CN105384694A

CN105384694A - 一种取代的氨基嘧啶衍生物及其制备方法和药物用途

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Publication number: CN105384694A
Application number: CN201510522077.XA
Authority: CN
Inventors: 李瑶; 魏用刚; 张国彪; 邱关鹏; 胡仕红
Original assignee: Sichuan Haisco Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Sichuan Haisco Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2014-08-22
Filing date: 2015-08-24
Publication date: 2016-03-09
Anticipated expiration: 2035-08-24
Also published as: CN105384694B

Abstract

本发明涉及一种通式(I)和(II)所述的取代的氨基嘧啶衍生物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，以及制备方法和在制备肿瘤药物中的用途，其中通式(I)和(II)化合物为：

Description

一种取代的氨基嘧啶衍生物及其制备方法和药物用途

技术领域

本发明涉及一种通式(I)和(II)所述的取代的氨基嘧啶衍生物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，以及它们的制备方法和在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。

背景技术

随着工业化时代的到来，环境的污染以及生活方式的改变，导致癌症的发病率持续上升。目前，癌症已经成为威胁人类生命健康的主要杀手。根据国际癌症研究中心(IARC)报告：全球2008年癌症新发病例为1,266万，死亡病例为756万，占所有死亡人数的13％。未来几十年内，癌症发病人数仍将快速增长，预计2030年全球将有2136万癌症新发病例，死亡病例将达1315万，癌症治疗的市场需求将持续快速增长。

细胞表面受体中的受体酪氨酸激酶超家族通过细胞外生长因子对细胞信号的调节起重要的作用。受体酪氨酸激酶能够催化磷酸基团从ATP转移至底物的酪氨酸基团上。当没有配体激活受体酪氨酸激酶时，这些激酶处于未磷酸化的单体状态，其激酶域呈非活性的结构。当配体与受体酪氨酸激酶的胞外段结合时，受体发生寡聚化，并且自磷酸化，增加激酶的催化活性的同时形成了信号蛋白的结合位点，信号蛋白与其结合，从而激活多条信号通路。这些信号通路相互联系，调控细胞的增殖、生存、分化、功能、迁移和凋亡。当受体酪氨酸激酶失去调控，异常激活时，细胞会发生转化成肿瘤细胞，增殖、生长能力和耐药能力提高，具有较强的成血管能力、侵袭力和转移能力(Yarden和Sliwkowski,2001,NatRevMolCellBiol,2,127-137)。

ErbB家族属于受体酪氨酸激酶，包含四个成员：表皮生长因子受体(EGFR/HER1/ErbB1)、HER2(neu/ErbB2)、HER3(ErbB3)和HER4(ErbB4)(Olayioye,Neve等,2000,EMBOJ,19,3159-3167；Yarden和Sliwkowski,2001,NatRevMolCellBiol,2,127-137)。他们都含有胞外配体结合域、单跨膜域和胞内酪氨酸激酶和调节域。其功能是催化ATP的磷酸基转移至底物蛋白的酪氨酸基团上。配体依赖的受体寡聚化导致受体调节域的自磷酸化，从而发生胞内信号转导，最终引起细胞增殖。该信号通路与肿瘤的发生和发展密切相关。在多种肿瘤中，超活化的ErbB受体，尤其是EGFR，会导致生长因子信号的失调控。EGFR的激活通常是由于过表达或突变引起的持续活化或配体的自分泌表达。EGFR的过表达或突变在头颈癌、卵巢癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胃癌、乳腺癌、内膜癌、结肠癌、肺癌和脑瘤等多种癌症中都能检测到，通常预示这不良的预后。因此抑制EGFR是一个备受关注的抗肿瘤策略。许多靶向EGFR的小分子抑制剂相继被开发，其中一些已经运用于临床治疗。

第一代的EGFR激酶抑制剂如吉非替尼、厄罗替尼在临床上能有效治疗非小细胞肺癌，尤其是那些含有EGFR激酶域发生激活突变的非小细胞肺癌(Mok,Wu等,2009,NEnglJMed,361,947-957；Rosell,Moran等,2009,NEnglJMed,361,958-967)。最常见的EGFR激活突变是L858R和delE746_A750，相对于野生型的EGFR，这些突变能够增加受体对吉非替尼和厄罗替尼的亲和力，而降低受体对ATP的亲和力(Carey,Garton等,2006,CancerRes,66,8163-8171；Yun,Boggon等,2007,CancerCell,11,217-227)。但是，临床上，由于获得性耐药的出现，吉非替尼和厄罗替尼的运用最终受到了限制。超过50％的肺癌患者都会出现获得性耐药，其中超过90％都含有EGFR的T790M看门残基突变(Kobayashi,Boggon等,2005,NEnglJMed,352,786-792；Pao,Miller等,2005,PLoSMed,2,e73)。T790M突变并非从空间构象上阻碍药物的结合，而是恢复受体对ATP的亲和力，与野生型相当(Yun,Mengwasser等,2008,ProcNatlAcadSciUSA,105,2070-2075)。

第二代的EGFR激酶抑制剂普遍具有喹啉结构，是不可逆的EGFR抑制剂。不同于吉非替尼，它们含有亲电子能力，能够与EGFR中保守的半胱氨酸基团(Cys797)发生迈克尔加成反应。这些化合物的共价性质使它们相较于可逆的抑制剂，具有更强的占据ATP位点的能力，因此，尽管T790M突变能够增加ATP的亲和力，这类抑制剂在临床前模型中还是足以抑制EGFRT790M(Engelman,Zejnullahu等,2007,CancerRes,67,11924-11932；Li,Ambrogio等,2008,Oncogene,27,4702-4711)，但是，现有的不可逆抑制剂在细胞系模型上，抑制EGFRT790M突变的能力还是低于抑制仅有EGFR激活突变的能力，并且在临床上可用到的浓度下，这类化合物在体外无法抑制EGFRT790M(Yuza,Glatt等,2007,CancerBiolTher,6,661-667；Godin-Heymann,Ulkus等,2008,MolCancerTher,7,874-879)。由于EGFRT790M对ATP的亲和力与野生型的EGFR对ATP的亲和力相似，喹唑啉类的EGFR抑制剂在抑制EGFRT790M的同时，也会抑制野生型的EGFR。在临床上，同时抑制野生型EGFR会导致患者出现皮疹和腹泻，这会限制第二代EGFR抑制剂的使用剂量，以至于药物的血浆浓度用不足以抑制T790M，使这类药物的临床有效性受到较大的限制。例如CI-1033、HKI-272和PF00299804，在临床上针对吉非替尼和厄罗替尼耐药的非小细胞肺癌的治疗非常有限，并且会发生剂量依赖的腹泻和皮疹(Janne,vonPawel等,2007,JClinOncol,25,3936-3944；Advani,Coiffier等,2010,JClinOncol,28,2085-2093)。

为了能够特异性针对EGFRT790M进行抑制，第三代EGFR突变选择性抑制剂问世。这类不可逆抑制剂比起第二代喹啉类化合物，对EGFRT790M具有更高的选择性，在临床上可能具有更高的活性和更好的耐受。例如共价的嘧啶类EGFR抑制剂WZ4002，在体外实验中，相比喹啉类化合物，对EGFRT790M的选择性高30-100倍，而对野生型EGFR抑制则低100倍。在EGFRT790M衍生的动物肺癌模型中，也展现出较好的药效(Zhou,Ercan等,2009,Nature,462,1070-1074)。另一突变选择性抑制剂CO-1686，在体外对EGFRT790M的选择性比对野生型EGFR高10-25倍。能选择性地抑制EGFR的突变，包括耐药突变T790M和激活突变(L858R,del19)，而对野生型EGFR无抑制。在体外，口服CO-1686能够导致T790M突变的肿瘤衰退，并且不介导肿瘤细胞发生进一步的耐药突变(Walter,Sjin等,2013,CancerDiscov,3,1404-1415)。为了满足临床需求，需要继续研发在能够有效克服T790M突变的浓度下不产生明显毒副作用的EGFR抑制剂。

目前已有多篇文献报道了蛋白激酶抑制剂及其抗肿瘤的用途。如：

WO2011140338描述了可作为EGFR抑制剂的杂环衍生物，以及作为抗肿瘤药物的用途，结构如下所示：

其中B选自6至10元的含至少一个N原子的单芳基或双杂芳基，X1选自O、S或N，R²⁹、R^29a和R29b各自独立的选自H、5至6元非杂芳基、5至6元非杂芳基亚甲基或5至6元非杂芳基羰基。

WO2011090760、WO2009158571描述了可作为蛋白激酶抑制剂的嘧啶衍生物，以及作为治疗多种疾病药物的用途，结构如下所示：

其中A、B各自独立的选自杂环或碳环。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新颖的、效果好、耐受性好、选择性高或毒副作用低的取代氨基嘧啶衍生物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，是一种EGFR抑制剂，及其在制备治疗癌症相关药物中的用途。本发明涉及一种通式(I)所示的化合物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

A、B各自独立的选自C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环、C₁₀碳环、3元杂环、4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环、9元杂环或10元杂环，所述碳环和杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_3-10碳环、3至10元杂环或C_3-10碳环-C_1-4亚烷基的取代基所取代，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子；

R¹选自H、F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基，所述的烷基或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R²为H、C_1-4烷基、C_2-6烯基、C₃环烷基、C₄环烷基、C₅环烷基、C₆环烷基或C_1-4烷氧基，所述烷基、烯基、环烷基或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个被选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R³选自H、F、Cl、Br、I、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c、C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环、C₁₀碳环、3元杂环、4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环、9元杂环或10元杂环，所述杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述碳环和杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3a选自C_1-4烷氧基、C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环、C₁₀碳环、3元杂环、4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环、9元杂环或10元杂环，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述的碳环、杂环或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、C_1-4烷基或3至6元碳环(C3碳环、C4碳环、C5碳环或C6碳环)；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成一个4至7元(4、5、6或7元)的杂环，所述的杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，所述的杂环任选进一步被0至4个(0、1、2、3或4个)选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(C_1-4烷基)-；

n选自0、1、2或3。

本发明优选方案，一种通式(I)所示的化合物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：A选自C_3-10碳环(C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环、C₁₀碳环)、或3至10元杂环(3元杂环、4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环、9元杂环或10元杂环)；优选C_3-6碳环(C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环)或4至9元杂环(4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环或9元杂环)；进一步优选C₅碳环、C₆碳环、5至9元杂环(5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环或9元杂环)；更优选取代或未取代的四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或最优选取代或未取代的吗啉基、哌嗪基或

所述碳环、杂环、四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_3-10碳环、3至10元杂环或C_3-10碳环-C_1-4亚烷基的取代基所取代，优选被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-2烷基、C_1-4烷氧基或C_3-6碳环-C_1-2亚烷基的取代基所取代，进一步优选被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、的取代基所取代，更优选被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、甲基、乙基、甲氧基、的取代基所取代，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子。

本发明优选方案，一种通式(I)所示的化合物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：B选自C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环、C₁₀碳环、3元杂环、4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环、9元杂环或10元杂环，优选C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环或C₁₀碳环，进一步优选苯基或萘基，更优选苯基；

所述碳环和杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_3-10碳环、3至10元杂环或C_3-10碳环-C_1-4亚烷基的取代基所取代，优选被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代，进一步优选被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基的取代基所取代，更优选被0、1、2、3或4个选自F、Cl、甲基或甲氧基的取代基所取代，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子。

本发明优选方案，一种通式(I)所示的化合物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

A选自C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环或9元杂环，优选C₅碳环、C₆碳环、4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环或9元杂环，所述碳环和杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-2烷基C_1-4烷氧基或C_3-6碳环-C_1-2亚烷基的取代基所取代，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子；

B选自C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环或C₁₀碳环，优选苯基或萘基，所述碳环、苯基或萘基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R¹选自H、F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基，所述的烷基或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl或Br的取代基所取代；

R²为H、C_1-4烷基、C_2-6烯基、C₃环烷基、C₄环烷基、C₅环烷基、C₆环烷基或C_1-4烷氧基，所述烷基、烯基、环烷基或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl或Br的取代基所取代；

R³选自H、F、Cl、Br、I、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环或9元杂环，优选H、F、Cl、Br、I、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环或9元杂环，进一步优选H、F、Cl、Br、I、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c、5元杂环、6元杂环或9元杂环，所述杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述碳环和杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3a选自C_1-4烷氧基、C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、3元杂环、4元杂环、5元杂环或6元杂环，优选C_1-4烷氧基、C₅碳环、C₆碳环、5元杂环或6元杂环，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述的碳环、杂环或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、C_1-4烷基、或3至6元碳环(C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环或C₆碳环)；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成一个4至6元(4、5或6元)的杂环，所述的杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，所述的杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(C_1-4烷基)-；

n选自0、1、2或3。

A选自5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环或9元杂环，所述杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、的取代基所取代，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子；

B为苯基，所述苯基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基的取代基所取代；

R²为H、C_1-4烷基、C_2-4烯基、C₃环烷基、C₄环烷基或C_1-4烷氧基，所述烷基、烯基、环烷基或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl或Br的取代基所取代；

R³选自H、F、Cl、Br、I、9元杂环、Z-(CH₂)_nR^3a或Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c，所述杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3a选自C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、4元杂环、5元杂环或6元杂环，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述的碳环或杂环任选被0、1、2、3或4个选自甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氨基、-NH(CH₃)-或-N(CH₃)_2-的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、C_1-4烷基、C₃碳环、C₄碳环或C₅碳环；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成一个5至6元的杂环，所述的杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，所述的杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自氨基或C_1-4烷基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(C_1-4烷基)-；

n选自0、1、2或3。

A选自取代或未取代的四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或优选取代或未取代的吗啉基、哌嗪基或当被取代时，任选进一步被1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、乙酰基、(＝O)、甲基、甲氧基、乙基、的取代基所取代；

B为苯基，所述苯基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基的取代基所取代，优选被0、1、2、3或4个选自F、Cl、甲基或甲氧基的取代基所取代；

R¹选自H、F、Cl、CF₃、甲基或甲氧基，优选H、F、Cl或CF₃；

R²选自H、甲基、乙基、乙烯基、环丙基、甲氧基、氟代甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基，优选H、甲氧基、环丙基、二氟甲氧基或三氟甲氧基，进一步优选H、甲氧基或环丙基；

R³选自H、F、Cl、Br、I、9元杂环、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c，优选H、F、或Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c，所述杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3a选自取代或未取代的环丙基、四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基，优选取代或未取代的哌啶基或哌嗪基，当被取代时，任选进一步被0、1、2、3或4个选自甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氨基、-NH(CH₃)-或-N(CH₃)₂-的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、甲基、乙基或环丙基；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成5元杂环或6元杂环，所述杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，R^3b、R^3c优选与其相连接的氮原子形成四氢吡咯基、吗啉基、哌啶基或哌嗪基，其中所述的杂环、四氢吡咯基、吗啉基、哌啶基或哌嗪基可任选进一步被0、1、2、3或4个选自氨基、甲基或乙基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(CH₃)-，优选-NH-或-N(CH₃)-；

n选自0、1、2或3。

A为取代或未取代的吗啉基、哌嗪基或当被取代时，任选进一步被1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、乙酰基、甲基、甲氧基、乙基、的取代基所取代；

B为苯基，所述苯基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、甲基或甲氧基的取代基所取代，优选进一步被0、1或2个甲氧基所取代；

R¹为H、F、Cl或CF₃；

R²为H、甲氧基或环丙基；

R³选自H、F、Cl、或Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、甲基、乙基或环丙基；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成四氢吡咯基、吗啉基、哌啶基或哌嗪基，当被取代时，可任选进一步被1或2个选自氨基、甲基或乙基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(CH₃)-；

n选自0、1、2或3。

本发明提供一种通式(II)所示的化合物，或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

X、Y各自独立选自C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环、C₁₀碳环、3元杂环、4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环、9元杂环或10元杂环，所述碳环或杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_3-10碳环、3至10元杂环或C_3-10碳环-C_1-4亚烷基的取代基所取代，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子；

