CN105267271A - 一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物及其制备方法和用途,该中药组合物由以下按照重量份的原料组成:刺五加10-18份、桑寄生22-30份、线叶蓟3-8份。刺五加加水浸泡、提取2次、合并滤液、减压浓缩、加乙醇、静置、过滤、加热溶解、加蒸馏水,制得刺五加药水;桑寄生、线叶蓟加水,蒸馏提取,制得混合滤液;将刺五加药水与混合滤液混合搅匀,调pH、过微孔薄膜、灭菌即得。本发明能调整免疫系统,增强免疫功能,抗炎、抗病毒,能有效地防止复发,缩短疗程,降低复发率,减少并发症,加快视力恢复;具有疗效显著、安全、价廉、清热解毒、明目退翳等优点。

Description

一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及医药领域,具体是一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物及其制备方法和用途。
背景技术
病毒性角膜炎是受病毒致病原感染角膜而引起的炎症。角膜浅层有丰富的三叉神经末梢,故该病常有明显的刺激症状,有畏光、流泪、酸痛等。角膜本属透明,一旦有病,则其透明度发生改变,病人常主诉有视物模糊。该病一般沿三叉神经发病,病变部位侵犯较深,其感觉减退,但因炎症刺激角膜病变的邻近组织,因此刺激症状仍较明显。病毒性角膜炎,病程牧长,愈后且易复发。常可伴有葡萄膜反应,甚至出现虹膜睫状体炎、前房积脓,或继发青光眼,是临床上较为常见的致盲眼病之一。病毒性角膜炎可由多种病毒引起,其临床表现轻重不等,对视力的损害程度视病变位置、炎症轻重、病程长短、复发次数和有无混合感染而不同。
临床治疗此病的药物品种繁多,虽然有清热解毒、明目退翳作用,但效果不稳定,易复发,且副作用大,不适合病人长期服用。
临床上常见的病毒性角膜炎有单纯疱疹性角膜炎、牛痘性角膜炎、带状疱疹性角膜炎等。单纯疱疹病毒引起的角膜炎,按抗原性及生物学特性将病毒区分为Ⅰ型和Ⅱ型。单疱病毒引起的角膜病变可侵及角膜各层,且相互转化,多见的典型形态为树枝状、地图状、盘状、角膜色素膜炎等。西医对单纯疱疹病毒性角膜炎的治疗以化学合成的核苷类抗病毒药物为主,但是此类药物极易产生耐药性,临床应用效果欠佳,尤其对反复不愈的单纯疱疹病毒性角膜炎疗效更佳不理想。
中药中刺五加根皮含挥发油、鞣质、棕桐酸、亚麻仁油酸、维生素A,维生素B1。用于风湿痹痛、腰膝酸痛、水肿、小便不利、神经衰弱等。桑寄生中含黄酮类化合物:槲皮素,槲皮甙及少量的右旋儿茶酚。补肝肾,强筋骨,除风湿,通经络,益血,安胎。治腰膝酸痛,筋骨痿弱,偏枯,脚气,风寒湿痹,胎漏血崩,产后乳汁不下。治久咳,舌纵眩晕。线叶蓟味酸;性温。功能主治:活血散瘀;解毒消肿。主月经不调;闭经;痛经;乳腺炎;跌打损伤;尿路感染;痈疖;痈;神经性皮炎;毒蛇咬伤。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物及其制备方法和用途,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物,由以下按照重量份的原料组成:刺五加10-18份、桑寄生22-30份、线叶蓟3-8份。
作为本发明进一步的方案:所述治疗病毒性角膜炎的中药组合物,由以下按照重量份的原料组成:刺五加13-15份、桑寄生24-27份、线叶蓟5-7份。
作为本发明进一步的方案:所述治疗病毒性角膜炎的中药组合物,由以下按照重量份的原料组成:刺五加14份、桑寄生25份、线叶蓟6份。
