CN105136964A

CN105136964A - 一种检测香菇素和蘑菇醇的方法

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Publication number: CN105136964A
Application number: CN201510684224.3A
Authority: CN
Inventors: 周佳欣; 周昌艳; 宋卫国; 白冰; 李晓贝
Original assignee: Shanghai Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Shanghai Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2015-10-20
Filing date: 2015-10-20
Publication date: 2015-12-09
Anticipated expiration: 2035-10-20
Also published as: CN105136964B

Abstract

本发明公开了一种检测香菇素和蘑菇醇的方法。本发明提供了一种检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，包括以下步骤：步骤1：将粉碎后的待测样品与邻二氯苯内标标准溶液形成的混合物先加热、再进行顶空固相微萃取；加热的温度为40℃～50℃，加热的时间为30～40分钟；顶空固相微萃取的温度为40℃～50℃，顶空固相微萃取的时间为30～40分钟；步骤2：将萃取物进行解析；解析的温度为200℃～220℃，解析的时间为3～8分钟；步骤3：将解析后的混合物进行气相色谱串联质谱分析，得到待测样品中香菇素或蘑菇醇的质谱图。本发明的检测方法前处理方法简单、操作简单、重复性好、灵敏度高、准确度高，适合于工业化标准化应用。

Description

一种检测香菇素和蘑菇醇的方法

技术领域

本发明涉及一种检测香菇素和蘑菇醇的方法。

背景技术

食用菌风味物质鉴定的研究一直是风味化学研究的重点，食用菌中风味成分可分为挥发性化合物和非挥发性化合物，其中挥发性化合物组分种类繁多，主要包括八碳化合物及其衍生物、萜烯类、含硫化合物以及醛类、酸类、酮类、酯类等，以八碳化合物和含硫化合物为主，醛酸酮酯类等与它们互补，各组分间相互协调、平衡呈现食用菌的香味。

香菇的风味取决于其中含有的挥发性芳香物质，而含硫化合物通常能影响菇体整体的芳香，是香菇中最重要的香味来源。香菇素化学名称为1,2,3,5,6-五硫杂环庚烷(1,2,3,5,6-Pentathiepane)，是一种具有强烈的香菇特征风味的含硫杂环化合物，是由前体物质香菇酸在谷氨酸转肽酶的作用下产生二硫杂环丙烷中间体聚合而成的。1966年被发现并命名为香菇素(Lenthionine)、香菇精。八碳挥发性化合物通常具有很浓烈的蘑菇风味，蘑菇醇(Mushroomalcohol)化学名称为1-辛烯-3-醇，是食用菌中最重要的八碳挥发性化合物之一，几乎存在于所有的食用菌种类中，并且含量较为丰富。因此，对香菇素和蘑菇醇进行分析检测，在食用菌的风味研究中有着重要意义。

作为香菇中挥发性风味物质的重要成分之一，香菇素的检测技术研究受到广泛关注。国内外已有学者运用水蒸气蒸馏法、溶剂萃取法、同时蒸馏萃取法、超临界萃取法对香气成分进行萃取，并应用色谱、质谱及吸闻技术对香菇的特征风味作了研究，鉴定了组成香菇特征风味的化合物。但对于香菇素和蘑菇醇的定性、定量检测，国内外并没有检测标准。郑建仙等(郑建仙，福建香菇风味物质的分离与鉴定[J]，中国食用菌，1995,14(6)，3-6。)采用水汽蒸馏法提取香菇中的风味物质，样品经水浴加热连续抽取2.5小时后，再经浓缩、氮吹，再由气相色谱-质谱检测。该方法不仅前处理步骤复杂、处理时间长、且检测的重复性较差。张书香等(张书香,谢建春,孙宝国.固相微萃取/气-质联用分析香菇挥发性香味成分[J]，北京工商大学学报，自然科学版，2010,28(2)，1-5。)使用Carboxen/PDMS纤维固相微萃取/气-质联机分析了香菇的挥发性香味成分，但该方法不能对各个风味组分进行精确的定量分析，而是采用质量百分比来计算各个风味物质的贡献。