W为化学键、-O-、-NH-、-CH₂-或-N(C_1-4烷基)-；

R²为H、C_1-4烷基、C_2-6烯基、C_3-6环烷基或C_1-4烷氧基，所述烷基、烯基、环烷基或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R³选自H、F、Cl、Br、I、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c、C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环、C₁₀碳环、3元杂环、4元杂环、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环、9元杂环或10元杂环，所述杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述碳环和杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、C_1-4烷基、C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环或C₆碳环；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成一个4至7元的杂环，所述的杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，所述的杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(C_1-4烷基)-；

n选自0、1、2或3。

本发明优选方案，通式(II)所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

X选自C₆碳环、C₇碳环、C₈碳环、C₉碳环或C₁₀碳环，优选苯基或萘基，更优选苯基，所述碳环、苯基或萘基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

W选自化学键、-O-、-NH-、-CH₂-或-N(C_1-4烷基)-，优选化学键、-O-、-NH-或-N(CH₃)-；

Y选自6元杂环、7元杂环、8元杂环、9元杂环或10元杂环，优选取代或未取代的四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、更优选哌啶基、哌嗪基、所述杂环、四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、任选进一步被0、1、2、3或4选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-2烷基、C_1-4烷氧基、C_3-6碳环-C_1-2亚烷基的取代基所取代，优选被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、甲基、乙基、甲氧基、的取代基所取代，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子；

R¹选自H、F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基，优选H、F、Cl、CF₃、甲基或甲氧基，所述的烷基或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl或Br的取代基所取代；

R²为H、C_1-4烷基、C_2-6烯基、C_3-6环烷基或C_1-4烷氧基，优选H、甲基、乙基、环丙基、甲氧基、氟代甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基，所述烷基、烯基、环烷基或烷氧基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl或Br的取代基所取代；

R³选自H、F、Cl、Br、I、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c、5元杂环、6元杂环、7元杂环、8元杂环或9元杂环，优选H、F、Cl、Br、I、9元杂环、Z-(CH₂)_nR^3a或Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c，所述杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3a选自C_1-4烷氧基、C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、C₆碳环、3元杂环、4元杂环、5元杂环或6元杂环，优选四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述的烷氧基、碳环、杂环、四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成一个4、5或6元的杂环，所述的杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，所述的杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(C_1-4烷基)-；

n选自0、1、2或3。

X为苯基，所述苯基任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基的取代基所取代；

W选自化学键、-O-、-NH-、-CH₂-或-N(CH₃)-；

Y选自取代或未取代的哌啶基、当被取代时，任选进一步被1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、甲基、乙基、甲氧基、的取代基所取代；

R¹选自H、F、Cl、CF₃、甲基或甲氧基，优选H、F、Cl或CF₃；

R²选自H、甲基、乙基、环丙基、甲氧基、氟代甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基，优选H、甲氧基或环丙基；

R³选自H、F、Cl、Br、I、9元杂环、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c，优选H、F、Cl或Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c，所述杂环任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、Br、I、氨基、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基或C_1-4烷氧基的取代基所取代，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子；

R^3a选自C₃碳环、C₄碳环、C₅碳环、4元杂环、5元杂环或6元杂环，所述的杂环含有1、2、3或4个选自N、O或S的杂原子，所述的碳环或杂环任选被0、1、2、3或4个选自甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氨基、NH(CH₃)或N(CH₃)₂的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、C_1-4烷基、3元碳环、4元碳环或5元碳环，优选H、甲基或乙基；

Z为-O-、-NH-或-N(CH₃)-，优选-NH-或-N(CH₃)-；

n选自0、1、2或3。

X为苯基，所述苯基任选进一步被0、1、2、3或4个选自F、Cl、甲基或甲氧基的取代基所取代；

W为化学键、-O-、-NH-、-CH_2-或-N(CH₃)-；

Y为取代或未取代的当被取代时，任选进一步被1至4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、甲基、甲氧基、乙基、的取代基所取代；

R¹为H、F、Cl或CF₃；

R²为H、甲氧基或环丙基；

R³选自H、F、Cl、或Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、甲基、乙基或环丙基；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成四氢吡咯基、吗啉基、哌啶基或哌嗪基，当被取代时，可任选进一步被0至2个选自氨基、甲基或乙基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(CH₃)-；

n选自0、1、2或3。

本发明优选方案，一种通式(I)或(II)所示的化合物，其中该化合物选自如下结构之一：

本发明优选方案，本发明所示化合物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中所述的盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、乙酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、扁桃酸盐、富马酸盐、丙二酸盐、苹果酸盐、2-羟基丙酸盐、草酸盐、羟乙酸盐、水杨酸盐、葡萄糖醛酸盐、半乳糖醛酸盐、枸橼酸盐、酒石酸盐、赖氨酸盐、精氨酸盐、门冬氨酸盐、谷氨酸盐、苯甲酸盐、肉桂酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、三氟甲磺酸盐、三氟乙酸盐、钾盐、钠盐或它们的组合，优选盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、富马酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐或它们的组合。

本发明还进一步涉及一种药物组合物，所述药物组合物含有治疗有效剂量的本发明化合物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，以及药学上可接受的载体或者赋形剂。

本发明的代化合物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，或包含其的药物组合物，可用作EGFR抑制剂，效果好、耐受性好、选择性高，毒副作用低。

本发明涉及一种本发明化合物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，在制备治疗癌症相关药物中的用途。所述的癌症包括头颈癌、卵巢癌、膀胱癌、宫颈癌、食道癌、胃癌、乳腺癌、内膜癌、结肠癌、肺癌、脑瘤、非小细胞肺癌、胰腺癌、实体肿瘤、结直肠肿瘤或恶性胶质瘤等。

本发明通式(I)化合物的合成方法：

其中X各自独立的选自F、Cl、Br或I，

R⁴选自H、F、Cl、Br或I，

A、B、R¹、R²或R³的定义与通式(I)化合物所述定义一致；

通式(I-A)化合物和通式(I-B)化合物在碱存在下反应得到通式(I-C)化合物，所述的碱选自二异丙基乙基胺、二异丙基胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、醋酸钾、醋酸钠、氢化钠或碳酸铯；

通式(I-C)化合物与取代的苯胺化合物在酸存在下反应得到通式(I-D)化合物，所述的酸选自盐酸、硫酸、三氟乙酸、乙酸、苯磺酸或对甲苯磺酸；

还原通式(I-D)化合物的硝基得到通式(I-E)化合物，所述的还原剂选自H₂、Pt、Fe、Zn、LiAlH₄或NaBH₄；

如果R³为H、F、Cl、Br或I，那么通式(I-D)化合物的硝基被还原得到通式(I-E)化合物，所述的还原剂选自H₂、Pt、Fe、Zn、LiAlH₄或NaBH₄；

否则，通式(I-D)化合物与H-R³在碱存在下反应得到通式(I-E`)化合物，通式(I-E`)化合物的硝基被还原得到通式(I-E)化合物，所述的碱选自二异丙基乙基胺、二异丙基胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、醋酸钾、醋酸钠、氢化钠或碳酸铯等，所述的还原剂选自H₂、Pt、Fe、Zn、LiAlH₄或NaBH₄；

通式(I-E)化合物与丙烯酰卤(例如丙烯酰氯)在碱存在下反应得到通式(I)化合物，所述的碱选自二异丙基乙基胺、二异丙基胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、醋酸钾、醋酸钠、氢化钠或碳酸铯等；

本发明通式(II)化合物的合成方法：

其中M选自F、Cl、Br或I；

P为氨基保护基，例如叔丁氧羰基、苄氧羰基、邻苯二甲酰基、对甲苯磺酰基、三苯甲基或三氟乙酰基等；

R⁴选自H、F、Cl、Br或I，

X、W、Y、R¹、R²或R³的定义与通式(II)化合物所述定义一致；

通式(II-A)化合物和通式(II-B)化合物在碱存在下反应后脱去氨基保护基，得到通式(II-C)化合物，所述的碱选自二异丙基乙基胺、二异丙基胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、醋酸钾、醋酸钠、氢化钠或碳酸铯，所述的脱去氨基保护基根据保护基不同选择本领域常用的脱除方法，比如叔丁氧羰基可以用三氟乙酸做酸的条件下脱除；

如果R³与R⁴相同且选自H、F、Cl、Br或I，那么通式(II-C)化合物与取代或未取代的丙烯酰卤(例如丙烯酰氯)在碱存在下反应得到通式(II-D)化合物，所述的碱选自N,N-二异丙基乙胺、二异丙基胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、醋酸钾、醋酸钠、氢化钠或碳酸铯等；

否则，通式(II-C)化合物与H-R³在碱存在下反应得到通式(II-C`)化合物，通式(II-C`)化合物与取代或未取代的丙烯酰卤(例如丙烯酰氯)在碱存在下反应得到通式(II-D)化合物，所述的碱选自N,N-二异丙基乙胺、二异丙基胺、三乙胺、碳酸钾、碳酸氢钠、碳酸钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、醋酸钾、醋酸钠、氢化钠或碳酸铯等；

通式(II-D)化合物与(II-E)化合物在酸存在下反应得到通式(II)化合物，所述的酸选自盐酸、硫酸、三氟乙酸、乙酸、苯磺酸或对甲苯磺酸；

通式(I-B)和(II-E)化合物可通过购买或参考WO2012012619、US5969155或Bioorganic&MedicinalChemistryLetters,2005,2441-2445等文献方法制得。取代的苯胺化合物可通过购买或参考WO2012075316、WO2012012619或WO20070255057等文献方法制得。H-R³可通过购买或参考WO2014029193、WO20140135512、WO2014043272、Science-2014-343(6166)-61-65、Bioorganic&MedicinalChemistryLetters-2013-23(24)-6769-6772或JournalofMedicinalChemistry-2014-57(9)-3687-3706等文献方法制得。

除非有相反的陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。

本发明所述基团和化合物中所涉及的碳、氢、氧、硫、氮或卤素均包括它们的同位素，及本发明所述基团和化合物中所涉及的碳、氢、氧、硫、氮或卤素任选进一步被一个或多个它们对应的同位素所替代，其中碳的同位素包括¹²C、¹³C和¹⁴C，氢的同位素包括氕(H)、氘(D，又称为重氢)、氚(T，又称为超重氢)，氧的同位素包括¹⁶O、¹⁷O和¹⁸O，硫的同位素包括³²S、³³S、³⁴S和³⁶S，氮的同位素包括¹⁴N和¹⁵N，氟的同位素¹⁹F，氯的同位素包括³⁵Cl和³⁷Cl，溴的同位素包括⁷⁹Br和⁸¹Br。

“烷基”是指直链和支链的饱和脂肪族烃基团，主链包括1至20个碳原子，优选为1至12个碳原子，进一步优选为1至8个碳原子，更优选为1至6个碳原子，再进一步优选1至4个碳原子的直链与支链基团，最优选1至2个碳原子。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-戊基、3-戊基、2-甲基-2-丁基、3-甲基-2-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-1-丁基、正己基、2-己基、3-己基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、3-甲基-3-戊基、2-甲基-3-戊基、2,3-二甲基-2-丁基、3,3-二甲基-2-丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,2-二甲基戊基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,2-二甲基己基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基和正癸基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，取代基优选选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、羧酸酯、-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_r-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_rS(＝O)_qR^a、-(CH₂)_r-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_r-炔基-R^a(其中r、q为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基或三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环烷基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环烷基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。

“烷氧基”是指-O-烷基，其中烷基如本文上述定义。烷氧基可以是取代的或未取代的，烷氧基实施例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基和正己氧基等。当被取代时，取代基优选为1至5个选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、羧酸酯-(CH2)r-C(＝O)-Ra、-O-(CH2)r-C(＝O)-Ra、-(CH2)r-C(＝O)-NRbRc、-(CH2)rS(＝O)qRa、-(CH2)r-烯基-Ra、ORd或-(CH2)r-炔基-Ra(其中r、q为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NRbRc，其中Rb与Rc独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，Rb与Rc可形成五或六元环烷基或杂环基。Ra与Rd各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。

“烯基”是指至少含一个碳-碳双键组成的如本文上述定义的烷基，优选含有2至20个碳原子，进一步优选2至12个碳原子，更优选在主链上有2至8个碳原子，烯基可以是取代的或未取代的。非限制性实施例包括乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1-甲基-1-丁烯基、2-甲基-1-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、1-甲基-1-戊烯基、2-甲基-1-戊烯基、1-庚烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、1-辛烯基、3-辛烯基、1-壬烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、4-癸烯基、1,3-丁二烯、1,3-戊二烯、1,4-戊二烯、1,4-己二烯、3-十一烯基、4-十二烯基和4,8,12-十四碳三烯基等。当被取代时，取代基为1至5个选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、羧酸酯、-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_r-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_rS(＝O)_qR^a、-(CH₂)_r-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_r-炔基-R^a(其中r、q为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。

“氨基”是指-NH₂。

“酰基”或“羰基”是指-C(＝O)-R^a基团，其中R^a如上文定义。

“醛”是指-C(＝O)-H。

“硫代”是指＝S。

“氧代”是指＝O。

“卤素”是指氟、氯、溴、碘。

“羟基”是指-OH。

“氰基”是指-C≡N。

“异氰基”是指-N≡C。

“硝基”是指-NO₂。

“羧酸”是指-C(＝O)-OH。

“羧酸酯”是指-C(＝O)-O-R^d，R^d选自烷基、环烷基或杂环基。

“巯基”是指-SH。

“硫醇”是指烷基中的一个或多个氢原子被巯基取代的烃，非限制性实施例包括甲硫醇、乙硫醇、1,2-二硫醇。

“碳环”是指取代的或未取代的饱和或者不饱和的芳香环或者非芳香环，芳香环或者非芳香可以是单环、双环、三环或多环系统，非限制性实施例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环己烯基、环庚基、环戊烯、环己二烯、环庚三烯、苯基、萘基、苯并环戊基、二环[3.2.1]辛烷基、二环[5.2.0]壬烷基、三环[5.3.1.1]十二烷基、金刚烷基或螺[3.3]庚烷基等。当被取代时，取代基独立地选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、羧酸酯、-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_r-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_rS(＝O)_qR^a、-(CH₂)_r-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_r-炔基-R^a(其中r、q为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。

“杂环”是指取代的或未取代的饱和或者不饱和的芳香环、非芳香环，且包含至少一个选自N、O、P或S的杂原子，杂环的环中选择性取代的N、S、P可被氧化成各种氧化态。芳香环、非芳香环可以是单环、双环、三环或多环系统，非限制性实施例包括，环氧乙烷、氮杂环丙基、氧杂环丁烷基、氮杂环丁烷基、1,3-二氧戊环、1,4-二氧戊环、1,3-二氧六环、氮杂环庚基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡喃基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、哌啶基、哌嗪基、哌叮基、吗啉基、硫代吗啉基、1,3-二噻烷、二氢呋喃、二氢吡喃、二噻戊环、四氢呋喃、四氢吡咯、四氢咪唑、四氢噻唑、四氢吡喃、苯并咪唑、苯并吡啶、吡咯并吡啶、苯并二氢呋喃、氮杂二环[3.2.1]辛烷基、氮杂二环[5.2.0]壬烷基、氧杂三环[5.3.1.1]十二烷基、氮杂金刚烷基、氧杂螺[3.3]庚烷基、等；当被取代时，取代基优选为1至5个，取代基独立地选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、羧酸酯、-(CH2)_r-C(＝O)-R^a、-O-(CH2)_r-C(＝O)-R^a、-(CH2)_r-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH2)_rS(＝O)_qR^a、-(CH2)_r-烯基-R^a、OR^d或-(CH2)_r-炔基-R^a(其中r、q为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。

“环烷基”是指饱和或不饱和的单环环烃基，可以是取代的或未取代的，环碳原子包括3至20个碳原子，优选3至10个碳原子，进一步优选3至8个碳原子，非限制性实施例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、1,5-环辛二烯基、1,4-环己二烯基和环庚三烯基等。当被取代时，取代基为1至5个选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、羧酸酯、-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_r-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_rS(＝O)_qR^a、-(CH₂)_r-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_r-炔基-R^a(其中r、q为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。

“芳基”是指取代的或未取代的6至14元环状芳香基团，包括单环芳香基和稠环芳香基。优选6至14元芳香环，进一步优选6至10元芳香环，其非限制性实例包括苯基、萘基、蒽基和菲基等。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，非限制性实施例包含：