所述治疗病毒性角膜炎的中药组合物的制备方法,由以下步骤组成:
1)刺五加加水浸泡2h,回流提取2次,第一次8倍量水提取3h,第二次6倍量水提取2.5h,过滤,合并两次滤液,于75℃减压浓缩至相对密度1.15,浓缩液放至室温,搅拌下加入乙醇使含醇量达到80%,静置24h以上,过滤,取沉淀物,加热溶解,加入刺五加质量5倍的蒸馏水,制得刺五加药水;
2)桑寄生、线叶蓟加入二者质量8倍量的水,蒸馏提取,制得混合滤液;
3)将刺五加药水与混合滤液混合搅匀,调pH至7.0,混匀,过0.30μm微孔薄膜,灌封于容器中,100℃灭菌20分钟,即得治疗病毒性角膜炎的中药组合物。
所述中药组合物在制备治疗病毒性角膜炎的药物中的用途。
所述病毒性角膜炎为单纯疱疹病毒性角膜炎。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明的中药组合物在各原料的相互配伍下能调整免疫系统,增强免疫功能,抗炎、抗病毒,能有效地防止复发病毒性角膜炎,与单纯西医治疗相比明显提高疗效,缩短疗程,降低复发率,减少并发症,加快视力恢复;特别适用于治疗单纯疱疹病毒性角膜炎。具有疗效显著、安全、价廉、清热解毒、明目退翳等优点。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明实施例中,一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物,由以下按照重量份的原料组成:刺五加10份、桑寄生22份、线叶蓟3份。刺五加加水浸泡2h,回流提取2次,第一次8倍量水提取3h,第二次6倍量水提取2.5h,过滤,合并两次滤液,于75℃减压浓缩至相对密度1.15,浓缩液放至室温,搅拌下加入乙醇使含醇量达到80%,静置24h以上,过滤,取沉淀物,加热溶解,加入刺五加质量5倍的蒸馏水,制得刺五加药水。桑寄生、线叶蓟加入二者质量8倍量的水,蒸馏提取,制得混合滤液。将刺五加药水与混合滤液混合搅匀,调pH至7.0,混匀,过0.30μm微孔薄膜,灌封于容器中,100℃灭菌20分钟,即得治疗病毒性角膜炎的中药组合物。
实施例2
本发明实施例中,一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物,由以下按照重量份的原料组成:刺五加18份、桑寄生30份、线叶蓟8份。制备过程与实施例1一致。
实施例3
本发明实施例中,一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物,由以下按照重量份的原料组成:刺五加13份、桑寄生24份、线叶蓟5份。制备过程与实施例1一致。
实施例4
本发明实施例中,一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物,由以下按照重量份的原料组成:刺五加15份、桑寄生27份、线叶蓟7份。制备过程与实施例1一致。
实施例5
本发明实施例中,一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物,由以下按照重量份的原料组成:刺五加14份、桑寄生25份、线叶蓟6份。制备过程与实施例1一致。
为了验证本发明的效果,利用单纯疱疹病毒性角膜炎对其进行研究。具体如下。
实施例6本发明中药组合物的毒性实验研究
毒性实验
