CN105380827A - 一种包覆寡肽-1的载体及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于化妆品技术领域，具体公开了一种包覆寡肽-1的载体及其制备方法，本发明所述包覆寡肽-1的载体按重量百分比计算，由0.001～1％寡肽-1、1～10％固态油脂、1～15％液态油脂、1～12％亲油性乳化剂、1～10％亲水性乳化剂、0.005～1％无机盐和余量的水组成。本发明所述制备方法采用两步乳化法，制备得到包覆寡肽-1的具有多重结构的固体脂质载体。进一步进行超声，最终获得的包覆寡肽-1的具有多重结构的固体脂质载体的分散相粒子的粒径较均一。本发明所述制备工艺简单、能耗低，形成的包覆寡肽-1的载体稳定性高，对皮肤温和，并且能使体系缓慢释放活性成分寡肽-1，达到缓释作用。

Description

一种包覆寡肽-1的载体及其制备方法
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种包覆寡肽-1的载体及其制备方法，尤其是涉及一种包覆寡肽-1的含多重结构的固体脂质载体及其制备方法。
背景技术
寡肽-1，又名人表皮生长因子，是人体内的一种活性物质，于1962年被美国科学家Cohen博士发现，1986年获得诺贝尔生理学和医学奖。寡肽-1由53个氨基组成的活性多肽，分子量6201道尔顿，分子内有6个半胱氨酸组成的二硫键，形成3个分子内环型结构，组成生物活性所必须的受体结合区域。EGF无糖基部位，非常稳定，耐热、耐酸，广泛存在于体液和多种腺体中，主要由颌下腺、十二指肠合成，在人体的绝大多数体液中均已发现，在乳汁、尿液、精液中的含量特异性地增高，但在血清中的浓度较低。
众多的实验研究表明，寡肽-1可刺激多种细胞的增殖，主要是表皮细胞、内皮细胞。用于角膜损伤、烧烫伤及手术等创面的修复和愈合取得了很好的疗效。
寡肽-1被美容界誉为“美丽因子”，补充EGF正逐步受到全球女性的青睐。藉由刺激寡肽-1受体之酪氨酸磷酸化，达到修补增生肌肤表层细胞的效果。寡肽-1能促进表皮细胞组织内多种细胞的生长分裂，使表皮细胞变得饱满、恢复年轻状态，它还可以促使胶原蛋白生长能力，修复老化断裂的胶原弹性纤维。寡肽-1还可以美白祛斑，降低皮肤细胞中黑色素和有色细胞的含量，加快黑素细胞代谢脱落。寡肽-1用于防晒及晒后修复，可减轻紫外线辐射对皮肤的伤害，减少晒后皮肤的黑斑生长。寡肽-1用于防粉刺、去疤痕，可缩短创伤愈合时间以及减少疤痕形成，对防止和护理痤疮有很好的效果。
目前由于寡肽-1的稳定性差，以及其提取和活性保存技术的限制，寡肽-1的大范围的推广和应用受到制约。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于针对现有技术的缺陷，提出一种稳定性高、粒径均一的包覆寡肽-1的载体及其制备方法。
为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：
一种包覆寡肽-1的载体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
在一些实施方案中，所述水分为内水相水和外水相水，按重量百分比计算，内水相水的含量为1.0％～20.0％，外水相水的含量为31.0％～94.999％。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中，所述的固态油脂为单甘酯、氢化蓖麻油、二十二碳醇、十六碳醇、十八碳醇、十六十八醇、季戊四醇双硬脂酸酯、季戊四醇四硬脂酸酯中的至少一种；所述的液态油脂为肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异辛酯、辛酸癸酸三甘油酯、聚二甲基硅氧烷、C12-15醇苯甲酸酯、合成霍霍巴油、澳洲坚果油中的至少一种。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中，所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、花生醇、山嵛醇、花生醇葡糖苷、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂基葡糖苷、脂肪醇聚氧乙烯醚、山俞酸甘油酯、鲸蜡硬脂基葡糖苷、硬脂酰谷氨酸钠中的至少一种；
