CN105360028A - 东方高原鳅的人工繁殖技术 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及水产养殖领域，公开了东方高原鳅的人工繁殖技术。包括以下步骤：⑴亲本选择：选择色泽正常、肥满度适中、性腺发育良好的东方高原鳅成熟个体作为亲本；⑵催产药物及催产剂量选择：催产药物选择绒毛膜促性腺激素(HCG),促黄体素释放素类似物A2(LHRH-A2)和马来地欧酮(DOM)，雌鱼催产剂量为HCG？2000～2500IU/kg，LHRH-A225～30μg/kg，DOM？6～8mg/kg，雄鱼剂量减半；⑶人工催产：在水温15～17℃条件下，雌鱼注射药物6～10h后，再给雄鱼注射；⑷人工授精：雌鱼注射药物42～60h后进行人工授精；⑸孵化：在水温15～19℃条件下，孵化时间为62～80h。

Description

东方高原鳅的人工繁殖技术
技术领域
本发明涉及水产养殖技术领域，具体涉及一种东方高原鳅的人工繁殖技术。
背景技术
东方高原鳅Triplophysaorientalis(Herzenstein)，地方名麻鱼，属鲤形目、鳅科、条鳅亚科、高原鳅属，主要分布在西藏的拉萨河、怒江上游、青海、甘肃和四川西部的长江、黄河干流及其附属水体，青海柴达木盆地和甘肃河西走廊的自流水体等水系。东方高原鳅在西藏高原鳅属中，属于个体较大的，体长56.5-142㎜，具有一定的经济价值，且体表具漂亮花纹，具有较好的观赏性；包括东方高原鳅在内的高原鳅是西藏雅鲁藏布江水域重要的土著鱼类，在西藏高寒脆弱的生态系统中占据重要地位。
近年来随着经济的发展，人们对雅鲁藏布江的开发力度逐渐加大，由于生活污水、采矿与工业污染、水利工程建设等一系列人类活动的加剧，加之藏族同胞传统的“放生”习俗，从而加剧了雅鲁藏布江中渔业资源的过度捕捞及外来种入侵问题，导致东方高原鳅等土著鱼类的种群数量急剧下降。由于高原地区水温很低，东方高原鳅生长缓慢、性成熟晚，其种群一旦受到破坏，将很难恢复，因而对东方高原鳅的保护显得尤为重要和紧迫。开展东方高原鳅的人工繁殖工作，以恢复和补充其群体数量，具有重要意义。
现有技术中，鲜有对高原鳅人工繁殖技术的报道，仅有陈生熬等对一种叶尔羌高原鳅的人工繁殖方法(陈生熬，姚娜，宋勇等。一种叶尔羌高原鳅的人工繁殖方法。中国专利。CN104430085。2014-10-24)、陈修松等对西昌高原鳅人工繁殖(陈修松，陈娇，邓思红等。西昌高原鳅人工繁殖及苗种培育研究。动物科学，2015，3：287-294)进行了初步报道。有关东方高原鳅的研究工作，主要集中在分类及资源调查的问题上(何德奎，陈咏霞，陈毅峰。高原鳅属Triplophysa鱼类的分子系统发育和生物地理学研究。自然科学进展，2006，16：1395-1404)，目前还没有对东方高原鳅人工繁殖技术的相关报道。
发明内容
本发明主要包括东方高原鳅的人工繁殖技术流程，该技术主要解决的技术问题是，提供一种受精率高、孵化率高的东方高原鳅的人工繁殖技术，为东方高原鳅种群恢复提供基础支撑。
本发明是这样实现的：
⑴亲本选择
选择色泽正常、肥满度适中、性腺发育良好的东方高原鳅成熟个体作为亲本；优选体长12cm、体重13g以上，腹部柔软弹性好，生殖孔红肿的雌性个体；优选体长10cm、体重11g以上，吻部和胸鳍第二性征明显、肉垫厚且有刺突的雄性个体；雌雄比例为2:1；用10mg/L高锰酸钾进行10分钟亲本消毒，然后将东方高原鳅亲本雌雄分别暂养在有微流水的0.6×0.6×0.5m暂养池备用。
