CN105193857A - 一种人工培养口腔细菌移植在口腔疾病治疗中的应用 - Google Patents
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Abstract
一种人工培养口腔细菌移植在口腔疾病治疗中的应用，其特征是通过采集经过多项条件筛选的健康人群口腔内细菌样品，如至少近3-6个月内没有使用过抗生素、无口腔疾病、没有不良生活习惯等多项筛选条件；采用平板分离技术，分别在厌氧和需氧的条件下培养，挑选可培养的口腔内益生菌群；获得的益生菌制成喷剂，用于口腔疾病的治疗。该发明采用细菌间的拮抗作用替代抗生素及其他药物，通过恢复口腔微生态平衡来达到治疗和预防口腔疾病的效果；且喷剂的治疗形式简单、安全，适用于各类口腔疾病患者，能起到预防和治疗如牙髓炎、牙尖周炎、牙龈炎、牙周炎、急性坏死性溃疡性牙周炎、口腔炎等口腔疾病的作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种人工培养口腔细菌移植在口腔疾病治疗中的应用，通过以菌治菌的方法，实现口腔疾病的治疗和保护。
背景技术
口腔微生态的变化可能导致各种口腔疾病的发生，是牙髓炎、牙尖周炎、牙龈炎、牙周炎、急性坏死性溃疡性牙周炎、口腔炎等的主要诱因。以往，考虑到变异链球菌经常从龋齿病人病变部位分离得到，因而设法使用抗生素将其清除已达到预防龋病的目的，但结果收效甚微。究其原因是因为变异链球菌属于口腔内的正常菌群成员之一，要想彻底清除它，一是操作难度大，二者会严重的破坏口腔原有的微生态平衡，从而导致菌群失调。因此，龋病和牙周病理论上来讲是由于正常的、共生的口腔菌群失调引起的，因此在治疗上应在保护口腔微生态生态平衡的前提下，进行治疗和采取预防措施，使其恢复在生物群落中的正常地位和作用。
抗生素的滥用，有可能在杀伤变异链球菌的同时造成原有菌群系统的失调，从而引发更为严重的后果，导致耐药菌株的出现。因此，尝试利用益生菌制剂来恢复和调节口腔微生态平衡不失为一种良好的选择。而要达到以菌防菌的目的，首先就要弄清楚口腔微生态系统中菌群的分布和数量变换，为后期口腔微生态制剂的开发和机会致病菌的防治提供基本的数据。
目前，活菌技术作为一种常用技术广泛应用于食品、医学等领域，但是该技术分辨率低、重复性差、依赖于培养，因此对一些生长要求比较苛刻的微生物难以进行监测。因此，本研究拟将活菌计数方法和高通量测序技术相结合，从菌群数量和种类上对正常人口腔和病人口腔中的微生物进行深入研究，为后期口腔类疾病的预防、治疗和口腔药物的研发提供理论依据。
发明内容
本发明的目的在于提供一种人工培养口腔细菌移植在口腔疾病治疗中的应用，可以通过调节和恢复人体口腔微生态，实现多种口腔疾病的治疗，并能长期有效的预防口腔疾病的发生。
本发明所述应用方法包括下列步骤：
1、口腔样品采集及筛选条件：采用生理盐水漱口的方式，采集健康人群的口腔内细菌样品，离心10000rpm/min3min，收集菌体并用生理盐水悬浮；对口腔细菌采集者筛选条件为：
a、至少近3-6个月内没有发生腹泻且没有使用过抗生素；
b、无口腔疾病；
c、没有不良性生活嗜好；
d、无传染性疾病，如HIV、乙肝、丙肝等；
2、口腔细菌的分离：取新鲜的健康人群的生理盐水悬浮后的口腔样品涂布于MRS平板、BHI平板、LB平板、LB+5%脱脂乳平板、血平板上，置于厌氧和需氧两种条件下培养，挑选单菌落；
c、进行细菌鉴定后，保存分离得到的口腔益生菌；
3、冻干粉制备：将分离的得到的益生菌二次活化后，离心10000rpm/min3min，生理盐水洗涤5次，采用冻干机制成冻干粉，保留备用；
4、喷剂的制备：将口腔益生菌冻干粉取适量溶解于生理盐水中，制成喷剂，多次喷入益生菌制剂，有利于口腔益生菌的增殖，恢复口腔微生态平衡，达到治疗和预防口腔疾病的效果。
本发明的有益效果：本发明采用细菌间的拮抗作用替代抗生素及其他药物，通过恢复口腔微生态平衡来达到治疗和预防口腔疾病的效果；且喷剂的治疗形式简单、安全，适用于各类口腔疾病患者，能起到预防和治疗如牙髓炎、牙尖周炎、牙龈炎、牙周炎、急性坏死性溃疡性牙周炎、口腔炎等口腔疾病的作用。
具体实施方式
本发明所述应用方法包括下列步骤：
1、口腔样品采集及筛选条件：采用生理盐水漱口的方式，采集健康人群的口腔内细菌样品，离心10000rpm/min3min，收集菌体并用生理盐水悬浮；对口腔细菌采集者筛选条件为：
a、至少近3-6个月内没有发生腹泻且没有使用过抗生素；
b、无口腔疾病；
c、没有不良性生活嗜好；
d、无传染性疾病，如HIV、乙肝、丙肝等；
2、口腔细菌的分离：取新鲜的健康人群的生理盐水悬浮后的口腔样品涂布于MRS平板、BHI平板、LB平板、LB+5%脱脂乳平板、血平板上，置于厌氧和需氧两种条件下培养，挑选单菌落；
c、进行细菌鉴定后，保存分离得到的口腔益生菌；
3、冻干粉制备：将分离的得到的益生菌二次活化后，离心10000rpm/min3min，生理盐水洗涤5次，采用冻干机制成冻干粉，保留备用；
4、喷剂的制备：将口腔益生菌冻干粉取适量溶解于生理盐水中，制成喷剂，多次喷入益生菌制剂，有利于口腔益生菌的增殖，恢复口腔微生态平衡，达到治疗和预防口腔疾病的效果。
Claims (1)
1.一种人工培养口腔细菌移植在口腔疾病治疗中的应用，其特征是:
（1）、口腔样品采集及筛选条件：采用生理盐水漱口的方式，采集健康人群的口腔内细菌样品，离心10000rpm/min3min，收集菌体并用生理盐水悬浮；对口腔细菌采集者筛选条件为：
a、至少近3-6个月内没有发生腹泻且没有使用过抗生素；
b、无口腔疾病；
c、没有不良性生活嗜好；
d、无传染性疾病，如HIV、乙肝、丙肝；
（2）、口腔细菌的分离：取新鲜的健康人群的生理盐水悬浮后的口腔样品涂布于MRS平板、BHI平板、LB平板、LB+5%脱脂乳平板、血平板上，置于厌氧和需氧两种条件下培养，挑选单菌落；
c、进行细菌鉴定后，保存分离得到的口腔益生菌；
（3）、冻干粉制备：将分离的得到的益生菌二次活化后，离心10000rpm/min3min，生理盐水洗涤5次，采用冻干机制成冻干粉，保留备用；
（4）、喷剂的制备：将口腔益生菌冻干粉取适量溶解于生理盐水中，制成喷剂，多次喷入益生菌制剂，有利于口腔益生菌的增殖，恢复口腔微生态平衡，达到治疗和预防口腔疾病的效果。
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| CN102245191A (zh) * | 2008-12-16 | 2011-11-16 | 雀巢产品技术援助有限公司 | 用于改善口腔健康的组合物和方法 |
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