CN105316318A - 一种用于pcr扩增的丝状真菌dna的提取方法 - Google Patents
一种用于pcr扩增的丝状真菌dna的提取方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105316318A CN105316318A CN201510918551.0A CN201510918551A CN105316318A CN 105316318 A CN105316318 A CN 105316318A CN 201510918551 A CN201510918551 A CN 201510918551A CN 105316318 A CN105316318 A CN 105316318A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- normal temperature
- under normal
- chloroform
- isoamyl alcohol
- extracting method
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法，包括吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml，生理盐水中，8000r/min离心5min；弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合均匀，再加入玻璃珠，于振荡器上震荡10min；65℃下水浴30min-40min；加等体积的氯仿/异戊醇混合液充分摇匀，常温下10000r离心5min；移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的氯仿/异戊醇混合液充分摇匀，常温下10000r离心5min。本发明具有提取方法操作简单，成本低，具有广阔的市场应用前景。
Description
技术领域
本发明属于生物工程技术领域，尤其涉及一种用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法。
背景技术
土壤丝状真菌广泛存在于自然界中，在工业、农业、医药以及基础生物学研究中具有重要作用，多年来一直被广泛的研究。由于真菌细胞壁成分复杂，难以得到充分裂解，真菌中富含的多糖、色素、核酸酶等物质使得核酸的分离更加困难，因此真菌破壁效率和效果直接影响到真菌DNA提取的效率和效果。已报道的真菌破壁方法有：液氮冷融(ManianS，SreenivasaprasadS，MillsPR.DNAextractionmethodforPCRinmycorrhizalfungi[J].LettApplMierobiol，2001，33(4)：307-310.)、-70℃冻融(GriffinDW，KeloggCA，PealKK，eta1.ArapidandeficientassayforextractionDNAfromfungi[J].LettApplMicmbiol，2002，34(3)：210-214.)、酶消解(WilliamsonEC，LeemingJP，PalmerHM，etal.Diagnosisofinvasiveaspergillosisinbonemarrowtransplantrecipientbypolymerasechainreaction[J].BrJHaematol，2000，108(1)：132—139)、超生破碎(HauglandRA，HeckmanJL，WymerLJ.EvaluationofdifferentmethodsfortheextractionofDNAfromfungalconidiabyquantitativecompetitivePCRanalysis[J].JMierebiolMethods，1999，37(2)：165—176.)、高盐溶液(DanilevichVN，GrishinEV.AnewapproachtotheisolationofgenomicDNAfromyeastandfungi：preparationofDNA-containingcellenvelopesandtheiruseinPCR[J].BicorKhim，2002，28(2)：156-167.)、尿素缓冲液处理(SansinforianoME，PadillaJA，HermosodeMendozaJ，atal.RapidandeasymethodtoextractandpreserveDNAfromCryptococeusneoformansAndotherpathogenicyeasts[J].Mycoses,1998,41(5-6):195-198)。
现有的方法步骤较为繁杂，所需试剂较多，需要较高的时间成本和经济成本，不能满足高通量的要求，因此，需要简化操作步骤，以便提高工作效率。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法，旨在解决现有的方法步骤较为繁杂，所需试剂较多，需要较高的时间成本和经济成本，不能满足高通量的要求的问题。
本发明是这样实现的，一种用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法，所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养，将所筛选的菌种接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的氯仿/异戊醇混合液，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
进一步，所述2×CTAB提取缓冲液含0.7mol/LNaCL，100mmol/LTris-HCLpH8.0，20mmol/LEDTA，20g/LCTAB。
进一步，所述TE缓冲液含10mmol/LTris-HC11mmol/LEDTApH8.0。
本发明的另一目的在于提供一种使用所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法的紫薇内生真菌DNA的提取方法，所述紫薇内生真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养：将所筛选的紫薇内生真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min；氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液溶解后在-20℃下保存备用。
本发明的另一目的在于提供一种使用所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法的白酒丝状真菌DNA的提取方法，所述白酒丝状真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养：将所筛选的白酒丝状真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min；氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液溶解后在-20℃下保存备用。
本发明的另一目的在于提供一种使用所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法的泡菜丝状真菌DNA的提取方法，所述泡菜丝状真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养：将所筛选的泡菜丝状真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液溶解后在-20℃下保存备用。
本发明的另一目的在于提供一种使用所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法的土壤丝状真菌DNA的提取方法，所述土壤丝状真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养：将所筛选的土壤丝状真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml，生理盐水中，8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液溶解后在-20℃下保存备用。
本发明提供的用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法，采用在CTAB方法上进行破壁改进，采用玻璃珠振荡法，对丝状真菌细胞进行破壁处理，可快速、有效的对丝状真菌DNA进行提取；且提取得到DNA完全满足PCR实验的要求，它具有提取方法操作简单，成本低，具有广阔的市场应用前景等优点。
附图说明
图1是本发明实施例提供的用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法流程图。
图2是本发明实施例提供的DNA扩增的真菌ITS片段示意图；
图中：1、紫薇内生真菌；2、白酒真菌；3、泡菜真菌；4、土壤真菌；M、marker。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。
如图1所示，本发明实施例的用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法包括以下步骤：
