CN105158429A - 一种水中可生物降解有机碳bdoc含量的测定方法 - Google Patents
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Abstract
一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，它涉及一种可生物降解有机碳BDOC浓度的测定方法。本发明的目的是要解决现有测定水中可生物降解有机碳BDOC含量的方法操作复杂，难以准确反映其在水中的实际含量的问题。方法：一、预处理待测水样；二、测定初始溶解性有机碳DOC0值；三、预处理接种水样；四、接种；五、培养；六、测定最终可生物降解有机碳DOC1值；七、计算待测水样中可生物降解有机碳BDOC含量，即完成一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。本发明可获得一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种可生物降解有机碳BDOC浓度的测定方法。
背景技术
可生物降解有机碳(biodegradabledissolvedorganiccarbon，BDOC)是溶解性有机碳(DOC)的一部分，指水体中能被异养菌代谢和利用的溶解性有机碳，是20世纪末评估水质生物稳定性的主要指标之一，目前主要用来预测和衡量水处理单元特别是生物处理单元对有机物的去除效率，以及预测出厂水需氯量和消毒副产物的潜在生成量。
BDOC的测定方法按照培养方式的不同可分为静态培养测定法和循环培养测定法。静态培养法主要有以土著细菌作为接种菌的悬浮培养法和以附着生物膜的石英砂为接种物的生物砂培养法，均需先将待测水样通过膜过滤去除不溶性物质，接种后于20℃条件下避光培养，测定培养前后的DOC值。其中，悬浮培养法的培养时间为28天，生物砂培养法为10天。这种方法简单易行，同时可用于多水样批量测定，但由于测定时间过长，不能及时反映水体的BDOC变化，在水厂的实际应用中受到限制。
循环培养测定法利用生物反应器对DOC的去除作用，通过测定水样流经反应器前后的DOC含量，获得DOC差值，从而测得水样的BDOC值。循环培养法以生物膜为菌源，大大提高了降解有机物的能力，测定时间可缩短至2～3天，甚至数小时，测定方法快速准确。但循环培养法每次只能测定一个水样，且生物反应器需要较长的驯化时间，因此对常规研究的适用性受到限制。
为了克服BDOC测定过程中的如上缺点，刘文君等最先提出以悬浮培养法培养三天测得培养前后的DOC差值，即用BDOC3来代替培养28d所测得的BDOC28，认为BDOC3约占BDOC28的40％，可以及时反映水中BDOC的含量。但是由于BDOC的测定受水样接种源、接种量与培养条件等影响很大，而现行的BDOC3测定法接种及培养条件不统一，测定结果难以准确反映实际的BDOC含量。
发明内容
本发明的目的是要解决现有测定水中可生物降解有机碳BDOC含量的方法操作复杂，难以准确反映其在水中的实际含量的问题，而提供一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，是按以下方法完成的：
一、预处理待测水样：
①、使用孔径为0.22μm的醋酸纤维滤膜过滤待测水样，得到醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；
②、将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至7～7.4，得到pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；将pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶；
二、测定初始溶解性有机碳DOC0值：向20mL醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；利用TOC分析仪测定加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的初始溶解性有机碳DOC0值；
三、预处理接种水样：使用孔径为1.76μm的玻璃纤维膜过滤待测水样，得到玻璃纤维膜过滤后的待测水样；将玻璃纤维膜过滤后的待测水样作为同源接种水；以SYBRGreenI为染料，利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数；
四、接种：在无菌环境下将同源接种水接种至装有pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶中，得到待培养水样；
步骤四中所述的待培养水样中细菌的浓度为10000cells/mL～200000cells/mL；
五、培养：将待培养水样在培养温度为20℃～35℃下避光振荡培养3天～28天，得到培养后的待测水样；
六、测定最终可生物降解有机碳DOC1值：向20mL培养后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的培养后的待测水样；再利用TOC分析仪测定加入HCl的培养后的待测水样的最终可生物降解有机碳DOC1值；
七、计算待测水样中可生物降解有机碳BDOC含量：
使用步骤二中测定的初始溶解性有机碳DOC0值减去步骤六中测定的最终溶解性有机碳DOC1值，得到待测水样中可生物降解有机碳BDOC值，即完成一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
本发明的原理及优点：
一、本发明提供一种简单的测定水中可生物降解有机碳BDOC含量方法，水样的预处理是使用孔径为0.22μm的醋酸纤维滤膜过滤待测水样，并调节pH至7～7.4；水样的除菌通过滤膜过滤实现，与传统的巴氏灭菌法相比，除菌效果更好，所需时间更短；水样的培养pH可能影响细菌体内降解酶的生物活性，通过设计pH梯度实验对培养pH进行优化，优化后的pH为7，在此pH下，微生物能够更充分地利用待测水样中的可降解有机碳，测得结果更为准确；
二、本发明提供一种简单的测定水中可生物降解有机碳BDOC含量方法，以同源菌作为接种菌，所选接种量为10000cells/mL～200000cells/mL；由于同源细菌对水样生存环境更为适应，将有利于发挥其生物降解能力，以同源菌作为接种菌更符合工程实际，避免了某特定测试菌种难以在该水体水中生长或呼吸作用缓慢的问题，能够更准确地反映待测水体中BDOC的含量；接种量浓度对BDOC的测定结果影响很大，接种菌量过小，有机物降解速率较慢，而接种菌量过大，可能不利于处于悬浮状态的细菌发挥降解作用；通过接种量优化实验，确定接种量为100000cells/mL，在此接种量下，待测水样中的可生物降解有机碳更能被充分利用，所测结果更为准确；
