CN105454048B - 一种美国红枫的组培快繁方法 - Google Patents

一种美国红枫的组培快繁方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105454048B
CN105454048B CN201511026125.2A CN201511026125A CN105454048B CN 105454048 B CN105454048 B CN 105454048B CN 201511026125 A CN201511026125 A CN 201511026125A CN 105454048 B CN105454048 B CN 105454048B
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
maple
american red
propagation method
rapid propagation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201511026125.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105454048A (zh
Inventor
李飞
赵玲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sichuan Qicai Forestry Co., Ltd.
Original Assignee
Sichuan Qicai Forestry Industry Development Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sichuan Qicai Forestry Industry Development Co Ltd filed Critical Sichuan Qicai Forestry Industry Development Co Ltd
Priority to CN201511026125.2A priority Critical patent/CN105454048B/zh
Publication of CN105454048A publication Critical patent/CN105454048A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105454048B publication Critical patent/CN105454048B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明公开一种美国红枫的组培快繁方法，包括以下步骤：(1)外植体选取及灭菌：切取美国红枫带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理；(2)启动培养：将步骤(1)处理后的外植体接种到启动培养基中培养2—3周，腋芽生成；(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养3—5周，丛生芽生成；(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单株，接种到生根培养基中培养2—3周即得美国红枫无菌苗；所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，成活率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了人工成本，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。