取豚鼠100只(由青岛市实验动物和动物实验中心提供),雌雄各半,体重为250g~300g,分成5组,每组20只,给药前24h用脱毛剂在大鼠脊柱旁进行脱毛(约4cm×5cm),将实施例1制备的中药组合物多次均匀涂抹在第1组的脱毛区,将实施例2制备的中药组合物多次均匀涂抹在第2组的脱毛区,将实施例3制备的中药组合物多次均匀涂抹在第3组的脱毛区,将实施例4制备的中药组合物多次均匀涂抹在第4组的脱毛区,将实施例5制备的中药组合物多次均匀涂抹在第5组的脱毛区,每只动物按照7.5mL/kg剂量涂抹给药(经过反复试验,7.5mL/kg为该浸膏的最大给药量),涂敷24h后,用温水擦拭残留的受试物。
给药后,各组大鼠连续观察14d,每天观察1~2次,并于给药前及给药后7d,14d称体质量,主要观察给药后动物的全身反应,包括皮毛、眼睛、口腔黏膜、呼吸、自主活动、肌张力等,有无颤抖、震颤、抽搐、流涎、腹泻、少动、精神萎靡不振、昏迷等毒性反应症状。记录有无死亡,若有死亡应立即进行尸检,若肉眼检查有明显异常时,进一步进行病理组织学检查。
给药当日,大鼠清醒,连续观察14d,各组大鼠皮毛均有光泽,眼睛无分泌物出现,口腔黏膜无溃烂、充血和红肿等刺激症状,能自主活动,行为无改变,均无烦躁等异常精神状态及全身中毒症状,14d后处死动物,解剖,肉眼观察各主要脏器,皮肤及脏器均无明显病理改变。
将给药处皮肤和不给药处皮肤取样后立即放入福尔马林中固定,常规采样,蜡埋,切片,制片,脱蜡,HE染色,封片,于显微镜下检查并摄影。镜下可见,给药处与不给药处皮肤表皮层与真皮层组织结构完整,间质无充血、水肿及炎性细胞浸润。
皮肤刺激性实验
取豚鼠50只,雌雄各半,随机分为完整皮肤组和破损皮肤组,每组10只。用基质(75%乙醇)作为阴性对照,同体左右侧自身对比法。试验前24h将豚鼠背部剃毛,去毛范围左右各约3cm×3cm。破损皮肤组将脱毛部位用注射针头划“井”字并以出现渗血为度。将实施例1制备的中药组合物多次均匀涂抹在第1组的脱毛区,将实施例2制备的中药组合物多次均匀涂抹在第2组的脱毛区,将实施例3制备的中药组合物多次均匀涂抹在第3组的脱毛区,将实施例4制备的中药组合物多次均匀涂抹在第4组的脱毛区,将实施例5制备的中药组合物多次均匀涂抹在第5组的脱毛区,每只动物按照1.5g涂抹于左侧去毛皮肤上,另一侧涂抹同样体积的基质对照。按上法每天给药1次,共7d,每次涂药部位一致。
观察指标和评价标准:
每次涂药前,在自然光线下观察并记录涂药部位有无红斑、水肿、色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况及其发生时间及消退时间,并按表1对红斑及水肿进行评分。
表1皮肤刺激反应评分标准
刺激反应 分值
红斑
无红斑 0
轻度红斑(勉强可见) 1
中度红斑(明显可见) 2
重度红斑 3
紫红色红斑到轻度焦痂形成 4
水肿
无水肿 0
轻度水肿(勉强可见) 1
中度水肿(明显隆起) 2
重度水肿(皮肤隆起1mm,轮廓清楚) 3
严重水肿(皮肤隆起1mm以上并有扩大) 4
表2皮肤刺激强度评价标准
分值 评价
0-0.49 无刺激性
0.5-2.99 轻度刺激性
3-5.99 中度刺激性
6-8 重度刺激性
给药期间各组动物一般状态、行为、体征等未见异常。各组动物给药部位均未见红斑及水肿等异常症状。各组动物给药及观察期间刺激性分值和刺激性强度评价结果见表3和表4。
表3各组药物对豚鼠正常皮肤刺激性反应情况
表4各组药物对豚鼠破损皮肤刺激性反应情况
从表3和表4可以看出,本发明的中药组合物对正常皮肤和破损皮肤均没有刺激性。
实施例7动物实验
仪器