三、本发明提供一种简单的测定水中可生物降解有机碳BDOC含量方法，通过梯度温度培养实验，将培养温度优化为25℃；在此温度培养条件下，水体中的微生物新陈代谢更为旺盛，对有机物的利用也更为充分，培养3d后所测得的DOC值更小，测得BDOC3值更为准确；
四、本发明的有益效果是建立了一种更准确的可生物降解有机碳的测定方法，解决了现有测定方法难以准确测定水体中BDOC含量的难题，通过进行正交优化实验，选取同源水作为接种水体，并确定接种量为100000cells/mL，同时优化培养pH为7，培养温度为25℃，最大程度地提高了待测水样中BDOC的生物利用率，不仅方法简单易行，而且所测结果更为准确，适用于工程实际应用。
本发明可获得一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式是一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法是按以下方法完成的：
一、预处理待测水样：
①、使用孔径为0.22μm的醋酸纤维滤膜过滤待测水样，得到醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；
②、将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至7～7.4，得到pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；将pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶；
二、测定初始溶解性有机碳DOC0值：向20mL醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；利用TOC分析仪测定加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的初始溶解性有机碳DOC0值；
三、预处理接种水样：使用孔径为1.76μm的玻璃纤维膜过滤待测水样，得到玻璃纤维膜过滤后的待测水样；将玻璃纤维膜过滤后的待测水样作为同源接种水；以SYBRGreenI为染料，利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数；
四、接种：在无菌环境下将同源接种水接种至装有pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶中，得到待培养水样；
步骤四中所述的待培养水样中细菌的浓度为10000cells/mL～200000cells/mL；
五、培养：将待培养水样在培养温度为20℃～35℃下避光振荡培养3天～28天，得到培养后的待测水样；
六、测定最终可生物降解有机碳DOC1值：向20mL培养后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的培养后的待测水样；再利用TOC分析仪测定加入HCl的培养后的待测水样的最终可生物降解有机碳DOC1值；
七、计算待测水样中可生物降解有机碳BDOC含量：
使用步骤二中测定的初始溶解性有机碳DOC0值减去步骤六中测定的最终溶解性有机碳DOC1值，得到待测水样中可生物降解有机碳BDOC值，即完成一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
本实施方式的原理及优点：
一、本实施方式提供一种简单的测定水中可生物降解有机碳BDOC含量方法，水样的预处理是使用孔径为0.22μm的醋酸纤维滤膜过滤待测水样，并调节pH至7～7.4；水样的除菌通过滤膜过滤实现，与传统的巴氏灭菌法相比，除菌效果更好，所需时间更短；水样的培养pH可能影响细菌体内降解酶的生物活性，通过设计pH梯度实验对培养pH进行优化，优化后的pH为7，在此pH下，微生物能够更充分地利用待测水样中的可降解有机碳，测得结果更为准确；
二、本实施方式提供一种简单的测定水中可生物降解有机碳BDOC含量方法，以同源菌作为接种菌，所选接种量为10000cells/mL～200000cells/mL；由于同源细菌对水样生存环境更为适应，将有利于发挥其生物降解能力，以同源菌作为接种菌更符合工程实际，避免了某特定测试菌种难以在该水体水中生长或呼吸作用缓慢的问题，能够更准确地反映待测水体中BDOC的含量；接种量浓度对BDOC的测定结果影响很大，接种菌量过小，有机物降解速率较慢，而接种菌量过大，可能不利于处于悬浮状态的细菌发挥降解作用；通过接种量优化实验，确定接种量为100000cells/mL，在此接种量下，待测水样中的可生物降解有机碳更能被充分利用，所测结果更为准确；
三、本实施方式提供一种简单的测定水中可生物降解有机碳BDOC含量方法，通过梯度温度培养实验，将培养温度优化为25℃；在此温度培养条件下，水体中的微生物新陈代谢更为旺盛，对有机物的利用也更为充分，培养3d后所测得的DOC值更小，测得BDOC3值更为准确；
四、本实施方式的有益效果是建立了一种更准确的可生物降解有机碳的测定方法，解决了现有测定方法难以准确测定水体中BDOC含量的难题，通过进行正交优化实验，选取同源水作为接种水体，并确定接种量为100000cells/mL，同时优化培养pH为7，培养温度为25℃，最大程度地提高了待测水样中BDOC的生物利用率，不仅方法简单易行，而且所测结果更为准确，适用于工程实际应用。
本实施方式可获得一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同点是：步骤三中所述的同源接种水的接种菌为同源菌。其他步骤与具体实施方式一相同。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二之一不同点是：步骤一中将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至7～7.4是使用摩尔浓度为0.1mol/L的NaOH和摩尔浓度为0.1mol/L的HCl调节的。其他步骤与具体实施方式一或二相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同点是：步骤三中利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数为活细菌数。其他步骤与具体实施方式一至三相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一不同点是：步骤一中将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至7。其他步骤与具体实施方式一至四相同。