⑵催产药物及其剂量选择
催产药物选择绒毛膜促性腺激素(HCG),促黄体素释放素类似物A2(LHRH-A2)和马来地欧酮(DOM)，雌鱼催产剂量为HCG2000～2500IU/kg，LHRH-A225～30μg/kg，DOM6～8mg/kg，雄鱼剂量减半。
⑶人工催产
a.使用医用注射器吸入⑵所配置好的注射药物，注射之前将注射器的针头套剪去部分后再重新套上，使得针头露出0.5cm左右便于注射；
b.将雌鱼捞出，拨开胸鳍，采用胸鳍基部一针注射，注射角度与鱼体呈45°角左右，入针0.5cm左右，每尾注射0.2ml，注射完成后立即放入网箱内，减少因操作引起的应激反应，保持水流0.2m/s刺激，并控制水温为15-17℃；
c.雌鱼注射药物6～10h后，再给雄鱼注射，雄鱼剂量减半，每尾注射0.1ml，注射完成后立即放入网箱内，减少因操作引起的应激反应,，保持水流0.2m/s刺激，并控制水温为15-17℃(雌雄催产注射间隔时间取决于水温，见表1)。
⑷人工授精
a.雌鱼注射药物42h到60h后，将雌鱼捞出检查，轻轻挤压腹部有卵从泄殖孔中顺利流出即可挤卵；以干毛巾吸干体表多余水份，将成熟的卵挤入干燥的铁盆中；
b.获取雄鱼精子，剖杀雄鱼将其精巢取出，放到滤纸上吸干水分，之后放入研钵中研磨，用0.8％(质量体积比)的生理盐水将研磨好的精巢冲入盛有卵子的铁盆中(生理盐水的剂量为卵子体积的10～20倍)，并轻轻用手迅速搅拌20～30s，获得受精卵。
⑸人工孵化
a.铺卵网片的制备：先用铁丝制成一个0.3×0.4m的矩形铁框，再将80目的网布固定到铁框上，要求网布紧绷平整，便于铺卵；
b.然后将⑷受精后的受精卵平铺在制作好的铺卵网片上，铺卵密度为1500-2000粒/框；将铺好的网片直接悬挂在有进出水口0.6×0.6×1m的流水池中，且流水池的排水口用80目的网布封住，水深0.6m，控制水温为15-19℃，水流0.2m/s刺激，避免阳光直射，经过62-80h后，孵化出苗(受精卵孵化时间与水温的关系，见表2)。
表1水温与东方高原鳅雌雄催产注射间隔时间的关系
表2水温与东方高原鳅孵化时间的关系
通过以上技术的实施，东方高原鳅催产率达70～75％，受精率85～90％，孵化率75～80％。
具体实施方式
以下结合实例具体阐述本发明的技术手段。
实施例1
实验方法
从雅鲁藏布江捕获东方高原鳅亲本，运送到林芝的西藏农牧学院水产基地，用10mg/L高锰酸钾消毒10分钟。
挑选雌性个体较大，腹部柔软弹性好，生殖孔红肿，体长12cm、体重13g以上的个体20尾；挑选雄性个体较大，吻部和胸鳍第二性征明显、肉垫厚且有刺突，，体长10cm、体重11g以上的个体10尾，分别暂养在0.6×0.5×0.6m的网箱内。
选择绒毛膜促性腺激素(HCG),促黄体素释放素类似物A2(LHRH-A2)和马来地欧酮(DOM)，雌鱼催产剂量为HCG2000IU/kg，LHRH-A225μg/kg，DOM6mg/kg，雄鱼剂量减半。
开始人工催产，注射之前将注射器的针头套剪去部分后再重新套上，使得针头露出0.5cm左右便于注射。