在一些实施方案中，本发明所述的亲油性乳化剂为鲸蜡基聚乙二醇/聚丙二醇-10/1聚二甲基硅氧烷、聚甘油-3聚蓖麻醇酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、十六烷基蓖麻醇酸酯、癸酸甘油酯、硬脂酸镁、硬脂酸、失水山梨醇油酸酯、环甲基硅氧烷和二甲基硅氧烷共聚多元醇中的至少一种；
在一些实施方案中，本发明所述的无机盐为氯化钠、氯化钾、硫酸镁、氯化镁中的至少一种。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为十八碳醇、十六十八醇所组成的混合物；
所述的液态油脂为肉豆蔻酸异丙酯；
所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物；
所述的亲油性乳化剂为鲸蜡基聚乙二醇/聚丙二醇-10/1聚二甲基硅氧烷；
所述的无机盐为氯化钾。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体，其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为单甘酯；
所述的液态油脂为辛酸癸酸三甘油酯；
所述的亲水性乳化剂为硬脂酰谷氨酸钠；
所述的亲油性乳化剂为聚甘油-3聚蓖麻醇酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、十六烷基蓖麻醇酸酯、癸酸甘油酯、硬脂酸镁、硬脂酸所组成的混合物；
所述的无机盐为氯化钠。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体，其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为十六十八醇；
所述的液态油脂为辛酸癸酸三甘油酯；
所述的亲水性乳化剂为山俞酸甘油酯、鲸蜡硬脂基葡糖苷所组成的混合物；
所述的亲油性乳化剂为失水山梨醇油酸酯；
所述的无机盐为硫酸镁。
本发明还提供了所述包覆寡肽-1的载体的制备方法，包括如下步骤：
(1)将亲油性乳化剂与固态油脂、液态油脂混合后加热得到分散均匀的油相组分；
(2)将寡肽-1加到内水相水中加热得到分散均匀的内水相组分；
(3)将外水相水与亲水性乳化剂和无机盐混合加热，得到分散均匀的外水相组分；
(4)均质步骤(1)所得的油相组分，同时加入步骤(2)所得的内水相组分，均质后得W/O型乳液；
(5)均质步骤(3)所得的外水相组分，同时加入步骤(4)得到的W/O型乳液组分，均质。
在一些实施方案中，本发明所述制备方法，步骤(1)所述加热为加热至80℃～110℃。
在一些实施方案中，本发明所述制备方法，步骤(2)所述加热和步骤(3)所述加热均为加热至70℃～90℃。
在一些实施方案中，本发明所述制备方法，步骤(4)和步骤(5)所述均质速度为7200rpm～30000rpm，均质1min～15min。
在一些实施方案中，本发明所述制备方法，还包括超声的步骤，所述超声为20％～30％的超声功率，超声5sec停止5sec，超声1min～20min。
由上述技术方案可知，本发明提供了一种包覆寡肽-1的载体及其制备方法。本发明所述包覆寡肽-1的载体按重量百分比计算，由0.001～1％寡肽-1、1～10％固态油脂、1～15％液态油脂、1～12％亲油性乳化剂、1～10％亲水性乳化剂、0.005～1％无机盐和余量的水组成。本发明所述制备方法采用两步乳化法，制备得到包覆寡肽-1的具有多重结构的固体脂质载体。进一步进行超声，最终获得的包覆寡肽-1的具有多重结构的固体脂质载体的分散相粒子的粒径较均一。本发明所述制备工艺简单、能耗低，形成的包覆寡肽-1的载体稳定性高，对皮肤温和，并且能使体系缓慢释放活性成分寡肽-1，达到缓释作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1示实施例1所得的包覆寡肽-1的载体的400倍显微镜照片图(未超声)；
