CN105175514A - 聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及药物领域，具体涉及具有促进胰岛素，能预防和治疗糖尿病的多肽。其序列为PEG-GSLQKRGIVEQCCTSICSLYQLENYCN是全新的序列，所述的PEG的分子量为1000-20000。本发明的有益效益是可用于治疗糖尿病，具有潜在的新药开发价值。

Description

聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽及其应用
技术领域：
本发明涉及药物领域，具体涉及用于预防和治疗或预防糖尿病的拟胰岛素多肽。
背景技术：
糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病，是由于胰岛素不足或胰岛素的细胞代谢作用缺陷所引起的葡萄糖、蛋白质及脂质代谢紊乱的一种综合症。近年来，糖尿病患者的人数逐渐增多，分为I型糖尿病和II型糖尿病。其中II型糖尿病患者的人数占糖尿病总人数的85-90％，严重威胁着病人的健康和生命。如果糖尿病得不到良好的控制，可能引起很多并发症，例如：糖尿病肾病、视网膜病变、高血压等。
目前，大多数患者通过注射胰岛素或者口服降糖药物来帮助控制体内血糖，或调节胰岛素分泌等方法治疗糖尿病。注射胰岛素治疗始终是治疗糖尿病的“金指标”。但是胰岛素是具有65个氨基酸的大分子蛋白质。长期注射治疗，一方面会引起过敏反应；另一方面，患者体内会产生大量胰岛素抗体，会中和体能的胰岛素，导致胰岛素抵抗，是胰岛素治疗无效。
小分子蛋白质或多肽就不容易诱发免疫变态反应，以及胰岛素抵抗。因此，小分子拟胰岛素多肽就能解决这一问题。GSLQKRGIVEQCCTSICSLYQLENYCN是拟胰岛素多肽，是一个全新的序列。前期的研究表明，该多肽经反复体内外活性评价证实具有较好的降血糖的效果，具有胰岛素活性。然而上述多肽的半衰期短，这给糖尿病慢性疾病患者带来了的痛苦。
文献报道中，对分子结构进行修饰或改造是解决半衰期较短、需连续给药问题的常用方法，其中以化学修饰应用最为广泛，常用的化学修饰剂有聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)、葡聚糖、聚氨基酸、聚酸酐等。PEG具有无毒、无免疫原性、水溶性好的特点，被美国食品与药物管理局(FDA)认可作为药品的辅助原料和修饰剂。蛋白质类药物经PEG修饰后，分子量增加，肾小球的滤过率减少，PEG的屏障作用保护了蛋白质不易被蛋白水解酶水解，同时减少了中和抗体的产生，这些均有助于蛋白质类药物生物半衰期的延长。
发明内容：
本发明目的是针对现有胰岛素治疗糖尿病的特点，设计全新序列的聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽，适用于临床治疗糖尿病的应用。
本发明技术方案是提供一种聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽，其序列为PEG-GSLQKRGIVEQCCTSICSLYQLENYCN，所述的PEG的分子量为1000-20000。以及在治疗或预防糖尿病药物中的应用。
有益结果：
本发明中的聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽序列PEG-GSLQKRGIVEQCCTSICSLYQLENYCN，具有拟胰岛素的作用，产生的胰岛素生理或病理的效应，达到预防或治疗糖尿病的效果，而且半衰期长，可以满足糖尿病患者的使用。说明本发明设计的拟胰岛素多肽科学、合理、可行有效，能用于治疗或预防糖尿病。
具体实施方式
本发明涉及多肽由上海吉尔合成。
聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽的体外细胞活性测定
采用MTT比色法。将对数生长的胰岛瘤细胞(INS-1细胞)，以1.0×105加入96孔培养板中，培养24h，实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽；空白组加入相同体积的溶剂。每孔设五个复孔，培养48h，每孔加入MTT，作用4h后，加入DMSO，孵育30min，在酶标仪570nm处测定吸光度A值，按公式细胞生长增殖率＝(实验组吸光值/对照组吸光值-1)×100％。计算出实验药物的EC50为105.32nmol/L。
实施例2
聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽的体内降糖实验
昆明小鼠，高脂高糖喂养至体重18～22g，雌雄各半，实验前禁食不禁水24h，腹腔一次性注射链脲佐菌素(STZ)50mg/kg(1％的柠檬酸盐缓冲液溶解配制)。1周后小鼠尾静脉采血测血糖(BS)，BS高于16mmol/L为造模成功。造模后将小鼠分为3组，每组10只，糖尿病模型组(DM组)：给予等量的PBS缓冲液皮下注射；对照组(胰岛素)：20μg/kg皮下注射给药(溶于0.1mol/LPBS缓冲液)，一天两次，连续15d；样品组(聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽)：1mg/kg皮下注射给药(溶于0.1mol/LPBS缓冲液)，一天1次，连续15d；另取10只正常小鼠做为空白组。用药后第15d于尾静脉取血快速测量血糖。15d之后，在停药1周后，禁食不禁水16小时进行葡萄糖耐量试验。用25％葡萄糖溶液(2g/kg)灌胃，灌胃后0、120分钟尾静脉取血检测血糖。
结果：葡萄糖转运体蛋白多肽具有降低糖尿病模型小鼠血糖的作用(P<0.05，表1)；同时，可以缓解糖尿病模型小鼠的糖耐量(表2)。其多肽的作用与对照组胰岛素作用相当。
表1聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽对小鼠降血糖作用
*p<0.05，**p<0.01与模型组相比
表2聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽对小鼠糖耐量实验结果
*p<0.05，**p<0.01与模型组相比
结论：聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽对糖尿病小鼠具有治疗作用。
SEQUENCELISTING
<110>苏州普罗达生物科技有限公司
<120>聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽及其应用
<130>
<160>1
<170>PatentInversion3.5
<210>1
<211>27
<212>PRT
<213>人工序列
<400>1
PEG-GlySerLeuGlnLysArgGlyIleValGluGlnCysCysThrSerIle
151015
CysSerLeuTyrGlnLeuGluAsnTyrCysAsn
2025

Claims (3)

1.聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽，其特征在于其序列为PEG-GSLQKRGIVEQCCTSICSLYQLENYCN。
2.根据权利要求1所述的一种聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽，其特征在于所述的PEG的分子量为1000-20000。
3.聚乙二醇修饰的拟胰岛素多肽，在治疗或预防糖尿病药物中的应用。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1970086A (zh) * 2006-11-30 2007-05-30 复旦大学 一种单修饰的聚乙二醇化胰岛素及其制备方法
CN101284135A (zh) * 2008-05-20 2008-10-15 大连民族学院 一种单修饰的聚乙二醇-胰岛素复合物及其制备方法
CN101918026A (zh) * 2007-11-20 2010-12-15 Ambrx公司 经修饰胰岛素多肽和其用途
CN102397558A (zh) * 2010-09-09 2012-04-04 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 Exendin-4类似物的定位聚乙二醇化修饰物及其用途

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1970086A (zh) * 2006-11-30 2007-05-30 复旦大学 一种单修饰的聚乙二醇化胰岛素及其制备方法
CN101918026A (zh) * 2007-11-20 2010-12-15 Ambrx公司 经修饰胰岛素多肽和其用途
CN101284135A (zh) * 2008-05-20 2008-10-15 大连民族学院 一种单修饰的聚乙二醇-胰岛素复合物及其制备方法
CN102397558A (zh) * 2010-09-09 2012-04-04 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 Exendin-4类似物的定位聚乙二醇化修饰物及其用途

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