将雌鱼捞出，拨开胸鳍，采用胸鳍基部一针注射，注射角度与鱼体呈45°角左右，入针0.5cm左右，每尾注射0.2ml,注射完成的亲本立即放入网箱内，减少因操作引起的应激反应,水流0.2m/s刺激，并控制水温为15℃。
雌鱼注射药物10h后,再给雄鱼注射，每尾注射0.1ml，将注射完成的亲本立即放入网箱内，减少因操作引起的应激反应,水流0.2m/s刺激，并控制水温为15℃。
雌鱼注射药物60h后，将雌鱼捞出检查，轻轻挤压腹部有卵从泄殖孔中顺利流出即可挤卵；以干毛巾吸干体表多余水份，将成熟的卵挤入干燥的铁盆中。
获取雄鱼精子，剖杀雄鱼将其精巢取出，放到滤纸上吸干水分，之后放入研钵中研磨，用0.8％(质量体积比)的生理盐水将研磨好的精巢冲入盛有卵子的铁盆中(生理盐水的剂量为卵子体积的10～20倍)，并轻轻用手迅速搅拌20～30s，获得受精卵。
铺卵网片的制备：先用铁丝制成一个0.3×0.4m的矩形铁框，再将80目的网布固定到铁框上，要求网布紧绷平整，便于铺卵；
然后将受精后的受精卵平铺在制作好的网片上，铺卵密度为1500粒/框；将铺好的网片直接悬挂在有进出水口0.6×0.6×1m的流水池中，且流水池的排水口用80目的网布封住，水深0.6m，控制水温为15℃，水流0.2m/s刺激，避免阳光直射，经过62h后，孵化出苗。
实验结果
本实施实例1东方高原鳅催产率70％，受精率90％，孵化率75％。
实施例2
实验方法
从雅鲁藏布江捕获东方高原鳅亲本，运送到林芝的西藏农牧学院水产基地，用10mg/L高锰酸钾消毒10分钟。
挑选雌性个体较大，腹部柔软弹性好，生殖孔红肿，体长12cm、体重13g以上的个体20尾；挑选雄性个体较大，吻部和胸鳍第二性征明显、肉垫厚且有刺突，体长10cm、体重11g以上的个体10尾，分别暂养在0.6×0.5×0.6m的网箱内。
催产药物选择绒毛膜促性腺激素(HCG),促黄体素释放素类似物A2(LHRH-A2)和马来地欧酮(DOM)，雌鱼催产剂量为HCG2500IU/kg，LHRH-A230μg/kg，DOM8mg/kg，雄鱼剂量减半。
开始人工催产，注射之前将注射器的针头套剪去部分后再重新套上，使得针头露出0.5cm左右便于注射。
将雌鱼捞出，拨开胸鳍，采用胸鳍基部一针注射，注射角度与鱼体呈45°角左右，入针0.5cm左右，每尾注射0.2ml,注射完成的亲本立即放入网箱内，减少因操作引起的应激反应,水流0.2m/s刺激，并控制水温为17℃。
雌鱼注射药物6h后,再给雄鱼注射，每尾注射0.1ml，注射完成的亲本立即放入网箱内，减少因操作引起的应激反应,水流0.2m/s刺激，并控制水温为17℃。
雌鱼注射药物42h后，将雌鱼捞出检查，轻轻挤压腹部有卵从泄殖孔中顺利流出即可挤卵；以干毛巾吸干体表多余水份，将成熟的卵挤入干燥的铁盆中。
获取雄鱼精子，剖杀雄鱼将其精巢取出，放到滤纸上吸干水分，之后放入研钵中研磨，用0.8％(质量体积比)的生理盐水将研磨好的精巢冲入盛有卵子的铁盆中(生理盐水的剂量为卵子体积的10～20倍)，并轻轻用手迅速搅拌20～30s，获得受精卵。
铺卵网片的制备：先用钢丝制成一个0.3×0.4m的矩形铁框，再将80目的网布固定到铁框上，要求网布紧绷平整，便于铺卵。
然后将受精后的受精卵平铺在制作好的网片上，铺卵密度为2000粒/框；将铺好的网片直接悬挂在有进出水口0.6×0.6×1m的流水池中，且流水池的排水口用80目的网布封住，水深0.6m，控制水温为19℃,，水流0.2m/s刺激，避免阳光直射，经过80h后，孵化出苗。
