CN105400722A - 一种复合微生物菌剂及其制备方法与应用 - Google Patents

一种复合微生物菌剂及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及复合微生物菌剂，具体公开了一种用于处理中草药废液的复合微生物菌剂及其制备方法与应用。所述复合微生物菌剂包括：枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、毕赤酵母和毛霉，总活菌数不低于3×108cfu/mL。所述复合微生物菌剂针对中草药废液中的成分，采用了合理的菌种组成，大部分有害物质都有对应的菌株对其进行降解，有效提高了菌剂的专一性；且通过本发明所述菌剂产生的多种酶，能够有效的分解中草药废液中的COD、BOD等物质。

Description

一种复合微生物菌剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及复合微生物菌剂，具体地说，涉及一种用于处理中草药废液的复合微生物菌剂。
背景技术
中草药是中华民族传统的瑰宝，因其独特的功效，其在世界医学中有着重要的地位。随着时代的发展，我国的中草药制药发展迅速，据统计，目前市场上的中草药厂家大约有2000多家。中草药在制药在生产过程中会产生大量的废液，废液大部分是直接排出，或进入污水处理系统。中草药废液中含有大量的有机物，以及糖类、木质素、生物碱等污染物，直接排出会污染地下水，而且产生的臭气会严重影响人们的生活和健康。研究发现，中草药废液中丰富的有机物、氮源以及微量元素进行合理处理可以在利用，对可持续发展具有重要影响。
当前，处理中草药废水的方法依然沿用的是制药废水的处理方法，包括物化法和生物法。其中物化法主要是混凝法、吸附法、电解法及气浮法等。主要是他通过物理吸附、化学沉底及化学氧化法，将废液中的有害物进行吸附、氧化，从而达到去除污染的目的。有研究表明，中药废水经过气浮法处理后，COD的去除率可以达到50％，固体悬浮物的去除率达到80％以上，但同时处理后的废液中仍然有大量的有机物，需要进一步的处理。目前，我国利用物化法处理中草药废液的具体案例较少，主要是成本太高，劳动强度大，产生二次污染，具有一定的局限性。生物法主要是采用厌氧及好氧的方法，能够有效的去除废液中的大部分污染物，其中好氧生物法包括活性污泥、曝气氧化池处理等方法，厌氧处理法包括厌氧固定生物反应器、厌氧稳定塘等方法。这些方法的处理特点是将中草药废液单纯的作为污水处理，而其中的有机物、氮源及微量元素等物质没有得到进一步的应用，从能源循环利用的方面来说，这种方法是不可取的。如何在处理中草药废液的同时充分利用中草药废液中有机物、氮源等物质是一项重要的研究内容。近些年有些企业尝试利用微生物将中草药进行发酵，通过微生物的分解作用，将废液中的有机物、氮源等物质进行分解、转化，得到的产品在添加一些营养成分，将其制作成生物肥料，是一个有益的尝试。然而，由于中草药废液中有机物、COD及有害物质含量较高，对微生物的耐受性有很高的要求，到目前为止还未有专门的微生物菌剂针对处理中草药废液。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种用于处理中草药废液的复合微生物菌剂及其制备方法与应用。
为了实现本发明目的，本发明的技术方案如下：
第一方面，本发明提供一种复合微生物菌剂，所述复合微生物菌剂包括：枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、毕赤酵母和毛霉。
本发明在进行了大量客观实验的研究基础上，综合利用了枯草芽孢杆菌的快速分解木质素，纤维素等有机物的特性，巨大芽孢杆菌的抗病原菌特性、毕赤酵母的分解有机物的特性和毛霉的产生蛋白酶和脂肪酶分解小分子肽和氨基酸的特性，针对中草药废液中的有机物等物质更好的进行处理或分解，以实现本发明的发明目的。
进一步地，所述复合微生物菌剂的总活菌数不低于3×108cfu/mL。满足该条件的复合微生物菌剂能够更好的对中草药废液中的有机物等物质进行分解。