S101：菌种培养，将所筛选的菌种接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
S102：吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
S103：弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
S104：弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液(含0.7mol/LNaCL，100mmol/LTris-HCLpH8.0，20mmol/LEDTA，20g/LCTAB)混合均匀，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
S105：65℃下水浴30min-40min；
S106：加6000μL氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
S107：移取上清液至一新的Eppendorf管中，加等体积的的氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
S108：取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
S109：常温下10000r/min离心10min；
S110：弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE(含10mmol/LTris-HC11mmol/LEDTApH8.0)缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
下面结合具体实施例对本发明的应用原理作进一步的说明。
实例1：紫薇内生真菌DNA的提取
(1)菌种培养：将所筛选的紫薇内生真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
(2)吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
(3)弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
(4)弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液(含0.7mol/LNaCL,100mmol/LTris-HCLpH8.0,20mmol/LEDTA,20g/LCTAB)混合均匀，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
(5)65℃下水浴30min-40min；
(6)加6000μL氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
(7)移取上清液至一新的Eppendorf管中，加等体积的的氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
(8)取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
(9)常温下10000r/min离心10min；
(10)弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE(含10mmol/LTris-HC11mmol/LEDTApH8.0)缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
实例2：白酒丝状真菌DNA的提取
(1)菌种培养：将所筛选的白酒丝状真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
(2)吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
(3)弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
(4)弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液(含0.7mol/LNaCL,100mmol/LTris-HCLpH8.0,20mmol/LEDTA,20g/LCTAB)混合均匀，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
(5)65℃下水浴30min-40min；
(6)加6000μL氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
(7)移取上清液至一新的Eppendorf管中，加等体积的的氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
(8)取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
(9)常温下10000r/min离心10min；
(10)弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE(含10mmol/LTris-HC11mmol/LEDTApH8.0)缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
实例3：泡菜丝状真菌DNA的提取
(1)菌种培养：将所筛选的泡菜丝状真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
(2)吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
(3)弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
(4)弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液(含0.7mol/LNaCL,100mmol/LTris-HCLpH8.0,20mmol/LEDTA,20g/LCTAB)混合均匀，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
(5)65℃下水浴30min-40min；
(6)加6000μL氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
(7)移取上清液至一新的Eppendorf管中，加等体积的的氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
(8)取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
(9)常温下10000r/min离心10min；
(10)弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE(含10mmol/LTris-HC11mmol/LEDTApH8.0)缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
实例4：土壤丝状真菌DNA的提取
(1)菌种培养：将所筛选的土壤丝状真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
(2)吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
(3)弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml，生理盐水中，8000r/min离心5min；
(4)弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液(含0.7mol/LNaCL,100mmol/LTris-HCLpH8.0,20mmol/LEDTA,20g/LCTAB)混合均匀，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
(5)65℃下水浴30min-40min；
(6)加6000μL氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
(7)移取上清液至一新的Eppendorf管中，加等体积的的氯仿/异戊醇混合液(24：1)充分摇匀，常温下10000r离心5min；
(8)取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
(9)常温下10000r/min离心10min；
(10)弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE(含10mmol/LTris-HC11mmol/LEDTApH8.0)缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
图2是DNA扩增的真菌ITS片段示意图；图中：1、紫薇内生真菌；2、白酒真菌；3、泡菜真菌；4、土壤真菌；M、marker。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法，其特征在于，所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养，将所筛选的菌种接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的氯仿/异戊醇混合液，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
