CN105441410A - 一种鼠李糖苷酶的生产方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种鼠李糖苷酶的生产方法，包括以下步骤：(1)取细丽毛壳菌种接种于一级种子培养基中，培养得一级种子液；(2)将一级种子液接种于二级种子培养基中，培养得二级种子液；(3)将二级种子液接种于发酵培养基中，得到混合培养基，后添加蔗糖，流加鼠李糖，得到酶活达到500U/mL以上的发酵液；(4)将发酵液进行过滤，对滤液超滤浓缩，得到酶活达到1250U/mL以上的鼠李糖苷酶酶液；(5)将鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，得到酶活达到3500U/mL以上的固体鼠李糖苷酶。上述鼠李糖苷酶的生产方法，工艺简单、操作容易、生产效率高，且生产的鼠李糖苷酶活力高，稳定性好，易于储存。

Description

一种鼠李糖苷酶的生产方法
技术领域
本发明涉及鼠李糖苷酶领域，特别是涉及一种鼠李糖苷酶的生产方法。
背景技术
鼠李糖苷酶是一种水解酶。鼠李糖苷酶的来源比较广，广泛分布于自然界的细菌和真菌中。国内关于鼠李糖苷酶研究，主要集中在代谢产生的鼠李糖苷酶，国外研究相对较多，主要有黑曲霉、白曲霉、棘孢曲霉、青霉菌、拟杆菌属和热微菌门等。鼠李糖苷酶在实际工艺中具有很多潜在的应用价值，如工业上用于去除柑桔汁中柚皮苷的苦味，将橘皮苷水解为鼠李糖和橘皮素糖苷等。其中橘皮素糖苷是工业生产甜味剂的重要前体物。另外，鼠李糖苷酶可以作用于萜烯基糖苷，在改善葡萄汁和饮料的香气成分方面有很重要的应用。它在食品、医药、饲料等行业中得到了广泛应用。其工业化生产是利用微生物发酵法生产，但该方法存在发酵活力低、产量低、生产成本高等限制性因素，故为了克服上述问题，技术人员在应用各种遗传学手段提高微生物的生产性能方面，做了大量工作，而对通过培养方法的改进来提高发酵性能方面所做的工作还有所欠缺。
发明内容
本发明的目的在于提供一种工艺简单、发酵活力高的鼠李糖苷酶的生产方法。
一种鼠李糖苷酶的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取细丽毛壳菌种按5～20％的接种量接种于一级种子培养基中，在25～38℃培养10～30h，控制溶氧在60％以上，培养即得一级种子液；
(2)将所述一级种子液按5～20％的接种量接种于二级种子培养基中，在25～38℃培养10～30h，控制溶氧在60％以上，培养即得二级种子液；
(3)将所述二级种子液按5～20％的接种量接种于发酵培养基中，在25～38℃培养40～55h，控制溶氧在60％以上，得到混合培养基，后按每升混合培养基添加5～10g蔗糖的比例添加蔗糖，并开始按每升混合培养基流加橘皮苷0.5～5g/小时的比例添加橘皮苷，同时控制pH为4.5～5.5，培养70～96h后即得酶活达到500U/mL以上的鼠李糖苷酶发酵液，其中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷60～80g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L；
(4)将所述鼠李糖苷酶发酵液进行过滤，除去菌体及其他微小颗粒，后对滤液超滤浓缩，直至得到酶活达到1250U/mL以上的鼠李糖苷酶酶液；
(5)将所述鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，即可得到酶活达到3500U/mL以上的固体鼠李糖苷酶；
其中，步骤(1)中的所述一级种子培养基和步骤(2)中的所述二级种子培养基的成分都为：橘皮苷60～80g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L。
在其中一个实施例中，所述一级种子培养基、所述二级种子培养基的成分都为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁1g/L、氯化锌0.2g/L、丙酸钙20g/L。
在其中一个实施例中，步骤(2)中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物10g/L、氯化钠5g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化锌0.5g/L、丙酸钙30g/L。
在其中一个实施例中，步骤(3)中，通过添加氨水的方式控制pH为5.0～5.5。