更进一步，所述复合微生物菌剂中：枯草芽孢杆菌的活菌数为1×108-6×108cfu/mL，巨大芽孢杆菌的活菌数为1.5×107-5×107cfu/mL，毕赤酵母的活菌数为2×108-4×108cfu/mL，毛霉的活菌数为1×106-4×106cfu/mL。当所述复合微生物菌剂满足上述条件时，各微生物能够充分发挥各自的功效，迅速分解废液中的相关成分，如：枯草芽孢杆菌能够产生大量纤维素酶和半纤维素酶，分解废液中木质素、纤维素等物质，巨大芽孢杆菌能够产生大量的脂肽、多肽等抗菌物质，有效抑制废液中的大肠杆菌等病原菌、毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，可以分解废液中的小分子肽和氨基酸等。所述枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、毕赤酵母和毛霉市售可得。
作为优选，本发明提供了在分解中草药废液中污染物效果上更优的菌种，如：所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌VTS‐2(Bacillussubtilis)，所述巨大芽孢杆菌为VTS‐1(Bacillusmegatherium)，所述毕赤酵母为毕赤酵母VTJ‐6(Pichiapastoris)，所述毛霉为犁头霉VTJ‐3(Absidia)。
第二方面，本发明提供了前述复合微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：
1)固体斜面培养：将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中，毕赤酵母、毛霉分别接种于PDA固体培养基中培养，使菌株充分活化；
其中，牛肉膏蛋白胨固体培养基配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL，琼脂20g。PDA固体培养基配方为土豆200g，葡萄糖20g，水1000mL，琼脂20g。
2)一级种子培养：将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，活化的毕赤酵母、毛霉分别接种于PDA培养基中培养，当液体培养菌密度OD600值达到0.6-0.8时停止培养，分别获得一级种子液；
其中，牛肉膏蛋白胨培养基配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，H2O1000mL；PDA培养基配方为土豆200g，葡萄糖20g，H2O1000mL。
3)二级种子培养：将所得枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌的一级种子液分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中培养，所得毕赤酵母、毛霉的一级种子液分别接种于PDA培养基中培养，分别获得二级种子液；
其中，所述牛肉膏蛋白胨培养基和PDA培养基同步骤2)。
4)将步骤3)中获得的4种微生物的二级种子液分别接种于发酵培养基中，进行高密度发酵培养，得到菌剂A、B、C、D；
其中，菌剂A为由枯草芽孢杆菌制备的菌剂，菌剂B为由巨大芽孢杆菌制备的菌剂、菌剂C为由毕赤酵母制备的菌剂，菌剂D为由毛霉制备的菌剂。
5)将菌剂A、B、C、D混合，即得复合微生物菌剂。
作为优选，所述菌剂A、B、C、D以1-3:1-3:1-3:2-3的体积比混合。所述菌剂A、B、C、D在该体积比例下混合，能够使复合微生物菌剂具有更好的菌种数量组成从而达到最佳的处理中草药废液的效果。
作为优选，步骤4)中所述的发酵培养基的配方按质量百分比为：糖蜜4-6％、玉米粉0.35-0.45％、硫酸铵0.5-0.7％，磷酸二氢钾0.05-0.15％，硫酸镁0.05-0.15％，余量为水，pH为7.0-7.2。该培养基特别适宜前述微生物种子液的发酵。
进一步地，所述步骤1)的培养条件为在28-30℃下培养1-3天；所述步骤2)和3)的培养条件为在28-30℃，160-180rpm下培养1-3天；所述步骤4)具体为：
枯草芽孢杆菌二级种子液以5-15％的接种量接种于发酵培养基中，于28-30℃，110-150rpm，通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养1-2d；
巨大芽孢杆菌二级种子液以5-15％的接种量接种于发酵培养基中，于28-30℃，160-200rpm，通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养1-2d；
毕赤酵母二级种子液以10-20％的接种量接种于发酵培养基中，于28-30℃，110-150rpm，通气量0.8-1.0vvm下进行高密度发酵培养1-2d；