具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一不同点是：步骤四中所述的待培养水样中细菌的浓度为100000cells/mL。其他步骤与具体实施方式一至五相同。
具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一至六之一不同点是：步骤五中所述的培养温度为25℃。其他步骤与具体实施方式一至六相同。
具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一至七之一不同点是：步骤五中所述的培养时间为3天。其他步骤与具体实施方式一至七相同。
具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式一至八之一不同点是：步骤五中所述的避光振荡培养是在避光条件下采用空气浴恒温振荡培养箱振荡培养，空气浴恒温振荡培养箱的转速为50rpm～100rpm。其他步骤与具体实施方式一至八相同。
具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式一至八之一不同点是：步骤三中所述的测定每微升同源接种水中含有的细菌数的方法如下：将同源接种水与SYBRGreenI染料共孵化10min～20min，再利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数，其中所述的同源接种水与SYBRGreenI染料的体积比为100:1。其他步骤与具体实施方式一至八相同。
采用以下试验验证本发明的有益效果：
实施例一：一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，是按以下方法完成的：
一、预处理待测水样：
①、使用孔径为0.22μm的醋酸纤维滤膜过滤待测水样，得到醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；
②、使用摩尔浓度为0.1mol/L的NaOH和摩尔浓度为0.1mol/L的HCl将将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至6～9，得到pH值为6～9的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；将pH值为6～9的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有pH值为6～9的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶；
二、测定初始溶解性有机碳DOC0值：向20mL醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；利用TOC分析仪测定加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的初始溶解性有机碳DOC0值；
三、预处理菌源接种液：使用孔径为1.76μm的玻璃纤维膜过滤菌源接种液，得到玻璃纤维膜过滤后的菌源接种液；将玻璃纤维膜过滤后的菌源接种液作为同源接种水；以SYBRGreenI为染料，利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数；
步骤三中所述的菌源接种液为依云水、同源水、二级出水或生活污水；
步骤三中所述的利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数为活细菌数；
四、接种：在无菌环境下将同源接种水接种至装有pH值为6～9的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶中，得到待培养水样；
步骤四中所述的待培养水样中细菌的浓度为10000cells/mL～200000cells/mL；
五、培养：将待培养水样在培养温度为20℃～35℃下避光振荡培养3天，得到培养后的待测水样；
步骤五中所述的避光振荡培养是在避光条件下采用空气浴恒温振荡培养箱振荡培养，空气浴恒温振荡培养箱的转速为60rpm；
六、测定最终可生物降解有机碳DOC1值：向20mL培养后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的培养后的待测水样；再利用TOC分析仪测定加入HCl的培养后的待测水样的最终可生物降解有机碳DOC1值；
七、计算待测水样中可生物降解有机碳BDOC含量：
使用步骤二中测定的初始溶解性有机碳DOC0值减去步骤六中测定的最终溶解性有机碳DOC1值，得到待测水样中可生物降解有机碳BDOC值，即完成一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
实施例一步骤三中所述的测定每微升同源接种水中含有的细菌数的方法如下：将同源接种水与SYBRGreenI染料共孵化10min，再利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数，其中所述的同源接种水与SYBRGreenI染料的体积比为100:1。
BDOC的测定主要受菌源接种液、待培养水样中细菌的浓度、待培养水样培养温度、培养pH值影响，为了探究不同因素对BDOC测定的影响程度及最优选择，设计正交实验，选取四因素四水平进行研究，方法如实施例一，以某中试装置砂滤出水作为待测水样，采用的具体参数为如表1所示。
表1
根据表1的四因素四水平选取正交表，设计正交实验如表2所示。
利用极差分析法对正交试验结果进行分析，所得结果列入表2，其中Kij分别表示第j列因素第i水平试验的BDOC3测定结果之和，kij为Kij的平均值，Rj＝max{kj}-min{kj}，表征第j列因素水平波动时，对试验观测指标(BDOC3测定结果)的影响，其值越大，说明因素的影响越大。
表2
根据表2的极差分析结果可以得到：
(1)因素的主次顺序为：B>D>A>C，即四种因素中对BDOC3测定结果影响的大小顺序为：待培养水样中细菌的浓度>培养pH值>菌源接种液>待培养水样培养温度