图2示实施例1所得的包覆寡肽-1的粒径图(超声后)，其中横坐标为粒径大小，纵坐标为强度。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：
一种包覆寡肽-1的载体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
寡肽-1具有良好的亲水性，而对于亲水性成分的包覆需要借助于含多重结构的固体脂质载体，将亲水性活性成分包覆于内水相，形成一种针对于亲水性活性成分的包覆载体结构。固体脂质载体是固体油脂在冷却或相分离过程中固化和结晶形成的固体微粒。固体脂质载体具备生理相容性好、可生物降解、载药能力强、物理化学存储稳定、成本低、利于大规模生产等优点。含有多重结构的固体脂质载体类似于多重结构乳状液，即在分散相微滴中,有另一种分散相分布其中。多重结构(W/O/W、O/W/O)可以说是最有前途的化妆品理想体系之一，它可以在三个被膜分隔开的不同相区以溶解不同的活性物质，并防止它们之间的相互作用，对乳状液进行超声，减小粒径，更加利于皮肤吸收。
本发明所述包覆寡肽-1的载体将寡肽-1分散于固体脂质载体的内水相，固体脂质载体为寡肽-1提供适合的包覆载体，形成包覆寡肽-1的具有多重结构的固体脂质载体。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
本发明所述包覆寡肽-1的载体中所述水分为内水相水和外水相水，其中所述内水相水与寡肽-1组成内水相组分，所述外水相水与亲水性乳化剂和无机盐组成外水相组分。
其中，按重量百分比计算，所述内水相水的含量为1.0％～20.0％；所述外水相水的含量为31.0％～94.999％。
进一步的，在一些实施方案中，所述内水相组分含量为1.001％～21.0％，所述外水相组分含量为95.999％～42.0％。
本发明所述包覆寡肽-1的载体中所述寡肽-1的含量为0.001％～1.0％。在一些具体实施例中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中所述寡肽-1的含量为0.001％；在一些具体实施例中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中所述寡肽-1的含量为0.5％；在另一些具体实施例中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中所述寡肽-1的含量为1.0％。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中，所述的固态油脂为单甘酯、氢化蓖麻油、二十二碳醇、十六碳醇、十八碳醇、十六十八醇、季戊四醇双硬脂酸酯、季戊四醇四硬脂酸酯中的至少一种；
进一步的，在一些优选实施方案中，所述固态油脂为单甘酯、十六十八醇或十八碳醇与十六十八醇所组成的混合物。
本发明包覆寡肽-1的载体中所述固态油脂含量为1.0％～10.0％。在某些实施例中，所述固态油脂含量为1.0％；在某些实施例中所述固态油脂含量为5.0％；在某些实施例中所述固态油脂含量为10.0％。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中，所述的液态油脂为肉豆蔻酸异丙酯、PPG-15硬脂醚、棕榈酸异辛酯、辛酸癸酸三甘油酯、聚二甲基硅氧烷、C12-15醇苯甲酸酯、合成霍霍巴油、聚乙二醇(8)澳洲种子油中的至少一种；
进一步的，在一些优选实施方案中，所述的液态油脂为肉豆蔻酸异丙酯或辛酸癸酸三甘油酯。
本发明包覆寡肽-1的载体中所述液态油脂含量为1.0％～15.0％。在某些实施例中，所述液态油脂含量为1.0％；在某些实施例中所述液态油脂含量为6.0％；在某些实施例中所述液态油脂含量为15.0％。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中，所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、花生醇、山嵛醇、花生醇葡糖苷、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂基葡糖苷、脂肪醇聚氧乙烯醚、山俞酸甘油酯、鲸蜡硬脂基葡糖苷、硬脂酰谷氨酸钠中的至少一种；