毛霉二级种子液以10-20％的接种量接种于发酵培养基中，于28-30℃，110-150rpm，通气量0.8-1.0vvm下进行高密度发酵培养1-2d。
按照上述接种量接种以上种子液进行发酵，能够保证各菌种发酵后的数量以及菌株产生的次级代谢产物的量。
第三方面，本发明提供了前述复合微生物菌剂在处理中草药废液中的应用。
作为优选，将所述复合微生物菌剂以0.05％v/v的比例加入到中草药废液中，于28℃，160rpm，通气量1.0-1.5vvm下进行好氧发酵5d。当所述复合微生物菌剂按照上述条件对中草药废液进行处理，能够使菌剂更好的发挥分解效果，提高菌剂分解中草药废液中有机物的速率。
第四方面，本发明提供了一种复合微生物水溶性肥，其原料来自经前述复合微生物菌剂处理后的中草药废液。当中草药废液经前述复合微生物菌剂后，含有丰富的微生物种群及各种微量元素，能够作为生产复合微生物水溶性肥的原料，对能源的循环利用具有重要意义。
本发明的有益效果在于：
本发明提供了一种复合微生物菌剂，将不同功能的微生物进行复合，并对其组合进行配伍优化，混合得到的复合菌用于中草药废液的处理，具有以下优点：(1)针对中草药废液中的成分，采用了合理的菌种组成，大部分有害物质都有对应的菌株对其进行降解，有效提高了菌剂的专一性；(2)本发明的复合菌剂通过产生多种酶，能够有效的分解中草药废液中的COD、BOD等物质；(3)复合微生物菌剂分泌产生的物质能够有效抑制病原微生物的生长，减少臭味的产生；(4)经处理的中草药废液中含有多种活性成分，能够促进作物生长，防治植物病虫害；(5)本发明中的一些微生物对重金属有很强的钝化作用，减少重金属对环境的污染。本发明专门用于中草药废液的处理，使用简单、成本低廉、效果持久。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。
本发明所用试剂和原料均为市售可得。
实施例1
实施例1用于说明本发明所述的复合微生物菌剂。
所述复合微生物菌剂包括：
枯草芽孢杆菌VTS-2(Bacillussubtilis)，活菌数为1×108-6×108cfu/mL；
巨大芽孢杆菌为VTS-1(Bacillusmegatherium)，其活菌数为1.5×107-5×107cfu/mL；
毕赤酵母VTJ-6(Pichiapastoris)，活菌数为2×108-4×108cfu/mL；
犁头霉VTJ-3(Absidia)，活菌数为1×106-4×106cfu/mL。
实施例2
实施例2用于说明本发明所述复合微生物菌剂的制备方法。
包括如下步骤：
1)固体斜面培养将枯草芽孢杆菌VTS-2(Bacillussubtilis)、巨大芽孢杆菌VTS-1(Bacillusmegatherium)接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中，毕赤酵母VTJ-6(Pichiapastoris)、毛霉(犁头霉VTJ‐3(Absidia))接种于PDA固体培养基中，于28℃恒温培养1天，使菌株活化；
其中，牛肉膏蛋白胨固体培养基配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL，琼脂20g；PDA固体培养基配方为土豆200g，葡萄糖20g，水1000mL，琼脂20g。
2)一级种子培养：将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，活化的毕赤酵母、毛霉接种于PDA培养基中，于28℃，160rpm下培养1天，当液体培养菌密度OD600值达到0.6时停止培养，即得一级种子；
其中，牛肉膏蛋白胨培养基配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，H2O1000mL；PDA培养基配方为土豆200g，葡萄糖20g，H2O1000mL。
3)二级种子培养：将所得枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌一级种子液分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，毕赤酵母、毛霉接种于PDA培养基中培养，于28℃，160rpm下培养1天，即得二级种子液；所述牛肉膏蛋白胨培养基和PDA培养基同步骤2)。
