CN105210877A - 一种龙牙百合快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种龙牙百合快速繁殖方法,包括如下步骤:取龙牙百合种球,不定芽的诱导生长培养,获得带有不定芽丛的组织块,诱导生根培养获得龙牙百合幼苗。本发明的有益效果是:本发明的方法再生效率增高,出芽率为100%左右,污染率降低,培养过程中不会出现反复污染的情况,通过调节培养基条件可提高诱导率并缩短再生周期,有效提高龙牙百合的品质和产量。
Description
技术领域
本发明涉及生物药材龙牙百合种子繁育扩种方法,该技术直接应用于生物药材繁育扩种,尤其涉及一种龙牙百合快速繁殖方法。
背景技术
龙牙百合,栽种于江西(万载、永丰中西山)、湖南(隆回、安化)等地,其中江西万载白水乡尤为知名,龙牙百合在万载是久负盛名的物产,种植历史据县志记载可追溯至宋朝,其龙牙百合产品是历朝历代的贡品;龙牙百合是白花百合中的优良品种,也是营养最好的品种。百合(白花百合)鳞茎球形,横径2-2.4厘米,鳞片披针形,白色,曝晒时呈黄白色或稍带粉红色。淀粉含量高,营养丰富,味淡不苦,地上茎高约100厘米,叶散生,倒披针形。花乳白色有香气,能结实产生种子。
龙牙百合鳞片是最为常用的快速繁殖的组培材料。研究表明,龙牙百合叶片和子房也可以再生形成小苗。以鳞茎为外植体进行再生虽然取材相对较方便,但由于鳞茎带菌严重,常常导致消毒不彻底,培养过程中反复污染现象非常严重,增大工作量,而且以鳞片为外植体再生效率并不十分理想。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供,提供一种龙牙百合快速繁殖方法。本发明的方法再生效率增高,污染率降低,通过调节培养基条件提高了诱导率,缩短了再生周期,此再生体系适用于多个龙牙百合品种。
本发明解决上述技术问题的技术方案如下:一种龙牙百合快速繁殖方法,包括如下步骤:
1)取露地种植2~3个月的龙牙百合种球,选取健康完好的种球,剥除外层鳞片;
2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为5%~7%的高锰酸钾溶液中浸泡15~20min后,用清水洗净;
3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽,平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养,获得带有不定芽丛的组织块;
4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块,在芽伸长培养基上进行芽伸长培养;
5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时,进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养,获得龙牙百合种球。
本发明的有益效果是:本发明的方法利用龙牙百合的幼嫩小花瓣片为外植体,直接再生大量不定芽,继而得到再生苗,与使用鳞片作为外植体进行组织培养相比,本发明的方法再生效率增高,出芽率为100%左右,平均每个外植体诱导再生的芽数量可达20个左右,污染率降低,培养过程中不会出现反复污染的情况,通过调节培养基条件可提高诱导率并缩短再生周期。
在上述技术方案的基础上,本发明还可以做如下改进。
进一步,所述MS固体培养基为MS+BA1.8~2.2mg/L+NAA0.8~1.2mg/L,pH5.8,蔗糖28~32g/L,琼脂4~6g/L。
进一步,所述芽伸长培养基为MS+BA0.3~0.7mg/L+NAA0.8~1.2mg/L,pH5.8,蔗糖28~32g/L,琼脂4~6g/L。
进一步,所述生根培养基为MS+BA0.3~0.7mg/L+NAA0.8~1.2mg/L,pH5.8,蔗糖28~32g/L,琼脂4~6g/L。
进一步,步骤2)中,所述诱导生长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
进一步,步骤3)中,所述芽伸长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
进一步,步骤4)中,所述诱导生根培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的原理和特征进行描述,所举实例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。
实施例一
一种龙牙百合快速繁殖方法,包括如下步骤:
1)取露地种植2个月的龙牙百合种球,选取健康完好的种球,剥除外层鳞片;
2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为5%的高锰酸钾溶液中浸泡15min后,用清水洗净;
3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽,平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养,获得带有不定芽丛的组织块;
4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块,在芽伸长培养基上进行芽伸长培养;
5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时,进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养,获得龙牙百合种球。
所述MS固体培养基为MS+BA1.8mg/L+NAA0.8mg/L,pH5.8,蔗糖28g/L,琼脂4g/L。
所述芽伸长培养基为MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L,pH5.8,蔗糖28g/L,琼脂4g/L。
所述生根培养基为MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L,pH5.8,蔗糖28g/L,琼脂4g/L。
步骤2)中,所述诱导生长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
步骤3)中,所述芽伸长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
步骤4)中,所述诱导生根培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
