CN105349602A - 一种以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,以猪血离心所得血球液为原料,依次经过加入蒸馏水稀释溶血,沸水变性,蛋白酶酶解、灭酶、板框压滤,取滤液经过膜浓缩、真空浓缩、喷雾干燥得猪血蛋白胨。按照本发明所得蛋白胨产品得率在80%以上,生产所需原料廉价易得,工艺较为简单,营养价值高,总氮含量14.5%以上,氨基氮含量在3%以上,可作为发酵工业、食品及其他轻工业的原料,提高了猪血的附加值,同时消除由于猪血向环境排放所带来的污染。
Description
技术领域
本发明涉及蛋白胨的制备方法,具体涉及一种以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法。
背景技术
目前国内猪血资源非常丰富,但有效利用率并不高,多数用来制作血豆腐、喷雾干燥为血球血浆蛋白粉,更多的被排放入周围环境中,产生极大污染。因此,猪血的有效利用仍亟待开发。现有技术中,还没有公开以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法。
目前制备蛋白胨的原料主要为动植物蛋白及其下脚料如肉、骨头、鱼皮、酪,大豆等为原料经酶解技术制备所得,相对于其他动植物原料,猪血球原料价格低廉、预处理步骤较简单,所采用的酶制剂组合使原料利用率高,产品收率高;反应条件温和,具有生产工艺简单、周期短,产品品质高、收率高,成本低廉的优点,有望成为一种新型理想的蛋白胨原料。另外目前采用猪血球生产的水解血红蛋白产品为了去除血红素保证产品色泽和质量,均需在灭酶后调节pH值至5以下,为了保证后期产品溶水pH达标还需加碱调节pH至中性,从而使灰分增加且步骤较为繁琐。
发明内容
本发明的目的在于:提供一种以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,不仅提高了猪血这种廉价原料的利用率,节约资源,降低生产成本;同时也为蛋白胨的生产提供了一种新的原料来源和制备方法。
为了实现上述发明目的,本发明提供如下技术方案:
一种以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,包括如下步骤:以猪血离心所得血球液为原料,依次经过加入蒸馏水稀释溶血,沸水变性,蛋白酶酶解、灭酶、板框压滤,取滤液经过膜浓缩、真空浓缩、喷雾干燥得猪血蛋白胨。
优选地,所述的以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,具体步骤如下:
1)血球预处理
取管式离心机离心所得血球液,先加入1-1.5倍体积的蒸馏水,搅拌溶血2-10h;然后再加入1-1.5倍体积的沸水搅拌溶血30-60min;
2)酶解
预处理后的血球稀释液测定pH值在6.8-8.0之间,直接加热至50-55℃,然后依次加入碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶进行酶解反应;
3)灭酶
酶解完成后,将酶解液加热至80-90℃,保温处理20-30min,灭活蛋白酶;
4)板框压滤
经灭酶后酶解液在50-65℃直接压滤,得到滤渣和滤液;
5)膜浓缩
压滤所得滤液用超滤和纳滤系统截留未酶解蛋白及大分子量肽类,同时脱除部分灰分及水分,脱水0.8-1.2倍。
6)真空浓缩
取上步所得浓缩液采用三效真空浓缩设备进一步浓缩脱水,脱水0.8-1.2倍;
7)喷雾干燥
上述真空浓缩所得浓缩液喷雾干燥后即得到猪血蛋白胨。
优选地,步骤2)中酶解的具体过程如下:预处理后的血球稀释液测定pH值在6.8-8.0之间,直接加热至50-55℃,按照占原血球液质量分数为1-2%的比例加入2709碱性蛋白酶,酶解2-8h,然后按照占原血球液质量分数为1-2%的比例加入1398中性蛋白酶酶解2-4h,最后按照占原血球液质量分数为0.5-1%的比例加入复合蛋白酶,反应1-2h。
本发明的有益效果在于:本发明采用猪血为原料,降低了生产成本,提高了猪血的利用率,消除了猪血向环境排放所带来的污染;同时,按照本发明的方法制备所得的蛋白胨为淡黄色或乳白色粉末,无苦涩味、无血腥味,溶解性极佳,溶水颜色清澈透明,总氮含量在14.5%以上,氨基氮含量≥3%,是优质的蛋白胨产品原料,同时,本发明所得蛋白胨产品得率在80%以上。
另外,本发明采用在酶解后特定温度范围内热压滤技术可大大提高蛋白肽的得率,同时所得肽类多数以非血红素螯合肽的形式存在,成品色泽为理想的淡黄色或黄色。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
具体实施方式
实施实例1:
一种以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,具体步骤如下:
1)血球预处理
取管式离心机离心所得血球液1020kg,先加入1000kg蒸馏水,搅拌溶血5h;然后再加入1000kg沸水搅拌溶血60min;
2)酶解
预处理后的血球稀释液测定pH7.25,直接加热至55℃,按照占原血球液质量分数为2%的比例加入2709碱性蛋白酶,酶解6h,然后按照占原血球液质量分数为1%的比例加入1398中性蛋白酶酶解2h,接着按照占原血球液质量分数为0.5%的复合蛋白酶反应2h;
3)灭酶
酶解完成后,将酶解液加热至85℃,保温处理30min,灭活蛋白酶;
4)板框压滤
经灭酶后酶解液在56℃热压滤,得到滤液和滤渣。
5)膜浓缩
压滤所得滤液用超滤和纳滤系统截留未酶解蛋白及大分子量肽类,同时脱除部分灰分及水分,脱水0.89倍。