当被取代时，取代基为1至5个选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、羧酸酯、-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_r-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_rS(＝O)_qR^a、-(CH₂)_r-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_r-炔基-R^a(其中r、q为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基、并环基。

“杂芳基”是指取代或未取代的5至14元芳香环，且含有1至5个选自N、O或S(＝O)_n杂原子或基团，优选5至10元杂芳香环，进一步优选5至6元。杂芳基的非限制性实施例包括但不限于吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡喃基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、咪唑基、哌啶基、吗啉、硫代吗啉、1,3-二噻烷、苯并咪唑、哌叮基、苯并咪唑、苯并吡啶、吡咯并吡啶等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂芳基环，非限制性实施例包含

当被取代时，取代基为1至5个选自F、Cl、Br、I、烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、硫醇、羟基、硝基、巯基、氨基、氰基、异氰基、芳基、杂芳基、杂环基、桥环基、螺环基、并环基、羟基烷基、＝O、羰基、醛、羧酸、羧酸酯、-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-O-(CH₂)_r-C(＝O)-R^a、-(CH₂)_r-C(＝O)-NR^bR^c、-(CH₂)_rS(＝O)_qR^a、-(CH₂)_r-烯基-R^a、OR^d或-(CH₂)_r-炔基-R^a(其中r、q为0、1或2)、芳基硫基、硫代羰基、硅烷基或-NR^bR^c，其中R^b与R^c独立选自包括H、羟基、氨基、羰基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、磺酰基、三氟甲磺酰基，作为选择，R^b与R^c可形成五或六元环烷基或杂环基。R^a与R^d各自独立选自芳基、杂芳基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、羰基、酯基、桥环基、螺环基或并环基。

“芳基硫基”是指如本文定义的-S-芳基或-S-杂芳基。芳基硫基实例包括但不限于苯硫基、吡啶基硫基、呋喃基硫基、噻吩基硫基、嘧啶基硫基等。

“任选”或“任选地”是指随后所描述的事件或环境可以但不必须发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的场合。如：“任选被F取代的烷基”指烷基可以但不必须被F取代，说明包括烷基被F取代的情形和烷基不被F取代的情形。

“药学上可接受的盐”或“其药学上可接受的盐”指的是保持游离酸或游离碱的生物有效性和特性，且所述的游离酸通过与无毒的无机碱或有机碱，或所述的游离酸通过与无毒的无机酸或有机酸反应获得的那些盐，包括碱金属盐，如钠盐、钾盐、锂盐等；碱土金属盐，如钙盐、镁盐等；其他金属盐，如铁盐、铜盐、钴盐等；有机碱盐，如铵盐、三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、2,6-二甲基吡啶盐、乙醇胺盐、二乙醇胺盐、三乙醇胺盐、环己胺盐、乙二胺盐、胍盐、异丙基胺盐、三甲基胺盐、三丙基胺盐、三乙醇胺盐、二乙醇胺盐、乙醇胺盐、二甲基乙醇胺盐、二环己基胺盐、咖啡碱盐、普鲁卡因盐、胆碱盐、甜菜碱盐、苯明青霉素盐、葡萄糖胺盐、N-甲基葡糖胺盐、可可碱盐、氨丁三醇盐、嘌呤盐、哌嗪盐、吗啉盐、哌啶盐、N-乙基哌啶盐、四甲基胺盐、二苄基胺盐和苯基甘氨酸烷基酯盐等；氢卤酸盐，如氢氟酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、氢溴酸盐等；无机酸盐，如盐酸盐、硝酸盐、硫酸盐、高氯酸盐、磷酸盐等；低级烷磺酸盐，如甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐、乙磺酸盐等；芳基磺酸盐，如苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐等；有机酸盐，如乙酸盐、苯甲酸盐、富马酸盐、甲酸盐、三氟乙酸盐、糠酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、羟乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、粘液酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、磺胺酸盐、酒石酸盐、丙二酸盐、2-羟基丙酸盐、柠檬酸盐、水杨酸盐、草酸盐、羟乙酸盐、葡萄糖醛酸盐、半乳糖醛酸盐、枸橼酸盐、赖氨酸盐、精氨酸盐、门冬氨酸盐、肉桂酸盐等。

“药物组合物”表示一种或多种文本所述化合物或其生理学/药学上可接受的盐与其他组成成分的混合物，其中其它组分包含生理学/药学上可接受的载体和赋形剂。

“载体”指的是不会对生物体产生明显刺激且不会消除所给予化合物的生物活性和特性的载体或稀释剂。

“赋形剂”指的是加入到药物组合物中以进一步依赖于化合物给药的惰性物质。赋形剂的实例包括但不限于碳酸钙、磷酸钙、各种糖和不同类型的淀粉、纤维素衍生物(包括微晶纤维素)、明胶、植物油、聚乙二醇类、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。

“前药”是指可以在生理条件下或通过溶剂解转化为具有生物活性的本发明化合物的化合物。

“共晶体”或“共晶”是指活性药物成分(activepharmaceuticalingredient,API)和共晶形成物(cocrystalformer,CCF)在氢键或其他非共价键的作用下结合而成的晶体，其中API和CCF的纯态在室温下均为固体，并且各组分间存在固定的化学计量比。共晶是一种多组分晶体，既包含两种中性固体之间形成的二元共晶，也包含中性固体与盐或溶剂化物形成的多元共晶。所述“共晶形成物”包括但不限于各种药学上可接受的酸、碱、非离子化合物、水、氨基酸、醇或其他溶剂，其非限制性实例包括丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、异亮氨酸(Ile)、脯氨酸(Pro)、苯丙氨酸(Phe)、色氨酸(Trp)、蛋氨酸(Met)、甘氨酸(Gly)、丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)、半胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)、赖氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、组氨酸(His)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、焦谷氨酸、硫酸、磷酸、硝酸、氢溴酸、盐酸、甲酸、乙酸、丙酸、苯磺酸、苯甲酸、苯乙酸、水杨酸、褐藻酸、氨茴酸、樟脑酸、柠檬酸、乙烯磺酸、蚁酸、富马酸、糠酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、乙醇酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、粘液酸、双羟萘酸、泛酸、硬脂酸、琥珀酸、磺胺酸、酒石酸、对甲苯磺酸、丙二酸、2-羟基丙酸、草酸、羟乙酸、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、枸橼酸、赖氨酸、精氨酸、门冬氨酸、肉桂酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸或三氟甲磺酸、氨、异丙基胺、三甲基胺、二乙胺、三乙胺、三丙基胺、二乙醇胺、乙醇胺、三乙醇胺、二甲基乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己基胺、咖啡碱、普鲁卡因、胆碱、甜菜碱、苯明青霉素、乙二胺、葡萄糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、氨丁三醇、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、甲醇、乙醇、丁炔二醇、1,2-丙二醇、(R)1,2-丙二醇、(S)1,2-丙二醇或1-甲基-1,2-乙二醇。

“溶剂化物”指本发明化合物或其盐，它们还包括以分子间非共价力结合的化学计量或非化学计量的溶剂。当溶剂为水时，则为水合物。

“IC₅₀”指半数抑制浓度，指达到最大抑制效果一半时的浓度。

具体实施方式

以下通过具体实施例对本发明做进一步详细说明，但不能理解为对本发明可实施范围的限定。

化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或(和)质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用(BrukerAvanceIII400和BrukerAvance300)核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d₆)，氘代氯仿(CDCl₃)，氘代甲醇(CD₃OD)，内标为四甲基硅烷(TMS)。

MS的测定用(Agilent6120B(ESI)和Agilent6120B(APCI))。

HPLC的测定使用安捷伦1260DAD高压液相色谱仪(ZorbaxSB-C18100×4.6mm)。

薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.15mm～0.20mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。

柱层析一般使用烟台黄海硅胶200～300目硅胶为载体。

本发明的己知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买于泰坦科技、安耐吉化学、上海德默、成都科龙化工、韶远化学科技、百灵威科技等公司。

氮气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氮气气球。

氢气氛是指反应瓶连接一个约1L容积的氢气气球。

氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。

实施例中无特殊说明，反应在氮气氛下进行。

实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。

实施例中无特殊说明，反应的温度为室温。

室温为20℃～30℃。

简写说明：

Boc:叔丁氧羰基；

OMe:甲氧基；

MeSO₃H:甲磺酸。

中间体1

5-氯-2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)氨基-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(中间体1)

5-chloro-2-(4-fluoro-2-methoxy-5-nitro-phenyl)amino-4-(2-methoxy-4-morpholino-phenyl)aminopyrimidine

第一步：2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-4-胺(1b)

2,5-dichloro-N-(2-methoxy-4-morpholinophenyl)pyrimidin-4-amine

将2,4,5-三氯嘧啶(1a)(0.62g,3mmol)置于圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入异丙醇(10mL)、2-甲氧基-4-吗啉基苯胺(0.55g,3mmol)和二异丙基乙基胺(0.49mL,6mmol)，升温至回流反应1小时。将反应液减压浓缩，除去大部分异丙醇，向残余物中加入乙酸乙酯(100mL)，用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到黑色固体状的2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-4-胺(1b)(1.06g)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.31-8.29(d,1H),8.12(s,1H),7.86(s,1H),6.58-6.52(m,1H),3.92(s,1H),3.88-3.86(m,4H),3.17-3.14(m,4H)。

第二步：5-氯-2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)氨基-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(中间体1)

将2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-4-胺(1b)(0.35g,1mmol)置于圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入1,4-二氧六环(10mL)、4-氟-2-甲氧基-5硝基苯胺(0.19g,1mmol)和对甲苯磺酸(0.23g,1.2mmol)，升温回流反应24小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)，分液，水相用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)得到黄色固体状的5-氯-2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)氨基-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(中间体1)(0.4g,产率80％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.06-9.04(d,1H),8.06-8.03(m,2H),7.58(s,1H),7.45(s,1H),6.73-6.70(d,1H),6.55-6.49(m,2H),3.99(s,3H),3.91-3.88(m,7H),3.19-3.17(m,3H)。

中间体2

2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺(中间体2)

2-methoxy-4-(2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)aniline

第一步：7-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷(2b)

7-(3-methoxy-4-nitrophenyl)-2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonane

将2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷半草酸盐(2a)(1g,5.8mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入碳酸钾(2.4g,17.4mmol)，加入5-氟-2-硝基苯甲醚(2g,11.6mmol)，加完后加热至90℃反应6小时。冷却至室温，加入水20mL，乙酸乙酯(50mL)，分液，有机层用饱和食盐水(10mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后，残留物用乙酸乙酯/石油醚(v/v＝1:9)(100mL)打浆，过滤，收集滤饼得到黄色固体的标题化合物7-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷(2b)(1.25g，产率78％)。

1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(d,1H),6.43(dd,1H),6.34(d,1H),4.49(s,4H),3.94(s,3H),3.35(dd,4H),2.03–1.98(m,4H)。

第二步：2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺(中间体2)

2-methoxy-4-(2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)aniline

将7-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬烷(2b)(0.2g，0.72mmol)溶解在6mL乙醇/四氢呋喃(v/v＝2/1)的混合溶剂中，加入10％的钯碳(0.1g)，室温常压氢化1.5小时。过滤，滤液减压浓缩得浅黄色固体状的标题产物2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺(中间体2)(0.17g，产率95％)。

1HNMR(400MHz,CDCl₃)δ6.62(d,1H),6.51(d,1H),6.40(dd,1H),4.46(s,4H),3.83(s,3H),3.57(b,2H),2.97–2.89(m,4H),2.08–1.96(m,4H)。

LC-MSm/z(ESI):249.2[M+1]。

中间体3

2-氯-N-(2-甲氧基-4-哌嗪-1-基-苯基)嘧啶-4-胺(中间体3)

2-chloro-N-(2-methoxy-4-piperazin-1-yl-phenyl)pyrimidin-4-amine

第一步：4-(4-氨基-3-甲氧基苯基)哌啶-1-碳酸叔丁基酯(3b)

tert-butyl4-(4-amino-3-methoxyphenyl)piperazine-1-carboxylate

称取5-氟-2-硝基苯甲醚(3a)(8.55g,50mmol)，置于250mL圆底烧瓶中。向反应瓶中依次加入N,N-二甲基甲酰胺(150mL),1-叔丁氧基哌嗪(11.2g,60mmol)和碳酸钾(13.8g,100mmol)。反应升温至80℃下搅拌5小时。待反应冷至室温后，将反应液倒入冰水中(100mL),有大量黄色固体析出，过滤，滤饼用水(100mL×3)洗涤,自然晾干后得到黄色固体状的粗产品。将该粗产品溶于甲醇(100mL)中，向反应瓶中加入钯碳(1.0g,10％),通入氢气,反应在室温下搅拌4小时。反应液减压浓缩,残留物用硅胶柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝3:1)得到白色固体状的标题产物4-(4-氨基-3-甲氧基苯基)哌啶-1-碳酸叔丁基酯(3b)(10.8g,产率99％)

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ6.94-6.92(m,1H),6.50-6.49(m,1H),6.41-6.38(m,1H),3.83(s,3H),3.56-3.55(m,4H),2.98-2.97(m,4H),1.47(s,9H)。

第二步：4-(4-((2-氯嘧啶-4-基)氨基)-3-甲氧基苯基)哌啶-1-碳酸叔丁基酯(3c)tert-butyl4-(4-((2-chloropyrimidin-4-yl)amino)-3-methoxyphenyl)piperazine-1-carboxylate

将4-(4-氨基-3-甲氧基苯基)哌啶-1-碳酸叔丁基酯(3b)(3.3g,10.7mmol)置于100mL圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入正丁醇(50mL),2,4-二氯嘧啶(1.6g,10.7mmol)和N,N-二异丙基乙胺(2.1g,16.1mmol)。反应升温至回流搅拌3小时。冷却至室温，反应液减压浓缩后,残留物用硅胶柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)得到黄色固体状的标题产物4-(4-((2-氯嘧啶-4-基)氨基)-3-甲氧基苯基)哌啶-1-碳酸叔丁基酯(3c)(4.2g,产率50％)。

第三步：2-氯-N-(2-甲氧基-4-哌嗪-1-基-苯基)嘧啶-4-胺(中间体3)

2-chloro-N-(2-methoxy-4-piperazin-1-yl-phenyl)pyrimidin-4-amine

0℃下,将4-[4-[(2-氯嘧啶-4-基)氨基]-3-甲氧基苯基]哌嗪-1-碳酸叔丁基酯(3c)(3g,7.2mmol)溶于盐酸的乙酸乙酯溶液(4mol/L,30mL)中,0℃反应1小时后过滤得到白色固体，加入饱和碳酸氢钠水溶液(30mL，调节体系pH＝7～8)，二氯甲烷(50mL×2)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得到淡黄色固体状的标题产物2-氯-N-(2-甲氧基-4-哌嗪-1-基-苯基)嘧啶-4-胺(中间体3)(1.7g,74％)。

中间体4

N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(中间体4)

N-[3-[[2-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide

第一步：N³-[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]苯基-1,3-二胺(4b)

N³-[2-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]benzene-1,3-diamine

称取N-叔丁基氧基羰基间苯二胺(2.08g,10mmol),置于100mL圆底烧瓶中，向反应瓶中加入正丁醇(20mL)。0℃下，向反应瓶中依次滴加2,4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(4a)(2.17g,10mmol)，N,N-二异丙基乙胺(2.5mL,15mmol)，滴加完毕后自然升至室温反应过夜。反应液出现白色浑浊,过滤,滤饼用正丁醇(10mL)洗。将得到的滤饼真空干燥后置于100mL圆底烧瓶中，0℃下,向反应瓶中加入二氯甲烷(20mL),三氟乙酸(10mL)。反应升至室温下搅拌10分钟。减压浓缩除去反应溶剂，得到N³-[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]苯基-1,3-二胺(4b)的粗产品直接投入下一步。

第二步：N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(中间体4)