4)将步骤3)中获得的枯草芽孢杆菌种子液以5％的接种量接种于发酵培养基中，于28℃，110rpm，通气量1.0vvm下进行高密度发酵培养，进行高密度发酵培养，获得菌剂A；发酵培养基配方按质量百分比为：糖蜜4％、玉米粉0.35％、硫酸铵0.5％，磷酸二氢钾0.05％，硫酸镁0.05％，余量为水，pH为7.0。
5)将步骤3)中获得的巨大芽孢杆菌种子液以5％的接种量接种于发酵培养基中，于28℃，160rpm，通气量1.0vvm下进行高密度发酵培养，进行高密度发酵培养，获得菌剂B。发酵培养基同步骤4)。
6)步骤3)中获得的毕赤酵母的种子液以以5％的接种量接种于发酵培养基中，于28℃，110rpm，通气量0.8vvm下进行高密度发酵培养，获得菌剂C。发酵培养基同步骤4)。
7)骤3)中获得的毛霉的种子液以5％的接种量接种于发酵培养基中，于28℃，110rpm，通气量0.8vvm下进行高密度发酵培养，获得菌剂D。发酵培养基同步骤4)。
8)将步骤4)、5)、6)及步骤7)中获得的菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D以体积比1:1:1:1混合，即得复合微生物菌剂。
实施例3
实施例3用于说明本发明所述复合微生物菌剂的另一可选的制备方法。
包括如下步骤：
1)固体斜面培养将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中，毕赤酵母、毛霉接种于PDA固体培养基中，于29℃恒温培养2天，使菌株活化；
其中，牛肉膏蛋白胨固体培养基配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL，琼脂20g；PDA固体培养基配方为土豆200g，葡萄糖20g，水1000mL，琼脂20g。
2)一级种子培养：将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，活化的毕赤酵母、毛霉接种于PDA培养基中，于29℃，170rpm下培养3天，当液体培养菌密度OD600值达到0.8时停止培养，即得一级种子；
其中，牛肉膏蛋白胨培养基配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，H2O1000mL；PDA培养基配方为土豆200g，葡萄糖20g，H2O1000mL。
3)二级种子培养：将所得枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌一级种子液分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，毕赤酵母、毛霉接种于PDA培养基中培养，于29℃，170rpm下培养3天，即得二级种子液；所述牛肉膏蛋白胨培养基和PDA培养基同步骤2)。
4)将步骤3)中获得的枯草芽孢杆菌种子液以15％的接种量接种于发酵培养基中，于29℃，130rpm，通气量1.3vvm下进行高密度发酵培养，进行高密度发酵培养，获得菌剂A；发酵培养基配方按质量百分比为：糖蜜6％、玉米粉0.45％、硫酸铵0.6％，磷酸二氢钾0.10％，硫酸镁0.10％，余量为水，pH为7.1。
5)将步骤3)中获得的巨大芽孢杆菌种子液以15％的接种量接种于发酵培养基中，于29℃，180rpm，通气量1.3vvm下进行高密度发酵培养，进行高密度发酵培养，获得菌剂B。发酵培养基同步骤4)。
6)步骤3)中获得的毕赤酵母的种子液以以15％的接种量接种于发酵培养基中，于29℃，130rpm，通气量0.9vvm下进行高密度发酵培养，获得菌剂C。发酵培养基同步骤4)。
7)骤3)中获得的毛霉的种子液以10％的接种量接种于发酵培养基中，于29℃，130rpm，通气量0.9vvm下进行高密度发酵培养，获得菌剂D。发酵培养基同步骤4)。
8)将步骤4)、5)、6)及步骤7)中获得的菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D以体积比1:2:1:3混合，即得复合微生物菌剂。
实施例4
实施例4用于说明本发明所述复合微生物菌剂的另一可选的制备方法。
包括如下步骤：
1)固体斜面培养将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中，毕赤酵母、毛霉接种于PDA固体培养基中，于30℃恒温培养3天，使菌株活化；
其中，牛肉膏蛋白胨固体培养基配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL，琼脂20g；PDA固体培养基配方为土豆200g，葡萄糖20g，水1000mL，琼脂20g。