进一步的，在一些优选实施方案中，所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、硬脂酰谷氨酸钠或山俞酸甘油酯与鲸蜡硬脂基葡糖苷所组成的混合物。
本发明包覆寡肽-1的载体中所述亲水性乳化剂含量为1.0％～15.0％。在某些实施例中，所述亲水性乳化剂含量为1.0％；在某些实施例中所述亲水性乳化剂含量为4.0％；在某些实施例中所述亲水性乳化剂含量为10.0％。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中，所述的亲油性乳化剂为鲸蜡基聚乙二醇/聚丙二醇-10/1聚二甲基硅氧烷、聚甘油-3聚蓖麻醇酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、十六烷基蓖麻醇酸酯、癸酸甘油酯、硬脂酸镁、硬脂酸、失水山梨醇油酸酯、环甲基硅氧烷和二甲基硅氧烷共聚多元醇中的至少一种。
进一步的，在一些优选实施方案中，所述的亲油性乳化剂为鲸蜡基聚乙二醇/聚丙二醇-10/1聚二甲基硅氧烷或失水山梨醇油酸酯。在一些优选实施方案中，所述的亲油性乳化剂为聚甘油-3聚蓖麻醇酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、十六烷基蓖麻醇酸酯、癸酸甘油酯、硬脂酸镁、硬脂酸所组成的混合物。
本发明包覆寡肽-1的载体中所述亲油性乳化剂含量为1.0％～12.0％。在某些实施例中，所述亲油性乳化剂含量为1.0％；在某些实施例中所述亲油性乳化剂含量为5.0％；在某些实施例中所述亲油性乳化剂含量为12.0％。
在一些实施方案中，本发明所述包覆寡肽-1的载体中，所述的无机盐为氯化钠、氯化钾、硫酸镁、氯化镁中的至少一种。
进一步的，在一些优选实施方案中，所述的无机盐为氯化钾、氯化钠或硫酸镁。
本发明包覆寡肽-1的载体中所述无机盐含量为0.005％～1.0％。在某些实施例中，所述无机盐含量为0.005％；在某些实施例中所述无机盐含量为0.5％；在某些实施例中所述无机盐含量为1.0％。
本领域技术人员可以理解，本发明所述水可以为任何可用于化妆品领域的水。
在一些具体实施例中，本发明所述水为去离子水。
本发明包覆寡肽-1的载体中所述内水相水的含量为1.0％～20.0％。在一些实施例中，所述内水相水的含量为1.0％；在一些实施例中为6.0％；在一些另实施例中为20.0％。
本发明包覆寡肽-1的载体中所述外水相水的含量为94.994％～31.0％。在一些实施例中，所述外水相水的含量为94.994％；在一些实施例中为为69.0％；在另一些实施例中为31.0％。
进一步，在某一具体实施例中，本发明所述包覆寡肽-1的载体按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为十八碳醇、十六十八醇所组成的混合物；
所述的液态油脂为肉豆蔻酸异丙酯；
所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物；
所述的亲油性乳化剂为鲸蜡基聚乙二醇/聚丙二醇-10/1聚二甲基硅氧烷；
所述的无机盐为氯化钾；
所述的水为去离子水，其中内水相水的含量为1.0％，外水相水的含量为94.994％。
其中作为内水相的水的含量为1.0％，作为外水相的水的含量为94.994％。
在某一具体实施例中，本发明所述包覆寡肽-1的载体其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为单甘酯；
所述的液态油脂为辛酸癸酸三甘油酯；
所述的亲水性乳化剂为硬脂酰谷氨酸钠；
所述的亲油性乳化剂为聚甘油-3聚蓖麻醇酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、十六烷基蓖麻醇酸酯、癸酸甘油酯、硬脂酸镁、硬脂酸所组成的混合物；
所述的无机盐为氯化钠。
所述的水去离子水，其中内水相水的含量为10.0％，外水相水的含量为69％。
