CN105167087B - 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，该方法包括以下步骤：⑴利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液；⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，接入乳酸菌和双歧杆菌发酵，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液；⑶在所述黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入调味剂和稳定剂进行调配，经高压均质处理后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品；⑷将所述黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过高温瞬时灭菌，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。本发明工艺简单、质量稳定、易规模化生产。
Description
技术领域
本发明涉及食品发酵技术领域，尤其涉及一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法。
背景技术
食用菌是一种“可食可补可药”的保健食品。越来越多的科学研究揭示了食用菌在抗肿瘤、抗氧化、增强免疫力、延缓衰老、改善生理功能等方面的神奇作用。饮料作为人们日常生活的消费品，具有携带方便、随取随饮、卫生健康等特点。随着市场消费能力的提高及消费结构的变化，居民对各种饮料的需求也发生了结构性的改变。通过食用菌深层发酵制作饮料，大大增加了饮料中多糖、蛋白、多肽、萜类、甾体等活性成分的种类及含量，使之集营养、保健、风味于一体，能够满足了人们的多种需求，具有广阔的市场前景。
目前对食用菌的开发主要集中在干品、盐渍和速冻产品上，也有一些文献报道了以食用菌子实体为原料发酵制作饮料的技术研究，中国专利CN103932344B和CN102389139B公开了食用菌益生、保健功能饮料的制备方法，但还没有黄绿蜜环菌深层发酵饮料制备方法的公开报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、质量稳定、易规模化生产的保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法。
为解决上述问题，本发明所述的一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液；
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按5%~10%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在30~45℃发酵8~32小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液；
⑶在所述黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量1~20%的调味剂和0.01~0.5%的稳定剂进行调配，经高压均质处理后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品；
⑷将所述黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过高温瞬时灭菌，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
所述步骤⑴中的黄绿蜜环菌驯化菌种是指采集于青海省海北州祁连县的黄绿蜜环菌Armillaria luteo-virens按常规方法经组织分离获得的黄绿蜜环菌；所述黄绿蜜环菌在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO：7356。
所述步骤⑵补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指马铃薯淀粉、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖、乳糖其中的一种或多种组合，其加入量为所述黄绿蜜环菌深层发酵液质量的 1~5%；氮源是指蛋白胨、酵母浸膏、黄豆浸提液其中一种或多种组合，其加入量为所述黄绿蜜环菌深层发酵液质量的0.5%~2.5%；麸皮的加入量为所述黄绿蜜环菌深层发酵液质量的1~5%。
所述步骤⑵乳酸菌是指乳酸克鲁维酵母菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌其中一种或多种组合。
所述步骤⑶调味剂是指柠檬酸、苹果酸、木糖醇、甜菊糖苷其中一种或多种组合。
所述步骤⑶稳定剂是指卡拉胶、瓜尔豆胶、海藻酸钠、CMC-N其中一种或多种组合。
所述步骤⑶中高压均质压力为20~40兆帕，高压均质次数为1~5次。
所述步骤⑷中高温瞬时灭菌温度为121~137℃，灭菌时间为3~10秒。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明的发酵原料均为食材，经黄绿蜜环菌和益生菌联合发酵，不仅营养丰富，生物活性高，还大大提高了营养物质的生物利用率，具有很高的营养价值和保健功能。
2、本发明的调味剂和稳定剂均为符合国标的食品添加剂，对人体无任何毒副作用。
3、整个发酵制备过程仅在一个发酵设备中完成，不需要更换发酵设备，生产操作简单，效率高。
4、采用本发明方法生产的饮料组织均匀、性能稳定，发酵产生的大量小分子营养物质易被人体吸收，达到深度开发黄绿蜜环菌的食用价值和药用价值的目的，符合人类对健康产品的需求，有利于提高我国饮料产品的国际市场竞争力。
具体实施方式
实施例1 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括20%马铃薯浸提液、20%黄豆芽浸提液，自然pH，在28℃发酵7天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：所述步骤⑴中的黄绿蜜环菌驯化菌种是指采集于青海省海北州祁连县的黄绿蜜环菌Armillaria luteo-virens按常规方法经组织分离获得的黄绿蜜环菌；所述黄绿蜜环菌在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO：7356。
深层发酵条件参照专利《一种黄绿蜜环菌的深层发酵及其应用，专利号：201310138985.X》进行。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按5%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在30℃发酵32小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指葡萄糖，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的 1.5%；氮源是指蛋白胨，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的1%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的4%。
乳酸菌是指乳酸克鲁维酵母菌、嗜热链球菌按6：4的比例（g/g）混合而成。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量8.15%的调味剂和0.1%的稳定剂进行调配，经压力为40兆帕的高压均质处理2次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指柠檬酸、苹果酸、木糖醇按10：5：8的比例（g/g）混合而成。
稳定剂是指卡拉胶、海藻酸钠按1：1的比例混合而成。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为121℃的高温瞬时灭菌10秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例2 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括10%马铃薯浸提液、30%黄豆芽浸提液、0.5mg/L Vt B、pH6.5，在25℃发酵12天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按10%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在40℃发酵16小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指蔗糖，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的 2%；氮源是指黄豆浸提液，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的2%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的1%。
乳酸菌是指嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌按6：4的比例（g/g）混合而成。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量5.3%的调味剂和0.1%的稳定剂进行调配，经压力为30兆帕的高压均质处理3次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指柠檬酸、苹果酸、甜菊糖苷按2：1：50的比例（g/g）混合而成。
稳定剂是指瓜尔豆胶、CMC-N按6：4的比例（g/g）混合而成。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为137℃的高温瞬时灭菌4秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例3 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括30%马铃薯浸提液、10%黄豆芽浸提液、1mg/L Vt B、pH7.0，在20℃发酵20天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，，按7%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在45℃发酵8小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指麦芽糖，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的 2%；氮源是指酵母浸膏，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的1.5%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的3%。