6)真空浓缩
膜浓缩所得浓缩液采用三效真空浓缩进一步脱去部水分,使其固含量达39%;
7)喷雾干燥
上述浓缩所得浓缩液经喷雾干燥后即得到猪血蛋白胨。
实施实例2:
一种以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,具体步骤如下:
1)血球预处理
取管式离心机离心所得血球液1000kg,先加1025kg蒸馏水,搅拌溶血10h;然后再加入1000kg沸水搅拌溶血30min;
2)酶解
预处理后的血球稀释液测定pH在7.05,直接加热至53℃,按照占原血球液质量分数为1.5%的比例加入2709碱性蛋白酶,酶解6h,然后按照占原血球液质量分数为1.5%的比例加入1398中性蛋白酶酶解3h,接着按照占原血球液质量分数为0.5%的比例加入复合蛋白酶反应2h;
3)灭酶
酶解完成后,将酶解液加热至88℃,保温处理20min,灭活蛋白酶;
4)板框压滤
灭酶后的酶解液在60℃热压滤,得到滤液和滤渣。
5)膜浓缩
压滤所得滤液用超滤和纳滤系统截留未酶解蛋白及大分子量肽类,同时脱除部分灰分及水分,脱水1.09倍。
6)真空浓缩
膜浓缩所得浓缩液采用三效真空浓缩进一步脱去部水分,使其固含量达40%;
7)喷雾干燥
上述真空浓缩所得浓缩液经喷雾干燥后即得到猪血蛋白胨。
实施实例3:
一种以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,具体步骤如下:
1)血球预处理
取管式离心机离心所得血球液1050kg,先加入1000kg蒸馏水,搅拌溶血9h;然后加入1020kg沸水搅拌溶血40min;
2)酶解
预处理后的血球稀释液测定pH在7.45,加热至54℃,按照占原血球液质量分数为2%的比例加入2709碱性蛋白酶,酶解5h,然后按照占原血球液质量分数为1.5%的比例加入1398中性蛋白酶酶解3h,接着占原血球液质量分数为0.8%的比例加入复合蛋白酶反应2h;
3)灭酶
酶解完成后,将酶解液加热至85℃,保温处理20min,灭活蛋白酶;
4)板框压滤
灭酶后的酶解液在57℃热压滤,得到滤液和滤渣。
5)膜浓缩
压滤所得滤液用超滤和纳滤系统截留未酶解蛋白及大分子量肽类,同时脱除部分灰分及水分,脱水1.15倍。
6)真空浓缩
膜浓缩所得浓缩液采用三效真空浓缩进一步脱去部水分,使其固含量达42%;
7)喷雾干燥
上述真空浓缩所得浓缩液经喷雾干燥后即得到猪血蛋白胨。
本发明的一个关键点在于所选酶制剂为碱性、中性和复合酶的优化组合,底物分解率达90%以上,原料利用率显著提高。
本发明的另一个关键点在于采用50-65℃温度段内的热压滤,经本项目组研究发现,在灭酶后保持酶解液温度为50-65℃,血红素与蛋白肽呈疏松易分离状态,此时热压滤,可使蛋白肽和血红素的充分分离,从而使所得蛋白胨产品呈较好的淡黄色,防止血红素残留过多造成的后期蛋白胨使用时微量元素铁离子超标。若降温至50℃以下进行压滤,由于肽类与血红素的结合状态发生变化,酶解液的pH测定值比在50-65℃时高约3个点,需额外盐酸调节至4以下才能保证血红素与蛋白肽分离较为完全,使产品色泽符合标准。但此操作会造成所得产品溶水pH较低,需在纳滤前添加NaOH调节料液pH,增加了工艺步骤,操作较为繁琐,也增加了膜浓缩工段脱盐的难度。
Claims (3)
1.一种以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,其特征在于,包括如下步骤:以猪血离心所得血球液为原料,依次经过加入蒸馏水稀释溶血,沸水变性,蛋白酶酶解、灭酶、板框压滤,取滤液经过膜浓缩、真空浓缩、喷雾干燥得猪血蛋白胨。
2.根据权利要求1所述的以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,其特征在于,具体步骤如下:
1)血球预处理
取管式离心机离心所得血球液,先加入1-1.5倍体积的蒸馏水,搅拌溶血2-10h;然后再加入1-1.5倍体积的沸水搅拌溶血30-60min;
2)酶解
预处理后的血球稀释液测定pH值在6.8-8.0之间,直接加热至50-55℃,然后依次加入碱性蛋白酶、中性蛋白酶、复合蛋白酶进行酶解反应;
3)灭酶
酶解完成后,将酶解液加热至80-90℃,保温处理20-30min,灭活蛋白酶;
4)板框压滤
经灭酶后酶解液在50-65℃直接压滤,得到滤渣和滤液;
5)膜浓缩
压滤所得滤液用超滤和纳滤系统截留未酶解蛋白及大分子量肽类,同时脱除部分灰分及水分,脱水0.8-1.2倍。
6)真空浓缩
取上步所得浓缩液采用三效真空浓缩设备进一步浓缩脱水,脱水0.8-1.2倍;
7)喷雾干燥
上述真空浓缩所得浓缩液喷雾干燥后即得到猪血蛋白胨。
3.根据权利要求2所述的以猪血球为原料制备生化试剂蛋白胨的方法,其特征在于,步骤2)中酶解的具体过程如下:预处理后的血球稀释液测定pH值在6.8-8.0之间,直接加热至50-55℃,按照占原血球液质量分数为1-2%的比例加入2709碱性蛋白酶,酶解2-8h,然后按照占原血球液质量分数为1-2%的比例加入1398中性蛋白酶酶解2-4h,最后按照占原血球液质量分数为0.5-1%的比例加入复合蛋白酶,反应1-2h。
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CN104498574A (zh) * | 2014-12-11 | 2015-04-08 | 重庆都好生物科技有限公司 | 一种猪血球蛋白胨的制备方法 |
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