CN103141431B - 一种诱导非洲爪蟾自然产卵及孵化的人工方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种诱导非洲爪蟾自然产卵及孵化的人工方法，本发明选择性成熟且3个月没有产卵的雌性非洲爪蟾和性成熟且3个月没有排精的雄性非洲爪蟾，对雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾进行皮下注射激素，按照两雄一雌法或三雄二雌或四雄二雌法放入产卵池中，雌性非洲爪蟾产卵后，把受精卵取出放到孵化箱中孵化，孵化24～72h小时受精卵即变成小蝌蚪。本发明方法促进了非洲爪蟾的自然产卵，操作简单，方便推广，成本低，技术难度低，本发明弥补了非洲爪蟾快速产卵在国内的空白，能为大量饲养提供充足的蝌蚪，适用于科研院所试验及非洲爪蟾商业养殖。
Description
技术领域
本发明涉及一种诱导非洲爪蟾自然产卵及孵化的人工方法。
背景技术
非洲爪蟾（Xenopus laevis）是科研领域应用很广泛的一种两栖类动物。目前在我国还没有规模饲养，科研试验需从国外进口，没有大量饲养等主要原因是产卵孵化较困难，在自然条件下每年抱对产卵一次，很难及时提供蝌蚪。目前在一些科研院所采用人工受精的方法：就是给雌蛙注射一定量的激素，使雌蛙排除卵，把雄蛙解剖，取出雄蛙的睾丸，在特定的营养液中进行人工受精。这种方法既浪费资源,技术难度大复杂，而且造价还很高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种诱导非洲爪蟾自然产卵及孵化的人工方法，本发明方法促进了非洲爪蟾的自然产卵，操作简单，方便推广，成本低，技术难度低，本发明弥补了非洲爪蟾快速产卵在国内的空白，能为大量饲养提供充足的蝌蚪，适用于科研院所试验及非洲爪蟾商业养殖。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种诱导非洲爪蟾自然产卵及孵化的人工方法，包括：
1）选择性成熟且3个月没有产卵的雌性非洲爪蟾和性成熟且3个月没有排精的雄性非洲爪蟾，对雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾进行皮下注射激素，注射部位在雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾的腿部与背部的交界处；
2）将步骤1）处理后的雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾按照两雄一雌法或三雄二雌法或四雄二雌法放入产卵池中，池水深为10cm～15cm，产卵池底设置一个过滤装置，如雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾抱对后，则把没有抱对的雄性非洲爪蟾捞出；
3）雌性非洲爪蟾产卵后，把受精卵取出放到孵化箱中，孵化24～72小时，受精卵即变成小蝌蚪。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
进一步，步骤1）中所述激素为注射用促黄体素释放激素A3，所述雌性非洲爪蟾的注射剂量按每千克体重注射：10～15μg，所述雄性非洲爪蟾的注射剂量按每千克体重注射：8～12μg；
进一步，步骤2）中所述产卵池的水温为22～18℃，所述产卵池处于避光安静的环境下；
进一步，步骤3）中所述孵化温度为20～22℃；
本发明的有益效果是：
本发明方法操作简单，方便推广，成本低，技术难度低，本发明弥补了非洲爪蟾快速产卵在国内的空白，能为大量饲养提供充足的蝌蚪，本发明蝌蚪的正常孵化率达到95%以上。
在正常情况下，非洲爪蟾每年只在3、4月份进行抱对产卵，一年只产一次。而本发明方法能让非洲爪蟾随时抱对产卵，方便快捷。每只雌性非洲爪蟾产卵后经过2～3个月的恢复，即可继续产卵，每年可产卵4次，雄性非洲爪蟾恢复2个月左右，即可进行排精。
本实发明采用的抱对方法一般采用2雄1雌或3雄2雌或4雄2雌，目的是为了增加雄性非洲爪蟾抱对几率，通过竞争使得非洲爪蟾抱对率增高（一雌一雄的抱对率低）。
过滤装置：产卵池中的过滤装置是为了防止受精卵被爪蟾吃掉；
性成熟的雌性非洲爪蟾的选择标准：雌性非洲爪蟾个体肥壮，腹部鼓起，肛门明显发红，向外凸出；
性成熟的雄性非洲爪蟾的选择标准：雄性非洲爪蟾前爪掌心发黑，前肢内侧触感粗糙。
具体实施方式
以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例1