N-[3-[[2-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide

将N³-[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]苯基-1,3-二胺(4b)的粗产品置于100mL圆底烧瓶中,向反应瓶中加入二氯甲烷(20mL)。-78℃下,向反应瓶中加入N,N-二异丙基乙胺(5.0mL,30mmol),滴加丙烯酰氯(1.6mL,20mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液。滴加完毕后，反应升至室温搅拌1小时。减压浓缩后，残留物用硅胶柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝4:1)得到黄色液体状的标题产物N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(中间体4)(1.71g,产率50％)。

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.26(s,1H),9.60(s,1H),8.59(s,1H),7.94(s,1H),7.37(m,1H),7.14(m,1H),6.48(m,1H),6.24(m,1H),5.76(m,1H)。

中间体5

4-(3-氨基苯基氧)哌啶-1-碳酸叔丁基酯(中间体5)

tert-butyl4-(3-aminophenoxy)piperidine-1-carboxylate

第一步：叔丁基4-羟基哌啶-1-碳酸酯(5b)

tert-butyl4-hydroxypiperidine-1-carboxylate

称取N-叔丁氧羰基-4-哌啶酮(5a)(10g,50mmol)，置于250mL圆底烧瓶中，向反应瓶中加入甲醇(100mL)，搅拌均匀。0℃下，向反应瓶中分批加入硼氢化钠(3.8g,100mmol),加完后，升至室温下反应2小时。向反应瓶中滴加水(50mL)淬灭反应，将反应液减压浓缩除去大部分甲醇，残余物用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并后的有机相用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥,，减压浓缩，残留物用柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝4:1)得到黄色油状的液体叔丁基4-羟基哌啶-1-碳酸酯(5b)(8g,产率80％)。

第二步：叔丁基4-(3-硝基苯基氧)哌啶-1-碳酸酯(5c)

tert-butyl4-(3-nitrophenoxy)piperidine-1-carboxylate

称取叔丁基4-羟基哌啶-1-碳酸酯(5b)(8g，40mmol),置于250mL圆底烧瓶中，向反应瓶中加入四氢呋喃(100mL)，搅拌均匀。向反应瓶中依次加入间氨基苯酚(4.36g,40mmol),三苯基膦(PPh₃)(15.7g,60mmol),偶氮二甲酸二异丙酯(12g,60mmol)。反应升至70℃下搅拌4小时。减压除去四氢呋喃，柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝4:1)得到黄色油状的液体叔丁基4-(3-硝基苯基氧)哌啶-1-碳酸酯(5c)(10.9g，产率85％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ7.81-7.71(m,2H),7.42-7.40(m,1H),7.26-7.20(m,1H),4.58-4.53(m,1H),3.70-3.66(m,2H),3.21-3.16(m,2H),1.83-1.81(m,2H),1.78-1.75(m,2H),1.45(s,9H)。

第三步：4-(3-氨基苯基氧)哌啶-1-碳酸叔丁基酯(中间体5)

tert-butyl4-(3-aminophenoxy)piperidine-1-carboxylate

称取叔丁基4-(3-硝基苯基氧)哌啶-1-碳酸酯(5c)(10.9g，34mmol),置于250mL圆底烧瓶中，向反应瓶中加入甲醇(100mL)，搅拌均匀。向反应瓶中加入钯炭(1.1g,10％w/w),室温下搅拌16小时。减压除去甲醇，柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)得到灰色固体状的4-(3-氨基苯基氧)哌啶-1-碳酸叔丁基酯(中间体5)(8.9g，产率90％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ7.06-7.02(m,1H),6.33-6.25(m,4H),5.01-4.94(m,2H),4.42-4.38(m,1H),3.68-3.65(m,2H),3.34-3.30(m,2H),1.88-1.86(m,2H),1.77-1.70(m,2H),1.47(s,9H)。

中间体6

4-[(3-氨基苯基)氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(中间体6)

tert-butyl4-[(3-aminophenyl)amino]piperidine-1-carboxylate

第一步：4-[(3-硝基苯基)氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(6b)

tert-butyl4-[(3-nitrophenyl)amino]piperidine-1-carboxylate

称取4-羰基哌啶-1-碳酸叔丁基酯(6a)(1.02g，5mmol)置于25mL微波管中，向反应瓶中依次加入1,2-二氯乙烷(10mL)、间硝基苯胺(0.69g,5mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(2.12g,10mmol)和醋酸(3mL)，90℃下微波反应2小时。反应完全，将反应混合物倒入50mL二氯甲烷与50mL水混合液中，分层，有机相用无水硫酸钠干燥，抽滤，减压浓缩，柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝3:1)，得到4-[(3-硝基苯基)氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(6b)(1.32g，产率82％)。

LC-MS(m/z):344.1[M+23]。

第二步：4-[(3-氨基苯基)氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(中间体6)

tert-butyl4-[(3-aminophenyl)amino]piperidine-1-carboxylate

称取4-[(3-硝基苯基)氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(6b)(1.32g，4.1mmol)置于50mL圆底烧瓶中，向反应瓶中加入20mL甲醇，搅拌均匀，加入钯炭(0.13g,10％w/w),导入氢气，室温下搅拌4小时。硅藻土过滤，减压浓缩除去甲醇，得到黄色固体状4-[(3-氨基苯基)氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(中间体6)(1.06g，产率89％)，直接进行下一步反应。

实施例1

N-[5-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基胺基)嘧啶-2-基]氨基]-2-[2-二甲氨基乙基(甲基)氨基]-4-甲氧基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物1)

N-[5-[[5-chloro-4-(2-methoxy-4-morpholino-anilino)pyrimidin-2-yl]amino]-2-[2-dimethylaminoethyl(methyl)amino]-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamide

第一步：5-氯-2-[4-[2-二甲氨基乙基(甲基)氨基]-2-甲氧基-5-硝基苯基]氨基-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(1B)

5-chloro-2-[4-[2-dimethylaminoethyl(methyl)amino]-2-methoxy-5-nitro-phenyl]amino-4-(2-methoxy-4-morpholino-phenyl)aminopyrimidine

将5-氯-2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)氨基-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(中间体1)(0.4g,0.8mmol)置于微波反应管(10mL)中，向反应管中依次加入N,N-二甲基乙酰胺(2mL)、N,N,N'-三甲基乙二胺(0.12mL,0.96mmol)和二异丙基乙基胺(0.16mL,0.96mmol)，升温至140℃微波1小时。将反应液减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝15:1)得到红色固体状的5-氯-2-[4-[2-二甲氨基乙基(甲基)氨基]-2-甲氧基-5-硝基苯基]氨基-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(1B)(0.47g)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.73(s,1H),8.09-8.07(d,1H),8.02(s,1H),7.53(s,1H),7.28-7.26(d,1H),6.64(s,1H),6.56-6.53(m,2H),3.93-3.87(m,10H),3.21-3.18(m,6H),3.17(s,3H),2.52-2.49(m,2H),2.24(s,6H)。

第二步：5-[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯胺基)嘧啶-2-基]-4-甲氧基-2-[(2-二甲氨基乙基)(甲基)氨基]苯胺(1C)

5-[5-chloro-4-(2-methoxy-4-morpholino-anilino)pyrimidin-2-yl]-4-methoxy-2-[(2-dimethylaminoethyl)(methyl)amino]aniline

将5-氯-2-[4-[2-二甲氨基乙基(甲基)氨基]-2-甲氧基-5-硝基苯基]氨基-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(1B)(0.4g,0.68mmol)置于圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入乙醇(21mL)、水(7mL)、还原铁粉(0.23g,4.08mmol)和氯化铵(0.025g,0.48mmol)，升温回流反应6小时。将反应液过滤，滤饼依次用二氯甲烷(10mL×2)和甲醇(10mL×2)洗涤，合并滤液，浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝15:1)得到灰色固体状的5-[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯胺基)嘧啶-2-基]-4-甲氧基-2-[(2-二甲氨基乙基)(甲基)氨基]苯胺(1C)(0.38g,产率100％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.14-8.12(d,1H),8.00(s,1H),7.84(s,1H),7.44(s,1H),7.36(s,1H),6.64-6.61(m,2H),6.55-6.54(d,1H),3.91-3.88(m,7H),3.80(s,3H),3.19-3.16(m,8H),2.67(s,3H),2.53(br,6H)。

第三步：N-[5-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-2-[2-二甲氨基乙基(甲基)氨基]-4-甲氧基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物1)

将5-[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯胺基)嘧啶-2-基]-4-甲氧基-2-[(2-二甲氨基乙基)(甲基)氨基]苯胺(1C)(0.38g,0.68mmol)置于圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入四氢呋喃(15mL)和二异丙基乙基胺(0.16mL,1.00mmol)，冷却至0℃，滴加丙烯酰氯(0.07mL,0.88mmol)，滴加完毕后，反应1小时。将反应液减压浓缩，向残余物中加入二氯甲烷(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)，分液，水相用二氯甲烷(50mL)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝15:1)得到黄色固体状的N-[5-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-2-[2-二甲氨基乙基(甲基)氨基]-4-甲氧基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物1)(0.2g,产率48％)。

LC-MSm/z(ESI):529.1[M+1]。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.99(s,1H),9.34(s,1H),8.37-8.35(d,1H),8.10(s,1H),7.62(s,1H),7.24(s,1H),6.75(s,1H),6.49-6.30(m,4H),5.67-5.65(m,1H),3.90-3.84(m,7H),3.48(s,3H),3.11-3.09(m,6H),2.69(s,3H),2.32-2.22(m,8H)。

实施例2

N-[5-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-2-氟-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物2)

N-[5-[[5-chloro-4-(2-methoxy-4-morpholino-anilino)pyrimidin-2-yl]amino]-2-fluoro-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamide

第一步：2-(5-氨基-4-氯-2-甲氧基-苯基)氨基-4-(2-甲氧基-5-氯-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(2B)

2-(5-amino-4-fluoro-2-methoxy-phenyl)amino-5-chloro-4-(2-methoxy-4-morpholino-phenyl)aminopyrimidine

将5-氯-2-(4-氟-2-甲氧基-5-硝基苯基)氨基-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(中间体1)(0.8g,1.6mmol)置于圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入乙醇(30mL)，水(10mL)，还原铁粉(0.54g,9.6mmol)，氯化铵(0.06g,1.12mmol)，升温回流反应6小时。将反应液过滤，滤饼依次用二氯甲烷(10mL×2)和甲醇(10mL×2)洗涤，合并滤液，浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝15:1)得到灰色固体状的2-(5-氨基-4-氯-2-甲氧基-苯基)氨基-4-(2-甲氧基-5-氯-4-吗啉基苯基)氨基嘧啶(2B)(0.68g,产率89％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.08-8.06(d,1H),7.99(s,1H),7.87-7.85(d,1H),7.53(s,1H),7.42(s,1H),6.62-6.55(m,3H),3.90-3.87(m,7H),3.79(s,3H),3.35(br,1H),3.18-3.16(m,3H)。

第二步：N-[5-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-2-氟-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物2)

将2-(5-氨基-4-氯-2-甲氧基-苯基)氨基-4-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)氨基-5-氯嘧啶(2B)(0.68g,1.43mmol)置于圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入四氢呋喃(15mL)和二异丙基乙基胺(0.3mL,1.86mmol)，冷却至0℃，滴加丙烯酰氯(0.15mL,1.86mmol)，滴加完毕后，反应1小时。将反应液减压浓缩，向残余物中加入二氯甲烷(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)，分液，水相用二氯甲烷(50mL)萃取，合并后的有机相，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)得到白色固体状的N-[5-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-2-氟-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物2)(0.2g,产率26％)。

LC-MSm/z(ESI):529.1[M+1]。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.94(s,1H),8.25-8.23(d,1H),8.05(s,1H),7.60(s,1H),7.26(s,1H),7.14(s,1H),6.68-6.66(d,1H),6.44-6.40(m,3H),6.28-6.24(m,1H),5.78-5.75(m,1H),3.91-3.86(m,10H),3.13(br,4H)。

实施例3

N-[3-[[2-[2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物3-a)和N-[3-[[4-[2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物3-b)

N-[3-[[2-[2-methoxy-4-(2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)anilino]-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide(Compound3-a)

N-[3-[[4-[2-methoxy-4-(2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)anilino]-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide(Compound3-b)

第一步：N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]氨基甲酸叔丁基酯(4b’)和N-[3-[[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]氨基甲酸叔丁基酯(3A)

tert-butylN-[3-[[2-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]carbamate(4b’)

tert-butylN-[3-[[4-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl]amino]phenyl]carbamate(3A)

将N-叔丁基氧基羰基-间苯二胺(1g,4.8mmol)溶解在正丁醇与四氢呋喃(v/v＝1/1)的混合溶剂(10mL)中，加入二异丙基乙基胺(0.8g,6.2mmol)，氮气保护下冰浴冷却至0℃，滴加2,4-二氯-5-三氟甲基嘧啶(4a)(1.04g,4.8mmol)，加完后自然升温至室温反应2小时。反应液中加入水(10mL)和二氯甲烷(20mL)，分液，有机层用饱和食盐水(10mL×1)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得，残留物用硅胶柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v:v)＝1:0～9:1)得无色油状的N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]氨基甲酸叔丁基酯(4b’)和N-[3-[[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]氨基甲酸叔丁基酯(3A)的混合物(1g，产率55.5％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.59–8.40(d,1H),7.75(d,1H),7.34–7.26(m,2H),7.08(m,2H),6.59(d,1H),1.53(d,9H)。

¹⁹FNMR(376MHz,CDCl3)δ-62.06,-62.63。

第二步：N³-[2-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]苯基-1,3-二胺(4b)和N¹-[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]苯基-1,3-二胺(3B)

N³-[2-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]benzene-1,3-diamine(4b)

N¹-[4-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl]benzene-1,3-diamine(3B)

将N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]氨基甲酸叔丁基酯(4b’)和N-[3-[[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]氨基甲酸叔丁基酯(3A)的混合物(1g,2.57mmol)溶解在二氯甲烷(10mL)中，冰浴冷却至0℃下加入三氟乙酸(5mL)，加完后，自然升温至室温反应1.5小时。减压浓缩至干得白色固体状的标题化合物N³-[2-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]苯基-1,3-二胺(4b)和N¹-[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]苯基-1,3-二胺(3B)的混合物(0.6g，产率80％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.41(d,1H),7.17(t,,1H),7.03(t,1H),6.96(s,1H),6.84(dd,1H),6.55(dd,1H)。

¹⁹FNMR(376MHz,CDCl₃)δ-62.74。

第三步：N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(中间体4)和N-[3-[[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(3C)

N-[3-[[2-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide(中间体4)

N-[3-[[4-chloro-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide(3C)

将N³-[2-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]苯基-1,3-二胺(4b)和N¹-[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]苯基-1,3-二胺(3B)的混合物(1g，3.46mmol)溶解在干燥的二氯甲烷(10mL)中，氮气保护下冷却至-30℃，加入二异丙基乙基胺(0.47g，3.63mmol)，再慢慢滴入丙烯酰氯(0.33g,3.63mmol)，加完后-30℃反应1小时。升温至室温，加入水(20mL)，用二氯甲烷(20mL×2)萃取，合并有机层，用饱和氯化钠(15mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩所，残留物用硅胶柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v:v)＝1:0～4:1)得白色固体状的标题化合物N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(中间体4)和N-[3-[[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(3C)的混合物(0.7g，产率59.3％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.51(d,1H),8.01(d,1H),7.75–7.59(m,1H),7.56–7.41(m,1H),7.41–7.32(m,1H),7.33–7.27(m,1H),6.45(dd,1H),6.27(dd,1H),5.80(ddd,1H)。

¹⁹FNMR(376MHz,CDCl₃)δ-62.09,-62.65。

LC-MSm/z(ESI):342.8[M+1]。

第四步：N-[3-[[2-[2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物3-a)和N-[3-[[4-[2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物3-b)

将N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(中间体4)和N-[3-[[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(3C)的混合物(0.5g，1.46mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中，加入2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺(中间体2)(0.36g，1.46mmol)，加入对甲苯磺酸(0.28g,1.46mmol)，加热至50℃反应过夜。冷却至室温，加入饱和碳酸氢钠调节pH至9，用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并有机层，用饱和氯化钠(10mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v:v)＝1:0～98:2)得N-[3-[[2-[2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物3-a)和N-[3-[[4-[2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物3-b)的混合物。将此混合物采用制备柱拆分，制备条件：仪器Waters2524，色谱柱SunfirePrepC18OBD,19×150mm,5μm，流动相A:水,B:乙腈；等度洗脱，A：B＝50:50，流速17.0mL/min,检测波长210nm。分离后得到浅黄色固体状的N-[3-[[2-[2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物3-a)(0.08g,产率10％)以及浅黄色固体状的N-[3-[[4-[2-甲氧基-4-(2-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基)苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物3-b)(0.07g,产率8.6％).

