CN105362996A - 一种治疗疱疹病毒的中药提取物及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种治疗疱疹病毒的中药提取物及其制备方法与应用，由土白芨、干姜和海桐花制备而成，将原料药混匀，粉碎成成粗颗粒，加水用微波萃取方法萃取两次，过滤后将萃取液用乙醇进行提取，将提取物液浓缩后滤过，通过大孔吸附树脂吸附，并用乙醇溶液洗脱，浓缩干燥，得本发明中药提取物。该中药提取物作为活性成分在制药学上接受附加剂的药物组合物在制备治疗疱疹病毒中的应用。本发明中药提取物抗疱疹病毒活性强，各成分之间相互协同作用，对疱疹临床症状具有明显的治疗药效，而且毒性小，无不良反应，使用安全，应用前景广泛。

Description

一种治疗疱疹病毒的中药提取物及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及医药领域，具体是一种治疗疱疹病毒的中药提取物及其制备方法与应用。
背景技术
疱疹病毒属疱疹病毒科，根据生物化学、生物学、流行病学等分为两个血清型，即HSV-1和HSV-2。HSV感染是人类一种常见的传染病。HSV-1主要是通过呼吸道、皮肤和黏膜密切接触传播，感染腰以上部位的皮肤黏膜和器官，引起龈口炎、唇疱疹、角膜结膜炎、脑炎及甲沟炎等；HSV-2主要感染腰部以下黏膜引起生殖器疱疹和新生儿疱疹。
带状疱疹是由水痘带状疱疹病毒引起的急性炎症性皮肤病，中医称为缠腰火龙、缠腰火丹，俗称蜘蛛疮、生蛇。其主要特点为簇集水泡，沿一侧周围神经作群集带状分布，伴有明显神经痛。初次感染表现为水痘，以后病毒可长期潜伏在脊髓后根神经节，免疫功能减弱可诱发水痘带状疱疹病毒再度活动，生长繁殖，沿周围神经波及皮肤，发生带状疱疹。临床症状消失后会有部分患者转为后遗神经痛(PHN)，是困扰中、老年人的顽固性痛症之一，持续时间短则1-2年，长者甚至超过10年，一般病史多在3-5年。常表现为局部阵发性或持久性的灼痛、刺痛、跳痛、刀割痛等，属于较剧烈的顽固性疼痛，轻轻触摸即可产生难以忍受的剧烈疼痛，从而使患者寝食难安，备受折磨。因其病势缠绵，胶瘤难愈，病程长的特点，使得根治带状疱疹后神经痛非常困难。
目前，西医治疗疱疹病毒的方法主要采用抗病毒药物(如阿昔洛韦、伐昔洛韦)、止痛药物(如镇痛剂，卡马西平)、营养神经药物(如维生素B1,B12)、采取破坏神经的方法(如神经封闭、切断、阻滞、冷冻等)，效果不是很确切，同时具有许多副作用、创伤大，并且密切观察白细胞和血小板减少、皮疹及肝肾功能的变化。纵观西医临床对于疱疹病毒的治疗效果并不理想，疗程长、疗效慢、疼痛期长，副作用多等。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗疱疹病毒的中药提取物及其制备方法与应用，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种治疗疱疹病毒的中药提取物，由以下重量份的原料制备而成：土白芨30～40份，干姜20～24份，海桐花28～32份。
一种所述的治疗疱疹病毒的中药提取物的制备方法，具体制备步骤如下：
(1)取以上药物组合物原料药混匀，粉碎成10～20目粗颗粒，加入6～8倍原料的水，用微波萃取方法萃取两次，在60～65℃温度下萃取30～40min，过滤后，再次加入5～7倍原料的水，在60～65℃温度下萃取30～40min，收集两次萃取液，过滤合并，得萃取液；
(2)将萃取液加入8～10倍体积的95％乙醇，在60℃水浴中回流提取2～3h，浓缩，回收乙醇，得提取液；
(3)将提取物液浓缩至相对密度d＝1.10～1.20，滤过，药液通过DM130大孔吸附树脂，再用浓度60～75％的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥，得本发明中药提取物。
一种所述的治疗疱疹病毒的中药提取物，所述的中药提取物作为活性成分在制药学上接受附加剂的药物组合物在制备治疗疱疹病毒中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明中药提取物抗疱疹病毒活性强，各成分之间相互协同作用，对疱疹临床症状具有明显的治疗药效，而且毒性小，无不良反应，使用安全，应用前景广泛。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