(2)最优水平组合为：A2B3C2D2，即BDOC3测定的最优操作条件是以同源水作为接种菌源，接种菌量为100000cells/mL，培养温度为25℃，培养pH为7±0.2。
实施例二：以东北某水源水为待测水样，采用实施例二一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，是按以下方法完成的：
一、预处理待测水样：
①、使用孔径为0.22μm的醋酸纤维滤膜过滤待测水样，得到醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；
②、使用摩尔浓度为0.1mol/L的NaOH和摩尔浓度为0.1mol/L的HCl将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至7，得到pH值为7的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；将pH值为7的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有pH值为7的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶；
二、测定初始溶解性有机碳DOC0值：向20mL醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；利用TOC分析仪测定加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的初始溶解性有机碳DOC0值；
三、预处理接种水样：使用孔径为1.76μm的玻璃纤维膜过滤待测水样，得到玻璃纤维膜过滤后的待测水样；将玻璃纤维膜过滤后的待测水样作为同源接种水；以SYBRGreenI为染料，利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数；
步骤三中所述的利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数为活细菌数；
四、接种：在无菌环境下将同源接种水接种至装有pH值为7的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶中，得到待培养水样；
步骤四中所述的待培养水样中细菌的浓度为100000cells/mL；
五、培养：将待培养水样在培养温度为25℃下避光振荡培养3天，得到培养后的待测水样；
步骤五中所述的避光振荡培养是在避光条件下采用空气浴恒温振荡培养箱振荡培养，空气浴恒温振荡培养箱的转速为60rpm；
六、测定最终可生物降解有机碳DOC1值：向20mL培养后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的培养后的待测水样；再利用TOC分析仪测定加入HCl的培养后的待测水样的最终可生物降解有机碳DOC1值；
七、计算待测水样中可生物降解有机碳BDOC含量：
使用步骤二中测定的初始溶解性有机碳DOC0值减去步骤六中测定的最终溶解性有机碳DOC1值，得到待测水样中可生物降解有机碳BDOC值，即完成一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
实施例二步骤三中所述的测定每微升同源接种水中含有的细菌数的方法如下：将同源接种水与SYBRGreenI染料共孵化10min，再利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数，其中所述的同源接种水与SYBRGreenI染料的体积比为100:1。
实施例二中步骤一和步骤二中所述的待测水样为同源水。
对实施例二进行三次平行试验，结果取平均值，DOC0值为3.66mg/L，BDOC值为0.50mg/L，结果表明，实施例二待测水样中所含可生物降解有机物较少，BDOC值为DOC0值的13.7％。
实施例三：以东北某生活污水为待测水样，采用实施例三一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，是按以下方法完成的：
一、预处理待测水样：
①、使用孔径为0.22μm的醋酸纤维滤膜过滤待测水样，得到醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；
②、使用摩尔浓度为0.1mol/L的NaOH和摩尔浓度为0.1mol/L的HCl将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至7，得到pH值为7的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；将pH值为7的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有pH值为7的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶；
二、测定初始溶解性有机碳DOC0值：向20mL醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；利用TOC分析仪测定加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的初始溶解性有机碳DOC0值；
三、预处理接种水样：使用孔径为1.76μm的玻璃纤维膜过滤待测水样，得到玻璃纤维膜过滤后的待测水样；将玻璃纤维膜过滤后的待测水样作为同源接种水；以SYBRGreenI为染料，利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数；
步骤三中所述的利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数为活细菌数；
四、接种：在无菌环境下将同源接种水接种至装有pH值为7的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶中，得到待培养水样；
步骤四中所述的待培养水样中细菌的浓度为100000cells/mL；
五、培养：将待培养水样在培养温度为25℃下避光振荡培养3天，得到培养后的待测水样；
步骤五中所述的避光振荡培养是在避光条件下采用空气浴恒温振荡培养箱振荡培养，空气浴恒温振荡培养箱的转速为60rpm；
六、测定最终可生物降解有机碳DOC1值：向20mL培养后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的培养后的待测水样；再利用TOC分析仪测定加入HCl的培养后的待测水样的最终可生物降解有机碳DOC1值；