化合物3-a：¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.01(s,1H),9.67(s,1H),8.30(s,1H),7.88(s,1H),7.65(d,2H),7.32(t,2H),7.04(t,1H),6.66(d,1H),6.51–6.38(m,2H),6.24(dd,1H),5.73(dd,1H),4.36(s,4H),3.77(s,3H),3.14–3.03(m,4H),1.95–1.85(m,4H)。

¹⁹FNMR(376MHz,DMSO-d₆)δ-59.83。

LC-MSm/z(ESI):555.3[M+1]。

化合物3-b:¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.18(s,1H),8.70(s,1H),8.29(s,1H),8.13(s,1H),7.76(s,1H),7.55(d,1H),7.49(d,1H),7.27(t,1H),7.15(s,1H),6.60(s,1H),6.45(dd,1H),6.26(dd,2H),5.76(dd,1H),4.34(s,4H),3.77(s,3H),3.02(s,4H),1.89(s,4H)。

¹⁹FNMR(376MHz,DMSO-d₆)δ-59.38。

LC-MSm/z(ESI):555.3[M+1]。

实施例4

N-[3-[[4-[4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物4)

N-[3-[[4-[4-(4-acetylpiperazin-1-yl)-2-methoxy-anilino]-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide(Compound4)

第一步：4-(3-甲氧基-4-硝基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4B)

tert-butyl4-(3-methoxy-4-nitrophenyl)piperazine-1-carboxylate

将5-氟-2-硝基苯甲醚(4A)(2g,11.6mmol)溶解在1,4-二氧六环(20mL)中，加入1-叔丁氧羰基哌嗪(4.3g,23.4mmol)和碳酸钾(3.2g,23.4mmol)，加完后加热至120℃反应过夜。冷却至室温，反应液减压浓缩后加入二氯甲烷(30mL)，依次用水(10mL×3)和饱和氯化钠(10mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后，残留物用乙酸乙酯/石油醚(v/v＝1:9)(100mL)打浆，过滤，收集滤饼干燥得标题化合物4-(3-甲氧基-4-硝基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4B)，黄色固体(1.3g,产率33.3％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.00(d,1H),6.41(dd,1H),6.31(d,1H),3.95(s,3H),3.65–3.57(m,4H),3.43–3.35(m,4H),1.49(s,9H)。

第二步：1-(3-甲氧基-4-硝基苯基)哌嗪(4C)

1-(3-methoxy-4-nitrophenyl)piperazine

将4-(3-甲氧基-4-硝基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4B)(2.9g,8.6mmol)溶解在20mL二氯甲烷中，加入三氟乙酸(10mL)，室温反应过夜。冰浴冷却下滴加2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至9，分液，水层用二氯甲烷(20mL×2)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，减压浓缩的黄色固体状的标题化合物1-(3-甲氧基-4-硝基苯基)哌嗪(4C)(1.8g,产率90％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.00(d,1H),6.42(dd,1H),6.32(d,1H),3.95(s,3H),3.39–3.33(m,4H),3.05–3.00(m,4H)。

第三步：1-(4-(3-甲氧基-4-硝基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(4D)

1-(4-(3-methoxy-4-nitrophenyl)piperazin-1-yl)ethanone

将1-(3-甲氧基-4-硝基苯基)哌嗪(4C)(1.8g,7.5mmol)溶解在二氯甲烷(15mL)中，氮气保护下冷却至0℃，加入三乙胺(1g,9.8mmol)，再慢慢滴入乙酰氯(0.71g,9.1mmol)加完后自然升温至室温反应1小时。反应液中加入水(20mL)，分液，水层用二氯甲烷(30mL×1)萃取，合并有机层，用饱和氯化钠(10mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后，残留物用二氯甲烷/石油醚重结晶，得黄色固体状的标题化合物1-(4-(3-甲氧基-4-硝基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(4D)(1.3g,产率61.9％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.00(d,1H),6.43(dd,1H),6.35(d,1H),3.96(s,3H),3.74(d,4H),3.55–3.34(m,4H),2.16(s,3H)。

第四步：1-(4-(4-氨基-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(4E)

1-(4-(4-amino-3-methoxyphenyl)piperazin-1-yl)ethanone

将1-(4-(3-甲氧基-4-硝基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(4D)(1g,3.58mmol)溶解在乙醇/四氢呋喃(v/v＝3/1)的混合溶剂(20mL)中，加入10％的钯碳(0.5g),室温常压氢化2小时。过滤除去钯碳，滤液浓缩得浅黄色固体状的标题化合物1-(4-(4-氨基-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(4E)(0.8g,产率89.7％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ6.64(d,1H),6.51(d,1H),6.41(dd,1H),3.84(s,3H),3.80–3.74(m,2H),3.67–3.50(m,4H),3.06–2.96(m,4H),2.13(s,3H)。

第五步：N-[3-[[4-[4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物4)

将N-[3-[[4-氯-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基苯基]-2-丙烯酰胺(3C)(0.4g混合物,1.16mmol，实施例3第三步中得到的中间体4与化合物3C的混合物)溶解在5mLN,N-二甲基甲酰胺中，加入1-(4-(4-氨基-3-甲氧基苯基)哌嗪-1-基)乙酮(4E)(0.35g,1.40mmol)，加入对甲苯磺酸(0.22g,1.16mmol)，加热至50℃反应过夜。减压浓缩除去N,N-二甲基甲酰胺所得粗品溶于二氯甲烷(50mL)中，依次用饱和碳酸氢钠(20mL×3)洗涤，再用饱和氯化钠(20mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v:v)＝1:0～97:3)得N-[3-[[4-[4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物4)粗品，将此粗品采用制备柱拆分，制备条件：仪器Waters2524，色谱柱XBridgePrepC18OBD,19×250mm,5μm，流动相A:水,B:乙腈；等度洗脱，A：B＝60:40，流速17.0mL/min,检测波长210nm。分离后得到浅黄色固体状的N-[3-[[4-[4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯胺基]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物4)(0.12g,产率18.5％)。

¹HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.22(s,1H),8.76(s,1H),8.30(s,1H),8.23(s,1H),7.78(s,1H),7.55(d,1H),7.49(d,1H),7.27(t,1H),7.16(s,1H),6.61(d,1H),6.47(dd,1H),6.25(dd,2H),5.78–5.72(m,1H),3.78(s,3H),3.60–3.53(m,4H),3.08(s,2H),3.02(s,2H),2.05(s,3H)。

¹⁹FNMR(376MHz,DMSO-d6)δ-59.45。

LC-MSm/z(ESI):556.3[M+1]。

实施例5

N-[4-甲氧基-3-[[4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)氨基]嘧啶-2-基]氨基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物5)

N-[4-methoxy-3-[[4-[2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)anilino]pyrimidin-2-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide

第一步：2-氯-N-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-4-胺(5B)

2-chloro-N-[2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl]pyrimidin-4-amine

将2-氯-N-(2-甲氧基-4-哌嗪-1-基-苯基)嘧啶-4-胺(中间体3)(1.7g，5.3mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，依次加入甲醛水溶液(0.3mL)，三乙酰氧基硼氢化钠(2.3g，5.8mmol)，乙酸(2mL)，室温反应1小时，加入饱和碳酸氢钠水溶液调节体系pH＝7～8,二氯甲烷(100mL×2)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到淡黄色固体状的标题产物2-氯-N-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-4-胺(5B)(1.6g,91％)。

第二步：N⁴-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(5C)

N⁴-[2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl]-N²-(2-methoxy-5-nitro-phenyl)pyrimidine-2,4-diamine

将2-氯-N-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-4-胺(5B)(1.6g，4.8mmol)溶于1,4二氧六环(16mL)中，依次加入2-甲氧基-5-硝基-苯胺(807mg，4.8mmol)，对甲苯磺酸(991mg，5.8mmol)，升温至110℃反应6小时，加入饱和碳酸氢钠水溶液调节体系pH为7～8,二氯甲烷(50mL×2)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的标题产物N⁴-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(5C)(1.6g,72％)。

第三步：N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2,4-二胺(5D)

N2-(5-amino-2-methoxy-phenyl)-N4-[2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl]pyrimidine-2,4-diamine

将N⁴-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(5C)(1.6g，3.4mmol)溶于乙醇/水(v/v)＝3:1(20mL)中，依次加入铁粉(1.1g，20.4mmol)，氯化铵(128mg，2.4mmol)，升温至90℃反应4小时，反应液过滤,滤饼二氯甲烷(50mL×2)洗涤，滤液用无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得到淡黄色固体状的标题产物N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2,4-二胺(5D)(1.4g,94％)。

第四步：N-[4-甲氧基-3-[[4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)氨基]嘧啶-2-基]氨基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物5)

将N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]嘧啶-2,4-二胺(5D)(1.4g,3.2mmol)溶于吡啶(14mL)中，依次加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(2.8g，12.8mmol)，丙烯酸(461mg，6.4mmol)，室温反应4小时，抽滤固体,二氯甲烷(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥滤液，减压浓缩后，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的标题产物N-[4-甲氧基-3-[[4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)氨基]嘧啶-2-基]氨基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物5)(1.0g,64％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.46(s,1H),8.00-7.98(m,1H),7.71-7.63(m,3H),7.40(s,1H),8.90(s,1H),6.84-6.82(d,1H),6.53(m,2H),6.48-6.30(m,2H),6.05(m,1H),5.73-5.70(d,2H),3.88(s,3H),3.86(s,3H),3.26(s,4H),2.70(s,4H),2.44(s,3H)。

LC-MSm/z(ESI):490.1[M+1]。

实施例6

N-[4-甲氧基-3-[[4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)氨基]嘧啶-2-基]氨基苯基]-2-丙烯酰胺甲磺酸盐(化合物6)

N-[4-methoxy-3-[[4-[2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)anilino]pyrimidin-2-yl]amino]phenyl]prop-2-enamidemethanesulfinicacid

将N-[4-甲氧基-3-[[4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)氨基]嘧啶-2-基]氨基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物5)(200mg，0.4mmol)溶于乙醇/乙酸乙酯(v/v)＝3:1(4mL)中，升温至70℃加入甲磺酸(98mg，1mmol)，搅拌2小时，析出固体，过滤得到黄色固体状的标题产物N-[4-甲氧基-3-[[4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)氨基]嘧啶-2-基]氨基苯基]-2-丙烯酰胺甲磺酸盐化合物6(200mg，67％)。

LC-MSm/z(ESI):490.1[(M-M_甲磺酸)+1]。

¹HNMR(400MH,MeOD)δ7.85(d,1H),7.81(d,1H),7.73(d,1H),7.57(dd,1H),7.13(d,1H),6.70(d,1H),6.55(d,1H),6.41(dd,3H),5.82(dd,1H),3.89(d,9H),3.72–3.56(m,3H),3.26(d,2H),3.01(s,3H),2.72(s,6H)。

实施例7

N-[3-[[4-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物7)

N-[3-[[4-[4-[4-(cyclopropylmethyl)piperazin-1-yl]-2-methoxy-anilino]pyrimidin-2-yl]amino]-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamide

第一步：2-氯-N-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基-]-2-甲氧基-苯基]-嘧啶-4-胺(7B)2-chloro-N-[4-[4-(cyclopropylmethyl)piperazin-1-yl]-2-methoxy-phenyl]pyrimidin-4-amine

将2-氯-N-(2-甲氧基-4-哌嗪-1-基-苯基)嘧啶-4-胺(中间体3)(1.3g，4.1mmol)溶于乙腈(13mL)中，依次加入环丙基甲基溴(1.1g，8.2mmol)，碳酸钾(1.7g，12.3mmol)，升温至90℃反应4小时，反应液过滤，滤液减压浓缩后，残留物用硅胶柱层析分离提纯(洗脱剂:二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的标题产物2-氯-N-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基-]-2-甲氧基-苯基]-嘧啶-4-胺(7B)(1.6g,产率91％)。

第二步：N⁴-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(7C)

N⁴-[4-[4-(cyclopropylmethyl)piperazin-1-yl]-2-methoxy-phenyl]-N²-(2-methoxy-5-nitro-phenyl)pyrimidine-2,4-diamine

将2-氯-N-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基-]-2-甲氧基-苯基]-嘧啶-4-胺(7B)(1.1g，3.0mmol)溶于1,4二氧六环(16mL)中，依次加入2-甲氧基-5-硝基-苯胺(504mg，3.0mmol)，对甲苯磺酸(684mg，3.6mmol)，升温至110℃反应6小时，加入饱和碳酸氢钠水溶液调节体系pH＝7～8,二氯甲烷(50mL×2)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的N⁴-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(7C)(1.6g,产率72％)。

第三步：N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯基]嘧啶-2,4-二胺(7D)

N²-(5-amino-2-methoxy-phenyl)-N⁴-[4-[4-(cyclopropylmethyl)piperazin-1-yl]-2-methoxy-phenyl]pyrimidine-2,4-diamine

将N⁴-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(7C)(900mg，1.9mmol)溶于乙醇/水(v/v)＝3:1(10mL)中，依次加入铁粉(672mg，12mmol)，氯化铵(76mg，1.4mmol)，升温至90℃反应4小时，抽滤固体,二氯甲烷(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥滤液，减压浓缩得到淡黄色固体状的标题产物N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯基]嘧啶-2,4-二胺(7D)(800mg,产率84％)。

第四步：N-[3-[[4-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物7)

将N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯基]嘧啶-2,4-二胺(7D)(800mg,1.7mmol)溶于吡啶(8mL)中，依次加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(482mg，2.5mmol)，丙烯酸(182mg，2.5mmol)，室温反应4小时，反应液过滤，滤饼用二氯甲烷(50mL×2)洗涤，滤液用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的标题产物N-[3-[[4-[4-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物7)(500mg,产率56％)。

LC-MSm/z(ESI):530.2[M+1]。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.42(d,1H),8.01(d,1H),7.88–7.65(m,2H),7.58(s,1H),6.83(d,1H),6.54(dd,2H),6.41(d,1H),6.25(dd,1H),6.07(d,1H),5.72(d,1H),3.88(d,6H),3.25(s,4H),2.76(s,4H),2.38(d,2H),0.88(t,1H),0.69–0.45(m,2H),0.17(d,2H)。

实施例8

N-[3-[[4-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物8)

N-[3-[[4-[4-[4-(2-fluoroethyl)piperazin-1-yl]-2-methoxy-anilino]pyrimidin-2-yl]amino]-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamide

第一步：2-氯-N-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基苯基]-嘧啶-4-胺(8B)2-chloro-N-[4-[4-(2-fluoroethyl)piperazin-1-yl]-2-methoxy-phenyl]pyrimidin-4-amine

将2-氯-N-(2-甲氧基-4-哌嗪-1-基-苯基)嘧啶-4-胺(中间体3)(1.6g，5.0mmol)溶于乙腈(20mL)中，依次加入氟乙基溴(1.3g，10mmol)，碳酸钾(2.1g，15mmol)，升温至90℃反应4小时，过滤，滤液减压浓缩后，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的标题产物2-氯-N-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基-]-2-甲氧基苯基]-嘧啶-4-胺(8B)(1.6g,产率91％)。

第二步：N⁴-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(8C)

N⁴-[4-[4-(2-fluoroethyl)piperazin-1-yl]-2-methoxy-phenyl]-N²-(2-methoxy-5-nitro-phenyl)pyrimidine-2,4-diamine