Description

一种美国红枫的组培快繁方法
技术领域
本发明涉及生物组培育苗技术领域，具体涉及一种美国红枫的组培快繁方法。
背景技术
美国红枫，槭树科槭属，原产于美国东北部，为大型乔木，树型圆形，整洁优美，是美国最受欢迎的绿化树种。前几年，自其被引入国内之后，已成为园林绿化的新宠，因此，关于美国红枫的研究也逐渐增多。目前主要通过播种和嫁接繁殖，但出芽率和成活率都不是很高，繁殖系数低，繁殖周期长，场地要求大，人工成本较高，远不能满足国内对种苗的需求。
近几年，国内对于美国红枫组培快繁技术的研究也取得了一定成果，然而该方法尚不完善，繁殖时间较长，成活率不高，材料成本较高成为制约美国红枫组培快繁技术发展的瓶颈，因此，如何提高其生产效率，缩短培育时间，降低人工成本，保持优良树种的遗传稳定性，提高其繁殖系数成为目前亟待解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本申请提供一种美国红枫的组培快繁方法，所用培养基配方简单，组培流程简便，培养时间短，增殖频率高，成活率高，幼苗整齐，便于后期统一的移栽和种植管理，降低了人工成本，能保证所长出的幼苗植株在形状上的一致性，易于操作，可进行产业化生产。
为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是一种美国红枫的组培快繁方法，包括以下步骤：
(1)外植体选取及灭菌：切取美国红枫带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理；
(2)启动培养：将步骤(1)处理后的外植体接种到启动培养基中培养2—3周，腋芽生成，所述启动培养基的组成包括：MS基本培养基，补充0.1—2.0mg/L PVP，所述启动培养基的pH值为5.8—6.2；
(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养3—5周，丛生芽生成，所述增殖培养基的组成包括：WPM基本培养基，补充0.01—0.5mg/L 6-BA；
(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单株，接种到生根培养基中培养2—3周即得美国红枫无菌苗，所述生根培养基的组成包括：1/2MS基本培养基，补充0.05—0.5mg/L NAA；
在步骤(2)启动培养中，切取所述外植体带芽茎段上部的可用茎段，重新接种到所述启动培养基中培养，直至腋芽生成，将所述腋芽切下供步骤(3)增殖培养，循环2—3次。
在启动培养过程中，外植体带芽茎段生长，此时可将带芽茎段的上部分带芽的部分再次切取下来，重新作为外植体接种到启动培养基上，15—25天时，在原芽周围又会分化出1—3个1—3cm的腋芽，可切下供增殖培养所用，这样每次带芽茎段和启动培养基可用2—3次，采用此方法循环重复利用，可提高材料利用率，加快繁殖速率。
优选的，所述外植体选取及灭菌的具体操作为：选取美国红枫幼嫩枝条，去掉叶片，在洗涤液中浸泡5—15min，然后在流水中冲洗20—35min；在无菌操作台上，用75％的酒精处理25—40s，无菌水冲洗2—4次，再用0.1％的升汞处理4—8min，无菌水冲洗5—7次，晾干，切割成长度为1—2cm的带芽茎段即可。
优选的，所述启动培养基的组成包括：MS基本培养基，补充0.5—2.0mg/L PVP。
更为优选的，所述启动培养基的组成包括：MS基本培养基，补充1.0mg/L PVP。
优选的，所述增殖培养基的组成包括：WPM基本培养基，补充0.05—0.5mg/L 6-BA。
更为优选的，所述增殖培养基的组成包括：WPM基本培养基，补充0.1mg/L 6-BA。
优选的，所述生根培养基的组成包括：1/2MS基本培养基，补充0.1—0.5mg/L NAA。
更为优选的，所述生根培养基的组成包括：1/2MS基本培养基，补充0.2mg/L NAA。
优选的，所述启动培养基、所述增殖培养基中均还补充30g/L蔗糖、6g/L琼脂；所述生根培养基中，还补充20g/L蔗糖、6g/L琼脂。
优选的，所述启动培养、增殖培养、生根培养步骤中，培养温度为23—27℃，光照强度为2000—2500Lx，所述启动培养的光周期为14/12h，所述增殖培养和所述生根培养的光周期为16/8h。
本申请所述MS基本培养基为MS基本培养基具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养，还能加速愈伤组织的生长，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。
所述WPM基本培养基为木本植物用培养基(WPM，woody plant medium)，无机盐浓度适中，其它营养成分充足。能够满足植物细胞生长的营养和生理需要，特别适用于木本植物的组培快繁。
所述1/2MS基本培养基是MS基本培养基大量元素减半，其它成分不变。具有无机盐浓度较低，但能够保证组织生长所需的矿质营养，满足植物细胞的营养和生理需要，最主要是能促进植物组织生根，因而在植物组织培养快速繁殖常用它作为生根培养基的基本培养基。
所述PVP为聚乙烯吡咯烷酮(polyvinyl pyrrolidone)的简称，其用途广泛，因其能与多酚类化合物络合而在植物组培中被用于防止外植体褐化。
所述6-BA为6-苄氨基腺嘌呤，是一种植物生长激素，其主要作用是促进芽的形成，也可以诱导愈伤组织发生，促进细胞分裂，促进非分化组织分化，促进生物体内物质的积累，促进侧芽发生，防止老化，是植物组织和细胞培养中最常用的一种细胞分裂素。
所述NAA为萘乙酸，是一种植物生长激素，在植物使用扦插法繁殖时使用，也可用于植物组织培养，能促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根增加座果，防止落果，改变雌、雄花比率等，可经叶片、树枝的嫩表皮，种子进入到植株内，随营养流输导到全株。
本申请与现有技术相比，其详细说明如下：本申请技术方案提供了一种美国红枫的组培快繁方法，包括外植体的选取及灭菌、启动培养、增殖培养、生根培养的步骤，通过对启动培养基、增殖培养基、生根培养基的筛选，得到最佳的培养基组分和配比，采用前述植物生长激素配比形成的培养基，配方简单，培养基成本低，配合各阶段的培养条件，得到的幼苗繁殖时间短，培养流程简便，提高了美国红枫繁殖的效率，繁殖系数可高达7—8，成活率高，能快速获得遗传性状一致的美国红枫无菌苗，利用组织培养技术，进行外植体培养，可不受季节气候变化、自然灾害的影响，可进行大规模的工业化育苗及深加工。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明。
实施例1
本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，包括以下步骤：
(1)外植体选取及灭菌：选取美国红枫幼嫩枝条，去掉叶片，在洗涤液中浸泡5—15min，然后在流水中冲洗20—35min；在无菌操作台上，用75％的酒精处理25—40s，无菌水冲洗2—4次，再用0.1％的升汞处理4—8min，无菌水冲洗5—7次，晾干，切割成长度为1—2cm的带芽茎段即可；
(2)启动培养：将步骤(1)处理后的外植体接种到pH值为6.0的启动培养基中培养2—3周，腋芽生成，所述启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充1.0mg/L PVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养3—5周，丛生芽生成，所述增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.1mg/L 6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单株，接种到生根培养基中培养2—3周即得美国红枫无菌苗，所述生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.2mg/L NAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂；
在步骤(2)启动培养中，切取所述外植体带芽茎段上部的可用茎段，重新接种到所述启动培养基中培养，直至腋芽生成，将所述腋芽切下供步骤(3)增殖培养，循环2—3次。
其中，所述启动培养、增殖培养、生根培养步骤中，培养温度为23—27℃，光照强度为2000—2500Lx，所述启动培养的光周期为14/12h，所述增殖培养和所述生根培养的光周期为16/8h。
本实施例中，启动培养过程中，第一个腋芽生成的时间为7天，启动培养结束时，腋芽伸长2—3cm；增殖培养过程中，5—6天接种的腋芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤，第一个丛生芽生成的时间为10天，增殖培养结束时，丛生芽株高2—7cm，增殖系数为4.78；生根培养中，开始生根的时间为7天，生根培养结束时，每株平均根数约为6根，根长大于3cm。
实施例2
本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
步骤(2)中，启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充0.1mg/L PVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(3)中，增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.01mg/L 6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.05mg/L NAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。
本实施例中，启动培养过程中，第一个腋芽生成的时间为8天，启动培养结束时，腋芽伸长2cm左右；增殖培养过程中，8天左右时间接种的腋芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤，第一个丛生芽生成的时间为14天，增殖培养结束时，丛生芽株高1—4cm，增殖系数为1.7；生根培养中，开始生根的时间为11天，生根培养结束时，每株平均根数约为3根，根长为1—4cm。
实施例3
本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
步骤(2)中，启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充2.0mg/L PVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(3)中，增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.5mg/L 6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.5mg/L NAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。
