CN105331554A - 一种复合微生物菌剂及其制备方法与应用 - Google Patents

一种复合微生物菌剂及其制备方法与应用 Download PDF

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CN105331554A CN201510716090.9A CN201510716090A CN105331554A CN 105331554 A CN105331554 A CN 105331554A CN 201510716090 A CN201510716090 A CN 201510716090A CN 105331554 A CN105331554 A CN 105331554A
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杨军
任莉
王凯
彭生平
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BEIJING VOTO BIOTECH Co Ltd
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Abstract

本发明涉及微生物制剂领域,具体公开了一种复合微生物菌剂及其制备方法与应用。所述复合微生物菌剂包括:乳酸粪肠球菌、枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌,其总活菌数不低于3.5×108cfu/mL。所述复合微生物菌剂针对餐厨滤液的成分特点采用合理的菌种组成,可以迅速降解餐厨滤液中的有害物质,对餐厨滤液COD、BOD、氨氮等的降解具有显著效果;且能够有效的降解有机物,能够使餐厨滤液的臭味大大缓解;经处理的餐厨滤液还可作为生产复合微生物水溶性肥的原料,提高了能源的利用率,减少了直接将其排放对环境的污染。

Description

一种复合微生物菌剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及微生物制剂领域,具体地说,涉及一种复合微生物菌剂及其制备方法与应用。
背景技术
随着城市的发展,各种废弃物垃圾也应运而生,其中餐厨垃圾是重要的部分。现在一般的处理餐厨垃圾的方法,是将餐厨垃圾进行固液分离,将固体部分加工成饲料、肥料等,而液体部分大多是直接排出,或进入污水处理系统。研究发现,餐厨滤液中含有大量的有机物物直接排出会污染地下水,而且产生的沼气和浓烈的气味会严重影响人们的生活和健康。研究发现,餐厨滤液中含有丰富的有机物及氮源,将这些物质进行再利用不仅对保护环境具有重要意义,对可持续发展也具有深远影响。
目前常规的处理餐厨滤液的方法主要是作为污水处理有物理化学法和生物法。其中物理化学方法主要是依据污水处理方法,通过物理吸附、化学沉淀、密度分离以及化学氧化、还原等多种方法。据相关研究表明,当滤液中COD为2000-4000mg/L时,通过运用物理化学的方法,COD的去除率可以达到50%以上,最高可以达到87%,但这些方法的处理成本高,对于处理大量的餐厨滤液不适用。因此,目前运用较多的处理方法是生物法。生物法一般分为好氧、厌氧及其两种形式的结合。其中好氧生物法包括活性污泥、曝气氧化池处理等方法,厌氧处理法包括厌氧固定生物反应器、厌氧稳定塘等方法。所有这些方法都有一个共同点,就是将餐厨滤液作为污水看待,处理之后直接排出,而餐厨滤液作为一种特殊的滤液,其中所含的大量有机营养物物并未得到充分的再利用。因此,从能源循环再利用来说,这种处理餐厨垃圾滤液的观念不可取。
如何将餐厨滤液进行处理再利用是一项重要的课题,目前有专家学者提出将餐厨滤液运用功能微生物进行发酵,然后通过添加一些营养物质制作成复合微生物肥料是一个新的方向。将餐厨垃圾滤液部分通过微生物发酵的方式制作成复合微生物肥料尤其强调微生物的作用,但由于餐厨滤液具有高含量COD、盐离子、氨氮以及大肠杆菌等多种病原有害微生物,所以至今还未有专一的微生物菌剂在降解转化餐厨滤液中进行运用。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题,本发明的目的是提供一种复合微生物菌剂及其制备方法与应用。
为了实现本发明目的,本发明首先提供一种复合微生物菌剂,所述复合微生物菌剂包括:乳酸粪肠球菌、枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌。
进一步地,为了使所述菌剂更好的发挥其发酵效果,所述复合微生物菌剂的总活菌数不低于3.5×108cfu/mL。
作为优选,所述复合微生物菌剂中:乳酸粪肠球菌的活菌数为1×108-5×108cfu/mL,枯草芽孢杆菌的活菌数为1.5×108-2.5×108cfu/mL,巨大芽孢杆菌的活菌数为1×108-2×108cfu/mL。
当所述菌剂中的微生物满足上述要求时,菌株能够充分发挥各自的功能,很好的分解滤液中的有害物质。
作为优选,所述乳酸粪肠球菌为乳酸粪肠球菌VTJ2(EnterococcusFaecalis),所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌VTL-2(Bacillussubtilis),所述巨大芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌VTL-1(Bacillusmegatherium)。