将2-氯-N-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基-]-2-甲氧基苯基]-嘧啶-4-胺(8B)(1.6g，4.4mmol)溶于1,4二氧六环(20mL)中，依次加入2-甲氧基-5-硝基-苯胺(739mg，4.4mmol)，对甲苯磺酸(1.0g，5.3mmol)，升温至110℃反应6小时，加入饱和碳酸氢钠水溶液调节体系pH＝7～8,二氯甲烷(100mL×2)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的标题产物N⁴-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(8C)(1.6g,产率72％)。

第三步：N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯基]嘧啶-2,4-二胺(8D)

N²-(5-amino-2-methoxy-phenyl)-N⁴-[4-[4-(2-fluoroethyl)piperazin-1-yl]-2-methoxy-phenyl]pyrimidine-2,4-diamine

将N⁴-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(8C)(1.6g，3.2mmol)溶于乙醇/水(v/v)＝3:1(20mL)中，依次加入铁粉(1.1g，19.3mmol)，氯化铵(122mg，2.3mmol)，升温至90℃反应4小时，抽滤固体,二氯甲烷(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥滤液，减压浓缩得到淡黄色固体状的标题产物N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯基]嘧啶-2,4-二胺(8D)(800mg,产率84％)。

第四步：N-[3-[[4-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物8)

将N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基)-2-甲氧基苯基]嘧啶-2,4-二胺(8D)(1.4g,3mmol)溶于吡啶(15mL)中，依次加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(859mg，4.5mmol)，丙烯酸(324mg，4.5mmol)，室温反应4小时，反应液过滤，滤饼用二氯甲烷(50mL×2)洗涤，滤液用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的标题产物N-[3-[[4-[4-[4-(2-氟乙基)哌嗪-1-基]-2-甲氧基苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物8)(600mg,产率56％)。

LC-MSm/z(ESI):522.1[M+1]。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.41(s,1H),7.95(s,1H),7.71(d,2H),6.82(d,1H),6.52(d,2H),6.48–6.38(m,1H),6.35–6.19(m,1H),6.06(d,1H),5.72(d,1H),4.75–4.64(m,1H),4.64–4.49(m,1H),3.87(d,6H),3.42–2.99(m,4H),2.77(ddd,4.8Hz,6H)。

实施例9

N-[3-[[4-[4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物9)

N-[3-[[4-[4-(4-acetylpiperazin-1-yl)-2-methoxy-anilino]pyrimidin-2-yl]amino]-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamide

第一步：2-氯-N-[4-[4-乙酰基哌嗪-1-基]-2-甲氧基苯基]嘧啶-4-胺(9B)

2-chloro-N-[4-[4-acetylpiperazin-1-yl]-2-methoxy-phenyl]pyrimidin-4-amine

将2-氯-N-(2-甲氧基-4-哌嗪-1-基-苯基)嘧啶-4-胺(中间体3)(1.4g，4.3mmol)溶于乙腈(20mL)中，依次加三乙胺(520mg，6.6mmol)，乙酰氯(670mg，6.6mmol)，升温至90℃反应4小时，反应液过滤，滤液减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的标题产物2-氯-N-[4-[4-乙酰基哌嗪-1-基-]-2-甲氧基-苯基]嘧啶-4-胺(9B)(1.4g,产率90％)。

第二步：N⁴-[4-[4-乙酰基哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(9C)

N⁴-[4-[4-acetylpiperazin-1-yl]-2-methoxy-phenyl]-N²-(2-methoxy-5-nitro-phenyl)pyrimidine-2,4-diamine

将2-氯-N-[4-[4-乙酰基哌嗪-1-基-]-2-甲氧基-苯基]嘧啶-4-胺(9B)(1.4g，3.9mmol)溶于1,4二氧六环(15mL)中，依次加入2-甲氧基-5-硝基-苯胺(655mg，3.9mmol)，对甲苯磺酸(893g，4.7mmol)，升温至110℃反应6小时，加入饱和碳酸氢钠水溶液调节体系pH为7至8,二氯甲烷(100mL×2)萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后,用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体的标题产物N⁴-[4-[4-乙酰基哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(9C)(1.0g,产率53％)。

第三步：N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[4-[4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯基]嘧啶-2,4-二胺(9D)

N²-(5-amino-2-methoxy-phenyl)-N⁴-[4-[4-acetylpiperazin-1-yl]-2-methoxy-phenyl]pyrimidine-2,4-diamine

将N⁴-[4-[4-乙酰基哌嗪-1-基]-2-甲氧基-苯基]-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(9C)(1.0g，3.0mmol)溶于乙醇/水(v/v)＝3:1(20mL)中，依次加入铁粉(672g，12mmol)，氯化铵(76mg，1.4mmol)，升温至90℃反应4小时，抽滤固体,二氯甲烷(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥滤液，减压浓缩后得到淡黄色固体状的标题产物N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[4-[4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯基]嘧啶-2,4-二胺(9D)(800mg,产率85％)。

第四步：N-[3-[[4-[4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物9)

将N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-[4-[4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯基]嘧啶-2,4-二胺(9D)(800mg,1.7mmol)溶于吡啶(10mL)中，依次加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(1.37g，6.9mmol)，丙烯酸(249mg，3.5mmol)，室温反应4小时，反应液过滤，滤饼二氯甲烷(50mL×2)洗涤，滤液用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝50:1)得到淡黄色固体状的标题产物N-[3-[[4-[4-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-2-甲氧基-苯胺基]嘧啶-2-基]胺]-4-甲氧基苯基]-2-丙烯酰胺(化合物9)(600mg,产率56％)。

LC-MSm/z(ESI):518.1[M+1]。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.41(s,1H),7.95(s,1H),7.82–7.64(m,2H),6.82(d,1H),6.51(d,2H),6.41(d,1H),6.29(d,1H),6.06(d,1H),5.70(d,1H),3.87(s,6H),3.81–3.68(m,2H),3.24–3.05(m,4H),2.15(s,1H)。

实施例10

N-[3-[[2-[3-[(1-乙酰基-4-哌啶)氧基]苯胺基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物10)

N-[3-[[2-[[3-[(1-acetyl-4-piperidyl)oxy]phenyl]amino]-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide

第一步：4-[3-[[4-[3-[(2-丙烯酰胺基)苯胺基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基]苯氧基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(10B)

tert-butyl4-[3-[[4-[3-(prop-2-enoylamino)anilino]-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl]amino]phenoxy]piperidine-1-carboxylate

称取N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基-2-丙烯酰胺(中间体4)(1.15g,3.36mmol),置于100mL圆底烧瓶中，向反应瓶中加入1,4-二氧六环(20mL)。向反应瓶中依次加入4-(3-氨基苯基氧)哌啶-1-碳酸叔丁基酯(中间体5)(0.98g,3.36mmol),三氟乙酸的1,4-二氧六环溶液(0.7mL,7mol/L)。反应升至50℃下搅拌反应6小时。减压浓缩除去反应溶剂，残留物用柱层析分离得到粉红色固体状的标题产物4-[3-[[4-[3-[(2-丙烯酰胺基)苯胺基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基]苯氧基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(10B)(0.91g,产率45％)。

LC-MSm/z(ESI):599.1[M+1]。

第二步：N-[3-[[2-[3-[(1-乙酰基-4-哌啶)氧基]苯胺基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物10)

4-[3-[[4-[3-[(-2-丙烯酰胺基)苯胺基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基]苯氧基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(10B)(0.47g,0.7mmol),置于100mL圆底烧瓶中。0℃下,向反应瓶中依次加入二氯甲烷(10mL),三氟乙酸(5mL)。室温下反应30分钟后,减压除去反应溶剂。将得到的粗产品置于100mL圆底烧瓶中,向反应瓶中依次加入二氯甲烷(10mL)。-78℃下，向反应瓶中加入三乙胺(0.38mL,2.8mmol)，滴加乙酸酐(0.1mL,1.04mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。滴加完毕后，反应升至室温搅拌1小时。减压浓缩后柱层析分离(二氯甲烷/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)得到白色固体状的标题产物N-[3-[[2-[3-[(1-乙酰基-4-哌啶)氧]苯胺基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物10)(0.26g,产率70％)。

LC-MSm/z(ESI):541.1[M+1]。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.67(s,1H),8.24(s,1H),8.06(s,1H),7.69(s,1H),7.52-7.38(m,1H),7.31(m,1H),7.22-7.07(m,2H),7.01(d,1H),6.73-6.57(m,1H),6.45(m,1H),6.28(m,1H),5.79(d,1H),4.37(s,1H),3.77-3.56(m,2H),3.51(s,1H),3.38-3.22(m,1H),2.07(m,2H),1.94-1.50(m,4H),1.26(s,2H),0.87(m,1H)。

实施例11

N-[3-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-4-环丙基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物11)

N-[3-[[5-chloro-4-(2-methoxy-4-morpholino-anilino)pyrimidin-2-yl]amino]-4-cyclopropyl-phenyl]prop-2-enamide

第一步：2-环丙基-5-硝基苯胺(11B)

2-cyclopropyl-5-nitroaniline

将2-溴-5-硝基苯胺(11A)(6.08g，28mmol)、环丙基三氟硼酸钾(8.25g，56mmol)、碳酸铯(55g，168mmol)、三环己基膦(2.35g，8.4mmol)和醋酸钯(0.95g，0.15mmol)依次溶于甲苯(100mL)和水(100mL)中，氮气除气15分钟，升至120℃反应6小时。反应结束，减压浓缩除去溶剂，残留物用硅胶柱层析分离提纯(石油醚：乙酸乙酯(v/v)＝1:0～2:1)得到棕色固体状的标题化合物2-环丙基-5-硝基苯胺(11B)(4g，产率80.2％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.55–7.46(m,2H),7.09(d,J＝7.9Hz,1H),1.70(ddd,J＝13.7,8.2,5.6Hz,1H),1.06–0.89(m,2H),0.71–0.60(m,2H)。

第二步：5-氯-N²-(2-环丙基-5-硝基苯基)-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(11C)

5-chloro-N²-(2-cyclopropyl-5-nitrophenyl)-N⁴-(2-methoxy-4-morpholinophenyl)pyrimidine-2,4-diamine

将2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-4-胺(1b)(1g，2.75mmol)溶于1,4-二氧六环(30mL)中，加入2-环丙基-5-硝基苯胺(11B)(489mg，2.75mmol)和对甲苯磺酸(1g，5.5mmol)，加热至110℃，回流反应1天。反应液冷却至室温，加入水(100mL)，然后用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相。有机相用无水硫酸钠，减压浓缩后，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷：甲醇(v/v)＝1:0～20:1)得黄色固体的标题产物5-氯-N²-(2-环丙基-5-硝基苯基)-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(11C)(0.5g，36.7％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.99(d,1H),8.09(d,1H),8.06(s,1H),7.80(dd,1H),7.69(s,1H),7.64(s,1H),7.22(d,1H),6.54(d,1H),6.42(dd,1H),3.92(d,3H),3.90–3.85(m,4H),3.15(dd,4H),1.26(t,1H),1.19–1.10(m,2H),0.80–0.72(m,2H)。

第三步：N²-(5-氨基-2-环丙基-苯基)-5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(11D)

N²-(5-amino-2-cyclopropyl-phenyl)-5-chloro-N⁴-(2-methoxy-4-morpholino-phenyl)pyrimidine-2,4-diamine

将5-氯-N²-(2-环丙基-5-硝基苯基)-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(11C)(0.5g，1mmol)溶于乙醇(15mL)和水(5mL)中，再加入铁粉(168mg，3mmol)和氯化铵(38mg，0.7mmol)，升温至90℃，回流反应6小时。冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷：甲醇(v/v)＝1:0～10:1)，得到黄色固体状的标题产物N²-(5-氨基-2-环丙基-苯基)-5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(11D)，黄色固体(466mg，产率100％)。

LC-MSm/z(ESI):467.1[M+1]。

第四步：N-[3-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基-4-环丙基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物11)

将N²-(5-氨基-2-环丙基-苯基)-5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(11D)(400mg，0.86mmol)溶于吡啶(15mL)中，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(489mg，2.56mmol)，再加入丙烯酸(0.088mL，1.28mmol)，室温反应4小时。减压浓缩除去吡啶，加入4mol/L氢氧化钠水溶液(150mL)和二氯甲烷(150mL)，分液。有机相依次用水(100mL×1)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后，残留物采用制备柱拆分，制备条件：C18制备柱，流动相A:水,B:乙腈，等度洗脱，A：B＝25:75，分离后得到浅黄色固体状的白色固体状的标题产物N-[3-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基-4-环丙基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物11)(100mg，产率22.4％)。

LC-MSm/z(ESI):521.0[M+1]。

实施例12

N-[3-[[5-氯-4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物12)

N-[3-[[5-chloro-4-[2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)anilino]pyrimidin-2-yl]amino]-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamide

第一步:1-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-4-甲基哌嗪(12B)

1-(3-methoxy-4-nitrophenyl)-4-methylpiperazine

称取5-氟-2-硝基苯甲醚(3a)(8.55g,50mmol)，置于250mL圆底烧瓶中。向反应瓶中依次加入150mLN,N-二甲基甲酰胺，1-甲基哌嗪(6.01g,60mmol)，碳酸钾(13.8g,100mmol)，反应升温至80℃下搅拌5小时。待反应冷至室温后，将反应液倒入冰水(100mL)中，残余物用二氯甲烷(150mL×2)萃取，合并后的有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得到黄色固体状的标题产物1-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-4-甲基哌嗪(12B)(12.0g,产率95.6％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ7.96-7.94(d,1H),6.40-6.37(m,1H),6.30-6.29(m,1H),3.92(s,3H),3.40-3.37(m,4H),2.53-2.51(m,4H),2.33(s,3H)。

第二步：2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(12C)

2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)aniline

称取1-(3-甲氧基-4-硝基苯基)-4-甲基哌嗪(12B)(12g,47.76mmol),置于500mL圆底烧瓶中,依次向反应瓶中加入甲醇(150mL)，钯碳(2.0g,10％),通入氢气,反应在室温下搅拌5小时。减压浓缩，除去反应溶剂，残留物用硅胶柱层析分离(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝15:1)得到紫色固体状的标题产物2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(12C)(10g,产率：94.6％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ6.65-6.62(d,1H),6.51-6.50(d,1H),6.42-6.40(m,1H),3.83(s,3H),3.50(br,2H),3.08-3.06(m,4H),2.59-2.57(m,4H),2.35(s,3H)。

第三步：2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-4-胺(12D)

2,5-dichloro-N-(2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl)pyrimidin-4-amine

称取2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺(12C)(2.21g,10mmol)，置于100mL圆底烧瓶中。向反应瓶中依次加入N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，2,4,5-三氯嘧啶(1.83g,10mmol)和碳酸钾(1.79g,13mmol)。反应升温至80℃搅拌4小时。待反应冷至室温后，将反应液倒入冰水中(50mL)，残余物用二氯甲烷萃取(100mL×2),合并后的有机相用饱和食盐水洗(50mL×2),无水硫酸钠干燥，减压浓缩后，残留物用硅胶柱层析分离(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝15:1)得到黄色固体状的标题产物2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-4-胺(12D)(3.4g,产率：92.5％)

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.30-8.27(d,1H),8.12(s,1H),7.86(s,1H),6.61-6.54(m,2H),3.92(s,3H),3.26-3.23(m,4H),2.64(s,4H),2.40(s,3H)。

第四步：5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-N²-(2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2,4-二胺(12E)

5-chloro-N⁴-(2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl)-N²-(2-methoxy-5-nitrophenyl)pyrimidine-2,4-diamine

称取2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-4-胺(12D)(0.74g,2mmol)，置于100mL圆底烧瓶中。向反应瓶中依次加入1,4-二氧六环(20mL),2-氨基-4-硝基苯甲醚(0.41g,2.4mmol)和对甲苯磺酸(0.76g,4mmol)。反应升温至回流搅拌8小时。待反应冷至室温后，将反应瓶中滴加饱和碳酸氢钠水溶液(40mL)，残余物用二氯甲烷萃取(100mL×2)，合并后的有机相用饱和食盐水洗(50mL),无水硫酸钠干燥，减压浓缩后，残留物用硅胶柱层析分离(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝15:1)得到黄色固体状的标题产物5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-N²-(2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2,4-二胺(12E)(0.7g,产率70％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.24-9.23(d,1H),8.14-8.12(d,1H),8.09(s,1H),7.88-7.86(d,1H),7.56-7.53(d,2H),6.89-6.87(d,1H),6.56-6.54(m,2H),4.01(s,3H),3.91(s,3H),3.32(s,4H),2.74(s,4H),2.47(s,3H)。