本实施例中，启动培养过程中，第一个腋芽生成的时间为9天，启动培养结束时，腋芽伸长1—2cm；增殖培养过程中，5天接种的腋芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤，第一个丛生芽生成的时间为14天，增殖培养结束时，丛生芽株高1—4cm，增殖系数为2.33；生根培养中，开始生根的时间为8天，生根培养结束时，每株平均根数约为4根，根长为2—4cm。
实施例4
本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
步骤(2)中，启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充0.1mg/L PVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(3)中，增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.5mg/L 6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.05mg/L NAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。
本实施例中，启动培养过程中，第一个腋芽生成的时间为7天，启动培养结束时，腋芽伸长2cm；增殖培养过程中，5天接种的腋芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤，第一个丛生芽生成的时间为14天，增殖培养结束时，丛生芽株高1—4cm，增殖系数为2.33；生根培养中，开始生根的时间为11天，生根培养结束时，每株平均根数约为3根，根长为1—4cm。
实施例5
本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
步骤(2)中，启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充2.0mg/L PVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(3)中，增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.01mg/L 6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.5mg/L NAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。
本实施例中，启动培养过程中，第一个腋芽生成的时间为7天，启动培养结束时，腋芽伸长1—2cm；增殖培养过程中，8天接种的腋芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤，第一个丛生芽生成的时间为14天，增殖培养结束时，丛生芽株高1—4cm，增殖系数为2.33；生根培养中，开始生根的时间为8天，生根培养结束时，每株平均根数约为3根，根长为2—4cm。
实施例6
本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
步骤(2)中，启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充0.5mg/L PVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(3)中，增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.05mg/L 6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.1mg/L NAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。
本实施例中，启动培养过程中，第一个腋芽生成的时间为7天，启动培养结束时，腋芽伸长2—3cm；增殖培养过程中，5—6天接种的腋芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤，第一个丛生芽生成的时间为11天，增殖培养结束时，丛生芽株高1—4cm，增殖系数为2.33；生根培养中，开始生根的时间为7天，生根培养结束时，每株平均根数为4—5根，根长为2—5cm。
实施例7
本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
步骤(2)中，启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充0.5mg/L PVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(3)中，增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.5mg/L 6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.1mg/L NAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。
本实施例中，启动培养过程中，第一个腋芽生成的时间为7天，启动培养结束时，腋芽伸长2—3cm；增殖培养过程中，5天接种的腋芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤，第一个丛生芽生成的时间为14天，增殖培养结束时，丛生芽株高2—5cm，增殖系数为7—8；生根培养中，开始生根的时间为7天，生根培养结束时，每株平均根数为4—5根，根长为2—5cm。
实施例8
本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
步骤(2)中，启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充2.0mg/L PVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(3)中，增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.05mg/L 6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.5mg/L NAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。
本实施例中，启动培养过程中，第一个腋芽生成的时间为7天，启动培养结束时，腋芽伸长1—2cm；增殖培养过程中，5—6天接种的腋芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤，第一个丛生芽生成的时间为11天，增殖培养结束时，丛生芽株高1—4cm，增殖系数为3.03；生根培养中，开始生根的时间为8天，生根培养结束时，每株平均根数约为4根，根长2—4cm。
实施例9
本实施例所述的一种美国红枫的组培快繁方法，与实施例1的区别在于：
步骤(2)中，启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充0.5mg/L PVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(3)中，增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.05mg/L 6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
步骤(4)中，生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.5mg/L NAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂。
本实施例中，启动培养过程中，第一个腋芽生成的时间为15天，启动培养结束时，腋芽伸长2—3cm；增殖培养过程中，5—6天接种的腋芽开始膨大萌发，基部形成一定愈伤，第一个丛生芽生成的时间为10天，增殖培养结束时，丛生芽株高2—5cm，增殖系数为7—8；生根培养中，开始生根的时间为8天，生根培养结束时，每株平均根数约为4根，根长为2—4cm。
实施例10
启动培养基中生长激素成分和浓度对腋芽生长的影响
取生长情况一致的外植体若干，经过灭菌晾干后接种到pH值为6.0的启动培养基上培养2—3周，培养温度为23—27℃，光照强度为2000—2500Lx，光周期为14/12h。其中启动培养基采用MS基本培养基，补充PVP、蔗糖、琼脂。在MS基本培养基、蔗糖、琼脂均相同的条件下，根据PVP的浓度进行分组，观察并记录培养基中外植体的培养情况，具体分组及培养结果见表1。
表1启动培养基中生长激素成分和浓度对腋芽生长的影响结果
从上表可以看出，PVP为1.0mg/L时，外植体褐化情况较少，分化率高，平均腋芽长度也更长，为启动培养基的最适合的生长激素组成条件。
实施例11
增殖培养基中生长激素成分和浓度对增殖的影响
取生长情况一致的经过启动培养的腋芽若干，接种到增殖培养基上培养3—5周，培养温度为23—27℃，光照强度为2000—2500Lx，光周期为16/8h。其中增殖培养基采用WPM基本培养基，补充6-BA、蔗糖、琼脂。在WPM基本培养基、蔗糖、琼脂相同的条件下根据6-BA的浓度进行分组，观察并记录培养基中腋芽的培养情况，具体分组及培养结果见表2。
表2增殖培养基中生长激素成分和浓度对增殖的影响结果
从上表可以看出，6-BA为0.10mg/L时，其增殖率高，增殖系数最大，株高也更高，为增殖培养基的最适合的生长激素组成条件。
实施例12
生根培养基中生长激素成分和浓度对生根的影响
取生长情况一致的经过增殖培养的丛生芽的单株若干，接种到增殖培养基上培养2—3周，培养温度为23—27℃，光照强度为2000—2500Lx，光周期为16/8h。其中，生根培养基采用1/2MS基本培养基，并补充NAA、蔗糖、琼脂，在1/2MS基本培养基、蔗糖、琼脂条件相同的情况下，根据NAA的浓度进行分组，观察并记录培养基中丛生芽的单株的培养情况，具体分组及培养结果见表3。
表3生根培养基中生长激素成分和浓度对生根的影响结果
从上表可以看出，NAA为0.20mg/L时，生根率达到95％，平均生根数和平均根长也均较高，且长势较好，为生根培养基的最适合的生长激素条件。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (8)