所述乳酸粪肠球菌VTJ2(EnterococcusFaecalis),枯草芽孢杆菌VTL-2(Bacillussubtilis)和巨大芽孢杆菌VTL-1(Bacillusmegatherium),均为北京沃土天地生物科技有限公司已出售的,属于本领域技术人员可购买的产品。
所述乳酸粪肠球菌VTJ2(EnterococcusFaecalis),是能够产生多种酶的菌株,能分解多种糖类及有机物,发酵产生酸,化学耐性高,能够有效抑制病原微生物的生长。
所述枯草芽孢杆菌VTL-2(Bacillussubtilis)是纤维素酶、半纤维素酶等活性物质的重要产生菌,能够有效分解餐厨滤液中的纤维素等物质,同时其在生长过程中产生的伊枯草菌素、多黏菌素、制霉菌素、短杆菌肽能抑制大肠杆菌等病原微生物的生长。
所述巨大芽胞杆菌VTL-1(Bacillusmegetarium),可以产生多种酶,分解滤液中的油脂、有机物及氨氮物质,其产生的一些抗菌肽能抑制营腐败微生物如大肠杆菌,黄色葡萄球菌等的生长,减少餐厨滤液异味的产生。同时其是一类重要的解磷细菌,能够将不溶性的磷等元素从环境中释放出来,促进作物生长。
本发明还提供了所述复合微生物菌剂的制备方法,包括如下步骤:
1)固体斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌与乳酸粪肠球菌分别在适宜的固体培养基中培养,使菌株活化;
2)一级种子培养:将活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和乳酸粪肠球菌分别接种于适宜的种子培养基中培养,当液体培养菌密度OD600值达到0.6-0.8时停止培养,即得一级种子;
3)二级种子培养:将所得一级种子液分别接种于同上的种子培养基中培养,得到二级种子液;
4)将枯草芽孢杆菌的二级种子液接种于发酵培养基中,进行高密度发酵培养,获得菌剂A;
5)将巨大芽孢杆菌的二级种子液接种于发酵培养基中,进行高密度发酵培养,获得菌剂B;
6)将乳酸肠球菌的二级种子液接种于发酵培养基中,进行高密度发酵培养,获得菌剂C;
7)将菌剂A、菌剂B及菌剂C混合,即得复合微生物菌剂。
其中,适宜枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌的固体培养基为牛肉膏蛋白胨固体培养基,适宜乳酸粪肠球菌的固体培养基为MRS固体培养基。
适宜枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌的种子培养基为牛肉膏蛋白胨培养基,适宜乳酸粪肠球菌的种子培养基为MRS培养基。
进一步地,所述方法具体包括如下步骤:
1)固体斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中,乳酸粪肠球菌接种于MRS固体培养基中,于30-37℃恒温培养1-3天,使菌株活化;
2)一级种子培养:将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基中,活化的乳酸粪肠球菌接种于MRS培养基中,于28-37℃,160-180rpm下培养2-4天,当液体培养菌密度OD600值达到0.6-0.8时停止培养,即得一级种子;
3)二级种子培养:将步骤2)所得枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌的一级种子液以10-20%的接种量分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中,将步骤2)所得乳酸粪肠球菌的一级种子液以10-20%的接种量接种于MRS培养基中,发酵培养2-4天,即得二级种子液;
4)将步骤3)中获得的枯草芽孢杆菌种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基中,于28-37℃,110-130rpm,通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂A;
5)将步骤3)中获得的巨大芽孢杆菌种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基中,于28-37℃,150-180rpm,通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂B;
6)步骤3)中获得的乳酸肠球菌的种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基中,于28-37℃,150-180rpm,通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂C;
7)将步骤4)、5)及步骤6)中获得的菌剂A、菌剂B及菌剂C以体积比1~2:1~2:1~3混合,即得复合微生物菌剂。
其中,步骤4)、5)、6)中所述的发酵培养基的配方按质量百分比为:糖蜜3-5%、玉米粉0.15-0.25%、硫酸铵0.3-0.5%,磷酸二氢钾0.05-0.15%,硫酸镁0.05-0.15%,氯化钙0.05-0.15%,余量为水。
本发明还进一步提供了所述复合微生物菌剂在降解有机物方面的应用。
以及所述复合微生物菌剂在处理餐厨滤液中的应用。
当餐厨滤液经本发明所述菌剂处理后,含有丰富的有益微生物菌群,并且含有丰富的营养,能够作为生产复合微生物水溶性肥的原料,提高能源的利用率,减少了直接将其排放对环境的污染。
因此,本发明还进一步提供了一种复合微生物水溶性肥,其原料来自经所述复合微生物菌剂处理后的餐厨滤液。