在其中一个实施例中，步骤(1)、(2)、(3)中控制溶氧的方法都为：在培养过程中，调整搅拌转速或通入无菌空气控制溶氧在60％以上。
在其中一个实施例中，步骤(4)中，将鼠李糖苷酶发酵液通过板框过滤方法，除去菌体及其他微小颗粒。
上述鼠李糖苷酶的生产方法，通过在发酵培养基中控制鼠李糖的加入量，从而控制菌体生长速度，防止发酵培养后期菌体生长后劲不足；另外，在发酵培养基中加入蔗糖，可以限制鼠李糖苷酶对橘皮苷的作用，减少鼠李糖的产生，有利于促进鼠李糖苷酶的合成。
上述鼠李糖苷酶的生产方法，工艺简单、操作容易、生产效率高，且生产的鼠李糖苷酶活力高，稳定性好，易于储存。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
一实施方式的鼠李糖苷酶的生产方法，包括以下步骤:
取细丽毛壳菌种按5～20％的接种量接种于一级种子培养基中，在25～38℃培养10～30h，控制溶氧在60％以上，培养即得一级种子液。
其中，一级种子培养基的成分为：橘皮苷60～80g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L。
将所述一级种子液按5～20％的接种量接种于二级种子培养基中，在25～38℃培养10～30h，控制溶氧在60％以上，培养即得二级种子液。
其中，二级种子培养基的成分为：橘皮苷60～80g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L。
将所述二级种子液按5～20％的接种量接种于发酵培养基中，在25～38℃培养40～55h，控制溶氧在60％以上，得到混合培养基，后按每升混合培养基添加5～10g蔗糖的比例添加蔗糖，并开始按每升混合培养基流加橘皮苷0.5～5g/小时的比例添加橘皮苷，同时控制pH为4.5～5.5，培养70～96h后即得酶活达到500U/mL以上的鼠李糖苷酶发酵液。
其中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷60～80g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L。
优选的，发酵培养基的成分为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁1g/L、氯化锌0.2g/L、丙酸钙20g/L。
控制pH值步骤为：通过添加氨水的方式控制pH为5.0～5.5。
上述中控制溶氧的方法都为：在培养过程中，调整搅拌转速或通入无菌空气控制溶氧在60％以上。
将鼠李糖苷酶发酵液进行过滤，除去菌体及其他微小颗粒，后对滤液超滤浓缩，直至得到酶活达到1250U/mL以上的鼠李糖苷酶酶液。
优选的，将鼠李糖苷酶发酵液通过板框过滤方法，除去菌体及其他微小颗粒。
将鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，即可得到酶活达到3500U/mL以上的固体鼠李糖苷酶。
喷雾干燥方法的优点为：生产效率高，生产能力大，且产品质量高。淀粉作为载体可以充当鼠李糖苷酶的保护剂，减少储存过程中的损失。
在鼠李糖苷酶发酵生产中，蔗糖作为菌体利用的碳源，可以使发酵缓慢持续进行，橘皮苷作为鼠李糖苷酶生产的诱导物，其代谢产物鼠李糖会阻碍鼠李糖苷酶的合成。为此，本发明在发酵初期，在发酵培养基中降低蔗糖和橘皮苷的加量，控制菌体生长速度，防止发酵后期菌体生长后劲不足，及防止鼠李糖的大量累积，阻碍鼠李糖苷酶的合成；同时在发酵培养基中添加丙酸钙既可以作为孢子附着的载体，有利于细丽毛壳菌的生长，又可以抑制杂菌的产生，有效缓解pH下降过快，减轻鼠李糖的阻碍作用。到发酵中期，发酵液中蔗糖和橘皮苷的浓度下降，此时流加蔗糖和橘皮苷既可以维持菌体的生长，又可以持续诱导鼠李糖苷酶的合成。
本发明的鼠李糖苷酶的生产方法工艺简单、操作容易、生产效率高，且生产的鼠李糖苷酶活力高，稳定性好，易于储存。
下面结合具体实施例，对本发明作进一步的阐述。
实施例1
一种鼠李糖苷酶的生产方法，包括以下步骤：
(1)取细丽毛壳菌种按5％的接种量接种于一级种子培养基中，在38℃培养30h，控制溶氧在60％以上，培养即得一级种子液。
其中，一级种子培养基的成分为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁1g/L、氯化锌0.2g/L、丙酸钙20g/L。
(2)将所述一级种子液按5的接种量接种于二级种子培养基中，在38℃培养30h，控制溶氧在60％以上，培养即得二级种子液。
其中，二级种子培养基的成分为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁1g/L、氯化锌0.2g/L、丙酸钙20g/L。