LC-MSm/z(ESI):550.0[M+1]。

第五步：N²-(5-氨基-2-甲氧基苯基)-5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺(12F)

N²-(5-amino-2-methoxyphenyl)-5-chloro-N⁴-(2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl)pyrimidine-2,4-diamine

称取5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-N²-(2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2,4-二胺(12E)(0.70g,1.4mmol),置于100mL圆底烧瓶中。向反应瓶中依次加入乙醇(21mL)，水(7mL)，还原铁粉(0.47g,8.4mmol)和氯化铵(0.052g,1.0mmol)，反应升温回流5小时。待反应冷至室温后，将反应液过滤，滤饼用二氯甲烷(30mL×2)洗涤，甲醇(30mL×2)洗涤。将滤液减压浓缩后，残留物用硅胶柱层析分离提纯(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝15:1)得到黄色固体状的标题产物N²-(5-氨基-2-甲氧基苯基)-5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺(12F)(0.48,产率73％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.11-8.09(d,1H),8.02(s,1H),7.86-7.85(d,1H),7.56(s,1H),7.34(s,1H),6.67-6.57(m,3H),6.26-6.23(m,1H),3.90(s,3H),3.80(s,3H),3.28-3.25(m,4H),2.69(s,4H),2.43(s,3H)

LC-MSm/z(ESI):470.0[M+1]。

第六步：N-[3-[[5-氯-4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物12)

N-[3-[[5-chloro-4-[2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)anilino]pyrimidin-2-yl]amino]-4-methoxy-phenyl]-2-propenamide

将N²-(5-氨基-2-甲氧基苯基)-5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)嘧啶-2,4-二胺(12F)(0.48g,1.0mmol)溶于吡啶(14mL)中，依次加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(0.59g，3.0mmol)，丙烯酸(0.11g，1.5mmol)，室温反应6小时。减压除去反应溶剂，向反应瓶中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)，残余物用二氯甲烷(50mL×2)萃取，合并后的有机相用无水硫酸钠干燥，减压浓缩后柱层析分离(二氯甲烷/甲醇(v/v)＝15:1)得到黄色固体状的标题产物N-[3-[[5-氯-4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物12)(0.20g,产率37％)。

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.95(s,1H),8.80-7.82(m,5H),7.50-7.46(m,1H),6.99-6.97(d,1H),6.63(s,1H),6.42-6.19(m,3H),5.72-5.69(m,1H),3.84(s,3H),3.78(s,3H),3.10-3.08(m,4H),2.50-2.46(m,4H),2.24(s,3H)。

LC-MSm/z(ESI):524.0[M+1]。

实施例13

N-[3-[[5-氯-4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺甲磺酸盐(化合物13)

N-[3-[[5-chloro-4-[2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)anilino]pyrimidin-2-yl]amino]-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamide；methanesulfonicacid

将N-[3-[[5-氯-4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物12)(0.18g，0.34mmol)溶于乙醇/乙酸乙酯(v/v)＝3:1(4mL)中。在70℃下,向反应瓶中加入甲磺酸(0.1g，1mmol)的乙酸乙酯溶液(3mL)。70℃下反应2小时。待反应冷却至室温后，过滤，滤饼用乙酸乙酯洗，(5mL×3)，自然晾干后得到黄色固体状的标题产物N-[3-[[5-氯-4-[2-甲氧基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯胺基]嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺甲磺酸盐(化合物13)(0.12g,产率：56％)。

¹HNMR(400MHz,CD₃OD)δ8.08(d,1H),7.94(d,1H),7.82-7.80(d,1H),7.56-7.54(d,1H),7.12-7.10(d,1H),6.74-6.73(d,1H),6.48-6.37(m,3H),5.87-5.84(m,1H),3.93(s,3H),3.90(s,3H),3.88(br,2H),3.65(br,2H),3.36(br,2H),3.08(br,2H),3.04(s,3H)。

LC-MSm/z(ESI):524.3[(M-M_甲磺酸)]。

实施例14

N-[3-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物14)

N-[3-[[5-chloro-4-(2-methoxy-4-morpholino-anilino)pyrimidin-2-yl]amino]-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamide

第一步：2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉苯胺基)嘧啶-4-胺(14B)

2,5-dichloro-N-(2-methoxy-4-morpholinophenyl)pyrimidin-4-amine

称取2,4,5-三氯嘧啶4-氯-3-氟苯胺(14A)(0.62g,3mmol)，置于100mL圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入异丙醇(10mL)，2-甲氧基-4-吗啉基苯胺(0.55g,3mmol)，二异丙基乙基胺(0.49mL,6mmol)，升温回流反应，1小时后进入后处理。减压除去大部分异丙醇，向残余物中加入乙酸乙酯(100mL)，有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后得到黑色固体状的标题产物2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉苯胺基)嘧啶-4-胺(14B)(1.06g)。

第二步：5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)-N²-(2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2,4-二胺(14C)

5-chloro-N⁴-(2-methoxy-4-morpholinophenyl)-N²-(2-methoxy-5-nitrophenyl)pyrimidine-2,4-diamine

称取2,5-二氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉苯胺基)嘧啶-4胺(14B)(1.06g,3mmol)，置于100mL圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入1,4-二氧六环(20mL)，2-甲氧基-5硝基苯胺(0.5g,3mmol)，对甲苯磺酸(0.68g,3.6mmol)，升温回流反应，24小时后进入后处理。向反应瓶中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)，残余物用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并后的有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)得到黄色固体状的标题产物5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)-N²-(2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2,4-二胺(14C)(1.25g,产率86.8％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.20-9.19(d,1H),8.11-8.09(d,1H),8.07(s,1H),7.92-7.89(m,1H),7.68(s,1H),6.92-6.90(d,1H),6.57-6.54(m,1H),4.01(s,3H),3.92-3.89(m,7H),3.20-3.17(m,4H)。

LC-MSm/z(ESI):487.1[M+1]。

第三步：N²-(5-氨基-2-甲氧基苯基)-5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(14D)

N²-(5-amino-2-methoxyphenyl)-5-chloro-N⁴-(2-methoxy-4-morpholinophenyl)pyrimidine-2,4-diamine

称取5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)-N²-(2-甲氧基-5-硝基苯基)嘧啶-2,4-二胺(14C)(1.25g,2.58mmol)，置于100mL圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入乙醇(30mL)，水(10mL)，还原铁粉(0.84g,15.0mmol)，氯化铵(0.1g,1.8mmol)，升温回流反应，5小时后进入后处理。将反应液过滤，滤饼用二氯甲烷(20mL×2)洗涤，甲醇(20mL×2)洗涤。将滤液浓缩后柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝2:1)得到灰色固体状的N²-(5-氨基-2-甲氧基苯基)-5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(14D)(1.0g,产率85％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.14-8.12(d,1H),8.02(s,1H),7.85(s,1H),7.62(s,1H),7.38(s,1H),6.67-6.65(m,3H),6.27-6.24(m,1H),3.90-3.87(m,7H),3.81(s,3H),3.18-3.15(m,4H)。

第四步：N-[3-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物14)

称取N²-(5-氨基-2-甲氧基苯基)-5-氯-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基苯基)嘧啶-2,4-二胺(14D)(1.0g,2.2mmol)，置于100mL圆底烧瓶中，向反应瓶中依次加入四氢呋喃(15mL)，二异丙基乙基胺(0.43mL,2.6mmol)。0℃下，向反应瓶中滴加丙烯酰氯(0.21mL,2.6mmol)，滴加完毕后，升温反应1小时。减压浓缩反应液，向残余物中加入二氯甲烷(50mL)，饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)，萃取，水相用二氯甲烷(50mL)反萃，合并后的有机相用饱和食盐水(30mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析分离提纯(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)得到白色固体状的N-[3-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物14)(0.18g,产率16％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.17(s,2H),8.06(s,1H),7.80-7.75(m,1H),7.52(s,1H),7.05(s,1H),6.86-6.84(d,1H),6.52-6.46(m,3H),6.27-6.21(m,1H),5.75-5.73(d,1H),3.93(s,3H),3.89-3.86(m,7H),3.17-3.14(m,4H)。

MSm/z(ESI):511.1[M+1]。

实施例15

N-[3-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺盐酸盐(化合物15)

N-[3-[[5-chloro-4-(2-methoxy-4-morpholino-anilino)pyrimidin-2-yl]amino]-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamidehydrochloride

称取N-[3-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物14)(0.2g,0.4mmol),置于50mL圆底烧瓶中,向反应瓶中加入1,4-二氧六环(5mL)。0℃下,向反应瓶中滴加盐酸的1,4-二氧六环溶液(0.2mL,4mol/L),滴加完毕后,反应升至室温下搅拌1小时后终止。减压除去反应溶剂得到黄色固体状的N-[3-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺盐酸盐(化合物15)(0.14g.产率70％)。

¹HNMR(400MHz,CD₃OD)δ8.16(s,1H),8.02-8.00(m,1H),7.81(s,1H),7.58-7.56(d,1H),7.42(s,1H),7.19-7.14(m,2H),6.45-6.35(m,2H),5.83-5.80(m,2H),4.01(s,3H),3.86(s,3H),3.66(br,4H),3.33(br,4H)。

MSm/z(ESI):511.1[M-M_HCl+1]。

实施例16

N-[5-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-2-氟-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺盐酸盐(化合物16)

N-[5-[[5-chloro-4-(2-methoxy-4-morpholino-anilino)pyrimidin-2-yl]amino]-2-fluoro-4-methoxy-phenyl]prop-2-enamidehydrochloride

称取N-[5-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-2-氟-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物2)(0.12g,0.23mmol),置于50mL圆底烧瓶中,向反应瓶中加入1,4-二氧六环(5mL)。0℃下,向反应瓶中滴加盐酸的1,4-二氧六环溶液(0.12mL,0.46mmol,4mol/L),滴加完毕后,反应升至室温下搅拌1小时后终止。减压除去反应溶剂得到黄色固体状的N-[5-[[5-氯-4-(2-甲氧基-4-吗啉苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-2-氟-4-甲氧基-苯基]-2-丙烯酰胺盐酸盐(化合物16)(0.06g.产率46％)。

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.80(s,1H),8.54(br,1H),8.31(br,1H),8.05(s,1H),8.03-8.01(d,1H),7.68-7.66(d,1H),7.10-6.96(m,2H),6.55-6.20(m,4H),5.76-5.73(m,1H),3.82-3.74(m,10H),3.11-3.08(m,4H)。

实施例17

N-[4-甲氧基-3[[4-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯胺基)-嘧啶-2-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物17)

N-[4-methoxy-3-[[4-(2-methoxy-4-morpholino-anilino)pyrimidin-2-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide

第一步：2-氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)嘧啶-4-胺(17B)

2-chloro-N-(2-methoxy-4-morpholino-phenyl)pyrimidin-4-amine

称取2-甲氧基-4-吗啡啉基苯胺(4.5g,22.0mmol)置于100mL圆底烧瓶中。向反应瓶中依次加入2,4-二氯嘧啶(17A)(3.2g,22.0mmol)、正丁醇(40mL)、N,N-二异丙基乙胺(5.4mL,32mmol)。反应升温至140℃下搅拌3小时。减压除去反应液大部分正丁醇，向残余物中加入乙酸乙酯(200mL)，有机相用水洗(100mL)，水相用乙酸乙酯(100mL)反萃取，合并有机相，用饱和食盐水洗(200mL)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝10:1～2:1)，得到墨绿色固体状的2-氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)嘧啶-4-胺(17B)(5.0g,产率72％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.07-8.05(d,1H),7.54-7.52(m,1H),6.97(s,1H),6.55-6.53(m,2H),6.45-6.44(d,1H),3.89(br,4H),3.85(s,3H),3.19-3.17(m,4H)；

LC-MS(m/z):321.0[M+1]。

第二步：N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(17C)

N⁴-(2-methoxy-4-morpholino-phenyl)-N²-(2-methoxy-5-nitro-phenyl)pyrimidine-2,4-diamine

称取2-氯-N-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)嘧啶-4-胺(17B)(0.48g,1.5mmol)置于100mL圆底烧瓶中。依次向反应瓶中加入1,4-二氧六环(15mL)、2-氨基-4-硝基苯甲醚(0.38g,2.2mmol)、对甲苯磺酸一水合物(0.85g,4.5mmol)。反应升温至100℃下搅拌8小时。待反应冷至室温后，向反应瓶中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)，残余物用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机相用饱和食盐水洗(50mL)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝5:1～1:1)，得到黄色固体状的N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(17C)(0.5g,产率70％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.46-9.45(d,1H),8.03-8.01(d,1H),7.89-7.87(d,1H),7.74-7.64(m,2H),6.82-6.80(d,1H),6.78(s,1H),6.53-6.51(m,2H),6.16-6.14(d,1H),4.01(s,3H),3.89-3.87(m,7H),3.18-3.16(m,4H)；

LC-MS(m/z):453.1[M+1]。

第三步：N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(17D)

N²-(5-amino-2-methoxy-phenyl)-N⁴-(2-methoxy-4-morpholino-phenyl)pyrimidine-2,4-diamine

称取N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)-N²-(2-甲氧基-5-硝基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(17C)(0.5g,1.0mmol)，置于100mL圆底烧瓶中。依次向反应瓶中加入乙醇(15mL)、水(6mL)、还原铁粉(0.4g,7.0mmol)、氯化铵(0.04g,0.8mmol)，升温至回流搅拌6小时。将反应液冷至室温，过滤，滤饼用二氯甲烷(10mL×2)洗涤，甲醇(10mL×2)洗涤。将滤液浓缩，柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝3:1～乙酸乙酯)，得到黄色固体状的N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(17D)(0.34g,70％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ7.99-7.97(m,2H),7.80-7.78(d,2H),7.67(s,1H),6.72-6.68(m,2H),6.56-6.53(m,2H),6.27-6.25(d,1H),6.08-6.06(d,1H),3.89-3.86(m,7H),3.81(s,3H),3.16-3.14(m,4H)。

第四步：N-[4-甲氧基-3[[4-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯胺基)嘧啶-2-基]氨基]-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物17)

将N²-(5-氨基-2-甲氧基-苯基)-N⁴-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯基)嘧啶-2,4-二胺(17D)(0.55g,1.3mmol)溶于10mL吡啶中,向其中依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.99g,5.2mmol)、丙烯酸(0.19g,2.6mmol)，室温下搅拌8小时。减压除去反应溶剂，向残余物中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)，水相用乙酸乙酯萃取(100mL×2)，合并有机相，用饱和食盐水(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝3:1～1:1)，得到白色固体状的N-[4-甲氧基-3[[4-(2-甲氧基-4-吗啉基-苯胺基)-嘧啶-2-基]氨基]-苯基]-2-丙烯酰胺(化合物17)(0.20g,32％)。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ8.41(s,1H),7.97-7.95(d,1H),7.78-7.69(m,3H),7.34(s,1H),6.90(s,1H),6.81-6.79(d,1H),6.51-6.38(m,3H),6.35-6.25(m,1H),6.05-6.03(d,1H),5.72-5.69(d,1H),3.88-3.85(m,10H),3.15-3.13(m,4H)；

LC-MS(m/z):477.1[M+1]。

实施例18

N-[3-[[2-[2-甲氧基-4-[(1S,4S)-3-氧代-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-5-基]苯胺]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物18)

N-[3-[[2-[2-methoxy-4-[(1S,4S)-3-oxo-2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptan-5-yl]anilino]-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide

第一步：(1S,4S)-5-(3-甲氧基-4-硝基-苯基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮(18A)

(1S,4S)-5-(3-methoxy-4-nitro-phenyl)-2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptan-3-one