本发明的有益效果在于:
本发明提供了一种复合微生物菌剂,将不同功能的有益微生物进行复合,并对其组合进行配伍优化,混合得到的复合菌用于餐厨垃圾滤液的处理,具有以下优点:(1)针对餐厨滤液的成分特点采用合理的菌种组成,每种菌株都有特定专一的功能,可以迅速降解餐厨滤液中的有害物质,对餐厨滤液COD、BOD、氨氮等的降解具有显著效果;(2)本复合菌剂能够有效的降解有机物,能够使餐厨滤液的臭味大大缓解;(3)复合菌剂通过迅速的分解作用,能够降低餐厨滤液的水色;(4)经处理的餐厨滤液含有丰富的有益微生物菌群,并且含有丰富的营养,能够作为生产复合微生物水溶性肥的原料,提高了能源的利用率,减少了直接将其排放对环境的污染;(5)本发明中的一些微生物对重金属有转化作用,能够将游离的重金属钝化,有效降低了重金属对环境的污染。本发明专门用于餐厨滤液的处理,使用方便,降解效果好,成本低廉,作用迅速、效果持续。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的,并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下,可以对本发明进行各种修改和替换。
本发明所用试剂和原料均为市售可得。
实施例1
实施例1用于说明本发明所述的复合微生物菌剂。
所述复合微生物菌剂包括:
乳酸粪肠球菌VTJ2(EnterococcusFaecalis),活菌数为1×108-5×108cfu/mL;
枯草芽孢杆菌VTL-2(Bacillussubtilis),活菌数为1.5×108-2.5×108cfu/mL;
巨大芽孢杆菌VTL-1(Bacillusmegatherium),活菌数为1×108-2×108cfu/mL。
实施例2
实施例2用于说明本发明所述复合微生物菌剂的制备方法。
包括如下步骤:
1)固体斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中,乳酸粪肠球菌接种于MRS固体培养基中,于28℃恒温培养1天,使菌株活化;
其中:牛肉膏蛋白胨固体培养基配方为:牛肉膏5g,蛋白胨10g,NaCl5g,蒸馏水1000mL,固体加琼脂20g,pH7.0-7.2;
MRS培养基配方为:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母膏5g,葡萄糖20g,吐温801.0mL,磷酸氢二钾2g,醋酸钠5g,柠檬酸二铵2g,七水硫酸镁0.58g,四水硫酸锰0.25g,蒸馏水1000mL,pH6.2-6.6;
2)一级种子培养:将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌菌株分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中,活化的乳酸粪肠球菌接种于MRS培养基中,于28℃,160rpm下培养2天,当液体培养菌密度OD600值达到0.6时停止培养,即得一级种子;
3)二级种子培养:将步骤2)所得一级种子液以10%的接种量分别接种于上述相应培养基中,混合发酵培养2天,即得二级种子液;
4)将步骤3)中获得的枯草芽孢杆菌种子液以10%的接种量接种于发酵培养基中,于28℃,110rpm,通气量1.0vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂A;发酵培养基的配方按质量百分比为:糖蜜3%、玉米粉0.15%、硫酸铵0.3%,磷酸二氢钾0.05%,硫酸镁0.05%,氯化钙0.05%,余量为水;
5)将步骤3)中获得的巨大芽孢杆菌种子液以10%的接种量接种于发酵培养基中(同步骤4)),于28℃,160rpm,通气量1.0vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂B;
6)步骤3)中获得的乳酸肠球菌的种子液以10%的接种量接种于发酵培养基中(同步骤4)),于28℃,160rpm,通气量1.0vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂C;
7)将步骤4)、5)及步骤6)中获得的菌剂A、菌剂B及菌剂C以体积比1:1:1混合,即得复合微生物菌剂;
所得复合微生物菌剂中:乳酸粪肠球菌的活菌数为1×108cfu/mL,枯草芽孢杆菌的活菌数为1.5×108cfu/mL,巨大芽孢杆菌的活菌数为1×108cfu/mL,总活菌数为3.5×108cfu/mL。
实施例3
实施例3用于说明本发明所述复合微生物菌剂的另一可选的制备方法。
包括如下步骤:
1)固体斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中,乳酸粪肠球菌接种于MRS固体培养基中,于30℃恒温培养3天,使菌株活化;
其中:牛肉膏蛋白胨固体培养基配方为:牛肉膏5g,蛋白胨10g,NaCl5g,蒸馏水1000mL,固体加琼脂20g,pH7.0-7.2;
MRS培养基配方为:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母膏5g,葡萄糖20g,吐温801.0mL,磷酸氢二钾2g,醋酸钠5g,柠檬酸二铵2g,七水硫酸镁0.58g,四水硫酸锰0.25g,蒸馏水1000mL,pH6.2-6.6;
2)一级种子培养:将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基中,活化的乳酸粪肠球菌接种于MRS培养基中,于30℃,170rpm下培养3天,当液体培养菌密度OD600值达到0.7时停止培养,即得一级种子;