2.如权利要求1所述的用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法，其特征在于，所述2×CTAB提取缓冲液含0.7mol/LNaCL，100mmol/LTris-HCLpH8.0，20mmol/LEDTA，20g/LCTAB。
3.如权利要求1所述的用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法，其特征在于，所述TE缓冲液含10mmol/LTris-HC11mmol/LEDTApH8.0。
4.一种使用权利要求1-3任意一项所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法的紫薇内生真菌DNA的提取方法，其特征在于，所述紫薇内生真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养：将所筛选的紫薇内生真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的氯仿/异戊醇混合液，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
5.一种使用权利要求1-3任意一项所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法的白酒丝状真菌DNA的提取方法，其特征在于，所述白酒丝状真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养：将所筛选的白酒丝状真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的氯仿/异戊醇混合液，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
6.一种使用权利要求1-3任意一项所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法的泡菜丝状真菌DNA的提取方法，其特征在于，所述泡菜丝状真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养：将所筛选的泡菜丝状真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的氯仿/异戊醇混合液，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
7.一种使用权利要求1-3任意一项所述用于PCR扩增的丝状真菌DNA的提取方法的土壤丝状真菌DNA的提取方法，其特征在于，所述土壤丝状真菌DNA的提取方法包括：
菌种培养：将所筛选的土壤丝状真菌接种在PDA液体培养基中，28℃震荡培养48h；
吸取1ml菌液到无菌EP管中，常温下10000r/min离心5min；
弃去上清液，将沉淀重悬于0.8ml生理盐水中8000r/min离心5min；
弃去上清液，向EP管内加入6000μL2×CTAB提取缓冲液混合，再加入1g玻璃珠，于振荡器上震荡10min；
65℃下水浴30min-40min；
加6000μL的氯仿/异戊醇混合液摇匀，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
移取上清液至Eppendorf管中，加等体积的氯仿/异戊醇混合液，常温下10000r离心5min，氯仿/异戊醇混合液体积比为24：1；
取上清液，加入6000μL冰冻乙醇，静置30min；
常温下10000r/min离心10min；
弃上清液，用70％的乙醇洗2-3次，晾干，加6000μLTE缓冲液充分溶解后在-20℃下保存备用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510918551.0A CN105316318A (zh) | 2015-12-10 | 2015-12-10 | 一种用于pcr扩增的丝状真菌dna的提取方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510918551.0A CN105316318A (zh) | 2015-12-10 | 2015-12-10 | 一种用于pcr扩增的丝状真菌dna的提取方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105316318A true CN105316318A (zh) | 2016-02-10 |
Family
ID=55244636
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510918551.0A Pending CN105316318A (zh) | 2015-12-10 | 2015-12-10 | 一种用于pcr扩增的丝状真菌dna的提取方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105316318A (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102102098A (zh) * | 2009-12-16 | 2011-06-22 | 西南民族大学 | 一种改良的酚-氯仿法提取真菌dna |
| CN104946628A (zh) * | 2015-06-29 | 2015-09-30 | 河北科技大学 | 丝状真菌基因组的提取方法 |
-
2015
- 2015-12-10 CN CN201510918551.0A patent/CN105316318A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102102098A (zh) * | 2009-12-16 | 2011-06-22 | 西南民族大学 | 一种改良的酚-氯仿法提取真菌dna |
| CN104946628A (zh) * | 2015-06-29 | 2015-09-30 | 河北科技大学 | 丝状真菌基因组的提取方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 张晓娟等: "浓香型白酒酒醅可培养真菌的分离、鉴定及系统发育研究", 《酿酒科技》 * |
| 韩利刚等: "丝状真菌组织DNA的提取", 《生物技术》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Walker et al. | RNA purification–precipitation methods | |
| CN103361339B (zh) | 一种提取丝状真菌基因组dna的方法及试剂盒和遗传转化子的快速筛选方法 | |
| CN204429843U (zh) | 一种异位处理污染土壤的搅拌淋洗装置 | |
| CN102286467B (zh) | 一种提取森林土壤和凋落物中微生物总rna的方法 | |
| CN104178431A (zh) | 一种提取土生隐球酵母线粒体的方法 | |
| CN204237790U (zh) | 一种病毒采样管 | |
| CN106047865A (zh) | 一种从中国白酒发酵酒醅中提取总rna的方法 | |
| CN105316318A (zh) | 一种用于pcr扩增的丝状真菌dna的提取方法 | |
| CN105002165A (zh) | 通过预处理提高大曲高粱酒醅总dna提取质量的方法 | |
| CN103695413B (zh) | 一种丝状真菌基因组dna提取的破壁方法 | |
| CN213680675U (zh) | 一种病毒运送保存管 | |
| CN206033779U (zh) | 一种长效抗菌皮革 | |
| CN208003179U (zh) | 一种膀胱冲洗引流装置 | |
| CN101402995B (zh) | 利用分子标记技术鉴定猴头菇菌种猴王的方法 | |
| CN203065472U (zh) | 一种枪头 | |
| CN103571939A (zh) | 从临床标本中检测结核菌感染的荧光定量pcr方法 | |
| CN203890362U (zh) | 用于毛细管培养法检测微生物的装置 | |
| CN204022828U (zh) | 萃取核酸分子的装置 | |
| CN111979108A (zh) | 一种病毒运送保存管、制作方法及病毒运送保存方法 | |
| CN102168130A (zh) | 用于检测耐甲氧西林葡萄球菌的引物组合物、试剂盒及方法 | |
| CN202530084U (zh) | 一种用于细胞接种的离心管 | |
| CN207137941U (zh) | 一种引流棒结构 | |
| CN104178482A (zh) | 从浓香型大曲中提取微生物总dna的方法 | |
| CN103194440A (zh) | 一种从酿酒酵母细胞中高效提取高分子量基因组的方法 | |
| CN201512539U (zh) | 硅胶膜型dna快速提取及保存试剂盒 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20160210 |