显微镜XSP-BM19A:上海光学仪器六厂生产;TGL-16G高速离心机:上海安宁科学仪器厂;-86℃海尔超低温冰箱;小鼠灌胃器;JEM21230透射电镜:日本电子有限公司;Bio-Rcd2550酶标仪:美国Becman公司。
试剂与药品
本发明实施例1制备的中药组合物;单纯疱疹病毒I型SM44株(中国协和医科大学提供);补体致敏酵母菌冻干试剂及未致敏酵母菌冻干试剂(山东大学提供);水合氯醛溶液、0.25%戊二醛溶液、10%福尔马林溶液等。
实验动物
鼠龄为3~5周,体质量17~23g的健康清洁级雌性小鼠60只。由由青岛市实验动物和动物实验中心提供,动物房温度(20.0±3.0)℃,自然光照,喂饲以灭菌颗粒饲料,饮用消毒处理的自来水,动物自由摄食饮水,各组小鼠在实验期间按组分笼饲养。
造模方法
小鼠适应环境1周后,同时予每只小鼠双眼点0.25%氯霉素眼药水,2次/d。第二周开始将实验小鼠用水合氯醛0.06m1腹腔注射麻醉后,置于显微镜下,用25号无菌手术刀片交叉划伤右眼角膜上皮层,将5μl含有1×107PFU病毒的无菌最小基础培养基(MEM)点于右眼角膜表面并轻轻按摩鼠眼睑30s。造模前后分别予小鼠角膜荧光素钠染色并用裂隙灯显微镜检查角膜改变。小鼠角膜感染病毒后18h荧光素钠染色,裂隙灯显微镜下检查角膜改变。发现原发角膜感染表现为急性上皮型角膜炎,小鼠角膜出现点状、片状上皮缺损,荧光素钠染色阳性,单纯疱疹病毒性角膜炎小鼠造模成功。
分组及给药
将造模成功的小鼠45只随机分为三组,分为模型组、治疗组和空白组,每组15只。造模后第2天开始给药,将中药组合物以及生理盐水等分别滴入各组动物眼结膜囊内,给药后使眼睛被动闭合3~5s。实验第1~3天,每1~2h用药1次,每次1滴,每天8~10次;以后每天6~8次,每次1滴,连续给药三周。
小鼠状况的观察与红细胞C3b受体活性表达的测定
小鼠角膜接种HSV-I后用2%荧光素钠生理盐水溶液滴双眼染色,闭眼1min,裂隙灯显微观察角膜病变,用药后第7、14、21天,以2%荧光素钠生理盐水溶液滴双眼染色,闭眼1min,裂隙灯显微观察角膜病变,角膜上皮点状、树枝状、地图状着色及基质混浊。
病变程度判断标准:以0至4计分:0分:无着色和混浊;1分:着色和混浊的范围为角膜面积的1/4以内;2分:着色和混浊的范围为角膜面积的1/4~1/2之间;3分:着色和混浊的范围为角膜面积的1/2~3/4之间;4分:着色和混浊的范围为角膜面积的3/4以上。
末次给药12h后,将小鼠水合氯醛腹腔麻醉,眼球放入10%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋。摘眼球取血,血液放入抗凝试管,离心去上清后,低温冰箱保存,进行红细胞C3b受体花环率实验。
统计方法
用SPSSforWindows10.0版软件进行统计处理。计量资料采用t检验,计数资料采用x2检验。
结果
各组小鼠角膜病变综合疗效比较,结果见表5。
表5各组小鼠病变综合疗效评分比较
组别 造模前 7d 14d 21d
空白组 0±0 0±0 0±0 0±0
模型组 0±0 2.45±0.94 2.71±1.04 2.90±0.86
治疗组 0±0 1.22±0.57 0.55±0.27 0.11±0.08
从表5可以看出,采用本发明的中药组合物在角膜病变方面与模型组相比,角膜病变程度明显减轻,证明对角膜病变具有良好的改善。
各组小鼠用药后红细胞C3b受体活性水平的比较,结果见表6。
表6各组小鼠用药后红细胞C3b受体活性水平比较
组别 红细胞C3b受体花环率(%)
空白组 20.09±1.58
模型组 13.65±1.01
治疗组 21.71±1.37