治疗疱疹病毒的中药提取物，由以下重量份的原料制备而成：土白芨30份，干姜24份，海桐花30份。
实施例2
治疗疱疹病毒的中药提取物，由以下重量份的原料制备而成：土白芨35份，干姜22份，海桐花30份。
实施例3
治疗疱疹病毒的中药提取物，由以下重量份的原料制备而成：土白芨35份，干姜20份，海桐花32份。
对比例1
治疗疱疹病毒的中药提取物，由以下重量份的原料制备而成：土白芨35份，干姜22份。
对比例2
治疗疱疹病毒的中药提取物，由以下重量份的原料制备而成：土白芨35份，海桐花30份。
对比例3
治疗疱疹病毒的中药提取物，由以下重量份的原料制备而成：干姜22份，海桐花30份。
上述各实施例中，治疗疱疹病毒的中药提取物的制备，具体制备步骤如下：
(1)取以上药物组合物原料药混匀，粉碎成20目粗颗粒，加入8倍原料的水，用微波萃取方法萃取两次，在60℃温度下萃取40min，过滤后，再次加入6倍原料的水，在65℃温度下萃取40min，收集两次萃取液，过滤合并，得萃取液；
(2)将萃取液加入10倍体积的95％乙醇，在60℃水浴中回流提取2h，浓缩，回收乙醇，得提取液；
(3)将提取物液浓缩至相对密度d＝1.10～1.20，滤过，药液通过DM130大孔吸附树脂，再用浓度75％的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥，得本发明中药提取物。
为了表明本发明中药提取物对疱疹病毒有治疗效果，本发明进行以下药理实验。
(1)材料
本发明实施例1-3和对比例1-3微波净浸液5m1，0.08MPa，15min高压消毒，密封冷藏保存；阿昔洛韦注射液(5m1：0.25g)取1ml稀释至20m1，再取稀释液的5mL备用。
病毒Hep-2细胞，HSV-1病毒和HSV-2病毒，细胞用含10％小牛血清的1640培养基作为生长液，含2％小牛血清的1640为维持液。
(2)方法
药物对病毒的抑制作用选100TCLD50/ml为病毒量的实验浓度，按每孔100μL吸附到40孔培养板中长成单层的HSV-1细胞，吸附2h后，吸出病毒，将本发明制备中药提取物和阿昔洛韦分别加入到吸附病毒的细胞中，各20孔，同时设立细胞对照和病毒对照。37℃，C02温箱培养，每天于倒置显微镜下观察细胞变化，待到病毒对照孔CPE呈+++～++++且细胞对照正常时，MTT法进行活细胞染色，酶标仪测定染色后OD(opticaldensity，光密度)值，根据OD值判断药物对病毒抑制作用的大小，HSV-2病毒OD值的测定也采取上述办法。
抑制率(％)＝(实验组OD值-病毒对照组OD值)/(细胞对照组OD值-病毒对照组OD值)×100％。
将所有数据录入SPSS17.0进行统计学处理，数据用X±s表示，组间对比采用方差齐性检验及t检验，P＜0.05视为具有统计学意义
2结果
对HSV-1的抑制作用如表1所示，对HSV-2的抑制作用如表2所示
表1对HSV-1的抑制作用
组别 OD值 抑制率/％
实施例1 0.262 87
实施例2 0.273 98
实施例3 0.266 91
对比例1 0.206 31
对比例2 0.209 34
对比例3 0.207 32
阿昔洛韦 0.235 60
细胞对照 0.275
病毒对照 0.175
注:实施例1-3与阿昔洛韦组相比，P＜0.05，有显著性差异。
表2对HSV-2的抑制作用
组别 OD值 抑制率/％
实施例1 0.257 82
实施例2 0.260 85
实施例3 0.258 83
对比例1 0.195 20
对比例2 0.197 22
对比例3 0.197 22
阿昔洛韦 0.235 60
细胞对照 0.275
病毒对照 0.175
注:实施例1-3与阿昔洛韦组相比，P＜0.05，有显著性差异。
该通过表1和2可知，实施例1-3与阿昔洛韦组相比，有显著性差异，因此，本发明中药提取物对HSV-1和HSV-2的抑制作用要明显优于阿昔洛韦，对比例1-3组对HSV-1和HSV-2的抑制作用要低于优于阿昔洛韦，抑制作用不明显。