本发明实验室在2012年1月～12月期间共做了4次重复性非洲爪蟾试验，每次实验分成3组，每两次实验间隔时间为3个月。
第1次实验
选择性成熟且3个月没有产卵的雌性非洲爪蟾和性成熟且3个月没有排精的雄性非洲爪蟾，分成2雄1雌组、3雄2雌组、4雄2雌组，对雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾进行皮下注射注射用促黄体素释放激素A3（苏州市苏牧药业有限公司），注射部位在雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾的腿部与背部的交界处，注意不要注射到肌肉里，引起爪蟾的剧烈反应，注射用促黄体素释放激素A3的规格为25μg，用2ml医用灭菌注射用水溶解。
将处理后的雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾按照2雄1雌组、3雄2雌组、4雄2雌组放入产卵池中，池水深为10cm，产卵池底设置一个过滤装置，如雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾抱对后，则把没有抱对的雄性非洲爪蟾捞出，产卵池的水温为20℃，所述产卵池处于避光安静的环境下；
雌性非洲爪蟾产卵后，把受精卵取出放到孵化箱中，孵化温度为22℃，孵化24～72小时，受精卵即变成小蝌蚪。将小蝌蚪放到饲养缸中饲养，溶氧大于5.8mg/L，水温22～24℃，每两日喂一次饲料，每周换一次水。
第2次实验
第1次实验后，2雄1雌组、3雄2雌组、4雄2雌组的雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾经过三个月的恢复，还按照第1次分组的情况重复第1次实验。
第3次实验
第2次实验后，2雄1雌组、3雄2雌组、4雄2雌组的雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾经过三个月的恢复，还按照第1次分组的情况再次重复第1次实验。
第4次实验
第3次实验后，2雄1雌组、3雄2雌组、4雄2雌组的雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾经过三个月的恢复，还按照第1次分组的情况再次重复第1次实验。
表112次实验结果
从表1可见，无论采用2雄1雌法、3雄2雌法或4雄2雌法，均能顺利抱对产卵受精，每只雌蛙产卵量大约有1000粒左右，这些受精卵通过本方法人工孵化，孵化率大于95%，每次抱对后雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾经过3个月的恢复，即可继续产卵、排精，每年能产卵4次，本发明方法能使雌性非洲爪蟾产卵量是现在的四倍，孵化出的蝌蚪数也随之增加，说明本发明方法可支持非洲爪蟾周年快速产卵。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种诱导非洲爪蟾自然产卵及孵化的人工方法，其特征在于，包括：
1)选择性成熟且3个月没有产卵的雌性非洲爪蟾和性成熟且3个月没有排精的雄性非洲爪蟾，对雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾进行皮下注射激素，注射部位在雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾的腿部与背部的交界处；
2)将步骤1)处理后的雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾按照两雄一雌法或三雄二雌法或四雄二雌法放入产卵池中，池水深为10cm～15cm，产卵池底设置一个过滤装置，如雌性非洲爪蟾和雄性非洲爪蟾抱对后，则把没有抱对的雄性非洲爪蟾捞出；
3)雌性非洲爪蟾产卵后，把受精卵取出放到孵化箱中，孵化24～72小时，受精卵即变成小蝌蚪；
其中，所述激素为注射用促黄体素释放激素A3，所述雌性非洲爪蟾的注射剂量按每千克体重注射：10～15μg，所述雄性非洲爪蟾的注射剂量按每千克体重注射：8～12μg。
2.根据权利要求1的人工方法，其特征在于，步骤2)中所述产卵池的水温为22～18℃，所述产卵池处于避光安静的环境下。
3.根据权利要求1的人工方法，其特征在于，步骤3)中所述孵化温度为20～22℃。
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