2)一级种子培养：将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌菌株接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，活化的毕赤酵母、毛霉接种于PDA培养基中，于30℃，180rpm下培养2天，当液体培养菌密度OD600值达到0.7时停止培养，即得一级种子；
其中，牛肉膏蛋白胨培养基配方为牛肉膏5g，蛋白胨10g，氯化钠5g，H2O1000mL；PDA培养基配方为土豆200g，葡萄糖20g，H2O1000mL。
3)二级种子培养：将所得枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌一级种子液分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，毕赤酵母、毛霉接种于PDA培养基中培养，于30℃，180rpm下培养2天，即得二级种子液；所述牛肉膏蛋白胨培养基和PDA培养基同步骤2)。
4)将步骤3)中获得的枯草芽孢杆菌种子液以10％的接种量接种于发酵培养基中，于30℃，150rpm，通气量1.5vvm下进行高密度发酵培养，进行高密度发酵培养，获得菌剂A；发酵培养基配方按质量百分比为：糖蜜5％、玉米粉0.4％、硫酸铵0.7％，磷酸二氢钾0.15％，硫酸镁0.15％，余量为水，pH为7.2。
5)将步骤3)中获得的巨大芽孢杆菌种子液以10％的接种量接种于发酵培养基中，于30℃，200rpm，通气量1.5vvm下进行高密度发酵培养，进行高密度发酵培养，获得菌剂B。发酵培养基同步骤4)。
6)步骤3)中获得的毕赤酵母的种子液以以10％的接种量接种于发酵培养基中，于30℃，150rpm，通气量1.0vvm下进行高密度发酵培养，获得菌剂C。发酵培养基同步骤4)。
7)骤3)中获得的毛霉的种子液以15％的接种量接种于发酵培养基中，于30℃，150rpm，通气量1.0vvm下进行高密度发酵培养，获得菌剂D。发酵培养基同步骤4)。
8)将步骤4)、5)、6)及步骤7)中获得的菌剂A、菌剂B、菌剂C和菌剂D以体积比2:1:1:2混合，即得复合微生物菌剂。
对比例1
选取市售某微生物菌剂1，以体积比为0.05％的比例加入到中草药废液中，于28℃，160rpm，通气量1.0-1.5vvm下进行好氧发酵5d，各所得菌剂总活菌数及对中草药废液成分的处理效果如下表1。
对比例2
选取市售某微生物菌剂2，以体积比为0.05％的比例加入到中草药废液中，于28℃，160rpm，通气量1.0-1.5vvm下进行好氧发酵5d，各所得菌剂总活菌数及对中草药废液成分的处理效果如下表1。
实施例5
实施例5用于说明本发明所述复合微生物菌剂在处理中草药废液中的应用。
将上述所得菌剂以体积比为0.05％的比例加入到中草药废液中，于28℃，160rpm，通气量1.0-1.5vvm下进行好氧发酵5d，各所得菌剂总活菌数及对中草药废液成分的处理效果如下表1。
表1
从表1中的效果数据可以看出，本发明的复合微生物菌剂对中草药废液中的COD、BOD、色度及总磷具有很好的去除作用，对病原菌的有很强的抑制作用。其中COD的最好去除率达到61.24％，BOD的去除率达到51.25％，色度的去除率达到40.21％，总磷的去除率达到43.5％，大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的数量最少可以控制在10CFU/mL和19CFU/mL。对比例中，菌剂对废液中各成分的处理效果弱于本实施例的处理效果。具体分析，由于本发明包含不同功能的微生物，各种微生物相互协同，能够有效的分解中草药废液中有机物、总磷、氨氮等物质，抑制病原微生物的生长繁殖，经处理的中草药废液中含有丰富的活性物质，能够作为生产复合微生物水溶性肥的原料，是能源得以循环利用，减少能源的损失和对环境的损坏。
虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (10)

1.一种复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂包括：枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、毕赤酵母和毛霉。