1.一种美国红枫的组培快繁方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)外植体选取及灭菌：切取美国红枫带芽茎段，采用酒精和升汞灭菌处理；
(2)启动培养：将步骤(1)处理后的外植体接种到启动培养基中培养2—3周，腋芽生成，所述启动培养基的组成为：MS基本培养基，补充0.1—2.0mg/LPVP、30g/L蔗糖、6g/L琼脂，所述启动培养基的pH值为5.8—6.2；
(3)增殖培养：切取步骤(2)所得腋芽，接种到增殖培养基中培养3—5周，丛生芽生成，所述增殖培养基的组成为：WPM基本培养基，补充0.01—0.5mg/L6-BA、30g/L蔗糖、6g/L琼脂；
(4)生根培养：将步骤(3)所得丛生芽分离成单株，接种到生根培养基中培养2—3周即得美国红枫无菌苗，所述生根培养基的组成为：1/2MS基本培养基，补充0.05—0.5mg/LNAA、20g/L蔗糖、6g/L琼脂；
所述启动培养、增殖培养、生根培养步骤中，培养温度为23—27℃，光照强度为2000—2500Lx，所述启动培养的光周期为14/12h，所述增殖培养和所述生根培养的光周期为16/8h；
在步骤(2)启动培养中，切取所述外植体带芽茎段上部的可用茎段，重新接种到所述启动培养基中培养，直至腋芽生成，将所述腋芽切下供步骤(3)增殖培养，循环2—3次。
2.根据权利要求1所述的一种美国红枫的组培快繁方法，其特征在于：所述外植体选取及灭菌的具体操作为：选取美国红枫幼嫩枝条，去掉叶片，在洗涤液中浸泡5—15min，然后在流水中冲洗20—35min；在无菌操作台上，用75％的酒精处理25—40s，无菌水冲洗2—4次，再用0.1％的升汞处理4—8min，无菌水冲洗5—7次，晾干，切割成长度为1—2cm的带芽茎段即可。
3.根据权利要求1所述的一种美国红枫的组培快繁方法，其特征在于：所述启动培养基补充的PVP为0.5—2.0mg/LPVP。
4.根据权利要求3所述的一种美国红枫的组培快繁方法，其特征在于：所述启动培养基补充的PVP为1.0mg/LPVP。
5.根据权利要求1所述的一种美国红枫的组培快繁方法，其特征在于：所述增殖培养基补充的6-BA为0.05—0.5mg/L6-BA。
6.根据权利要求5所述的一种美国红枫的组培快繁方法，其特征在于：所述增殖培养基补充的6-BA为0.1mg/L6-BA。
7.根据权利要求1所述的一种美国红枫的组培快繁方法，其特征在于：所述生根培养基补充的NAA为0.1—0.5mg/LNAA。
8.根据权利要求7所述的一种美国红枫的组培快繁方法，其特征在于：所述生根培养基补充的NAA为0.2mg/LNAA。
CN201511026125.2A 2015-12-30 2015-12-30 一种美国红枫的组培快繁方法 Active CN105454048B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511026125.2A CN105454048B (zh) 2015-12-30 2015-12-30 一种美国红枫的组培快繁方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201511026125.2A CN105454048B (zh) 2015-12-30 2015-12-30 一种美国红枫的组培快繁方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105454048A CN105454048A (zh) 2016-04-06
CN105454048B true CN105454048B (zh) 2018-12-21