红细胞不仅能黏附和运转有害的免疫复合物,而且能浓缩抗原,将抗原传递给T淋巴细胞,增强和活化T淋巴细胞的免疫反应,从表6可以看出,经过造模后,小鼠红细胞C3b受体花环率显著降低,采用本发明的治疗组对模型治疗后能够显著提高红细胞C3b受体花环率。
实施例8临床资料
一般资料
入选400例患者全部为单眼发病患者,男205例,女195例,发病时间最短者4天,最长18个月;年龄18~49岁,随即分为治疗1-5组及对照1-3组,每组50例,各组无显著差异,具有可比性。
诊断标准
单纯疱疹病毒性角膜炎的诊断及中医辨证参照国家中医药管理局《中医病症诊断疗效标准·聚星障》拟定。1.角膜星点翳障,或聚或散,或连缀成片,形如树枝或地图状。抱轮红赤;2.干涩畏光,刺痛流泪,视物模糊;3.角膜荧光素染色阳性;4.病变区角膜知觉减退;5.常有外感风热或眼部外伤等诱因;6.全身或伴鼻塞、头痛、咽痛,舌红,苔薄黄,脉浮数或弦数。
纳入标准
1.角膜荧光素染色后,裂隙灯检查角膜出现树枝状及地图状浅层着色者;2.有畏光、流泪、结膜充血等刺激症状,并自觉疼痛者;3.常有相同部位角膜炎反复发作史;4.先有树枝状或地图状角膜炎史,之后出现角膜基质层圆盘状混浊。
排除标准
1.角膜出现深层坏死性溃疡及严重葡萄膜并发症者不列入治疗对象;2.有严重胃肠、肝、肾疾病者不列入治疗对象;3.未按规定用药,无法判断疗效或资料不全影响疗效者。
治疗方法
治疗1-5组分别采用本发明实施例1-5制备的中药组合物,每1~2h用药1次,每次1~2滴,每日8~10次,1周1个疗程,连续使用4个疗程。
对照1组采用0.1%阿昔洛韦液滴眼液点患眼,每次2滴,每日6~8次,两次间隔时间约2h,1周为1疗程,连用4个疗程。
对照2组仅含有刺五加、桑寄生,其余条件与实施例5一致。每1~2h用药1次,每次1~2滴,每日8~10次,1周1个疗程,连续使用4个疗程。
对照3组仅含有线叶蓟,其余条件与实施例5一致。每1~2h用药1次,每次1~2滴,每日8~10次,1周1个疗程,连续使用4个疗程。
治疗期间,不再使用其他的药物治疗。
观察方法
每一疗程后分别查视力及裂隙灯显微镜荧光染色检查局部病变情况,并用专用表格记录。4疗程共28天治疗后汇总治疗结果专人保管。待全部病例完成后进行统计学处理。各组均严格控制可变因素,治疗时未加用其他影响疗效的药物和方法。实验中采用单盲法,全部试验过程符合医德要求。
疗效标准
参照国家中医药管理局《中医病证诊断疗效标准·聚星障》。痊愈:角膜星翳及症状消失,荧光素染色(-);好转:角膜星翳减少或缩小,荧光素染色(+),畏光刺痛,红赤流泪等症状减轻;无效:角膜星翳无变化或加重,荧光素染色阳性,症状无改善。
统计方法
用SPSSforWindows10.0版软件进行统计处理。计量资料采用t检验,计数资料采用x2检验。
结果疗效比较见表7。
表7各组疗效比较
组别 眼数(只) 痊愈(只) 好转(只) 无效(只) 总有效率(%)
治疗1组 50 40 8 2 96
治疗2组 50 43 6 1 98
治疗3组 50 45 4 1 98
治疗4组 50 45 5 0 100
治疗5组 50 48 2 0 100
对照1组 50 32 10 8 84
对照2组 50 5 13 32 36
对照3组 50 0 8 42 16
从表7可以看出,采用本发明制备的中药组合物能明显提高单纯疱疹病毒性角膜炎的治疗疗效。
治疗前后视力比较,结果见表8。
表8各组治疗前后视力比较
从表8可以看出,采用本发明的中药组合物的患者的视力相对于对照1-3组,具有较为显著的上升。
疗程比较,见表9。