(3)将所述二级种子液按20％的接种量接种于发酵培养基中，在25℃培养40h，控制溶氧在60％以上，得到混合培养基，后按每升混合培养基添加5g蔗糖的比例添加蔗糖，并开始按每升混合培养基流加橘皮苷5g/小时的比例添加橘皮苷，同时控制pH为4.5，培养96h后即得酶活达到500U/mL以上的鼠李糖苷酶发酵液。
其中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物10g/L、氯化钠5g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化锌0.5g/L、丙酸钙30g/L。
(4)将鼠李糖苷酶发酵液进行板框过滤，除去菌体及其他微小颗粒，后对滤液超滤浓缩，直至得到酶活达到1250U/mL的鼠李糖苷酶酶液。
(5)将鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，即可得到酶活达到3500U/mL的固体鼠李糖苷酶。
实施例2
一种鼠李糖苷酶的生产方法，包括以下步骤：
(1)取细丽毛壳菌种按20％的接种量接种于一级种子培养基中，在25℃培养10h，控制溶氧在60％以上，培养即得一级种子液。
其中，一级种子培养基的成分为：橘皮苷50g/L、酵母抽提物10g/L、氯化钠3/L、磷酸二氢铵2g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化锌0.2g/L、丙酸钙20g/L。
(2)将所述一级种子液按5％的接种量接种于二级种子培养基中，在25℃培养30h，控制溶氧在60％以上，培养即得二级种子液。
其中，二级种子培养基的成分为：橘皮苷50g/L、酵母抽提物10g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵2g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化锌0.2g/L、丙酸钙20g/L。
(3)将所述二级种子液按5％的接种量接种于发酵培养基中，在25℃培养40h，控制溶氧在60％以上，得到混合培养基，后按每升混合培养基添加10g蔗糖的比例添加蔗糖，并开始按每升混合培养基流加橘皮苷5g/小时的比例添加橘皮苷，同时控制pH为5.5，培养70h后即得酶活达到510U/mL以上的鼠李糖苷酶发酵液。
其中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠5g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁1g/L、氯化锌0.5g/L、丙酸钙30g/L。
(4)将鼠李糖苷酶发酵液进行板框过滤，除去菌体及其他微小颗粒，后对滤液超滤浓缩，直至得到酶活达到1285U/mL的鼠李糖苷酶酶液。
(5)将鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，即可得到酶活达到3520U/mL的固体鼠李糖苷酶。
实施例3
一种鼠李糖苷酶的生产方法，包括以下步骤：
(1)取细丽毛壳菌种按10％的接种量接种于一级种子培养基中，在30℃培养20h，控制溶氧在60％以上，培养即得一级种子液。
其中，一级种子培养基的成分为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵2g/L、硫酸镁1g/L、氯化锌0.3g/L、丙酸钙25g/L。
(2)将所述一级种子液按5％的接种量接种于二级种子培养基中，在35℃培养20h，控制溶氧在60％以上，培养即得二级种子液。
其中，二级种子培养基的成分为：橘皮苷55g/L、酵母抽提物13g/L、氯化钠4g/L、磷酸二氢铵2g/L、硫酸镁1g/L、氯化锌0.4g/L、丙酸钙25g/L。
(3)将所述二级种子液按15％的接种量接种于发酵培养基中，在35℃培养50h，控制溶氧在60％以上，得到混合培养基，后按每升混合培养基添加8g蔗糖的比例添加蔗糖，并开始按每升混合培养基流加橘皮苷4g/小时的比例添加橘皮苷，同时控制pH为4.5，培养80h后即得酶活达到515U/mL以上的鼠李糖苷酶发酵液。
其中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵2g/L、硫酸镁1g/L、氯化锌0.5g/L、丙酸钙20g/L。
(4)将鼠李糖苷酶发酵液进行板框过滤，除去菌体及其他微小颗粒，后对滤液超滤浓缩，直至得到酶活达到1320U/mL的鼠李糖苷酶酶液。