实施例二
一种龙牙百合快速繁殖方法,包括如下步骤:
1)取露地种植2.5个月的龙牙百合种球,选取健康完好的种球,剥除外层鳞片;
2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为6%的高锰酸钾溶液中浸泡18min后,用清水洗净;
3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽,平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养,获得带有不定芽丛的组织块;
4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块,在芽伸长培养基上进行芽伸长培养;
5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时,进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养,获得龙牙百合种球。
所述MS固体培养基为MS+BA2.2mg/L+NAA1.2mg/L,pH5.8,蔗糖32g/L,琼脂6g/L。
所述芽伸长培养基为MS+BA0.7mg/L+NAA1.2mg/L,pH5.8,蔗糖32g/L,琼脂6g/L。
所述生根培养基为MS+BA0.7mg/L+NAA1.2mg/L,pH5.8,蔗糖32g/L,琼脂6g/L。
步骤2)中,所述诱导生长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
步骤3)中,所述芽伸长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
步骤4)中,所述诱导生根培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
实施例三
一种龙牙百合快速繁殖方法,包括如下步骤:
1)取露地种植3个月的龙牙百合种球,选取健康完好的种球,剥除外层鳞片;
2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为7%的高锰酸钾溶液中浸泡20min后,用清水洗净;
3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽,平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养,获得带有不定芽丛的组织块;
4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块,在芽伸长培养基上进行芽伸长培养;
5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时,进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养,获得龙牙百合种球。
所述MS固体培养基为MS+BA2.0mg/L+NAA1.0mg/L,pH5.8,蔗糖30g/L,琼脂5g/L。
所述芽伸长培养基为MS+BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L,pH5.8,蔗糖30g/L,琼脂5g/L。
所述生根培养基为MS+BA0.5mg/L+NAA1.0mg/L,pH5.8,蔗糖30g/L,琼脂5g/L。
步骤2)中,所述诱导生长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
步骤3)中,所述芽伸长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
步骤4)中,所述诱导生根培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
以上所述仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种龙牙百合快速繁殖方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)取露地种植2~3个月的龙牙百合种球,选取健康完好的种球,剥除外层鳞片;
2)将步骤1)中获得的种球鳞片浓度为5%~7%的高锰酸钾溶液中浸泡15~20min后,用清水洗净;
3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽,平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养,获得带有不定芽丛的组织块;
4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块,在芽伸长培养基上进行芽伸长培养;
5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时,进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养,获得龙牙百合种球。
2.如权利要求1所述的一种龙牙百合快速繁殖方法,其特征在于,所述MS固体培养基为MS+BA1.8~2.2mg/L+NAA0.8~1.2mg/L,pH5.8,蔗糖28~32g/L,琼脂4~6g/L。
3.如权利要求2所述的一种龙牙百合快速繁殖方法,其特征在于,所述芽伸长培养基为MS+BA0.3~0.7mg/L+NAA0.8~1.2mg/L,pH5.8,蔗糖28~32g/L,琼脂4~6g/L。
4.如权利要求3所述的一种龙牙百合快速繁殖方法,其特征在于,所述生根培养基为MS+BA0.3~0.7mg/L+NAA0.8~1.2mg/L,pH5.8,蔗糖28~32g/L,琼脂4~6g/L。
5.如权利要求4所述的一种龙牙百合快速繁殖方法,其特征在于,步骤2)中,所述诱导生长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
6.如权利要求5所述的一种龙牙百合快速繁殖方法,其特征在于,步骤3)中,所述芽伸长培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
7.如权利要求6所述的一种龙牙百合快速繁殖方法,其特征在于,步骤4)中,所述诱导生根培养的条件为:温度25℃,光照:14光期/7暗期。
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