2.根据权利要求1所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂的总活菌数不低于3×108cfu/mL。
3.权利要求1或2所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂中：枯草芽孢杆菌的活菌数为1×108-6×108cfu/mL，巨大芽孢杆菌的活菌数为1.5×107-5×107cfu/mL，毕赤酵母的活菌数为2×108-4×108cfu/mL，毛霉的活菌数为1×106-4×106cfu/mL。
4.权利要求3所述的复合微生物菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌VTS‐2(Bacillussubtilis)，所述巨大芽孢杆菌为VTS‐1(Bacillusmegatherium)，所述毕赤酵母为毕赤酵母VTJ‐6(Pichiapastoris)，所述毛霉为犁头霉VTJ‐3(Absidia)。
5.权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)固体斜面培养：将枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨固体培养基中，毕赤酵母、毛霉分别接种于PDA固体培养基中培养，使菌株充分活化；
2)一级种子培养：将步骤1)中活化的枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，活化的毕赤酵母、毛霉分别接种于PDA培养基中培养，当液体培养菌密度OD600值达到0.6-0.8时停止培养，分别获得一级种子液；
3)二级种子培养：将所得枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌的一级种子液分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中培养，所得毕赤酵母、毛霉的一级种子液分别接种于PDA培养基中培养，分别获得二级种子液；
4)将步骤3)中获得的4种微生物的二级种子液分别接种于发酵培养基中，进行高密度发酵培养，得到菌剂A、B、C、D；
5)将菌剂A、B、C、D混合，即得复合微生物菌剂。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述菌剂A、B、C、D以1-3:1-3:1-3:2-3的体积比混合。
7.根据权利要求5或6所述的制备方法，其特征在于，步骤4)中所述的发酵培养基的配方按质量百分比为：糖蜜4-6％、玉米粉0.35-0.45％、硫酸铵0.5-0.7％，磷酸二氢钾0.05-0.15％，硫酸镁0.05-0.15％，余量为水，pH为7.0-7.2。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)的培养条件为在28-30℃下培养1-3天；所述步骤2)和3)的培养条件为在28-30℃，160-180rpm下培养1-3天；
所述步骤4)具体为：
枯草芽孢杆菌二级种子液以5-15％的接种量接种于发酵培养基中，于28-30℃，110-150rpm，通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养1-2d；
巨大芽孢杆菌二级种子液以5-15％的接种量接种于发酵培养基中，于28-30℃，160-200rpm，通气量1.0-1.5vvm下进行高密度发酵培养1-2d；
毕赤酵母二级种子液以10-20％的接种量接种于发酵培养基中，于28-30℃，110-150rpm，通气量0.8-1.0vvm下进行高密度发酵培养1-2d；
毛霉二级种子液以10-20％的接种量接种于发酵培养基中，于28-30℃，110-150rpm，通气量0.8-1.0vvm下进行高密度发酵培养1-2d。
9.权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂在处理中草药废液中的应用；
作为优选，将所述复合微生物菌剂以0.05％v/v的比例加入到中草药废液中，于28℃，160rpm，通气量1.0-1.5vvm下进行好氧发酵5d。
10.一种复合微生物水溶性肥，其特征在于，其原料来自经权利要求1-4任一项所述的复合微生物菌剂处理后的中草药废液。
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