(5)将鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，即可得到酶活达到3535U/mL的固体鼠李糖苷酶。
实施例4
一种鼠李糖苷酶的生产方法，包括以下步骤：
(1)取细丽毛壳菌种按20％的接种量接种于一级种子培养基中，在25℃培养10h，控制溶氧在60％以上，培养即得一级种子液。
其中，一级种子培养基的成分为：橘皮苷50g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化锌0.5g/L、丙酸钙30g/L。
(2)将所述一级种子液按5～20％的接种量接种于二级种子培养基中，在38℃培养10h，控制溶氧在60％以上，培养即得二级种子液。
其中，二级种子培养基的成分为：橘皮苷50g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化锌0.5g/L、丙酸钙20g/L。
(3)将所述二级种子液按5～20％的接种量接种于发酵培养基中，在38℃培养40h，控制溶氧在60％以上，得到混合培养基，后按每升混合培养基添加10g蔗糖的比例添加蔗糖，并开始按每升混合培养基流加橘皮苷0.5g/小时的比例添加橘皮苷，同时控制pH为5.5，培养70h后即得酶活达到505U/mL以上的鼠李糖苷酶发酵液。
其中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷50～60g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L。
(4)将鼠李糖苷酶发酵液进行板框过滤，除去菌体及其他微小颗粒，后对滤液超滤浓缩，直至得到酶活达到1260U/mL的鼠李糖苷酶酶液。
(5)将鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，即可得到酶活达到3511U/mL的固体鼠李糖苷酶。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (6)

1.一种鼠李糖苷酶的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取细丽毛壳菌种按5～20％的接种量接种于一级种子培养基中，在25～38℃培养10～30h，控制溶氧在60％以上，培养即得一级种子液；
(2)将所述一级种子液按5～20％的接种量接种于二级种子培养基中，在25～38℃培养10～30h，控制溶氧在60％以上，培养即得二级种子液；
(3)将所述二级种子液按5～20％的接种量接种于发酵培养基中，在25～38℃培养40～55h，控制溶氧在60％以上，得到混合培养基，后按每升混合培养基添加5～10g蔗糖的比例添加蔗糖，并开始按每升混合培养基流加橘皮苷0.5～5g/小时的比例添加橘皮苷，同时控制pH为4.5～5.5，培养70～96h后即得酶活达到500U/mL以上的鼠李糖苷酶发酵液，其中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷60～80g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L；
(4)将所述鼠李糖苷酶发酵液进行过滤，除去菌体及其他微小颗粒，后对滤液超滤浓缩，直至得到酶活达到1250U/mL以上的鼠李糖苷酶酶液；
(5)将所述鼠李糖苷酶酶液以淀粉为载体，进行喷雾干燥，即可得到酶活达到3500U/mL以上的固体鼠李糖苷酶；
其中，步骤(1)中的所述一级种子培养基和步骤(2)中的所述二级种子培养基的成分都为：橘皮苷60～80g/L、酵母抽提物10～15g/L、氯化钠3～5g/L、磷酸二氢铵2～3g/L、硫酸镁0.5～1g/L、氯化锌0.2～0.5g/L、丙酸钙20～30g/L。
2.根据权利要求1所述的鼠李糖苷酶的生产方法，其特征在于，所述一级种子培养基、所述二级种子培养基的成分都为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物15g/L、氯化钠3g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁1g/L、氯化锌0.2g/L、丙酸钙20g/L。
3.根据权利要求1所述的鼠李糖苷酶的生产方法，其特征在于，步骤(2)中，所述发酵培养基的成分为：橘皮苷60g/L、酵母抽提物10g/L、氯化钠5g/L、磷酸二氢铵3g/L、硫酸镁0.5g/L、氯化锌0.5g/L、丙酸钙30g/L。