因此，寻找一种准确度高、灵敏度高、重复性好、操作简单、适合于工业化应用的香菇素和蘑菇醇的检测方法是目前急需解决的技术问题。固相微萃取法是利用微纤维表面少量的吸附剂从样品中分离和浓缩分析物的技术。该方法无需有机溶剂、分析样品量少，集采样、萃取、浓缩、进样于一体，主要与气相色谱、液相色谱联用分析鉴定香味物质。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服现有技术测定香菇中风味物质的检测方法中，前处理方法复杂、操作繁琐、重复性较差、灵敏度不高、准确度不高，不适合于标准化应用等缺陷，而提供了一种检测香菇素和蘑菇醇的方法。本发明的检测方法前处理方法简单、操作简单、重复性好、灵敏度高、准确度高，适合于工业化、标准化应用。

本发明提供了一种检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其包括以下步骤：

步骤1：将粉碎后的待测样品与邻二氯苯内标标准溶液形成的混合物先加热、再进行顶空固相微萃取，得到萃取物；所述的加热的温度为40℃～50℃，所述的加热的时间为30～40分钟；所述的顶空固相微萃取的温度为40℃～50℃，所述的顶空固相微萃取的时间为30～40分钟；

步骤2：将步骤1得到的萃取物进行解析，得到解析后的混合物；所述的解析的温度为200℃～220℃，所述的解析的时间为3～8分钟；

步骤3：将步骤2得到的解析后的混合物进行气相色谱串联质谱分析，得到待测样品中香菇素或蘑菇醇的质谱图。

步骤1中，所述的待测样品包括干品和鲜品。所述的干品是指本领域中常规的经过脱水处理后的含有香菇素和/或蘑菇醇的样品。所述的鲜品是指本领域中常规的新鲜的含有香菇素和/或蘑菇醇的样品。当所述的待测样品为鲜品时，所述的“粉碎后的待测样品”优选经过高速研磨匀浆，均匀混合后得到。当所述的待测样品为干品时，所述的“粉碎后的待测样品”优选经过高速研磨、均匀混合后得到；所述的“粉碎后的待测样品”的粒径优选不大于355μm。

步骤1中，所述的待测样品为本领域中常规的含有香菇素和/或蘑菇醇的样品，例如香菇、花菇或金钱菇。

步骤1中，所述的邻二氯苯内标标准溶液的浓度优选100μg/mL～500μg/mL。

步骤1中，所述的待测样品与所述的邻二氯苯的质量比值优选100000～500000。

步骤1中，所述的加热的温度优选45℃～50℃。

步骤1中，所述的加热的时间优选30～35分钟。

步骤1中，所述的加热优选在震荡的条件下进行，所述的震荡转速优选400转每分钟～600转每分钟。

步骤1中，所述的顶空固相微萃取的固相微萃取头优选SPME萃取头，所述的SPME萃取头的组成优选50μm/30μm二乙烯基苯/碳分子筛/聚二甲基硅氧烷(DVB/CAR/PDMS，50μm/30μm表示SPME萃取头的膜厚度)。

步骤1中，所述的顶空固相微萃取的温度优选45℃～50℃。

步骤1中，所述的顶空固相微萃取的时间优选30～35分钟。

步骤1中，所述的顶空固相微萃取优选在震荡的条件下进行，所述的震荡转速优选400转每分钟～600转每分钟。

步骤1中，所述的顶空固相微萃取优选采用自动顶空固相微萃取装置进行，所述的自动顶空固相微萃取装置型号优选G6500-CTC，厂家优选安捷伦。

步骤2中，所述的解析的温度优选210℃～220℃。

步骤2中，所述的解析的时间优选3～5分钟。

步骤3中，所述的气相色谱的参数条件优选：HP-5MS，30m×0.25mm内径，膜厚度0.25μm；进样口温度为220℃；气相程序升温：起始温度50℃，保持1min，以3℃/min的速率升温至180℃，保持5min，再以10℃/min的速率升温至280℃；不分流进样；恒流模式，流速为1mL/min。

步骤3中，所述的串联质谱的参数条件优选：EI离子源温度230℃，传输线温度280℃，碰撞能量70eV；溶剂延迟时间5.5～6.5min，全扫描模式范围为35-550amu；载气为纯度＞99.999％的高纯氦气。

