CN105362868A - 一种用于防治动物呼吸综合征药物 - Google Patents
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Abstract
一种用于防治动物呼吸综合征药物，属于动物药领域。本发明的目的是以中兽医理论为指导，对动物呼吸综合征预防和治疗的用于防治动物呼吸综合征药物。本发明组成配方为：白前、百部、鱼腥草、诃子、穿心莲、甘草。本发明能有效的防治动物呼吸综合征。在发掘中兽药优势与特色的基础上，坚持中西医结合原则，研究发明更加安全、有效且质量可控的中西药结合制剂用于动物呼吸综合征的防治，对于促进动物养殖业发展，防控人畜共患病和维护食品安全均具有重大的经济与社会效益。
Description
技术领域
本发明属于动物药领域。
背景技术
动物呼吸综合征（AnimalRespiratorySyndrome；ARS）是多种病因可以导致的以咳嗽、气喘为主要症状的常见多发病。种类繁多的病原（包括多种细菌、真菌、病毒、支原体以及寄生虫等）感染、舍内通风不良所致氨气或硫化氢等气体超标、PM2.5造成的环境污染、冷空气突袭带来的气温变化等均可引起该病。患病动物表现为咳嗽、呼吸困难、鼻液增多、精神沉郁、饮食欲减退、生长发育缓慢、生产性能降低、死淘率升高等症状；剖检可见肺炎、支气管肺炎或气囊炎病变，鼻、咽、气管、支气管、肺泡、气囊等呼吸系统器官组织充血、淤血、渗出、坏死以及黏膜受损等。ARS发病遍及世界各地，发病率为30﹪～80﹪，病死率为20﹪～60﹪，每年给全球造成数千亿美元的经济损失；除此之外，更有某些导致动物呼吸综合症的病原会感染人类，从而对人类健康带来巨大威胁。
当前对ARS的防控还存在许多亟待解决的重大问题：一是针对相关病原的疫苗免疫效果不理想，甚至其中某些疾病还没有疫苗可用；二是生物隔离措施不够完善，许多饲养场管理水平不够高，环境污染等问题普遍存在，为ARS的发生和传播提供了外部条件；三是由于抗生素和化学抗菌药物的大量使用，使相关病原产生了广泛的耐药性，使治疗效果不断下降，临床不得不加大药物剂量并延长给药时间，大幅度提高了治疗难度与成本；四是抗生素和化学药物在动物体内及其产品中形成药物残留而危害食品安全，通过排泄物等途径而污染土壤与水源，贻害子孙后代。
发明内容
本发明的目的是以中兽医理论为指导，对动物呼吸综合征预防和治疗的用于防治动物呼吸综合征药物。
本发明组成配方重量份为：
白前1~30份、百部1~30份、鱼腥草1~30份、诃子1~30份、穿心莲1~30份、甘草1~30份。
本发明组成配方重量份为：
白前15份、百部15份、鱼腥草15份、穿心莲15份、诃子15份、甘草15份。
本发明汤散剂的制备：将白前、百部、甘草混合粉碎，过100目筛；鱼腥草、穿心莲混合粉碎，过100目筛；诃子粉碎，过100目筛，再将上述粉末混匀，再过100目筛，即得百草莲子汤散剂。
本发明可溶性粉制作流程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，分取各次上清液，过滤，合并滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入与中药材同等份的蔗糖，搅拌混匀，再蒸发浓缩至稠膏状，在50~60℃条件下继续浓缩成干膏，粉碎，即得百草莲子汤可溶性粉。
本发明口服液制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，分取各次上清液，滤过，合并滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入中药材三倍量矫味剂和防腐剂，其中矫味剂和防腐剂是蔗糖、苯甲酸、尼泊金复合酯、乙醇中的一种或几种，即得百草莲子汤口服液。
本发明颗粒剂制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，虑取滤液，蒸发回收乙醇，继续浓缩至稠膏状，加入中药材三倍量赋型剂，其中赋型剂是糊精、乳糖、蔗糖中的一种或几种，混合均匀，再加60%乙醇，制粒、烘干，整粒，即得百草莲子汤颗粒剂。
本发明气雾剂制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮2次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，将上述药液分装入特制的药瓶中，加上阀门拧紧密封后，于12kg/cm2的压力下，向药瓶中灌入一半于药液质量的抛射剂氟利昂，即得百草莲子汤气雾剂。