乳酸菌是指嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌按5：5的比例（g/g）混合而成。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量6.24%的调味剂和0.1%的稳定剂进行调配，经压力为20兆帕的高压均质处理5次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指柠檬酸、苹果酸、木糖醇、甜菊糖苷按8：16：40：20的比例（g/g）混合而成。
稳定剂是指卡拉胶、海藻酸钠、CMC-N按4：3：3的比例（g/g）混合而成。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为129℃的高温瞬时灭菌6秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例4 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括15%马铃薯浸提液、15%黄豆芽浸提液、0.5mg/L Vt B、pH6.5，在25℃发酵14天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按5%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在35℃发酵12小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指马铃薯淀粉，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的 1%；氮源是指蛋白胨、酵母浸膏按5：1的比例（g/g）混合而成，其总加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的0.5%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的5%。
乳酸菌是指乳酸克鲁维酵母菌。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量20%的调味剂和0.01%的稳定剂进行调配，经压力为35兆帕的高压均质处理1次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指柠檬酸。
稳定剂是指卡拉胶。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为125℃的高温瞬时灭菌3秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例5 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括20%马铃薯浸提液、15%黄豆芽浸提液、0.1 mg/L Vt B、pH7，在20℃发酵20天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按8%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在30℃发酵24小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指果糖，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的5%；氮源是指蛋白胨、酵母浸膏、黄豆浸提液按5：1：10的比例（g/g）混合而成，其总加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的2.5%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的2%。
乳酸菌是指嗜热链球菌。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量1%的调味剂和0.05%的稳定剂进行调配，经压力为25兆帕的高压均质处理4次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指苹果酸。
稳定剂是指瓜尔豆胶。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为130℃的高温瞬时灭菌8秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例6 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括30%马铃薯浸提液、10%黄豆芽浸提液、1 mg/L Vt B、pH5.5，在30℃发酵7天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按10%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在45℃发酵10小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指乳糖，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的5%；氮源是指蛋白胨，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的2.5%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的3%。
乳酸菌是指保加利亚乳杆菌。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量10%的调味剂和0.25%的稳定剂进行调配，经压力为35兆帕的高压均质处理2次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指木糖醇。
稳定剂是指海藻酸钠。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为137℃的高温瞬时灭菌3秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例7 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括10%马铃薯浸提液、25%黄豆芽浸提液、0.1 mg/L Vt B、pH6，在22℃发酵15天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按6%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在37℃发酵18小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指马铃薯淀粉、蔗糖按1：2的比例（g/g）混合而成，其总加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的3%；氮源是指酵母浸膏，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的0.5%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的1%。
乳酸菌是指嗜酸乳杆菌。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量15%的调味剂和0.05%的稳定剂进行调配，经压力为20兆帕的高压均质处理3次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指甜菊糖苷。
稳定剂是指CMC-N。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为128℃的高温瞬时灭菌7秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例8 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括25%马铃薯浸提液、20%黄豆芽浸提液、0.5 mg/L Vt B、pH7.5，在28℃发酵10天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按8%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在42℃发酵10小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指马铃薯淀粉、蔗糖、麦芽糖按1：1：2的比例（g/g）混合而成，其总加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的 1%；氮源是指黄豆浸提液，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的1.0%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的2%。
乳酸菌是指乳酸克鲁维酵母菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌按1：1：1的比例（g/g）混合而成。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量12%的调味剂和0.01%的稳定剂进行调配，经压力为22兆帕的高压均质处理4次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指柠檬酸、苹果酸按1：1的比例混合而成。