在某一具体实施例中，本发明所述包覆寡肽-1的载体其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为十六十八混醇；
所述的液态油脂为辛酸癸酸三甘油酯；
所述的亲水性乳化剂为山俞酸甘油酯、鲸蜡硬脂基葡糖苷所组成的混合物；
所述的亲油性乳化剂为失水山梨醇油酸酯；
所述的无机盐为硫酸镁；
所述的水去离子水，其中内水相水的含量为20.0％，外水相水的含量为31％。
本发明还提供了所述包覆寡肽-1的载体的制备方法，包括如下步骤：
(1)将亲油性乳化剂与固态油脂、液态油脂混合后加热得到分散均匀的油相组分；
(2)将寡肽-1加到一定量水中加热得到分散均匀的内水相组分；
(3)将余量的水与亲水性乳化剂和无机盐混合加热，得到分散均匀的外水相组分；
(4)均质步骤(1)所得的油相组分，同时加入步骤(2)所得的内水相组分，均质后得W/O型乳液；
(5)均质步骤(3)所得的外水相组分，同时加入步骤(4)得到的W/O型乳液组分，均质。
本发明所述包覆寡肽-1的载体的制备方法将亲油性乳化剂与固态油脂、液态油脂混合得到油相组分，将寡肽-1加到内水相水中得到内水相组分，将外水相水与亲水性乳化剂和无机盐混合得到外水相组分；之后将油相组分与内水相组分混合均质，使水和寡肽-1的混合物在熔融的固态油脂和液态油脂中乳化形成一个W/O型初级乳状液；然后将得到的W/O型乳状液与外水相组分混合均质，进一步乳化，得到包覆寡肽-1的载体。本发明所述包覆寡肽-1的载体制备方法采用两步乳化法制备得到包覆寡肽-1的具有多重结构的固体脂质载体，寡肽-1分散于固体脂质载体的内水相。本发明所述包覆寡肽-1的载体可使有效成分寡肽-1缓慢而持久的释放，使之具有缓释作用，同时能促进活性成分寡肽-1的渗透性、提高寡肽-1的稳定性。此外包覆寡肽-1的载体不但具有W/O型乳状液优良的润肤作用，也具备了O/W型乳状液的清爽无油腻感。
在一些实施方案中，本发明所述制备方法，步骤(1)所述加热为加热至80℃～110℃。
在一些实施方案中，本发明所述制备方法，步骤(2)所述加热和步骤(3)所述加热均为加热至70℃～90℃。
在一些实施方案中，本发明所述制备方法，步骤(4)和步骤(5)所述均质速度为7200rpm～30000rpm，均质时间为1min～15min。
进一步的，在一些实施方案中，本发明所述制备方法还包括超声的步骤。
在一些优选实施方案中，所述超声为20％～30％的超声功率，超声5sec停止5sec，超声1min～20min。
本发明所述包覆寡肽-1的载体超声后得到粒径大小为50nm～750nm，包覆活性物质寡肽-1的含有多重结构的固体脂质微粒。
由上述技术方案可知，本发明提供了一种包覆寡肽-1的载体及其制备方法。本发明所述包覆寡肽-1的载体按重量百分比计算，由0.001～1％寡肽-1、1～10％固态油脂、1～15％液态油脂、1～12％亲油性乳化剂、1～10％亲水性乳化剂、0.005～1％无机盐和余量的水组成。本发明所述制备方法采用两步乳化法，制备得到包覆寡肽-1的具有多重结构的固体脂质载体。进一步进行超声，最终获得的包覆寡肽-1的具有多重结构的固体脂质载体的分散相粒子的粒径较均一。本发明所述制备工艺简单、能耗低，形成的包覆寡肽-1的载体稳定性高，对皮肤温和，并且能使体系缓慢释放活性成分寡肽-1，达到缓释作用。
为了进一步理解本发明，下面结合具体实施例对本发明进行详细阐述。如无特殊说明，所述的水均为去离子水。
实施例1、一种寡肽-1的载体：
按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为十八碳醇、十六十八醇以1:1(重量比)的比例所组成的混合物；
所述的液态油脂肉豆蔻酸异丙酯；
所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物；
所述的亲油性乳化剂为鲸蜡基聚乙二醇/聚丙二醇-10/1聚二甲基硅氧烷；
所述的无机盐为氯化钾。
制备方法包括如下步骤：
(1)将亲油性乳化剂与固态油脂、液态油脂混合后加热至80℃，得到分散均匀的油相组分；
(2)将寡肽-1加到内水相水混合加热至70℃，得到分散均匀内水相组分；