本发明注射剂制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮2次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩至稠膏状，加2~3倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，冷藏静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入氯化钠和注射用水至每毫升药液相当于1克药材并且药液渗透压和生理盐水的渗透压相等，过滤，灌封，灭菌，即得百草莲子汤注射剂。
本发明能有效的防治动物呼吸综合征。在发掘中兽药优势与特色的基础上，坚持中西医结合原则，研究发明更加安全、有效且质量可控的中西药结合制剂用于动物呼吸综合征的防治，对于促进动物养殖业发展，防控人畜共患病和维护食品安全均具有重大的经济与社会效益。
附图说明
图1是本发明汤散剂制作流程图；
图2是本发明可溶性粉制作流程图；
图3是本发明口服液制作流程图；
图4是本发明颗粒剂制作流程图；
图5是本发明气雾剂制作流程；
图6是本发明注射剂制作流程图。
具体实施方式
本发明组成配方重量份为：
白前1~30份、百部1~30份、鱼腥草1~30份、诃子1~30份、穿心莲1~30份、甘草1~30份。
本发明组成配方重量份为：
白前15份、百部15份、鱼腥草15份、穿心莲15份、诃子15份、甘草15份。
本发明汤散剂的制备：将白前、百部、甘草混合粉碎，过100目筛；鱼腥草、穿心莲混合粉碎，过100目筛；诃子粉碎，过100目筛，再将上述粉末混匀，再过100目筛，即得百草莲子汤散剂。
本发明可溶性粉制作流程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，分取各次上清液，过滤，合并滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入与中药材同等份的蔗糖，搅拌混匀，再蒸发浓缩至稠膏状，在50~60℃条件下继续浓缩成干膏，粉碎，即得百草莲子汤可溶性粉。
本发明口服液制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，分取各次上清液，滤过，合并滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入中药材三倍量矫味剂和防腐剂，其中矫味剂和防腐剂是蔗糖、苯甲酸、尼泊金复合酯、乙醇中的一种或几种，即得百草莲子汤口服液。
本发明颗粒剂制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，虑取滤液，蒸发回收乙醇，继续浓缩至稠膏状，加入中药材三倍量赋型剂，其中赋型剂是糊精、乳糖、蔗糖中的一种或几种，混合均匀，再加60%乙醇，制粒、烘干，整粒，即得百草莲子汤颗粒剂。
本发明气雾剂制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮2次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，将上述药液分装入特制的药瓶中，加上阀门拧紧密封后，于12kg/cm2的压力下，向药瓶中灌入一半于药液质量的抛射剂氟利昂，即得百草莲子汤气雾剂。
本发明注射剂制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮2次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩至稠膏状，加2~3倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，冷藏静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入氯化钠和注射用水至每毫升药液相当于1克药材并且药液渗透压和生理盐水的渗透压相等，过滤，灌封，灭菌，即得百草莲子汤注射剂。
实施例1
本发明组成配方重量份为：
白前1份、百部1份、鱼腥草1份、诃子1份、穿心莲1份、甘草1份，
各剂型制备方法同上。
实施例2
本发明组成配方重量份为：
白前15份、百部15份、鱼腥草15份、穿心莲15份、诃子15份、甘草15份，
各剂型制备方法同上。
实施例3
本发明组成配方重量份为：
白前30份、百部30份、鱼腥草30份、诃子30份、穿心莲30份、甘草30份，
各剂型制备方法同上。
本发明以中兽医理论为指导，研究发明出一个更加安全有效的中药配方—百草莲子汤用于防治动物呼吸综合征，该配方由白前、百部、鱼腥草、诃子、穿心莲和甘草组成，各味药物的比例如下：白前1~30份、百部1~30份、鱼腥草1~30份、诃子1~30份、穿心莲1~30份和甘草1~30份，最佳配比为白前15份、百部15份、鱼腥草15份、穿心莲15份、诃子15份、甘草15份。