稳定剂是指卡拉胶、瓜尔豆胶、海藻酸钠、CMC-N按1：1：1：1的比例（g/g）混合而成。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为135℃的高温瞬时灭菌5秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例9 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括20%马铃薯浸提液、20%黄豆芽浸提液、1 mg/L Vt B、pH6.5，在28℃发酵7天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按5%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在37℃发酵30小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指马铃薯淀粉、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖按1：1：1：1的比例（g/g）混合而成，其总加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的2%；氮源是指蛋白胨、酵母浸膏按5：1的比例（g/g）混合而成，其总加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的1.5%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的4%。
乳酸菌是指乳酸克鲁维酵母菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌按1：2：1：1的比例（g/g）混合而成。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量18%的调味剂和0.25%的稳定剂进行调配，经压力为40兆帕的高压均质处理1次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指柠檬酸。
稳定剂是指卡拉胶。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为121℃的高温瞬时灭菌9秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例10 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括15%马铃薯浸提液、30%黄豆芽浸提液、0.1 mg/L Vt B、pH6.0，在25℃发酵18天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按7%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在30℃发酵16小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指马铃薯淀粉、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖按1：1：1：2：1的比例（g/g）混合而成，其总加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的4%；氮源是指蛋白胨、酵母浸膏、黄豆浸提液按2：1：7的比例（g/g）混合而成，其总加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的2.0%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的5%。
乳酸菌是指乳酸克鲁维酵母菌。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量10%的调味剂和0.5%的稳定剂进行调配，经压力为30兆帕的高压均质处理5次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指甜菊糖苷。
稳定剂是指CMC-N。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为132℃的高温瞬时灭菌4秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
实施例11 一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
具体过程如下：将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括25%马铃薯浸提液、10%黄豆芽浸提液、0.5 mg/L Vt B、pH7.0，在25℃发酵14天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液。
其中：黄绿蜜环菌驯化菌种、深层发酵条件同实施例1。
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按6%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在40℃发酵20小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液。
其中：
补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指马铃薯淀粉、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖、乳糖按1：2：2：1：1：1的比例（g/g）混合而成，其总加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的 3%；氮源是指蛋白胨，其加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的1.5%；麸皮的加入量为黄绿蜜环菌深层发酵液质量的5%。
乳酸菌是指乳酸克鲁维酵母菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌按2：1：1的比例（g/g）混合而成。
⑶在黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量2.5%的调味剂和0.5%的稳定剂进行调配，经压力为25兆帕的高压均质处理5次后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品。
其中：调味剂是指柠檬酸、苹果酸、木糖醇按1：1：4的比例（g/g）混合而成。
稳定剂是指卡拉胶、瓜尔豆胶、海藻酸钠按2：1：1的比例（g/g）混合而成。
⑷将黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过灭菌温度为135℃的高温瞬时灭菌6秒，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
Claims (6)
1.一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，包括以下步骤：
⑴ 利用黄绿蜜环菌驯化菌种进行深层发酵，得到黄绿蜜环菌深层发酵液；即：
将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括20%马铃薯浸提液、20%黄豆芽浸提液，自然pH，在28℃发酵7天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液；
或将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括10%马铃薯浸提液、30%黄豆芽浸提液、0.5mg/L Vt B、pH 6.5，在25℃发酵12天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液；
或将人工驯化的黄绿蜜环菌生产菌种在无菌条件下接入灭过菌的发酵培养液中，发酵培养液成分包括30%马铃薯浸提液、10%黄豆芽浸提液、1mg/L Vt B、pH 7.0，在20℃发酵20天，得到黄绿蜜环菌深层发酵液；
⑵在无菌条件下，向黄绿蜜环菌深层发酵液中加入无菌的补料液后，按5%~10%的接种量接入乳酸菌和双歧杆菌，在30~45℃发酵8~32小时，得到黄绿蜜环菌发酵饮料原液；所述补料液由碳源、氮源和麸皮组成，其中碳源是指马铃薯淀粉、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖、乳糖其中的一种或多种组合，其加入量为所述黄绿蜜环菌深层发酵液质量的 1~5%；氮源是指蛋白胨、酵母浸膏、黄豆浸提液其中一种或多种组合，其加入量为所述黄绿蜜环菌深层发酵液质量的0.5%~2.5%；麸皮的加入量为所述黄绿蜜环菌深层发酵液质量的1~5%；
⑶在所述黄绿蜜环菌发酵饮料原液中加入其质量1~20%的调味剂和0.01~0.5%的稳定剂进行调配，经高压均质处理后，得到黄绿蜜环菌发酵饮料初品；所述高压均质压力为20~40兆帕，高压均质次数为1~5次；
⑷将所述黄绿蜜环菌发酵饮料初品通过高温瞬时灭菌，待冷却至20~30℃时无菌灌装，即得黄绿蜜环菌发酵饮料成品。
2.如权利要求 1 所述的一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，其特征在于：所述步骤⑴中的黄绿蜜环菌驯化菌种是指采集于青海省海北州祁连县的黄绿蜜环菌Armillaria luteo-virens按常规方法经组织分离获得的黄绿蜜环菌；所述黄绿蜜环菌在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO：7356。
3.如权利要求 1 所述的一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，其特征在于：所述步骤⑵乳酸菌是指乳酸克鲁维酵母菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌其中一种或多种组合。
4.如权利要求 1所述的一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，其特征在于：所述步骤⑶调味剂是指柠檬酸、苹果酸、木糖醇、甜菊糖苷其中一种或多种组合。
5.如权利要求 1所述的一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，其特征在于：所述步骤⑶稳定剂是指卡拉胶、瓜尔豆胶、海藻酸钠、CMC-N其中一种或多种组合。
6.如权利要求 1所述的一种保健型黄绿蜜环菌发酵饮料的制备方法，其特征在于：所述步骤⑷中高温瞬时灭菌温度为121~137℃，灭菌时间为3~10秒。
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