实验结果
本实施实例2东方高原鳅催产率75％，受精率85％，孵化率80％。

Claims (3)

1.东方高原鳅的人工繁殖技术，其特征在于,该技术包括以下步骤：
⑴亲本选择：选择色泽正常、肥满度适中、性腺发育良好的东方高原鳅成熟个体作为亲本；优选体长12cm、体重13g以上，腹部柔软弹性好，生殖孔红肿的雌性个体；优选体长10cm、体重11g以上，吻部和胸鳍第二性征明显、肉垫厚且有刺突的雄性个体；雌雄比例为2:1；用10mg/L高锰酸钾进行10分钟亲本消毒，然后将东方高原鳅亲本雌雄分别暂养在有微流水的0.6×0.6×0.5m暂养池备用；
⑵催产药物及其剂量选择：催产药物选择绒毛膜促性腺激素(HCG),促黄体素释放素类似物A2(LHRH-A2)和马来地欧酮(DOM)，雌性催产剂量为HCG2000～2500IU/kg，LHRH-A225～30μg/kg，DOM6～8mg/kg，雄鱼剂量减半；
⑶人工催产：
a.使用医用注射器吸入⑵所配置好的注射药物，注射之前将注射器的针头套剪去部分后再重新套上，使得针头露出0.5cm左右便于注射；
b.将雌鱼捞出，拨开胸鳍，采用胸鳍基部一针注射，注射角度与鱼体呈45°角左右，入针0.5cm左右，每尾注射0.2ml药液，注射完成后立即放入网箱内，减少因操作引起的应激反应，保持水流0.2m/s刺激，并控制水温为15-17℃；
c.雌鱼注射药物6～10h后，再给雄性亲本注射，注射剂量减半，每尾注射0.1ml，注射完成后立即放入网箱内，减少因操作引起的应激反应，保持水流0.2m/s刺激，并控制水温为15-17℃；
⑷人工授精：
a.雌鱼注射药物42h到60h后，将雌鱼捞出检查，轻轻挤压腹部有卵从泄殖孔中顺利流出即可挤卵；以干毛巾吸干体表多余水份，将成熟的卵挤入干燥的铁盆中；
b.获取雄鱼精子，剖杀雄鱼将其精巢取出，放到滤纸上吸干水分，之后放入研钵中研磨，用0.8％(质量体积比)的生理盐水将研磨好的精巢冲入盛有卵子的铁盆中(生理盐水的剂量为卵子体积的10～20倍)，并轻轻用手迅速搅拌20～30s，获得受精卵；
⑸人工孵化：
a.铺卵网片的制备：先用铁丝制成一个0.3×0.4m的矩形铁框，再将80目的网布固定到铁框上，要求网布紧绷平整，便于铺卵；
b.然后将⑷受精后的受精卵平铺在制作好的铺卵网片上，铺卵密度为1500-2000粒/框；将铺好的网片直接悬挂在有进出水口0.6×0.6×1m的流水池中，且流水池的排水口用80目的网布封住，水深0.6m，控制水温为15-19℃，水流0.2m/s刺激，避免阳光直射，经过62-80h后，孵化出苗。
2.根据权利要求1所述东方高原鳅的人工繁殖技术，其特征在于：催产剂为鱼用催产剂，选择绒毛膜促性腺激素(HCG),促黄体素释放素类似物A2(LHRH-A2)和马来地欧酮(DOM)，雌鱼催产剂量为HCG2000～2500IU/kg，LHRH-A225～30μg/kg，DOM6～8mg/kg，雄鱼剂量减半。
3.根据权利要求1所述东方高原鳅的人工繁殖技术，其特征在于：雌鱼注射6～10h后再给雄鱼注射，以达到雌雄排卵排精同步。
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