白前为萝藦科植物柳叶白前Cynanchumstauntonii（Decne.）Schltr.exLévl.或芫花叶白前Cynanchumglaucescens（Decne.）Hand.-Mazz.的干燥根茎及根，味辛、苦，性微温，归肺经，具有降气、消痰、止咳的功效；主治肺气壅滞，痰多咳喘。百部为百部科植物直立百部Stemonasessilifolia（Miq.）Miq.、蔓生百部Stemonajaponica（Bl.）Miq.或对叶百部StemonatuberosaLour.的干燥块根，味甘、苦，性微温，归肺经，具有润肺止咳，杀虫的功效，主治咳嗽、蛲虫病、蛔虫病、疥癣和体虱。鱼腥草为三白草科植物蕺菜HouttuyniacordataThunb.的新鲜全草或干燥地上部分，味辛，性微寒，归肺经，具有清热解毒，消肿排脓，利尿通淋的功效，主治肺痈、肠黄、痢疾、乳痈和淋浊。穿心莲为爵床科植物穿心莲Andrographispaniculata（Burm.f.）Nees的干燥地上部分，味苦，性寒，归心、肺、大肠、膀胱经，具有清热解毒，消肿止痛的功效，主治感冒发热、湿热下痢、蛇虫咬伤、疮痈疔毒和鱼肠炎、烂鳃、赤皮、锚头蚤病。诃子为使君子科植物诃子TerminaliachebulaRetz.或绒毛诃子TerminaliachebulaRetz.var.tomentellaKurt.的干燥成熟果实，味苦、酸、涩，性平，归肺、大肠经，具有涩肠，敛肺的功效，主治久泻久痢、便血、脱肛和肺虚咳喘。甘草为豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、胀果甘草GlycyrrhizainflataBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabraL.的干燥根和根茎，味甘，性平，归心、肺、脾、胃经，具有补脾益气，祛痰止咳，和中缓急，解毒，调和诸药，缓解药物毒性、烈性的功效，主治脾胃虚弱、倦怠无力、咳喘、咽喉肿痛、中毒和疮疡。
根据中兽医学辨证理论，动物呼吸综合征属于“咳喘证”。由于风寒、风热或燥邪等外感，经呼吸道或肌表侵入动物体，致使肺气不宣，肃降失常，或日久不愈转为肺火而引起的咳喘；也可因饲养管理不良，空气污浊，致使肺脾两虚，痰浊内生，阻遏肺气而咳喘；或因阴液不足，虚火上炎，灼伤肺津，均可使肺失宣降而咳喘。方中百部、白前止咳化痰，降气平喘为主药；鱼腥草、穿心莲清肺泻热，解毒消痈为辅药；诃子敛肺平喘为佐药；甘草祛痰止咳，调和诸药为使药；组方后，各药相须为用，共奏清肺化痰，止咳平喘之功。
本方可制成散剂、可溶性粉、口服液、颗粒剂、气雾剂及注射剂，制剂的制作方法如下。
1、散剂将1~30份白前、1~30份百部、1~30份甘草混合粉碎，过100目筛；1~30份鱼腥草、1~30份穿心莲混合粉碎，过100目筛；1~30份诃子粉碎，过100目筛。再将上述粉末混匀，再过100目筛。即得百草莲子汤散剂。
2、可溶性粉将1~30份白前、1~30份百部、1~30份甘草、1~30份鱼腥草、1~30份穿心莲、1~30份诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时。分取各次上清液，过滤，合并滤液。蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入1~30份蔗糖，搅拌混匀，再蒸发浓缩至稠膏状，在50~60℃条件下继续浓缩成干膏，粉碎。即得百草莲子汤可溶性粉。
3、口服液将1~30份白前、1~30份百部、1~30份甘草、1~30份鱼腥草、1~30份穿心莲、1~30份诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时。分取各次上清液，滤过，合并滤液。蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入3~100份矫味剂和防腐剂（蔗糖、苯甲酸、尼泊金复合酯、乙醇中的一种或几种）。即得百草莲子汤口服液。
4、颗粒剂将1~30份白前、1~30份百部、1~30份甘草、1~30份鱼腥草、1~30份穿心莲、1~30份诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，虑取滤液，蒸发回收乙醇，继续浓缩至稠膏状，加入3~100份赋型剂（糊精、乳糖、蔗糖中的一种或几种），混合均匀，再加适量的60%乙醇，制粒、烘干，整粒。即得百草莲子汤颗粒剂。
5、气雾剂将1~30份白前、1~30份百部、1~30份甘草、1~30份鱼腥草、1~30份穿心莲、1~30份诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮2次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，将上述药液分装入特制的药瓶中，加上阀门拧紧密封后，于12kg/cm2的压力下，向药瓶中灌入一半于药液质量的抛射剂氟利昂。即得百草莲子汤气雾剂。