4.根据权利要求1所述的鼠李糖苷酶的生产方法，其特征在于，步骤(3)中，通过添加氨水的方式控制pH为5.0～5.5。
5.根据权利要求1所述的鼠李糖苷酶的生产方法，其特征在于，步骤(1)、(2)、(3)中控制溶氧的方法都为：在培养过程中，调整搅拌转速或通入无菌空气控制溶氧在60％以上。
6.根据权利要求1所述的鼠李糖苷酶的生产方法，其特征在于，步骤(4)中，将鼠李糖苷酶发酵液通过板框过滤方法，除去菌体及其他微小颗粒。
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Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101089175A (zh) * 2006-06-14 2007-12-19 浙江工业大学 一种同时高产柚苷酶和橙皮苷酶的黑曲霉菌wz001及其应用
CN101092611A (zh) * 2006-09-08 2007-12-26 颜廷和 一种制备纯化柚苷酶的方法及其酶制剂的应用
CN101914451A (zh) * 2010-07-08 2010-12-15 山东大学 产α-L-鼠李糖苷酶的链格孢菌株及其培养方法与应用
CN102399770A (zh) * 2011-09-06 2012-04-04 广西大学 一种利用细丽毛壳菌发酵制备右旋糖酐酶粗酶的方法
CN102703480A (zh) * 2012-05-10 2012-10-03 宁夏夏盛实业集团有限公司 α-葡聚糖酶和工程菌及应用
CN103865906A (zh) * 2014-03-17 2014-06-18 广西大学 超声条件下细丽毛壳菌发酵制备α-葡聚糖酶的方法
CN105176843A (zh) * 2015-10-22 2015-12-23 江南大学 一株产α-L-鼠李糖苷酶的菌株及采用该菌株发酵生产α-L-鼠李糖苷酶的方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101089175A (zh) * 2006-06-14 2007-12-19 浙江工业大学 一种同时高产柚苷酶和橙皮苷酶的黑曲霉菌wz001及其应用
CN101092611A (zh) * 2006-09-08 2007-12-26 颜廷和 一种制备纯化柚苷酶的方法及其酶制剂的应用
CN101914451A (zh) * 2010-07-08 2010-12-15 山东大学 产α-L-鼠李糖苷酶的链格孢菌株及其培养方法与应用
CN102399770A (zh) * 2011-09-06 2012-04-04 广西大学 一种利用细丽毛壳菌发酵制备右旋糖酐酶粗酶的方法
CN102703480A (zh) * 2012-05-10 2012-10-03 宁夏夏盛实业集团有限公司 α-葡聚糖酶和工程菌及应用
CN103865906A (zh) * 2014-03-17 2014-06-18 广西大学 超声条件下细丽毛壳菌发酵制备α-葡聚糖酶的方法
CN105176843A (zh) * 2015-10-22 2015-12-23 江南大学 一株产α-L-鼠李糖苷酶的菌株及采用该菌株发酵生产α-L-鼠李糖苷酶的方法

Non-Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SUN GUANG-YU: "The family Chaetomiaceae from China I. Species of the genus Chaetomium", 《菌物学报》 *
吴升山 等: "黑曲霉DB056产柚苷酶发酵条件初步优化", 《微生物学通报》 *
吴绍熙: "《现代医学真菌检验手册》", 31 July 1998, 北京医科大学 中国协和医科大学 联合出版社 *
李彦萍 等: "《食品化学理论与应用研究》", 31 July 2015, 中国水利水电出版社 *
滕芳超 等: "嗜热毛壳菌一种 β-葡萄糖苷酶的分离纯化及特性", 《菌物学报》 *
王艳君 等: "α-L-鼠李糖苷酶的研究进展", 《中国酿造》 *
韩冰 等: "两种菌产两种不同天然苷类α -鼠李糖苷酶的研究", 《大连工业大学学报》 *
麻少莹: "细丽毛壳菌发酵生产右旋糖酐酶的工艺条件优化及应用研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》 *

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