Family

ID=55592619

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201511026125.2A Active CN105454048B (zh) 2015-12-30 2015-12-30 一种美国红枫的组培快繁方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105454048B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106472310A (zh) * 2016-10-13 2017-03-08 李志峰 一种加拿大红枫快繁技术及其应用
CN109362569A (zh) * 2018-12-11 2019-02-22 梁伟艺 一种培养基再利用的牛大力多糖的生产方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102715087A (zh) * 2012-06-30 2012-10-10 吴昌海 美国红枫组织培养繁殖方法
CN103828719A (zh) * 2014-03-13 2014-06-04 湖南天福林业科技有限公司 一种美国红枫的组织培养方法
CN104509439A (zh) * 2014-12-19 2015-04-15 湖南师范大学 一种适于美国红枫组织快繁方法
CN104663450A (zh) * 2015-03-05 2015-06-03 罗焕荣 一种美国红枫组培快繁方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102715087A (zh) * 2012-06-30 2012-10-10 吴昌海 美国红枫组织培养繁殖方法
CN103828719A (zh) * 2014-03-13 2014-06-04 湖南天福林业科技有限公司 一种美国红枫的组织培养方法
CN104509439A (zh) * 2014-12-19 2015-04-15 湖南师范大学 一种适于美国红枫组织快繁方法
CN104663450A (zh) * 2015-03-05 2015-06-03 罗焕荣 一种美国红枫组培快繁方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
美国红枫组织培养初步研究;李克壮 等;《第十六届中国科协年会-分11森林培育技术创新与特色资源产业发展学术研讨会论文集》;20140524;第153页"1.2.5诱导培养基与激素配比组合的筛选",第157页"3.2.2外植体褐化的抑制" *