6、注射剂将1~30份白前、1~30份百部、1~30份甘草、1~30份鱼腥草、1~30份穿心莲、1~30份诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮2次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩至稠膏状，加2~3倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，冷藏静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入氯化钠和注射用水至每毫升药液相当于1克药材并且药液渗透压和生理盐水的渗透压相等，过滤，灌封，灭菌。即得百草莲子汤注射剂。
百草莲子汤治疗和预防动物呼吸综合征安全性和有效性评价：
急性毒性试验及结果如下：将百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤颗粒剂分别以5.0g/kg体重的剂量给药，百草莲子汤口服液、百草莲子汤注射液、百草莲子汤气雾剂分别以20ml/kg体重的剂量给药,均不能引起小鼠死亡，未测出其对小鼠的半数致死量（LD50），表明该制剂为实际无毒。亚慢性毒性试验及结果如下：将百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤颗粒剂分别以12.0g/kg体重、6.0g/kg体重、3.0g/kg体重的计量给药，百草莲子汤口服液、百草莲子汤注射液、百草莲子汤气雾剂以50ml/Kg体重、25ml/kg体重、15ml/kg体重的剂量给药，每日1次，连用6周，停药后继续观察2周，均没有引起大鼠死亡，也没有对大鼠的一般健康状况、体重、采食量、饮水量、血液细胞成分与生化指标、主要内脏器官的形态与组织结构、脏器系数造成不良影响，表明百草莲子汤具有较高的临床用药安全性。
为了在较大范围内考察和评价百草莲子汤治疗猪呼吸综合征的有效性，我们进行了百草莲子汤治疗猪呼吸综合征疗效观察试验，其过程及结果如下。选择350头具有典型动物呼吸综合征临床症状的猪，随机分为百草莲子汤散剂组、百草莲子汤可溶性粉组、百草莲子汤口服液组、百草莲子汤颗粒剂组、百草莲子汤注射液组、百草莲子汤气雾剂组和麻杏石甘散组（对照组），然后分别用所对应的药物进行治疗，通过观察病猪的主要症状、一般健康状况、给药前和给药结束5天后体重、疗效与疗程来综合判定百草莲子汤治疗猪呼吸综合征的有效性及安全性。结果表明：用百草莲子汤治疗的病猪临床症状得到较快改善，精神渐显活泼，活动增多，咳嗽逐渐减轻、次数逐渐减少，呼吸逐渐恢复正常，口鼻分泌物逐渐减少直至消失，体增重得到较快恢复。百草莲子汤散剂组、百草莲子汤可溶性粉组、百草莲子汤口服液组、百草莲子汤颗粒剂组、百草莲子汤注射液组和百草莲子汤气雾剂组治疗期间各种临床症状减轻或消除的明显比麻杏石甘散组快。百草莲子汤散剂组、百草莲子汤可溶性粉组、百草莲子汤口服液组、百草莲子汤颗粒剂组、百草莲子汤注射液组和百草莲子汤气雾剂组的病猪生长发育明显比麻杏石甘散组恢复的快。百草莲子汤的治疗疗程和麻杏石甘散相比没有显著差异。百草莲子汤散剂组治愈率94.00%，有效率98.00%；百草莲子汤可溶性粉组治愈率98.00%，有效率100.00%；百草莲子汤口服液组治愈率94.00%，有效率100.00%；百草莲子汤颗粒剂组治愈率96.00%，有效率100.00%；百草莲子汤注射液组治愈率92.00%，有效率96.00%；百草莲子汤气雾剂组治愈率96.00%，有效率100.00%；麻杏石甘散组（对照组）治愈率88.00%，有效率94.00%；各组之间没有显著性差异。治疗期间没有发现百草莲子汤有明显的毒性作用或引起其他不良反应。百草莲子汤可以有效治疗猪呼吸综合征。
为了在较大范围内考察和评价百草莲子汤气雾剂预防鸡呼吸综合征的有效性，我们进行了百草莲子汤气雾剂预防鸡呼吸综合征效果观察试验，其过程及结果如下。选择同一养鸡场的两个鸡舍，随机分为百草莲子汤气雾剂组和麻杏石甘散组（对照组），百草莲子汤气雾剂组的鸡舍每天喷一次百草莲子汤气雾剂，连续用药5天；麻杏石甘散组每天将麻杏石甘散拌料饲喂，连续用药5天；其余饲养条件保持一致。观察各鸡舍内是否出现患有呼吸综合征的病鸡（出现气喘、咳嗽或有明显口鼻分泌物即判为患病），并记录病鸡只数和鸡的总数，连续观察21天。结果显示：百草莲子汤气雾剂组和麻杏石甘散组鸡舍的发病率分别为4.30%和17.70%，百草莲子汤气雾剂组的发病率显著低于麻杏石甘散组；观察期内没有发现百草莲子汤气雾剂有明显的毒性作用或引起其他不良反应。百草莲子汤气雾剂可以有效的预防鸡呼吸综合征。
百草莲子汤各剂型急性毒性试验
1.材料
1.1受试药物
百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤注射液、百草莲子汤气雾剂。
实验动物及其饲养条件
清洁级昆明小鼠，18-22g，雌雄对半。
室内自然采光，室温：20～25℃，湿度：40%-55%。给药前后，实验小鼠雌雄分笼，用标准鼠粮喂养，自由饮水。