(3)将外水相水与亲水性乳化剂和无机盐混合加热至80℃，得到分散均匀的外水相组分；
(4)以均质速度15500rpm均质步骤(1)所得的油相组分，同时将步骤(2)所得的内水相组分加入其中，均质5min后即得W/O型乳液；
(5)以均质速度15500rpm均质外水相组分，同时将步骤(4)制备得到的W/O型乳液组分加入其中，均质5min；运用Quanta200F型扫描电镜(FEIcompany,Quanta200FEG，Holland，加速电压5～30kv)对所得的包覆寡肽-1的载体的外貌形态进行扫描，结果如图1所示。从图1中可以看出粒子都呈较规则的圆形，但根据显微镜照片可以看出，圆形的多重结构粒子大小不均匀，由此可知包覆寡肽-1的载体的粒径大小不一。
(6)选择超声功率30％，超声5秒停止5秒，对乳状液超声10min，最后搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，即得包覆寡肽-1的载体。测量包覆寡肽-1的载体的粒径，结果如图2所示。根据图2可知，粒子分布较均匀，只有一个强度峰，且强度较强，粒子的分布比较均匀。
实施例2、一种寡肽-1的载体：
按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为单甘酯；
所述的液态油脂辛酸癸酸三甘油酯；
所述的亲水性乳化剂为硬脂酰谷氨酸钠；
所述的亲油性乳化剂为聚甘油-3聚蓖麻醇酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、十六烷基蓖麻醇酸酯、癸酸甘油酯、硬脂酸镁、硬脂酸以等比例(重量比)所组成的混合物；
所述的无机盐为氯化钠；
制备方法包括如下步骤：
(1)将亲油性乳化剂与固态油脂、液态油脂混合后加热至90℃，得到分散均匀的油相组分；
(2)将寡肽-1加到内水相水混合加热至80℃，得到分散均匀内水相组分；
(3)将外水相水与亲水性乳化剂和无机盐混合加热至80℃，得到分散均匀的外水相组分；
(4)以均质速度7200rpm均质步骤(1)所得的油相组分，同时将步骤(2)所得的内水相组分加入其中，均质15min后即得W/O型乳液。
(5)以均质速度7200rpm均质外水相组分，同时将步骤(4)制备得到的W/O型乳液组分加入其中，均质15min；显微镜观察，结果与图1相似。
(6)选择超声功率20％，超声5秒停止5秒，对乳状液超声20min，最后搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，即得包覆寡肽-1的载体。测量包覆寡肽-1的载体的粒径，结果与图2相似。
实施例3、一种寡肽-1的载体：
按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为十六十八混醇；
所述的液态油脂为辛酸癸酸三甘油酯；
所述的亲水性乳化剂为山俞酸甘油酯、鲸蜡硬脂基葡糖苷以1:1(重量比)的比例所组成的混合物；
所述的亲油性乳化剂失水山梨醇油酸酯；
所述的无机盐为硫酸镁；
制备方法包括如下步骤：
(1)将亲油性乳化剂与固态油脂、液态油脂混合后加热至110℃，得到分散均匀的油相组分；
(2)将寡肽-1加到内水相水混合加热至90℃，得到分散均匀内水相组分；
(3)将外水相水与亲水性乳化剂和无机盐混合加热至70℃，得到分散均匀的外水相组分；
(4)以均质速度30000rpm均质步骤(1)所得的油相组分，同时将步骤(2)所得的内水相组分加入其中，均质1min后即得W/O型乳液。
(5)以均质速度30000rpm均质外水相组分，同时将步骤(4)制备得到的W/O型乳液组分加入其中，均质1min；显微镜观察，结果与图1相似。
(6)选择超声功率30％，超声5秒停止5秒，对乳状液超声5min，最后搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，即得包覆寡肽-1的载体。测量包覆寡肽-1的载体的粒径，结果与图2相似。
实施例4、一种寡肽-1的载体：
按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为季戊四醇双硬脂酸酯；