将5-氟-2-硝基苯甲醚(3a)(1.71g,10.0mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中，加入(1S,4S)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-3-酮(参照Bioorganic&MedicinalChemistryLetters,2005,2441-2445文献合成)(1.12g,10.0mmol)和碳酸钾(2.76g,20.0mmol)，加毕，加热至90℃反应过夜。将反应液冷却至室温，减压浓缩，加入乙酸乙酯(50mL)，依次用水(30mL×3)和饱和氯化钠(30mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后，残留物用二氯甲烷/甲醇(v/v＝0:1-1:9)柱层析分离，得黄色固体化合物(1S,4S)-5-(3-甲氧基-4-硝基-苯基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮(18A)(0.25g,产率9.5％)。

LC-MS(m/z):264.2[M+1]。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ7.97(d,1H),6.32–6.26(m,2H),6.14(s,1H),4.44(d,1H),4.27(s,1H),4.02–3.90(m,3H),3.77(dt,3.5Hz,1H),3.06–3.00(m,1H),2.20(d,1H),2.03(dd,1H)。

第二步：(1S,4S)-5-(4-氨基-3-甲氧基-苯基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮(18B)

(1S,4S)-5-(4-amino-3-methoxy-phenyl)-2,5-diazabicyclo[2.2.1]heptan-3-one

将(1S,4S)-5-(3-甲氧基-4-硝基-苯基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮(18A)(0.25g,0.95mmol)溶解在甲醇(20mL)中，加入10％的钯碳(0.05g),室温下常压氢化5小时。过滤除去钯碳，滤液浓缩得黑色固体状化合物(1S,4S)-5-(4-氨基-3-甲氧基-苯基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮(18B)(0.14g,产率61.5％)。

第三步：N-[3-[[2-[2-甲氧基-4-[(1S,4S)-3-氧代-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-5-基]苯胺]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物18)

将N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(中间体4)(0.2g,0.59mmol)溶解在10mLN,N-二甲基甲酰胺中，加入(1S,4S)-5-(4-氨基-3-甲氧基-苯基)-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-3-酮(18B)(0.14g,0.59mmol)、对甲苯磺酸(0.11g,0.59mmol)，加热至50℃反应过夜。将反应液冷却至室温，加入水(50mL)，依次用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，合并有机层，饱和氯化钠(50mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩后，残留物用二氯甲烷/甲醇(v/v＝0:1-1:9)柱层析分离，得白色固体化合物N-[3-[[2-[2-甲氧基-4-[(1S,4S)-3-氧代-2,5-二氮杂二环[2.2.1]庚-5-基]苯胺]-5-(三氟甲氧基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物18)(0.06g,产率19％)。

LC-MS(m/z):234.2[M+1]。

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.09(s,1H),8.48(s,1H),8.25(s,1H),8.07(s,1H),7.78(s,2H),7.49(d,1H),7.35(d,1H),7.33–7.14(m,2H),6.45(dd,2H),6.26(dd,1H),6.11(s,1H),5.80–5.71(m,1H),4.29(s,1H),4.10(s,1H),3.74(s,3H),3.63(d,1H),2.69(d,1H),1.90(d,1H),1.82(d,1H)。

实施例19

N-[3-[[2-[[3-[(1-乙酰基-4-哌啶)氨基]苯基]氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物19)

N-[3-[[2-[[3-[(1-acetyl-4-piperidyl)amino]phenyl]amino]-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]prop-2-enamide

第一步：4-[[3-[[4-[[3-[(2-丙烯酰胺基)苯基]氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(19A)

tert-butyl4-[[3-[[4-[3-(prop-2-enoylamino)phenyl]amino]-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl]amino]pheny]amino]piperidine-1-carboxylate

称取N-[3-[[2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基-2-丙烯酰胺(3D-a)(0.72g,2.1mmol)置于100mL圆底烧瓶中，依次加入1,4-二氧六环(10mL)、4-[(3-氨基苯基)氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(中间体6)(0.61g,2.1mmol)和三氟乙酸的1,4-二氧六环溶液(1M,0.4mL)，将反应液升至50℃下搅拌过夜。减压除去反应溶剂，柱层析分离(石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝3:1)，得到白色固体4-[[3-[[4-[[3-[(2-丙烯酰胺基)苯基]氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(19A)(0.8g,产率64％)。

LC-MS(m/z):598.1[M+1]。

第二步：N-[3-[[2-[[3-[(1-乙酰基-4-哌啶基)氨基]苯基]氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物19)

将4-[[3-[[4-[[3-[(2-丙烯酰胺基)苯基]氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基]氨基]苯基]氨基]哌啶-1-碳酸叔丁基酯(19A)(0.245g,0.41mmol)置于50mL圆底烧瓶中，0℃下，依次加入二氯甲烷(5mL)和三氟乙酸(5mL)，室温下反应30分钟。减压除去反应溶剂，将得到的粗产品置于50mL圆底烧瓶中，依次加入二氯甲烷(5mL)、四氢呋喃(5mL)。0℃下，加入三乙胺(0.23mL,1.6mmol)，滴加乙酸酐(0.058mL,0.61mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。滴加完毕，升至室温搅拌1小时。将反应液减压浓缩，柱层析分离(二氯甲烷/乙酸乙酯(v/v)＝1:1)，得到白色固体N-[3-[[2-[[3-[(1-乙酰基-4-哌啶)氨基]苯基]氨基]-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基]氨基]苯基]-2-丙烯酰胺(化合物19)(78mg,产率35％)。

LC-MS(m/z):540.3[M+1]。

¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ10.17(s,1H),9.36(s,1H),8.68(d,1H),8.34(s,1H),7.76(s,1H),7.32(t,1H),7.22(s,2H),6.86(s,1H),6.76(m,2H),6.42(m,1H),6.26(m,2H),5.75(m,1H),4.22(m,1H),3.79(d,1H),3.34-3.00(m,3H),2.74(m,1H),1.97-1.78(m,2H),1.25-1.15(m,5H)。

测试例1：测试癌细胞生长抑制

连续传代肿瘤细胞经胰蛋白酶消化，悬于培养基，计数后种入96孔细胞培养板。非小细胞肺癌细胞NCI-H1975每孔10000个细胞，人上皮细胞癌细胞A431细胞系每孔10000个细胞，在37℃，5％CO₂孵箱中，培养过夜。第二天每种细胞取6个孔加入30μl50％三氯乙酸固定；其余各孔分别加入得自实施例的化合物或阳性对照化合物WZ-4002。待测化合物以DMSO配置成溶液，最高浓度10μM，按下述方法5倍稀释10个待测浓度。对于NCI-H1975、A431细胞系，用含0.1％FBS的培养基梯度稀释待测，并使其为终浓度2倍。将种植NCI-H1975、A431细胞的96孔细胞培养板培养基换为新鲜含0.1％FBS的培养基(每孔100μl)，再加入100μl含2倍终浓度的待测化合物或WZ-4002。各96孔细胞培养板在37℃，5％CO₂细胞培养箱孵育72小时。然后每孔加入50μl50％三氯乙酸，置于4℃冰箱中固定1小时。

将各孔中的三氯乙酸弃去，用300μl双蒸水洗5次。室温下干燥后，每孔加入50μl0.4％SRB(Sulforhodamine-B)染料溶液(1％乙酸/0.4％SRB)，反应15min。弃去各孔的染料溶液，用1％乙酸洗6-7次，室温干燥。各孔加入200μl10mMTris溶液(PH＝10.5)，振荡溶解。用酶标仪测定各孔490nm吸光度。以待测化合物浓度为0的孔的读数为对照，使用origin7.5计算和分析待测化合物和WZ-4002的半效抑制浓度(IC₅₀)。

本发明化合物的抗肿瘤细胞增殖活性通过以上的试验进行测定，测得的IC₅₀值见表1。

表1抗肿瘤细胞增殖活性试验结果

结论：本发明化合物具有良好的抗肿瘤细胞增殖活性，对非小细胞肺癌细胞H1975活性均<50nM；相对于非小细胞肺癌细胞H1975、人上皮细胞癌细胞A431细胞系，本发明化合物对非小细胞肺癌细胞H1975有较好的选择性，个别化合物的选择性大于了1000倍。

生物测试例2：药代动力学评价

雄性SD大鼠(购自维通利华实验动物有限公司)180-240g，禁食给水过夜，3只大鼠口服灌胃5mg/kg，3只大鼠静脉注射1mg/kg。口服给药组，化合物以0.5％甲基纤维素(MC)溶液(含0.4％吐温80)配制成0.5mg×mL^-1的混悬液，在给药前和在给药后30分钟以及1、2、4、6、8、12和24小时采血；静脉给药组，化合物以10％的DMA，20％SolutolHS-15(30％，w/v)和70％生理盐水配制成0.2mg×mL^-1的溶液，在给药前和在给药后5、15和30分钟以及1、2、4、8、12和24小时采血。血液样品5500转/分钟离心10分钟，收集血浆，于-30℃保存。取各时间点大鼠血浆10μL，加入含内标的乙腈溶液500μL混合后，涡旋混合4分钟，3700转/分钟离心18分钟，取上清液70μL与70μL水混合，取混和液5μL进行LC-MS/MS分析。主要药代动力学参数用WinNonlin6.3软件非房室模型分析。

表2药代动力学评价试验结果

药代动力学评价试验结果见表2。

Claims

1.一种通式(I)所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

A、B各自独立的选自C_3-10碳环或3至10元杂环，所述碳环或杂环任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_3-10碳环、3至10元杂环或C_3-10碳环-C_1-4亚烷基的取代基所取代，所述的杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子；

R¹选自H、F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基，所述的烷基或烷氧基任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R²为H、C_1-4烷基、C_2-6烯基、C_3-6环烷基或C_1-4烷氧基，所述烷基、烯基、环烷基或烷氧基任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R³选自H、F、Cl、Br、I、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c、C_3-10碳环或3至10元杂环，所述杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子，所述碳环和杂环任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、氨基、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3a选自C_1-4烷氧基、C_3-10碳环或3至10元杂环，所述的杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子，所述的碳环、杂环或烷氧基任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、C_1-4烷基或3至6元碳环；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成一个4至7元的杂环，所述的杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，所述的杂环任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(C_1-4烷基)-；

n选自0、1、2或3。

2.根据权利要求1所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

A选自C_3-6碳环或4至9元杂环，所述碳环或杂环任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、C_1-4烷基、卤素取代的C_1-2烷基、C_1-4烷氧基或C_3-6碳环-C_1-2亚烷基的取代基所取代，所述的杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子；

B选自C_6-10碳环，所述碳环任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R¹选自H、F、Cl、Br、I、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基，所述的烷基或烷氧基任选进一步被0至4个选自F、Cl或Br的取代基所取代；

R²为H、C_1-4烷基、C_2-6烯基、C_3-6环烷基或C_1-4烷氧基，所述烷基、烯基、环烷基或烷氧基任选进一步被0至4个选自F、Cl或Br的取代基所取代；

R³选自H、F、Cl、Br、I、Z-(CH₂)_nR^3a、Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c或5至9元杂环，所述杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子，所述杂环任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、氨基、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3a选自C_1-4烷氧基、C_3-6碳环或3至6元杂环，所述的杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子，所述的碳环、杂环或烷氧基任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、C_1-4烷基或3至6元碳环；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成一个4至6元的杂环，所述的杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，所述的杂环任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、氨基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(C_1-4烷基)-；

n选自0、1、2或3。

3.根据权利要求2所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

A选自5至9元杂环，所述杂环任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、的取代基所取代，所述的杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子；

B为苯基，所述苯基任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基的取代基所取代；

R²为H、C_1-4烷基、C_2-4烯基、C_3-4环烷基或C_1-4烷氧基，所述烷基、烯基、环烷基或烷氧基任选进一步被0至4个选自F、Cl或Br的取代基所取代；

R³选自H、F、Cl、Br、I、9元杂环、Z-(CH₂)_nR^3a或Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c，所述杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子，所述杂环任选进一步被0至4个选自F、Cl、Br、I、氨基、C_1-4烷基、1至2个C_1-4烷基取代的氨基或C_1-4烷氧基的取代基所取代；

R^3a选自C_3-5碳环或4至6元杂环，所述的杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子，所述的碳环或杂环任选被0至4个选自甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氨基、-NH(CH₃)-或-N(CH₃)_2-的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、C_1-4烷基或3至5元碳环；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成一个5至6元的杂环，所述的杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，所述的杂环任选进一步被0至4个选自氨基或C_1-4烷基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(C_1-4烷基)-；

n选自0、1、2或3。

4.根据权利要求3所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

A选自取代或未取代的四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或当被取代时，任选进一步被1至4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、甲基、乙基、甲氧基、的取代基所取代；

R¹选自H、F、Cl、CF₃、甲基或甲氧基；

R²选自H、甲基、乙基、乙烯基、环丙基、甲氧基、氟代甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基；

R^3a选自取代或未取代的环丙基、四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基或吗啉基，当被取代时，任选进一步被0至4个选自甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氨基、-NH(CH₃)-或-N(CH₃)₂-的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、甲基、乙基或环丙基；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成一个5至6元的杂环，所述的杂环含有1至2个选自N、O或S的杂原子，所述的杂环任选进一步被0至4个选自氨基、甲基或乙基的取代基所取代；

Z为-O-、-NH-或-N(CH₃)-；

n选自0、1、2或3。

5.根据权利要求4所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

A为取代或未取代的吗啉基、哌嗪基或当被取代时，任选进一步被1至4个选自F、Cl、Br、I、乙酰基、甲基、甲氧基、乙基、的取代基所取代；

B为苯基，所述苯基任选进一步被0至4个选自F、Cl、甲基或甲氧基的取代基所取代；

R¹为H、F、Cl或CF₃；

R²为H、甲氧基或环丙基；

R³选自H、F、Cl、或Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、甲基、乙基或环丙基；

作为选择，R^3b、R^3c可以与其相连接的氮原子形成四氢吡咯基、吗啉基、哌啶基或哌嗪基，当被取代时，可任选进一步被1至2个选自氨基、甲基或乙基的取代基所取代；

Z选自-O-、-NH-或-N(CH₃)-；

n选自0、1、2或3。

6.一种通式(II)所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

W选自化学键、-O-、-NH-、-CH₂-或-N(CH₃)-；

Y选自取代或未取代的哌啶基、当被取代时，任选进一步被1至4个选自F、Cl、Br、I、(＝O)、乙酰基、甲基、乙基、甲氧基、的取代基所取代；

R¹选自H、F、Cl、CF₃、甲基或甲氧基；

R²选自H、甲基、乙基、环丙基、甲氧基、氟代甲氧基、二氟甲氧基或三氟甲氧基；

R^3a选自C_3-5碳环或4至6元杂环，所述的杂环含有1至4个选自N、O或S的杂原子，所述的碳环或杂环任选被0至4个选自甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、氨基、NH(CH₃)或N(CH₃)₂的取代基所取代；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、C_1-4烷基或3至5元碳环；

Z为-O-、-NH-或-N(CH₃)-；

n选自0、1、2或3。

7.根据权利要求6所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中：

X为苯基，所述苯基任选进一步被0至4个选自F、Cl、甲基或甲氧基的取代基所取代；

W为化学键、-O-、-NH-、-CH₂-或-N(CH₃)-；

Y为取代或未取代的当被取代时，任选进一步被1至4个选自F、Cl、Br、I、乙酰基、甲基、甲氧基、乙基、的取代基所取代；

R¹为H、F、Cl或CF₃；

R²为H、甲氧基或环丙基；

R³选自H、F、Cl、或Z-(CH₂)_nNR^3bR^3c；

R^3b和R^3c各自独立的选自H、甲基、乙基或环丙基；

Z选自-O-、-NH-或-N(CH₃)-；

n选自0、1、2或3。

8.根据权利要求1或6所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中所述化合物选自如下结构之一：

9.根据权利要求1～8任意一项所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，其中所述的盐选自盐酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、富马酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐或它们的组合。

10.一种药物组合物，所述药物组合物含有治疗有效剂量的根据利要求1～9中任一项所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，以及药学上可接受的载体或者赋形剂。

11.权利要求1-9中任一项所述的化合物及其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，或权利要求10所述的药物组合物，在制备用于治疗癌症的相关药物中的用途。

12.权利要求1-9中任意一项所述的化合物或其光学异构体、药学上可接受的盐或共晶，或权利要求10所述的药物组合物，在制备EGFR抑制剂中的用途。