3)二级种子培养:将步骤2)所得一级种子液以15%的接种量分别接种于上述相应培养基中,发酵培养3天,即得二级种子液;
4)将步骤3)中获得的枯草芽孢杆菌种子液以15%的接种量接种于发酵培养基中,于30℃,120rpm,通气量1.2vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂A;发酵培养基的配方按质量百分比为:糖蜜4%、玉米粉0.25%、硫酸铵0.4%,磷酸二氢钾0.15%,硫酸镁0.15%,氯化钙0.15%,余量为水;
5)将步骤3)中获得的巨大芽孢杆菌种子液以15%的接种量接种于发酵培养基中(同步骤4)),于30℃,170rpm,通气量1.2vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂B;
6)步骤3)中获得的乳酸肠球菌的种子液以15%的接种量接种于发酵培养基中(同步骤4)),于30℃,170rpm,通气量1.2vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂C;
7)将步骤4)、5)及步骤6)中获得的菌剂A、菌剂B及菌剂C以体积比1:1:1混合,即得复合微生物菌剂;
所得复合微生物菌剂中:乳酸粪肠球菌的活菌数为5×108cfu/mL,枯草芽孢杆菌的活菌数为2.5×108cfu/mL,巨大芽孢杆菌的活菌数为2×108cfu/mL,总活菌数为9.5×108cfu/mL。
实施例4
实施例4用于说明本发明所述复合微生物菌剂的另一可选的制备方法。
1)固体斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中,乳酸粪肠球菌接种于MRS固体培养基中,于37℃恒温培养3天,使菌株活化;
其中:牛肉膏蛋白胨固体培养基配方为:牛肉膏5g,蛋白胨10g,NaCl5g,蒸馏水1000mL,固体加琼脂20g,pH7.0-7.2;
MRS培养基配方为:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母膏5g,葡萄糖20g,吐温801.0mL,磷酸氢二钾2g,醋酸钠5g,柠檬酸二铵2g,七水硫酸镁0.58g,四水硫酸锰0.25g,蒸馏水1000mL,pH6.2-6.6;
2)一级种子培养:将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基中,活化的乳酸粪肠球菌接种于MRS培养基中,于37℃,180rpm下培养4天,当液体培养菌密度OD600值达到0.8时停止培养,即得一级种子;
3)二级种子培养:将步骤2)所得一级种子液以20%的接种量分别接种于上述相应培养基中,发酵培养4天,即得二级种子液;
4)将步骤3)中获得的枯草芽孢杆菌种子液以20%的接种量接种于发酵培养基中,于37℃,130rpm,通气量1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂A;
发酵培养基的配方按质量百分比为:糖蜜5%、玉米粉0.20%、硫酸铵0.5%,磷酸二氢钾0.10%,硫酸镁0.10%,氯化钙0.10%,余量为水;
5)将步骤3)中获得的巨大芽孢杆菌种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基(同步骤4))中,于37℃,180rpm,通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂B;
6)步骤3)中获得的乳酸肠球菌的种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基(同步骤4))中,于37℃,180rpm,通气量1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂C;
7)将步骤4)、5)及步骤6)中获得的菌剂A、菌剂B及菌剂C以体积比1:1:1混合,即得复合微生物菌剂;
所得复合微生物菌剂中:乳酸粪肠球菌的活菌数为3.0×108cfu/mL,枯草芽孢杆菌的活菌数为2.0×108cfu/mL,巨大芽孢杆菌的活菌数为1.5×108cfu/mL,总活菌数为6.5×108cfu/mL。
实施例5
实施例5用于说明本发明所述复合微生物菌剂在降解有机物及处理餐厨滤液中的应用。
将上述实施例中得到的菌剂均以体积比为0.1%的比例接种到餐厨滤液中,于25℃,180rpm,通气量1.0-1.5vvm下进行好氧发酵3d,各菌剂对滤液的处理效果如下表1。
表1菌剂对滤液的处理效果
从表1中的数据可以看出,当采用本发明的微生物复合菌剂对餐厨滤液进行接种发酵后,其氨氮去除率、硫化氢去除率、COD以及BOD去除率均有良好效果,对大肠杆菌的抑制作用非常明显。其中氨氮去除率最高达82.03%,硫化氢的去除率高达67%,COD的去除率达到80.23%,BOD的去除率达到43%,大肠杆菌的数量最少可以控制在9CFU/mL。具体分析,由于本发明的微生物复合菌剂由多种不同功能的微生物经发酵制成,由于菌群组成、代谢类型、呼吸类型及作用功能多样的特点以及各菌株之间的协同作用,使得微生物菌剂能够在餐厨滤液中良好生长,从而有效地降解氨氮及有机物等物质,抑制产生恶臭物质的腐败菌生长繁殖,经处理的餐厨滤液还可作为生产复合微生物水溶性肥的原料,提高了能源的利用率,减少了直接将其排放对环境的污染。
虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种复合微生物菌剂,其特征在于,所述复合微生物菌剂包括:乳酸粪肠球菌、枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌。
2.根据权利要求1所述的复合微生物菌剂,其特征在于,所述复合微生物菌剂的总活菌数不低于3.5×108cfu/mL。
3.权利要求1或2所述的复合微生物菌剂,其特征在于,所述复合微生物菌剂中:乳酸粪肠球菌的活菌数为1×108-5×108cfu/mL,枯草芽孢杆菌的活菌数为1.5×108-2.5×108cfu/mL,巨大芽孢杆菌的活菌数为1×108-2×108cfu/mL。
4.权利要求3所述的复合微生物菌剂,其特征在于,所述乳酸粪肠球菌为乳酸粪肠球菌VTJ2(EnterococcusFaecalis),所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌VTL-2(Bacillussubtilis),所述巨大芽孢杆菌为巨大芽孢杆菌VTL-1(Bacillusmegatherium)。
5.权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)固体斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌与乳酸粪肠球菌分别在适宜的固体培养基中培养,使菌株活化;
2)一级种子培养:将活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌和乳酸粪肠球菌分别接种于适宜的种子培养基中培养,当液体培养菌密度OD600值达到0.6-0.8时停止培养,即得一级种子;
3)二级种子培养:将所得一级种子液分别接种于同上的种子培养基中培养,得到二级种子液;
4)将枯草芽孢杆菌的二级种子液接种于发酵培养基中,进行高密度发酵培养,获得菌剂A;
5)将巨大芽孢杆菌的二级种子液接种于发酵培养基中,进行高密度发酵培养,获得菌剂B;
6)将乳酸肠球菌的二级种子液接种于发酵培养基中,进行高密度发酵培养,获得菌剂C;
7)将菌剂A、菌剂B及菌剂C混合,即得复合微生物菌剂。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)固体斜面培养:将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中,乳酸粪肠球菌接种于MRS固体培养基中,于30-37℃恒温培养1-3天,使菌株活化;
2)一级种子培养:将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基中,活化的乳酸粪肠球菌接种于MRS培养基中,于28-37℃,160-180rpm下培养2-4天,当液体培养菌密度OD600值达到0.6-0.8时停止培养,即得一级种子;
3)二级种子培养:将步骤2)所得枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌的一级种子液以10-20%的接种量分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中,将步骤2)所得乳酸粪肠球菌的一级种子液以10-20%的接种量接种于MRS培养基中,发酵培养2-4天,即得二级种子液;
4)将步骤3)中获得的枯草芽孢杆菌种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基中,于28-37℃,110-130rpm,通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂A;
5)将步骤3)中获得的巨大芽孢杆菌种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基中,于28-37℃,150-180rpm,通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂B;
6)步骤3)中获得的乳酸肠球菌的种子液以10-20%的接种量接种于发酵培养基中,于28-37℃,150-180rpm,通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养,获得菌剂C;
7)将步骤4)、5)及步骤6)中获得的菌剂A、菌剂B及菌剂C以体积比1~2:1~2:1~3混合,即得复合微生物菌剂。
7.根据权利要求5或6所述的制备方法,其特征在于,步骤4)、5)、6)中所述的发酵培养基的配方按质量百分比为:糖蜜3-5%、玉米粉0.15-0.25%、硫酸铵0.3-0.5%,磷酸二氢钾0.05-0.15%,硫酸镁0.05-0.15%,氯化钙0.05-0.15%,余量为水。
8.权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂在降解有机物方面的应用。
9.权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂在处理餐厨滤液中的应用。
10.一种复合微生物水溶性肥,其特征在于,其原料来自经权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂处理后的餐厨滤液。
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