CN105348346A - 5’-胞苷酸的精制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于产品精制技术领域，具体涉及一种5’-胞苷酸的精制方法。将5’-胞苷酸粗品配制成质量浓度1-3％、pH2.0-3.5的水溶液；将5’-胞苷酸粗品溶液先经过阳离子交换树脂柱处理，再经过阴离子交换树脂柱处理；用混合洗脱液洗脱，收集洗脱料液，洗脱料液浓度在70-80g/L；调节洗脱料液的pH值到2.5-3.0后，用有机溶剂进行结晶，过滤，漂洗，烘干，即得。本发明5’-胞苷酸溶液无需浓缩，产品纯度高、收率高。
Description
技术领域
本发明属于产品精制技术领域，具体涉及一种5’-胞苷酸的精制方法。
背景技术
5’-胞苷酸粗品中，除含有部分同分异构体、胞苷及其它有机成分外，尚含有较多的磷酸盐及氯化钠等盐类。这些盐类在重结晶过程中会与产品5’-胞苷酸一起结晶沉淀析出，所以用传统的重结晶工艺很难将它们从产品中彻底去除。5’-胞苷酸粗品中的有机杂质也很难用重结晶的方法分离完全，所以利用传统重结晶方法获得的5’-胞苷酸产品液相色谱含量较低，一般在98％以下，且产品收率也较低。
发明内容
本发明的目的是提供一种5’-胞苷酸的精制方法，科学合理、简单易行，精制后的产品纯度高、收率高。
本发明所述的5’-胞苷酸的精制方法，步骤如下：
(1)将5’-胞苷酸粗品配制成质量浓度1-3％、pH2.0-3.5的水溶液；
(2)将5’-胞苷酸粗品溶液先经过阳离子交换树脂柱处理，再经过阴离子交换树脂柱处理；用混合洗脱液洗脱，收集洗脱料液，洗脱料液浓度在70-80g/L；
(3)调节洗脱料液的pH值到2.5-3.0后，用有机溶剂进行结晶，过滤，漂洗，烘干，即得。
步骤(2)中所述的混合洗脱液为质量浓度30-35％盐酸和0.1-1.0mol/L氯化钠的混合液，质量浓度30-35％盐酸和0.1-1.0mol/L氯化钠的体积比为1:80-100。
步骤(2)中所述的阳离子交换树脂柱中装填001×7阳离子交换树脂。
所述的5’-胞苷酸粗品质量与阳离子交换树脂体积的配比为1:10-20，5’-胞苷酸粗品质量以g计，阳离子交换树脂体积以ml计。
步骤(2)中所述的阴离子交换树脂柱中装填201×8阴离子交换树脂。
所述的5’-胞苷酸粗品质量与阴离子交换树脂体积的配比为1:10-20，5’-胞苷酸粗品质量以g计，阴离子交换树脂体积以ml计。
步骤(2)中所述的阳离子交换树脂柱处理的时间为5-10h。
步骤(2)中所述的阴离子交换树脂柱处理的时间为10-15h。
步骤(3)中所述的有机溶剂为辛醇、庚醇、己醇、丁醇、丙醇、乙醇或甲醇中的一种，优选乙醇。
步骤(3)中所述的洗脱料液与有机溶剂的体积比为1∶1.2-1.5。
本发明所述的5’-胞苷酸的精制方法，具体步骤如下：
(1)首先将5’-胞苷酸粗品配制成质量浓度1-3％、用盐酸调节pH2.0-3.5的水溶液；
(2)将溶液通过阳离子交换树脂柱；
(3)用纯水冲洗阳离子交换树脂柱，收集溶液；
(4)阳离子交换树脂柱洗下料液调pH值3.0-3.5上阴离子交换树脂柱，溶液上柱完毕，混合洗脱液提前加温30-40℃，用混合洗脱液洗脱；阳离子交换树脂柱洗脱速度200-300L/h，阴离子交换树脂柱洗脱速度200-300L/h；
(5)收集洗脱料液浓度在70-80g/L，且HPLC大于98％的部分；
(6)经过上述处理后的5’-胞苷酸溶液浓度达到70-80g/L，溶液无需浓缩，pH值调节2.5-3.0，滴加溶液体积1.2-1.5倍量的有机溶剂析出结晶，过滤、漂洗、烘干得到液相含量大于99.5％的成品，产品收率93-95％。
本发明与现有技术相比，具有如下有益效果：
本发明5’-胞苷酸溶液无需浓缩，产品纯度高、收率高。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明做进一步描述。
实施例1
称取15g5’-胞苷酸粗品，将其配成1％质量浓度的水溶液，用盐酸调节pH值到3.0，先经过阳离子交换树脂柱处理，再经过阴离子交换树脂柱处理。阳离子交换树脂柱中装填001×7阳离子交换树脂，阴离子交换树脂柱中装填201×8阴离子交换树脂。收集溶液到玻璃烧杯中，将所收集精制液调pH值为2.5，然后加入300ml酒精，有5’-胞苷酸晶体析出，经常规分离、烘干后，得到5’-胞苷酸产品，产品液相色谱含量为99.56％。
实施例2-4
步骤同实施例1，工艺参数见表1。
表1实施例2-4工艺参数
Claims (10)
1.一种5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于步骤如下：
(1)将5’-胞苷酸粗品配制成质量浓度1-3％、pH2.0-3.5的水溶液；
(2)将5’-胞苷酸粗品溶液先经过阳离子交换树脂柱处理，再经过阴离子交换树脂柱处理；用混合洗脱液洗脱，收集洗脱料液，洗脱料液浓度在70-80g/L；
(3)调节洗脱料液的pH值到2.5-3.0后，用有机溶剂进行结晶，过滤，漂洗，烘干，即得。
2.根据权利要求1所述的5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于步骤(2)中所述的混合洗脱液为质量浓度30-35％盐酸和0.1-1.0mol/L氯化钠的混合液。
3.根据权利要求1所述的5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于步骤(2)中所述的阳离子交换树脂柱中装填001×7阳离子交换树脂。
4.根据权利要求3所述的5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于所述的5’-胞苷酸粗品质量与阳离子交换树脂体积的配比为1:10-20，5’-胞苷酸粗品质量以g计，阳离子交换树脂体积以ml计。
5.根据权利要求1所述的5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于步骤(2)中所述的阴离子交换树脂柱中装填201×8阴离子交换树脂。
6.根据权利要求5所述的5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于所述的5’-胞苷酸粗品质量与阴离子交换树脂体积的配比为1:10-20，5’-胞苷酸粗品质量以g计，阴离子交换树脂体积以ml计。
7.根据权利要求1所述的5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于步骤(2)中所述的阳离子交换树脂柱处理的时间为5-10h。
8.根据权利要求1所述的5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于步骤(2)中所述的阴离子交换树脂柱处理的时间为10-15h。
9.根据权利要求1所述的5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于步骤(3)中所述的有机溶剂为辛醇、庚醇、己醇、丁醇、丙醇、乙醇或甲醇中的一种。
10.根据权利要求1所述的5’-胞苷酸的精制方法，其特征在于步骤(3)中所述的洗脱料液与有机溶剂的体积比为1∶1.2-1.5。
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