步骤3中，所述的气相色谱串联质谱分析优选采用气相色谱质谱联用仪进行；所述的气相色谱质谱联用仪型号优选Agilent7890A-5975C，厂家优选安捷伦。

本发明所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法中，定性分析方法：利用标准谱库检索，通过比较目标化合物和标准化合物的标准谱图，所得匹配度都在95％以上。所述的香菇素的定性离子为m/z142，定量离子为m/z124和/或78；所述的蘑菇醇的定性离子为m/z57，定量离子为m/z43和/或72。

按照所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法测得待测样品中香菇素或蘑菇醇的质谱图之后，再按照下述公式计算得到待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量：

C_样品为待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克(μg/g)；

C_标液为邻二氯苯内标标准溶液的浓度，单位是微克每毫升(μg/mL)；

V为内标标准溶液的体积，单位为微升(μL)；

A_S为待测样品中香菇素或蘑菇醇的峰面积；

A₀为邻二氯苯内标的峰面积；

W为待测样品质量，单位为克(g)。

本发明中，所述的溶液都用色谱纯的丙酮配制。

在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：

1、本发明运用自动顶空固相微萃取/气相色谱质谱联用仪(HS-SPME-GC/MS)检测风味物质的含量，前处理简单，没有溶剂污染、减小前处理过程中的损失，在检测实际样品的风味物质含量中具有明显的优势。

2、由于高纯度香菇素标准品难以获得，本方法利用内标定量，可以克服由此带来的难以精确定量的问题。

3、本发明方法可有效分析香菇风味中的挥发性成分及组成，且在处理过程中具有操作简单，缩短采样时间，无需溶剂，减少有效成份损失，有效避免杂质干扰、测试的准确性高、重复性好、灵敏度高，香菇素和蘑菇醇的检出限达到了0.01μg/g，为香菇质量评价、风味改良、蘑菇风味料开发提供技术参数和指导。

附图说明

图1表示GC-MS全扫描模式检测实施例1制得的香菇素和蘑菇醇总离子流图。

图2表示实施例1制得的蘑菇醇(1-辛烯-3-醇)的质谱图。

图3表示实施例1制得的香菇素(1,2,3,5,6-五硫杂环庚烷)的质谱图。

图4表示GC-MS全扫描模式检测实施例3制得的花菇干品总离子流图。

图5表示GC-MS全扫描模式检测实施例3制得的金钱菇干品总离子流图。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。

本发明中用到的顶空进样器为安捷伦G6500-CTC、气相色谱仪为安捷伦7890A、质谱仪5975C。气相色谱-质谱联用的参数条件为：进样口温度为220℃；气相程序升温：起始温度50℃，保持1min,以3℃/min的速率升温至180℃，保持5min，再以10℃/min的速率升温至280℃；不分流进样，恒流模式，流速为1mL/min。EI离子源温度230℃，传输线温度280℃，碰撞能量70eV；溶剂延迟时间6.5min，全扫描模式范围为35-550amu。

实施例1香菇鲜品中的香菇素和蘑菇醇含量测定

鲜品经过高速研磨匀浆，均匀混合后得到粉碎后的待测样品，准确称取3份5g粉碎后的待测样品，分别加入10μL浓度为100μg/mL的邻二氯苯标准溶液，得到待测样品。将样品于50℃加热30分钟，使用顶空固相微萃取装置于50℃萃取30分钟，加热和萃取震荡转速为500转每分钟，于220℃的进样口进行解析5分钟，然后进行气相色谱-质谱分析；通过质谱对样品和邻二氯苯内标同时进行检测，通过计算各自的峰面积对样品中香菇素和蘑菇醇的含量进行定量。根据所述的公式定量计算(C_样品为待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克(μg/g)；C_标液为邻二氯苯内标标准溶液的浓度，单位是(μg/mL)；V为内标标准溶液的体积，单位为微升(μL)；A_S为待测样品中香菇素或蘑菇醇的峰面积；A₀为邻二氯苯内标的峰面积；W为待测样品质量，单位为克(g)。)，分析结果如下：检测到香菇鲜品中，蘑菇醇含量为18.80μg/g，RSD值(相对标准偏差(RSD)＝标准偏差(SD)/计算结果的算术平均值×100％)均在9.42％；香菇素含量为7.42μg/g，RSD值为8.23％，具有很好的重现性。GC-MS全扫描模式检测实施例1制得的香菇素和蘑菇醇总离子流图如图1所示。实施例1制得的蘑菇醇(1-辛烯-3-醇)的质谱图如图2所示。实施例1制得的香菇素(1,2,3,5,6-五硫杂环庚烷)的质谱图如图3所示。