所述的液态油脂为聚二甲基硅氧烷；
所述的亲水性乳化剂为PEG-100硬脂酸酯；
所述的亲油性乳化剂为失水山梨醇倍半油酸酯、十六烷基蓖麻醇酸酯、癸酸甘油酯以等比例(重量比)所组成的混合物；
所述的无机盐为氯化钾；
制备方法包括如下步骤：
(1)将亲油性乳化剂与固态油脂、液态油脂混合后加热至80℃，得到分散均匀的油相组分；
(2)将寡肽-1加到内水相水混合加热至70℃，得到分散均匀内水相组分；
(3)将外水相水与亲水性乳化剂和无机盐混合加热至90℃，得到分散均匀的外水相组分；
(4)以均质速度10000rpm均质步骤(1)所得的油相组分，同时将步骤(2)所得的内水相组分加入其中，均质10min后即得W/O型乳液。
(5)以均质速度10000rpm均质外水相组分，同时将步骤(4)制备得到的W/O型乳液组分加入其中，均质10min；显微镜观察，结果与图1相似。
(6)选择超声功率30％，超声5秒停止5秒，对乳状液超声10min，最后搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，即得包覆寡肽-1的载体。测量包覆寡肽-1的载体的粒径，结果与图2相似。
实施例5、一种寡肽-1的载体：
按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
所述的固态油脂为季戊四醇四硬脂酸酯；
所述的液态油脂为棕榈酸异辛酯；
所述的亲水性乳化剂为花生醇葡糖苷；
所述的亲油性乳化剂为聚甘油-3聚蓖麻醇酸酯；
所述的无机盐为氯化镁；
制备方法包括如下步骤：
(1)将亲油性乳化剂与固态油脂、液态油脂混合后加热至110℃，得到分散均匀的油相组分；
(2)将寡肽-1加到内水相水混合加热至90℃，得到分散均匀内水相组分；
(3)将外水相水与亲水性乳化剂和无机盐混合加热至90℃，得到分散均匀的外水相组分；
(4)以均质速度20000rpm均质步骤(1)所得的油相组分，同时将步骤(2)所得的内水相组分加入其中，均质5min后即得W/O型乳液。
(5)以均质速度20000rpm均质外水相组分，同时将步骤(4)制备得到的W/O型乳液组分加入其中，均质5min；显微镜观察，结果与图1相似。
(6)选择超声功率20％，超声5秒停止5秒，对乳状液超声20min，最后搅拌至体系均一并自然冷却降至室温，即得包覆寡肽-1的载体。测量包覆寡肽-1的载体的粒径，结果与图2相似。
实施例6、高温稳定性考察
将实施例1制备的包覆寡肽-1的载体置于50℃恒温箱中，HPLC监控活性物含量变化和体系稳定性变化。结果如表1所示。
表150℃恒温箱中放置一周后寡肽-1的含量
放置时间 实施例1包覆寡肽-1的载体中寡肽-1含量
1周 91％
结果显示，实施例1制备的包覆寡肽-1的载体中寡肽-1的含量能达到91％，高温稳定性好。按照上述方法对实施例2-5制备的包覆寡肽-1的载体的高温稳定性进行考察，结果与实施例1制备的包覆寡肽-1的载体相似。可见本发明所述包覆寡肽-1的载体高温稳定性好。
实施例7、离心稳定性考察
将实施例1制备的包覆寡肽-1的载体在9000r/min的转速下离心，统计离心后的下清液中寡肽-1的含量。
表2离心后下清液中的寡肽-1的含量
离心时间 实施例1包覆寡肽-1的载体中寡肽-1含量
5min 4％-6％
10min 6％-9％
15min 9％-11％
结果显示，实施例1制备的包覆寡肽-1的载体离心后的下清液中寡肽-1不到15％。
按照上述方法对实施例2-5制备的包覆寡肽-1的载体的离心稳定性进行考察，结果与实施例1制备的包覆寡肽-1的载体相似。结果表明本发明所述包覆寡肽-1的载体的离心稳定性好。
实施例8、缓释性考察
取实施例1制备的包覆寡肽-1的载体样品1mL于透析袋中，扎紧；将装有样品的透析袋置于20mL外相溶液中，外相溶液为含60％乙醇的PBS溶液；时间间隔2h、6h分别取1mL样品，并分别再补充1mL新鲜的外相溶液；高效液相色谱法测定寡肽-1的浓度，计算累计缓释率。结果如表3所示。
高效液相色谱法检测条件为：色谱柱采用十八烷基硅氧烷键合硅胶为填充剂，以1‰三氟乙酸-水溶液为流动相A相(量取1.0ml三氟乙酸加水至1000ml，充分混匀)、1‰三氟乙酸-乙腈溶液为流动相B相(量取1.0ml三氟乙酸加入色谱纯乙腈至1000ml，充分混匀)，在室温条件下，进行梯度洗脱(0-70％B相)，取样量应不少于10μg，在波长280nm处检测。