七、计算待测水样中可生物降解有机碳BDOC含量：
使用步骤二中测定的初始溶解性有机碳DOC0值减去步骤六中测定的最终溶解性有机碳DOC1值，得到待测水样中可生物降解有机碳BDOC值，即完成一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
实施例三步骤三中所述的测定每微升同源接种水中含有的细菌数的方法如下：将同源接种水与SYBRGreenI染料共孵化10min，再利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数，其中所述的同源接种水与SYBRGreenI染料的体积比为100:1。
实施例三中步骤一和步骤二中所述的待测水样为同源水，为东北某生活污水。
对实施例三进行三次平行试验，结果取平均值，得到DOC0值为18.06mg/L，BDOC值为2.83mg/L，结果表明，实施例三待测水样中所含可生物降解有机物较多，BDOC值为DOC0值的15.7％。
本发明给出的实施例为有限的实施例，并非对本发明的限制。
Claims (10)
1.一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法是按以下方法完成的：
一、预处理待测水样：
①、使用孔径为0.22μm的醋酸纤维滤膜过滤待测水样，得到醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；
②、将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至7～7.4，得到pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；将pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样置于无菌无碳的样品瓶中，得到装有pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶；
二、测定初始溶解性有机碳DOC0值：向20mL醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样；利用TOC分析仪测定加入HCl的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的初始溶解性有机碳DOC0值；
三、预处理接种水样：使用孔径为1.76μm的玻璃纤维膜过滤待测水样，得到玻璃纤维膜过滤后的待测水样；将玻璃纤维膜过滤后的待测水样作为同源接种水；以SYBRGreenI为染料，利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数；
四、接种：在无菌环境下将同源接种水接种至装有pH值为7～7.4的醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的样品瓶中，得到待培养水样；
步骤四中所述的待培养水样中细菌的浓度为10000cells/mL～200000cells/mL；
五、培养：将待培养水样在培养温度为20℃～35℃下避光振荡培养3天～28天，得到培养后的待测水样；
六、测定最终可生物降解有机碳DOC1值：向20mL培养后的待测水样中加入50μL质量分数为37％的HCl，混合均匀，得到加入HCl的培养后的待测水样；再利用TOC分析仪测定加入HCl的培养后的待测水样的最终可生物降解有机碳DOC1值；
七、计算待测水样中可生物降解有机碳BDOC含量：
使用步骤二中测定的初始溶解性有机碳DOC0值减去步骤六中测定的最终溶解性有机碳DOC1值，得到待测水样中可生物降解有机碳BDOC值，即完成一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法。
2.根据权利要求1所述的一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于步骤三中所述的同源接种水的接种菌为同源菌。
3.根据权利要求1所述的一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于步骤一②中将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至7～7.4是使用摩尔浓度为0.1mol/L的NaOH和摩尔浓度为0.1mol/L的HCl调节的。
4.根据权利要求1所述的一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于步骤三中利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数为活细菌数。
5.根据权利要求1所述的一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于步骤一②中将醋酸纤维滤膜过滤后的待测水样的pH值调节至7。
6.根据权利要求1所述的一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于步骤四中所述的待培养水样中细菌的浓度为100000cells/mL。
7.根据权利要求1所述的一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于步骤五中所述的培养温度为25℃。
8.根据权利要求1所述的一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于步骤五中所述的培养时间为3天。
9.根据权利要求1所述的一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于步骤五中所述的避光振荡培养是在避光条件下采用空气浴恒温振荡培养箱振荡培养，空气浴恒温振荡培养箱的转速为50rpm～100rpm。
10.根据权利要求1所述的一种水中可生物降解有机碳BDOC含量的测定方法，其特征在于步骤三中所述的测定每微升同源接种水中含有的细菌数的方法如下：将同源接种水与SYBRGreenI染料共孵化10min～20min，再利用流式细胞仪测定每微升同源接种水中含有的细菌数，其中所述的同源接种水与SYBRGreenI染料的体积比为100:1。
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