CN105385734A - 一种鸭血小分子肽的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鸭血小分子肽的制备方法，以肉鸭加工副产物鸭血为原料，运用抗凝抗氧化技术、生物同步酶解技术、酶解上清液脱色处理及喷雾干燥等技术集成，研发特定分子量范围具有生理活性的小分子肽。本血蛋白水解专用酶中加入了一定量的风味酶，可减少苦味肽的生成，提高产品的适口性，本产品不仅可以替代鱼粉缓解动物蛋白紧缺的局面，还可以部分取代多种提高免疫抗病的药物添加剂，真正生产出自然健康的食品。本发明工艺制备工艺简单合理，生产成本低，适合于大规模工业化生产。
Description
技术领域
本发明属于农副产品精加工技术领域，具体涉及是一种以鸭血为原料制备小分子肽的方法。
背景技术
我国的畜禽血液资源非常丰富，但目前加工技术较为落后，产业化程度较低，除部分以血粉、血豆腐或饲料原料等初级加工形式利用之外，相当一部分以污水的形式排放或丢弃，利用率不到10%，致使大量宝贵营养资源流失，且造成严重的环境污染。
鸭血中富含大量优质蛋白质，特别是占血液总蛋白质含量60%～70%的血红蛋白，经水解出分离出来的小分子肽，不仅有很好的溶解性、低黏度、抗凝胶形成性，在体内不用消化可以直接吸收，还具有一系列重要的功能活性，如阿片样活性、ACE抑制活性、增强血管舒缓激肽活性、刺激细菌生长活性、镇痛活性、抗菌活性及抗氧化活性等。
以畜禽血为原料，深加工开发小分子肽是当前的研究热点，但技术路线大多较为单一，纯度较低。目前主要技术有溶剂提取法、酸碱水解法和酶水解法。有机溶剂提取法使用有机溶剂进行提取，但有机溶剂的残留使得产品存在安全隐患；酸碱水解法存在可控性差，产物杂、附加值不高等缺陷；生物酶解一般只需在常压、中温条件下进行，加上酶解技术的高效、专一等特性使酶解技术更具有操作性，是生产小分子肽的一种非常有潜力的技术，但单一酶的水解度不高、酶解效率低、水解产物较为粗放。
发明内容
蛋白质的酶水解生产小分子肽是增强蛋白质附加值的一种效果方法，蛋白质水解产物的性质由水解程度和产生的肽的结构决定，而水解程度又依赖于蛋白质的性质和所使用酶的特性，同时与水解条件，尤其是pH值和温度有关。
研究表明，若采用单一酶水解血浆蛋白，不仅水解度低，同时因生成苦肽而产生苦味，因此将多种蛋白酶复合，进行深度水解，可断开血浆蛋白分子肽链内部的肽键，同时分解苦味肽段，降低苦味。发明人在研究中发现中性蛋白酶和风味蛋白酶复合水解鸭血球，效果较好，且其最适水解条件相近，因此考虑同步进行两种蛋白酶的酶解，以提高酶解效率，降低能耗。
目前，越来越多的研究集中于将两个或多个作用条件相近的酶解过程耦合起来，即同步酶解，多种酶同步作用于底物，在增强酶解效果的同时还能减少酶解时间和能耗。本发明采用同步酶解法水解鸭血球，选择合适的内切蛋白酶（中性蛋白酶）和外切蛋白酶（风味蛋白酶），以酶的水解度和苦味肽生成量为指标，通过控制酶解时间、酶解温度、pH值、酶用量等条件，建立了鸭血球的最佳酶解工艺，提高血球的水解度，减少苦味肽生成量。
本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种生产特定分子量范围具有生理活性的小分子血肽的工艺，提高了血球的水解度，减少了苦味肽生成量。
本发明采取的技术方案是：
一种鸭血小分子肽的制备方法，其特征在于按以下步骤进行：
(1)鸭血的抗凝抗氧化处理：采用2g/L的抗坏血酸作为抗氧化剂，添加量为血量的0.05%-0.1%；以及4g/L的柠檬酸三钠作为抗凝剂，添加量为血量的16.7%；
(2)离心处理：采用4000r/min离心30min，上清液为血浆，离心沉淀物为血球；
(3)血球溶血：将步骤（2）离心处理获得的沉淀物血球，以血球：水=1:2～6的重量比加入自来水，升温至40～45℃后用浓度0.5mol/L的氢氧化钠调pH值7.5～8.0；
(4)酶解：第一阶段在pH7.5～8.0，温度55℃下，采用0.3%的中性蛋白酶酶解2h；第二阶段在pH值7.0，反应温度50℃，采用0.2%风味蛋白酶同步酶解时间3h，得到酶解液；
(5)灭酶：将鸭血球酶解液升温至80～90℃，恒温维持20～30min；
(6)离心分离：将灭酶后的鸭血球酶解液加入10%盐酸调节pH值为4.5，静置2h，4000r/min离心30min，收集上清液；
(7)浓缩：通过高效顺流降膜浓缩器浓缩至干物质含量为30～50%；
(8)干燥：通过喷雾干燥机将浓缩液干燥成粉末状产品。
上述步骤（8）中，所述的喷雾干燥的热风进风温度为195～200℃，出风温度为90～95℃。
本发明的有益效果是：
1.本发明所述生产工艺不仅提高了产品的附加值，对鸭血资源进行了全效综合利用，而且生产过程中无污染物排放，可达到无环境污染的生态效益。
2.本发明所得产品为浅黄色，无异味，苦味度轻，适口性好，本产品不仅可以替代鱼粉缓解动物蛋白紧缺的局面，还可以部分取代多种提高免疫抗病的药物添加剂，真正生产出自然健康的食品。