其它器材
小鼠灌胃器，1mL注射器，天平，量杯，烧杯和毒理实验室常规设备等。
2.方法（小鼠LD50的测定）
取试验用昆明小鼠120只，雌雄各半，雌雄分笼饲养。将小鼠随机分为6组，分别为百草莲子汤散剂组、百草莲子汤可溶性粉组、百草莲子汤口服液组、百草莲子汤颗粒剂组、百草莲子汤注射液组、百草莲子汤气雾剂组。
将百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤颗粒剂用温开水溶成0.125g/ml液体，分别按0.8ml/20g体重给小鼠1次灌胃，即单次给药剂量为5.0g/kg体重，观察7天内所产生的死亡情况和毒性反应。
将百草莲子汤口服液按0.4ml/20g体重给小鼠1次灌胃，即单次给药剂量为20ml/kg体重，观察7天内所产生的死亡情况和毒性反应。
将百草莲子汤注射液按0.4ml/20g体重给小鼠分2~3次注射（2h内全部注射完），即单次给药剂量为20ml/kg体重，观察7天内所产生的死亡情况和毒性反应。
将百草莲子汤气雾剂按0.4ml/20g体重喷在暂时相对密封的鼠笼内，即单次给药剂量为20ml/kg体重，观察7天内所产生的死亡情况和毒性反应。
3.结果
受试小鼠在观察期内没有死亡或毒性反应。全部试验小鼠精神活泼，行为、运动正常，采食量和饮水量没有异常变化，未能测出LD50值。
4.结论
组成百草莲子汤的几味中药均为常用无毒中药。本实验进行了百草莲子汤各剂型LD50的测定，结果未能测出其LD50，表明这些制剂均为实际无毒。
百草莲子汤各剂型的亚慢性毒性试验
为了考察本品长时期给药的安全性，本实验进行了亚慢性毒性试验，为临床试验和应用研究提供依据。
1.材料
1.1受试药物
百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤注射液、百草莲子汤气雾剂。
实验动物及其饲养条件
清洁级Wistar大鼠380只，6周龄，健康，雌雄各半。
室内自然采光，室温：20～25℃，湿度：40%-55%。给药前后，雌雄分笼，用标准鼠粮喂养，自由饮水。
其它器材
大鼠灌胃器，1mL注射器，天平，量杯，烧杯和毒理实验室常规设备等。
2.方法
2.1实验分组
将380只Wistar大鼠随机分为19组，分别为百草莲子汤散剂高、中、低剂量组，百草莲子汤可溶性粉高、中、低剂量组，百草莲子汤口服液高、中、低剂量组，百草莲子汤颗粒剂高、中、低剂量组，百草莲子汤注射液高、中、低剂量组，百草莲子汤气雾剂高、中、低剂量组和生理盐水对照组，每组20只。
给药剂量及给药途径
将百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤颗粒剂用温开水溶解；然后分别将这三种药物以12.0g/kg体重、6.0g/kg体重、3.0g/kg体重的计量给百草莲子汤散剂高、中、低剂量组，百草莲子汤可溶性粉高、中、低剂量组，百草莲子汤颗粒剂高、中、低剂量组大鼠灌胃，每日1次。
将百草莲子汤口服液按50.0ml/Kg体重、25.0ml/kg体重、15.0ml/kg体重的计量给百草莲子汤口服液高、中、低剂量组大鼠灌胃，每日1次。
将百草莲子汤注射液按50.0ml/Kg体重、25.0ml/kg体重、15.0ml/kg体重的计量分别给百草莲子汤注射液高、中、低剂量组大鼠注射，每日1次。
将百草莲子汤气雾剂按50.0ml/Kg体重、25.0ml/kg体重、15.0ml/kg体重的计量分别喷射于百草莲子气雾剂高、中、低剂量组大鼠的鼠笼内（鼠笼暂时相对密封），每日1次。
对照组大鼠每天灌胃生理盐水，每日1次。
连续连续给药6周，每2周称量体重一次，随体重调整给药剂量。停药后继续观察两周。
观察指标
2.3.1一般健康状况实验期间观察大鼠的精神状态、行为、饮食、粪便、发病及死亡等情况，若有大鼠死亡，及时剖检作病理检查。
体重每2周逐只称量体重，计算组间差异。
采食量自由摄食，每日称取给予饲料和剩余饲料的重量，计算饲料消耗量，以周为单位，统计日均采食量。
饮水量自由饮水，每日统计饮水量，以周为单位，统计日均饮水量。
血液指标于末次给药（给药6周）后24h和停药2周后分别每组各取10只大鼠（雌雄各半），全身麻醉后，迅速剖腹从下腔静脉取血，检查血液学和血液生化学指标。血清生化指标测定：谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）、总胆固醇（TC）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、血糖（GLU）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）；血常规测定：红细胞（RBC）、白细胞（WBC）和血红蛋白（Hb）。
脏器系数动物处死后，取心、肝、脾、肺、肾，观察并称重，计算脏器系数：
脏器系数=脏器重量/体重×100