实施例2香菇鲜品中的香菇素和蘑菇醇添加回收试验

鲜品经过高速研磨匀浆，均匀混合后得到粉碎后的待测样品，准确称取3份5g粉碎后的待测样品，每份样品中准确加入香菇素标准溶液和蘑菇醇标准溶液，添加浓度为10μg/mL；同时准备未添加标品的空白样品。静置后在全部样品中加入10μL浓度为100μg/mL的邻二氯苯标准溶液，得到待测样品。将样品于50℃加热30分钟，使用顶空固相微萃取装置于50℃萃取30分钟，加热和萃取震荡转速为500转每分钟，于220℃的进样口进行解析5分钟，然后进行气相色谱-质谱分析；通过质谱对样品和邻二氯苯内标同时进行检测，通过计算各自的峰面积对样品中香菇素和蘑菇醇的含量进行定量。根据所述的公式定量计算(C_样品为待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克(μg/g)；C_标液为邻二氯苯内标标准溶液的浓度，单位是(μg/mL)；V为内标标准溶液的体积，单位为微升(μL)；A_S为待测样品中香菇素或蘑菇醇的峰面积；A₀为邻二氯苯内标的峰面积；W为待测样品质量，单位为克(g)。)回收率分析结果如下：蘑菇醇平均回收率为89.42％，(回收率％＝(C_样品-C_空白)/C_添加×100％，C_样品为添加样品中香菇素或蘑菇醇的平均含量，单位为微克每克(μg/g)；C_空白为未添加样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克(μg/g)；C_添加为添加浓度，单位为微克每克(μg/g))；香菇素平均回收率为91.78％，回收率较高。

实施例3金钱菇、花菇干品中香菇素和蘑菇醇含量测定

金钱菇或花菇干品经过高速研磨，均匀混合后得到粉碎后的待测样品(所述的“粉碎后的待测样品”的粒径不大于355μm)，各准确称取3份1g粉碎后的待测样品，置于20mL顶空进样瓶内，加入5mL水，涡旋混匀。加入10μL浓度为100μg/mL的邻二氯苯标准溶液，得到待测样品。将样品于50℃加热30分钟，使用顶空固相微萃取装置于50℃萃取30分钟，加热和萃取震荡转速为500转每分钟，于220℃的进样口进行解析5分钟，然后进行气相色谱-质谱分析；通过质谱对样品和邻二氯苯内标同时进行检测，通过计算各自的峰面积对样品中香菇素和蘑菇醇的含量进行定量。根据所述的公式定量计算(C_样品为待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克(μg/g)；C_标液为邻二氯苯内标标准溶液的浓度，单位是(μg/mL)；V为内标标准溶液的体积，单位为微升(μL)；A_S为待测样品中香菇素或蘑菇醇的峰面积；A₀为邻二氯苯内标的峰面积；W为待测样品质量，单位为克(g)。)，分析结果如下：花菇干品中，蘑菇醇含量为12.30μg/g，RSD值9.30％；香菇素含量为8.94μg/g，RSD值为5.08％；金钱菇干品中，蘑菇醇含量为8.93μg/g，RSD值9.10％；香菇素含量为7.74μg/g，RSD值为6.98％，具有很好的重现性。GC-MS全扫描模式检测实施例3制得的花菇干品总离子流图如图4所示。GC-MS全扫描模式检测实施例3制得的金钱菇干品总离子流图如图5所示。