累积缓释率的计算公式为：
累计释放率(％)＝Cn×V2+(Cn-1+………+C2+C1)×V1/1000/10×100
其中V1——为高效液相色谱法测试时取样体积1ml；
V2——溶出介质体积，20ml
1000是微克转化为毫克；
10是在测试时，取原样品10mg；
100是转化为百分数。
表3透析2h、6h寡肽-1的累计释放率(％)
由上表可见，实施例1制备的包覆寡肽-1的载体累计释放率在2h时为22.5％，而6h时为30％，即实施例1制备的包覆寡肽-1的载体有明显的缓释效果。
按照上述方法对实施例2-5制备的包覆寡肽-1的载体的累计释放率进行考察，结果与实施例1制备的包覆寡肽-1的载体相似。上述结果表明本发明所述包覆寡肽-1的载体的具有明显的缓释效果。
以上所述，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种包覆寡肽-1的载体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
2.根据权利要求1所述的包覆寡肽-1的载体，按重量百分比计算，其原料组成及含量如下：
3.根据权利要求1或2所述的载体，所述水分为内水相水和外水相水，按重量百分比计算，内水相水的含量为1.0％～20.0％，外水相水的含量为31.0％～94.999％。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的载体，所述的固态油脂为单甘酯、氢化蓖麻油、二十二碳醇、十六碳醇、十八碳醇、十六十八醇、季戊四醇双硬脂酸酯、季戊四醇四硬脂酸酯中的至少一种；所述的液态油脂为肉豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异辛酯、辛酸癸酸三甘油酯、聚二甲基硅氧烷、C12-15醇苯甲酸酯、合成霍霍巴油、澳洲坚果油中的至少一种。
5.根据权利要求1-3任意一项所述的载体，所述的亲水性乳化剂为聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、PEG-100硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、花生醇、山嵛醇、花生醇葡糖苷、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡硬脂基葡糖苷、脂肪醇聚氧乙烯醚、山俞酸甘油酯、鲸蜡硬脂基葡糖苷、硬脂酰谷氨酸钠中的至少一种。
6.根据权利要求1-3任意一项所述的载体，所述的亲油性乳化剂为鲸蜡基聚乙二醇/聚丙二醇-10/1聚二甲基硅氧烷、聚甘油-3聚蓖麻醇酸酯、失水山梨醇倍半油酸酯、十六烷基蓖麻醇酸酯、癸酸甘油酯、硬脂酸镁、硬脂酸、失水山梨醇油酸酯、环甲基硅氧烷和二甲基硅氧烷共聚多元醇中的至少一种。
7.根据权利要求1-3任一项所述的载体，所述的无机盐为氯化钠、氯化钾、硫酸镁、氯化镁中的至少一种。
8.一种权利要求书1-7任一项所述包覆寡肽-1的载体的制备方法，包括如下步骤：
(1)将亲油性乳化剂与固态油脂、液态油脂混合后加热得到分散均匀的油相组分；
(2)将寡肽-1加到一定量水中加热得到分散均匀的内水相组分；
(3)将余量的水与亲水性乳化剂和无机盐混合加热，得到分散均匀的外水相组分；
(4)均质步骤(1)所得的油相组分，同时加入步骤(2)所得的内水相组分，均质后得W/O型乳液；
(5)均质步骤(3)所得的外水相组分，同时加入步骤(4)得到的W/O型乳液组分，均质。
9.根据权利要求书8所述的制备方法，步骤(1)所述加热为加热至80℃～110℃；步骤(2)所述加热和步骤(3)所述加热均为加热至70℃～90℃。
10.根据权利要求书8所述的制备方法，步骤(4)和步骤(5)所述均质速度为7200rpm～30000rpm，均质时间为1min～15min。
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