2.3.7病变观察大鼠采血后做病变检查，然后取心、肝、脾、肺、肾，以10%福尔马林溶液固定后，按常规方法做石蜡切片，HE染色后，光镜下进行病理学检查。
统计分析
采用SPSS13.0软件进行数据分析，各组实验数据用均数±标准差(±s)表示。
3.3结果
在试验期间，各实验组大鼠的一般健康状况均没有出现任何异常现象，精神、行为、饮食、粪便正常，没有出现病理状态，没有大鼠死亡；各实验组大鼠体重、采食量、饮水量、血液指标、脏器系数和对照组相比均没有显著性差异；各实验组大鼠的心、肝、脾、肺、肾均未发现病理变化。
3.4结论
长期大剂量的给大鼠用药，没有使大鼠出现任何异常现象，表明百草莲子汤具有较高的临床用药安全性。
百草莲子汤治疗猪呼吸综合征疗效观察
动物呼吸综合征（AnimalRespiratorySyndrome；ARS）是多种病因可以导致的以咳嗽、气喘为主要症状的常见多发病。种类繁多的病原（包括多种细菌、真菌、病毒、支原体以及寄生虫等）感染、舍内通风不良所致氨气或硫化氢等气体超标、PM2.5造成的环境污染、冷空气突袭带来的气温变化等均可引起该病。由病原感染造成的动物呼吸综合征有可能是单一病原感染，也有能是多种病原混合感染；而氨气或硫化氢等刺激性气体、PM2.5和冷空气等所致的呼吸综合征则在发病早期一般没有病原感染，若是延误治疗，就有可能转为感染性疾病。
在感染性的动物呼吸综合征中可以检测出的病原有多，如猪肺炎支原体、多杀性巴氏杆菌、猪链球菌、猪传染性胸膜肺炎放线杆菌、猪流感病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪附红细胞体等，考虑到本次试验用猪数量较多，而且患病情况复杂，要一一检测清楚每头病猪是否感染了病原、感染了哪一种病原或哪几种病原要有相当大的工作量。
百草莲子汤具有清肺化痰，止咳平喘的功效，主治以咳嗽、气喘为主要症状的动物呼吸综合征，而且并不是仅局限于治疗感染性或者非感染性、单一病原感染或者混合性感染的动物呼吸综合征。
鉴于上述情况，本试验纳入病例，以发病主要症状为咳嗽、呼吸困难为标准，不再进行病原检测。
1.材料
1.1试验药物：百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤注射液、百草莲子汤气雾剂。
1.2对照药物：以兽药典方剂麻杏石甘散（成分：麻黄、杏仁、石膏、甘草）为对照药物。麻杏石甘散是治疗肺热咳嗽的经典方剂，有清热，宣肺，平喘的功效。本实验以麻杏石甘散为对照，观察百草莲子汤治疗猪呼吸综合征的疗效。
1.3实验动物：深入发病猪场调查，选择在以咳嗽、气喘为主要症状的病例较为集中的一些猪场开展试验。将以咳嗽、气喘为主要症状的患病猪作为实验动物，共350头。
2.方法
2.1根据兽医临床学实际，所采用病例是在较长时期内搜集的，先将具有典型动物呼吸综合征临床症状的猪按发病先后顺序编号标记，抓阄决定组别（即随机分组），按表1进行处置。设置百草莲子汤散剂组、百草莲子汤可溶性粉组、百草莲子汤口服液组、百草莲子汤颗粒剂组、百草莲子汤注射液组、百草莲子汤气雾剂组和麻杏石甘散组（对照组）。
表1试验组分组与处置
2.2试验猪饲养管理
所有试验猪都正常饲养，饲养管理条件相同。
2.3观察指标与疗效判定
从试验当天起连续观察10天，详细记录每天的病情变化。主要观察指标有咳嗽剧烈程度、气喘剧烈程度、口鼻分泌物的多少、精神食欲和其它临床症状，分别于用药前和用药结束5天后逐一称量体重，通过疗效、疗程和体增重综合判定治疗药物的有效性。
痊愈试验猪不咳嗽，不气喘，口鼻处没有明显分泌物，精神、饮食欲恢复正常（症状打分为0分）。
有效咳嗽次数明显减少，气喘程度程度明显减轻，精神、饮食状态有明显改善。
无效咳嗽、气喘与其它临床症状无明显改善，甚至加重或死亡。
2.4主要症状计分
在全面系统搜集临床症状的基础上，主要观察咳嗽、气喘、口鼻分泌物、食欲和精神5种临床症状，每种临床症状又根据出现频率和严重程度分为轻、中、重、剧4个等级，最终病情判定是将咳嗽、气喘、口鼻分泌物、食欲和精神5种临床症状分别按3、3、2、1的权重打分，死亡病例按最高权重加分计，综合得分越高，表示病情越严重（表2）。
表2各种症状计分权重
2.5体重变化
实验处理前和观察期结束时，分别空腹称量各试验猪的始重和末重，统计其各组之间体重及增重变化。
2.6统计分析
试验数据以SPSS12.0软件进行统计处理，结果用均值（）±标准差（SD）表示。
3.结果
3.1治疗结果
百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤注射液和百草莲子汤气雾剂对动物呼吸综合征均有较好疗效。用百草莲子汤治疗的病猪临床症状得到较快改善，精神渐显活泼，活动增多，咳嗽逐渐减轻、次数逐渐减少，呼吸逐渐恢复正常，口鼻分泌物逐渐减少直至消失，体增重得到较快恢复。
3.2治愈率和有效率