通过以下实验表明本发明药物的临床效果
(1)诊断标准
火毒炽盛、毒热奎盛、气滞血癖造成的水痘一带状疱疹及带状疱疹后神经痛，作为临床诊断标准。
(2)服用方法、用量
饭后30分钟后服用；
水痘：每日两次，早、晚各一次，每次500mg；
带状疱疹：每日三次，早、中、晚各一次，每次500mg；
后神经痛：每日两次，早、晚各一次，每次1000mg。
(3)功效判断标准
治愈：服用2-3疗程后一年无复发症状；
显效；服用1-3疗程后有明显缓解或消除症状70％以上；
有效：服用1-3疗程后有缓解或消除症状50％以上；
无效；服用1-3疗程后无缓解，无症状消除。
(4)临床结果
临床结果统计：临床98人，其中，水痘12人，带状疱疹75人，带状疽疹后神经痛11人；
临床效果：水痘12人，其中一疗程治愈3人，二疗程治愈9人；
带状疽疹75人，其中二个疗程治愈48人，三个疗程治愈26人，三个疗程显效1人；
带状疽疹后神经痛11人，其中二个疗程治愈2人，三个疗程治愈9人；
临床效果统计：有效率100％，显效率1％，治愈率99％，无效率:无数据显示。
(5)典型病例
典型病例1：应某，男，53岁，带状疱疹反复发作一月，再发加重五天；肋及背部皮肤出现绿豆致黄豆大小丘疱疹，呈带状分布，伴有神经走向的热痛，曾在区级医院诊治断为“带状疱疹”，于药物抗病毒治疗，症状无明显好转，后症状加重，出现融合成片的丘疱疹，水泡破溃，部分结痂。发病部位觉灼热、跳痛，伴有全身疲倦无力，夜眠难安，食欲不振，轻度发烧。查体：左侧胸肋及背部皮肤可见大片融合的丘疱疹，色暗红，部分疱疹糜烂、渗液、结痂。舌质淡暗苔少，脉弦细。诊断为蛇串疮。
治疗：内服本发明实施例2制剂，1-2疗程；每日两次，早、晚各一次，每次1000mg。一年后随访，症状全消失，无复发症状，痊愈。
典型病例2：曾某，女61岁，胸肋部红斑、水泡、灼热、疼痛，胸肋部皮肤出现绿豆大小斑丘疹，灼热、疼痛，呈带状分布，伴有口苦、咽干、口渴、烦躁易怒，小便黄，大便秘结。查体：右侧胸肋部皮肤少量散在丘疱疹，色鲜红，部分疱疹渗液。舌红苔黄腻，脉弦滑数。诊断为带状疱疹。
治疗：内服本发明实施例2制剂，1-2疗程。每日两次，早、晚各一次，每次1000mg。一年后随访，症状全部消失，无复发迹象，痊愈。
典型病例3：连某，男，57岁。胸肋部皮肤水泡渗液，胸肋部皮肤出现绿豆大小水泡，淡红色，呈带状分布，热痛不明显，反复糜烂、渗液，并产生神经痛，影响睡眠，伴有口渴不欲饮水、腹胀、纳差、大便塘等不适。查体：左侧胸肋部皮肤可见淡红色水泡，部分破溃、糜烂、融合成片、渗液多。舌质淡红苔白厚，脉濡缓。诊断为水痘一带状疱疹后神经痛症。
治疗：内服本发明实施例2制剂，3疗程。每日两次，早晚各一次，每次1000mg；一年后随访，症状消失、无复发迹象，治愈。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

Claims (3)

1.一种治疗疱疹病毒的中药提取物，其特征在于，由以下重量份的原料制备而成：土白芨30～40份，干姜20～24份，海桐花28～32份。
2.一种如权利要求1所述的治疗疱疹病毒的中药提取物的制备方法，其特征在于，具体制备步骤如下：
(1)取以上药物组合物原料药混匀，粉碎成10～20目粗颗粒，加入6～8倍原料的水，用微波萃取方法萃取两次，在60～65℃温度下萃取30～40min，过滤后，再次加入5～7倍原料的水，在60～65℃温度下萃取30～40min，收集两次萃取液，过滤合并，得萃取液；
(2)将萃取液加入8～10倍体积的95％乙醇，在60℃水浴中回流提取2～3h，浓缩，回收乙醇，得提取液；
(3)将提取物液浓缩至相对密度d＝1.10～1.20，滤过，药液通过DM130大孔吸附树脂，再用浓度60～75％的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干燥，得本发明中药提取物。
3.一种如权利要求1所述的治疗疱疹病毒的中药提取物，其特征在于，所述的中药提取物作为活性成分在制药学上接受附加剂的药物组合物在制备治疗疱疹病毒中的应用。
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