表9各组疗程比较
组别 眼数(只) 疗效开始时间(天) 疗程(天)
治疗1组 50 3.32±1.05 15.32±2.07
治疗2组 50 3.25±1.01 15.10±1.95
治疗3组 50 3.17±1.00 15.06±1.84
治疗4组 50 3.15±1.05 15.03±1.89
治疗5组 50 3.15±1.02 15.08±1.92
对照1组 50 5.70±0.76 22.41±2.95
对照2组 50 5.91±1.03 23.41±2.21
对照3组 50 6.32±1.25 24.16±3.01
表9可以看出,采用本发明的中药组合物的治疗时间和起效时间要少于对照1-3组,证明,本发明的见效时间更短,疗效更好。
复发情况比较
痊愈1年后随机跟踪病例复发情况比较,结果见表10。
表10各组痊愈患者跟踪1年后病例复发情况比较
组别 随机跟踪的痊愈病例 复发病例
治疗1组 35 1
治疗2组 36 1
治疗3组 36 0
治疗4组 36 0
治疗5组 38 0
对照1组 30 5
对照2组 3 3
对照3组 0 -
表10可以看出,采用本发明的患者复发情况要显著低于对照1-3组的患者。
实施例9病例
宋某,女,69岁。左眼患单纯疱疹病毒性角膜炎,反复迁延不愈1年余,常在劳累、感冒后加重,常用更昔洛韦眼液、贝复舒眼液滴眼,未见明显效果。现左眼视物不清,疼痛,畏光,流泪。检查:视力右眼0.6,左眼0.2,左眼球结膜混合充血明显,角膜鼻侧呈地图状混浊,周围浸润水肿并侵入瞳孔区,荧光素染色阳性。右眼无异常。诊断:左眼单纯疱疹病毒性角膜炎,采用本发明制备的中药组合物滴入患病眼处,每1~2h用药1次,每次1~2滴,每日8~10次,治疗7天后,自觉症状好转,继用7天后,刺激症状明显减轻,继续巩固治疗2周后,检查:视力右眼0.6,左眼0.5;左眼角膜染色阴性。
对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (6)

1.一种治疗病毒性角膜炎的中药组合物,其特征在于,由以下按照重量份的原料组成:刺五加10-18份、桑寄生22-30份、线叶蓟3-8份。
2.根据权利要求1所述的治疗病毒性角膜炎的中药组合物,其特征在于,由以下按照重量份的原料组成:刺五加13-15份、桑寄生24-27份、线叶蓟5-7份。
3.根据权利要求2所述的治疗病毒性角膜炎的中药组合物,其特征在于,由以下按照重量份的原料组成:刺五加14份、桑寄生25份、线叶蓟6份。
4.根据权利要求1-3任一所述治疗病毒性角膜炎的中药组合物的制备方法,其特征在于,由以下步骤组成:
1)刺五加加水浸泡2h,回流提取2次,第一次8倍量水提取3h,第二次6倍量水提取2.5h,过滤,合并两次滤液,于75℃减压浓缩至相对密度1.15,浓缩液放至室温,搅拌下加入乙醇使含醇量达到80%,静置24h以上,过滤,取沉淀物,加热溶解,加入刺五加质量5倍的蒸馏水,制得刺五加药水;
2)桑寄生、线叶蓟加入二者质量8倍量的水,蒸馏提取,制得混合滤液;
3)将刺五加药水与混合滤液混合搅匀,调pH至7.0,混匀,过0.30μm微孔薄膜,灌封于容器中,100℃灭菌20分钟,即得治疗病毒性角膜炎的中药组合物。
5.根据权利要求1-3任一所述中药组合物在制备治疗病毒性角膜炎的药物中的用途。
6.根据权利要求5所述中药组合物在制备治疗病毒性角膜炎的药物中的用途,其特征在于,所述病毒性角膜炎为单纯疱疹病毒性角膜炎。
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