百草莲子汤散剂组治愈率94.00%，有效率98.00%；百草莲子汤可溶性粉组治愈率98.00%，有效率100.00%；百草莲子汤口服液组治愈率94.00%，有效率100.00%；百草莲子汤颗粒剂组治愈率96.00%，有效率100.00%；百草莲子汤注射液组治愈率92.00%，有效率96.00%；百草莲子汤气雾剂组治愈率96.00%，有效率100.00%；麻杏石甘散组（对照组）治愈率88.00%，有效率94.00%。各组之间没有显著性差异（表3）。
表3地翁颗粒组和白龙散组治疗结果
3.3临床症状分值
百草莲子汤散剂组、百草莲子汤可溶性粉组、百草莲子汤口服液组、百草莲子汤颗粒剂组、百草莲子汤注射液组和百草莲子汤气雾剂组治疗期间各种临床症状减轻或消除的明显比麻杏石甘散组快。（见表4）。
表4各组主要临床症状分值比较
注：同一行中，**表示与对照组相比差异极显著（P＜0.01），*表示与对照组相比差异显著（P＜0.05）。
3.4疗程
各组平均疗程没有显著性差异（见表5）。
表5地翁颗粒和白龙散治疗疗程（单位：d）
注：5日内痊愈计入疗程，治疗有效和无效不计入疗程。同一列中，**表示与对照组相比差异极显著（P＜0.01），*表示与对照组相比差异显著（P＜0.05）。
3.5体重变化
百草莲子汤散剂组、百草莲子汤可溶性粉组、百草莲子汤口服液组、百草莲子汤颗粒剂组、百草莲子汤注射液组和百草莲子汤气雾剂组猪生长发育明显比麻杏石甘散组恢复的快（见表6）。
表6不同日龄试验猪体重变化（kg/头）
注：同一列中，**表示与对照组相比差异极显著（P＜0.01），*表示与对照组相比差异显著（P＜0.05）。
4.结论
动物呼吸综合征是多种病因可以导致的以咳嗽、气喘为主要症状的常见多发病，发病遍及世界各地。麻杏石甘散是治疗肺热咳嗽的经典方剂，有清热，宣肺，平喘的功效。本实验以麻杏石甘散为对照，观察百草莲子汤治疗猪呼吸综合征的疗效。实验结果表明，与麻杏石甘散相比，百草莲子汤各种剂型治疗猪呼吸综合征可以使病猪临床症状减轻或消除的更快，病猪生长发育恢复的更快，治愈率、有效率和疗程没有显著性差异；治疗期间没有发现百草莲子汤有明显的毒性作用或引起其他不良反应。百草莲子汤可以有效的治疗猪呼吸综合征。
百草莲子汤气雾剂预防鸡呼吸综合征效果观察
动物呼吸综合征是多种病因可以导致的以咳嗽、气喘为主要症状的常见多发病。种类繁多的病原（包括多种细菌、真菌、病毒、支原体以及寄生虫等）感染、舍内通风不良所致氨气或硫化氢等气体超标、PM2.5造成的环境污染、冷空气突袭带来的气温变化等均可引起该病。
我国北方冬季气温很低，畜舍和禽舍内需要保温，因而开窗透气的时间很短，再加上畜禽排泄物的堆积，导致舍内空气污浊，氨气或硫化氢等气体超标，微生物密集。污浊的空气长期刺激畜禽呼吸道粘膜，导致动物患呼吸综合征。
百草莲子汤气雾剂使用方便，只需喷在畜禽舍内即可，避免了灌服或拌料的麻烦，节省人力。
1.材料
1.1试验药物：百草莲子汤气雾剂。
1.2实验动物：冬季深入北方养鸡场调查，选择呼吸综合征高发病率地区而还没有开始发病的养鸡场开展试验。在该养鸡场选取两个鸡舍进行试验。
2.方法
2.1选定开展实验的养鸡场和鸡舍后，随机分为百草莲子汤气雾剂组和麻杏石甘散组（对照组）。
2.2百草莲子汤气雾剂组的鸡舍每天喷一次百草莲子汤气雾剂，连续用药5天；麻杏石甘散组每天将麻杏石甘散拌料饲喂，连续用药5天。其余饲养条件保持一致。
2.3观察各鸡舍内是否出现患有呼吸综合征的病鸡（出现气喘、咳嗽或有明显口鼻分泌物即判为患病），并记录病鸡只数和鸡的总数。连续观察21天。
3.结果
观察期内，百草莲子汤气雾剂组和麻杏石甘散组鸡舍的发病率分别为4.30%和17.70%，百草莲子汤气雾剂组的发病率显著低于麻杏石甘散组（表7）。
表7百草莲子汤气雾剂组和对照组发病率
注：同一列中，**表示与对照组相比差异极显著（P＜0.01），*表示与对照组相比差异显著（P＜0.05）。
4.结论
百草莲子汤气雾剂能够明显降低鸡呼吸综合征的发病率，观察期内没有发现百草莲子汤气雾剂有明显的毒性作用或引起其他不良反应。百草莲子汤气雾剂可以有效的预防鸡呼吸综合征。
临床实例证明本方剂能有效防治自然发病的动物呼吸综合征。
1、以流行病学调查、临床检查和实验室病原检查确定诊断为猪呼吸综合征，随机分组后分别用百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤注射液、百草莲子汤气雾剂和麻杏石甘散（选用药典方剂作为对照药）进行治疗。通过观察猪的咳嗽次数、气喘严重程度、精神、食欲等临床症状和实验室指标变化，以及给药前和给药结束5天后体重等，综合判定百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤注射液、百草莲子汤气雾剂的有效性和安全性。结果表明：百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤气雾剂和百草莲子汤注射液均对猪的呼吸综合征有良好的治疗作用，治愈率和有效率均在90%以上，治疗效果优于麻杏石甘散。