具体实施方式
实施例l
(1)鸭血的抗凝抗氧化处理：选用大型宰鸭厂新鲜血液为原料，采用2g/L的抗坏血酸作为抗氧化剂，添加量为血量的0.05%；以及4g/L的柠檬酸三钠作为抗凝剂，添加量为血量的16.7%；
(2)离心处理：采用4000r/min离心30min，上清液为血浆，离心沉淀物为血球；
(3)血球溶血：将步骤（2）离心处理获得的沉淀物血球，以血球：水=1:2的重量比加入自来水，升温至40℃后用浓度0.5mol/L的氢氧化钠调pH值7.5；
(4)酶解：第一阶段在pH7.5，温度55℃下，采用0.3%的中性蛋白酶酶解2h；第二阶段在pH值7.0，反应温度50℃，采用0.2%风味蛋白酶同步酶解时间3h，得到酶解液；
(5)灭酶：将鸭血球酶解液升温至80℃，恒温维持30min；
(6)离心分离：将灭酶后的鸭血球酶解液加入10%盐酸调节pH值为4.5，静置2h，4000r/min离心30min，收集上清液；
(7)浓缩：通过高效顺流降膜浓缩器浓缩至干物质含量为30%；
(8)干燥：通过喷雾干燥机将浓缩液干燥，喷雾干燥的热风进风温度为200℃，出风温度为95℃，收集喷雾干燥粉末状产品。
实施例2
(1)鸭血的抗凝抗氧化处理：选用大型宰鸭厂新鲜血液为原料，采用2g/L的抗坏血酸作为抗氧化剂，添加量为血量的0.1%；以及4g/L的柠檬酸三钠作为抗凝剂，添加量为血量的16.7%；
(2)离心处理：采用4000r/min离心30min，上清液为血浆，离心沉淀物为血球；
(3)血球溶血：将步骤（2）离心处理获得的沉淀物血球，以血球：水=1:6的重量比加入自来水，升温至45℃后用浓度0.5mol/L的氢氧化钠调pH值8.0；
(4)酶解：第一阶段在pH8.0，温度55℃下，采用0.3%的中性蛋白酶酶解2h；第二阶段在pH值7.0，反应温度50℃，采用0.2%风味蛋白酶同步酶解时间3h，得到酶解液；
(5)灭酶：将鸭血球酶解液升温至90℃，恒温维持20min；
(6)离心分离：将灭酶后的鸭血球酶解液加入10%盐酸调节pH值为4.5，静置2h，4000r/min离心30min，收集上清液；
(7)浓缩：通过高效顺流降膜浓缩器浓缩至干物质含量为50%；
(8)干燥：通过喷雾干燥机将浓缩液干燥，喷雾干燥的热风进风温度为195℃，出风温度为90℃，收集喷雾干燥粉末状产品。
实施例3
(1)鸭血的抗凝抗氧化处理：选用大型宰鸭厂新鲜血液为原料，采用2g/L的抗坏血酸作为抗氧化剂，添加量为血量的0.08%；以及4g/L的柠檬酸三钠作为抗凝剂，添加量为血量的16.7%；
(2)离心处理：采用4000r/min离心30min，上清液为血浆，离心沉淀物为血球；
(3)血球溶血：将步骤（2）离心处理获得的沉淀物血球，以血球：水=1:4的重量比加入自来水，升温至45℃后用浓度0.5mol/L的氢氧化钠调pH值7.8；
(4)酶解：第一阶段在pH7.8，温度55℃下，采用0.3%的中性蛋白酶酶解2h；第二阶段在pH值7.0，反应温度50℃，采用0.2%风味蛋白酶同步酶解时间3h，得到酶解液；
(5)灭酶：将鸭血球酶解液升温至85℃，恒温维持25min；
(6)离心分离：将灭酶后的鸭血球酶解液加入10%盐酸调节pH值为4.5，静置2h，4000r/min离心30min，收集上清液；
(7)浓缩：通过高效顺流降膜浓缩器浓缩至干物质含量为40%；
(8)干燥：通过喷雾干燥机将浓缩液干燥，喷雾干燥的热风进风温度为198℃，出风温度为93℃，收集喷雾干燥粉末状产品。
Claims (2)
1.一种鸭血小分子肽的制备方法，其特征在于，按以下步骤进行：
(1)鸭血的抗凝抗氧化处理：采用2g/L的抗坏血酸作为抗氧化剂，添加量为血量的0.05%-0.1%；以及4g/L的柠檬酸三钠作为抗凝剂，添加量为血量的16.7%；
(2)离心处理：采用4000r/min离心30min，上清液为血浆，离心沉淀物为血球；
(3)血球溶血：将步骤（2）离心处理获得的沉淀物血球，以血球：水=1:2～6的重量比加入自来水，升温至40～45℃后用浓度0.5mol/L的氢氧化钠调pH值7.5～8.0；
(4)酶解：第一阶段在pH7.5～8.0，温度55℃下，采用0.3%的中性蛋白酶酶解2h；第二阶段在pH值7.0，反应温度50℃，采用0.2%风味蛋白酶同步酶解时间3h，得到酶解液；
(5)灭酶：将鸭血球酶解液升温至80～90℃，恒温维持20～30min；
(6)离心分离：将灭酶后的鸭血球酶解液加入10%盐酸调节pH值为4.5，静置2h，4000r/min离心30min，收集上清液；
(7)浓缩：通过高效顺流降膜浓缩器浓缩至干物质含量为30～50%；
(8)干燥：通过喷雾干燥机将浓缩液干燥成粉末状产品。
2.根据权利要求1所述的一种鸭血小分子肽的制备方法，其特征在于所述的喷雾干燥的热风进风温度为195～200℃，出风温度为90～95℃。
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