中任一项所述的方法获得。
11.根据权利要求10所述的乳制品组合物,所述乳制品组合物每份包含至少0.5g、1g或4g山楂果实(干重)。
12.根据权利要求10或11所述的乳制品组合物,所述乳制品组合物每份包含至少0.25g、0.5g或0.6g植物甾醇。
13.根据权利要求10至12中任一项所述的乳制品组合物,所述乳制品组合物选自乳制品粉末、奶粉、酸奶粉、发酵乳产品、酸奶、乳制品饮料和可饮用的酸奶。
14.根据权利要求10至13中任一项所述的乳制品组合物,所述乳制品组合物用于治疗、缓解或预防与高胆固醇血症和/或高脂血症相关的疾病。
15.根据权利要求14所述的具有所述用途的乳制品组合物,其中所述组合物将被施用给成年人或中老年人。
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