Also Published As

Publication number Publication date
CN105454048A (zh) 2016-04-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102648698B (zh) 一种梨茎尖组织培养快速繁殖方法
CN104206270B (zh) 一种红火炬郁金的组织培养及根茎膨大方法
CN101347097A (zh) 木薯体细胞胚胎发生再生植株快繁方法
CN102577959A (zh) 巫山淫羊藿的组培快繁方法和繁育的巫山淫羊藿
CN105010147A (zh) 一种用于增加十二卷属多肉植物组培繁殖速度的专用培养基及组培方法
CN103371103B (zh) 一种马缨杜鹃组织培养快速繁殖方法
CN108077068A (zh) 一种猕猴桃无菌种苗的快速繁殖方法
CN108077071B (zh) 穗花牡荆组织培养用培养基及快速繁殖方法
CN106258960B (zh) 一种蕙兰种子萌发快繁方法
CN108142283A (zh) 一种梓叶槭的组培快繁方法
CN105475129A (zh) 一种竹叶兰组培快繁的方法
CN104686351A (zh) 一种连香树离体快速繁殖方法
CN107027627A (zh) 一种多花黄精幼胚培养的微块茎繁殖方法
CN111066654A (zh) 一种多肉植物的组培快繁方法
CN105454048B (zh) 一种美国红枫的组培快繁方法
CN103609444B (zh) 常绿萱草的组织培养法
CN106613993B (zh) 一种枳的组织培养再生苗的培养方法
CN105379621B (zh) 一种大岛樱成年优良单株“小乔”樱的高效离体植株再生方法
CN108142284A (zh) 一种五小叶槭的组培快繁方法
CN103734013A (zh) 白撮茄的高效再生培养体系
CN106489737A (zh) 一种大花月季组织培养的培养基及方法
CN107873518B (zh) 一种粉防己种苗的组培方法
CN104429964B (zh) 一种紫香兰组培快繁方法
CN104542285B (zh) 一种大花萱草叶片组织培养的方法
CN109548655B (zh) 苦郎树的组织培养方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20170728

Address after: Six agency 635600 Dong Yu Zhen Huai Shu Cun, Bazhong city of Sichuan province Nanjiang County

Applicant after: SICHUAN QICAI FORESTRY INDUSTRY DEVELOPMENT CO., LTD.

Address before: 610041 No. 8, No. 1, No. 4, three, 2 Garden Road, Chengdu hi tech Zone, Sichuan, China

Applicant before: Sichuan this industry of grass tree agriculture and forestry science and technology Co., Ltd

GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CP01 Change in the name or title of a patent holder
CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: 635600 Six Societies of Huaishu Village, Dongyu Town, Nanjiang County, Bazhong City, Sichuan Province

Patentee after: Sichuan Qicai Forestry Co., Ltd.

Address before: 635600 Six Societies of Huaishu Village, Dongyu Town, Nanjiang County, Bazhong City, Sichuan Province

Patentee before: SICHUAN QICAI FORESTRY INDUSTRY DEVELOPMENT CO., LTD.

CP02 Change in the address of a patent holder
CP02 Change in the address of a patent holder

Address after: 635600 Tissue Culture Workshop Building of Rare and Colorful Leaf Plant Varieties in Guangwu Mountain, Sanshe, Changtan Village, Zhengzheng Town, Nanjiang County, Bazhong City, Sichuan Province

Patentee after: Sichuan Qicai Forestry Co., Ltd.

Address before: 635600 Six Societies of Huaishu Village, Dongyu Town, Nanjiang County, Bazhong City, Sichuan Province

Patentee before: Sichuan Qicai Forestry Co., Ltd.