使用百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤注射液或百草莲子汤气雾剂治疗的病猪临床症状得到较快改善，并且大部分病猪完全恢复健康，咳嗽次数减少，气喘逐渐减轻，口、鼻分泌物明显减少，精神渐显活泼，饮食欲迅速增进，体增重得到较快恢复。治疗期间未发现百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤注射液或百草莲子汤气雾剂有明显的毒性作用或引起其他不良反应。证明百草莲子汤散剂、百草莲子汤可溶性粉、百草莲子汤口服液、百草莲子汤颗粒剂、百草莲子汤注射液和百草莲子汤气雾剂是安全有效的。
2、根据流行病学调查结果，在呼吸综合征发病率高的地区选取多个猪场，将猪场的各个猪舍随机分组后，用百草莲子汤气雾剂和麻杏石甘散（选用药典方剂作为对照药）来进行预防，用药时间均为5天，根据用药期间及用药后3周，各个猪舍的发病率来判断药物的预防效果。结果表明，使用百草莲子汤气雾剂的猪舍发病率低于使用麻杏石甘散的猪舍，并且没有发现百草莲子汤气雾剂有明显的毒性作用或引起其他不良反应。百草莲子汤气雾剂可以良好的预防猪呼吸综合征。
Claims (8)
1.一种用于防治动物呼吸综合征药物，其特征在于：组成配方重量份为：
白前1~30份、百部1~30份、鱼腥草1~30份、诃子1~30份、穿心莲1~30份、甘草1~30份。
2.根据权利要求1所述的用于防治畜禽呼吸道综合征药物，其特征在于：组成配方重量份为：
白前15份、百部15份、鱼腥草15份、穿心莲15份、诃子15份、甘草15份。
3.根据权利要求1或2所述的用于防治畜禽呼吸道综合征药物，其特征在于：其汤散剂的制备：将白前、百部、甘草混合粉碎，过100目筛；鱼腥草、穿心莲混合粉碎，过100目筛；诃子粉碎，过100目筛，再将上述粉末混匀，再过100目筛，即得百草莲子汤散剂。
4.根据权利要求1或2所述的用于防治畜禽呼吸道综合征药物，其特征在于：其可溶性粉制作流程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，分取各次上清液，过滤，合并滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入与中药材同等份的蔗糖，搅拌混匀，再蒸发浓缩至稠膏状，在50~60℃条件下继续浓缩成干膏，粉碎，即得百草莲子汤可溶性粉。
5.根据权利要求1或2所述的用于防治畜禽呼吸道综合征药物，其特征在于：其口服液制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，分取各次上清液，滤过，合并滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入中药材三倍量矫味剂和防腐剂，其中矫味剂和防腐剂是蔗糖、苯甲酸、尼泊金复合酯、乙醇中的一种或几种，即得百草莲子汤口服液。
6.根据权利要求1或2所述的用于防治畜禽呼吸道综合征药物，其特征在于：其颗粒剂制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮3次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，虑取滤液，蒸发回收乙醇，继续浓缩至稠膏状，加入中药材三倍量赋型剂，其中赋型剂是糊精、乳糖、蔗糖中的一种或几种，混合均匀，再加60%乙醇，制粒、烘干，整粒，即得百草莲子汤颗粒剂。
7.根据权利要求1或2所述的用于防治畜禽呼吸道综合征药物，其特征在于：其气雾剂制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮2次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩滤液至每毫升滤液相当于1克药材，加1倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，将上述药液分装入特制的药瓶中，加上阀门拧紧密封后，于12kg/cm2的压力下，向药瓶中灌入一半于药液质量的抛射剂氟利昂，即得百草莲子汤气雾剂。
8.根据权利要求1或2所述的用于防治畜禽呼吸道综合征药物，其特征在于：其注射剂制备过程：将白前、百部、甘草、鱼腥草、穿心莲、诃子适当粉碎，混匀，然后向上述混合物中加水，煎煮2次，每次为半小时至一小时，过滤，合并两次滤液，蒸发浓缩至稠膏状，加2~3倍容量的95%乙醇，充分搅拌混合均匀，冷藏静置12~14小时，滤取滤液，蒸发回收乙醇，加入氯化钠和注射用水至每毫升药液相当于1克药材并且药液渗透压和生理盐水的渗透压相等，过滤，灌封，灭菌，即得百草莲子汤注射剂。
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