实施例4

鲜品经过高速研磨匀浆，均匀混合后得到粉碎后的待测样品，准确称取5g粉碎后的待测样品，每个条件3个平行样品，加入10μL浓度为100μg/mL的邻二氯苯标准溶液，得到待测样品。将样品于分别于40℃、50℃、60℃加热30分钟，使用顶空固相微萃取装置分别于40℃、50℃、60℃萃取30分钟，加热和萃取震荡转速为500转每分钟，于220℃的进样口进行解析5分钟，然后进行气相色谱-质谱分析；通过质谱对样品和邻二氯苯内标同时进行检测，通过计算各自的峰面积对样品中香菇素和蘑菇醇的含量进行定量，测试结果见表1。根据所述的公式定量计算(C_样品为待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克(μg/g)；C_标液为邻二氯苯内标标准溶液的浓度，单位是(μg/mL)；V为内标标准溶液的体积，单位为微升(μL)；A_S为待测样品中香菇素或蘑菇醇的峰面积；A₀为邻二氯苯内标的峰面积；W为待测样品质量，单位为克(g)。)，分析结果如表1所示，RSD值(相对标准偏差(RSD)＝标准偏差(SD)/计算结果的算术平均值×100％)。

表1不同萃取温度条件蘑菇醇和香菇素的检测结果

实验结果表明，同一样品在不同萃取温度条件下，当萃取温度为50℃时，检测响应值最高，测得蘑菇醇或香菇素含量最高，且RSD值较低。

实施例5

鲜品经过高速研磨匀浆，均匀混合后得到粉碎后的待测样品，准确称取5g粉碎后的待测样品，每个条件3个平行样品，加入10μL浓度为100μg/mL的邻二氯苯标准溶液，得到待测样品。将样品于50℃分别加热30分钟、45分钟、60分钟，使用顶空固相微萃取装置于50℃分别萃取30分钟、45分钟、60分钟，加热和萃取震荡转速为500转每分钟，于220℃的进样口进行解析5分钟，然后进行气相色谱-质谱分析；通过质谱对样品和邻二氯苯内标同时进行检测，通过计算各自的峰面积对样品中香菇素和蘑菇醇的含量进行定量，测试结果见表2。根据所述的公式定量计算(C_样品为待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克(μg/g)；C_标液为邻二氯苯内标标准溶液的浓度，单位是(μg/mL)；V为内标标准溶液的体积，单位为微升(μL)；A_S为待测样品中香菇素或蘑菇醇的峰面积；A₀为邻二氯苯内标的峰面积；W为待测样品质量，单位为克(g)。)，分析结果表2所示，RSD值(相对标准偏差(RSD)＝标准偏差(SD)/计算结果的算术平均值×100％)。

表2不同萃取时间条件蘑菇醇和香菇素的检测结果

实验结果表明，同一样品在不同萃取时间条件下，当萃取时间为30分钟，检测响应值最高，测得蘑菇醇或香菇素含量最高，且RSD值较低，随着萃取时间增加，检测值反而降低。

实施例6

鲜品经过高速研磨匀浆，均匀混合后得到粉碎后的待测样品，准确称取5g粉碎后的待测样品，每个条件3个平行样品，加入10μL浓度为100μg/mL的邻二氯苯标准溶液，得到待测样品。将样品于50℃加热30分钟，加热和萃取震荡转速为500转每分钟，使用顶空固相微萃取装置于50℃萃取30分钟，于分别于200℃、220℃、250℃的进样口进行解析5分钟，然后进行气相色谱-质谱分析；通过质谱对样品和邻二氯苯内标同时进行检测，通过计算各自的峰面积对样品中香菇素和蘑菇醇的含量进行定量，测试结果见表3。根据所述的公式定量计算(C_样品为待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克(μg/g)；C_标液为邻二氯苯内标标准溶液的浓度，单位是(μg/mL)；V为内标标准溶液的体积，单位为微升(μL)；A_S为待测样品中香菇素或蘑菇醇的峰面积；A₀为邻二氯苯内标的峰面积；W为待测样品质量，单位为克(g)。)，分析结果表3所示，RSD值(相对标准偏差(RSD)＝标准偏差(SD)/计算结果的算术平均值×100％)。

表3不同解析温度条件蘑菇醇和香菇素的检测结果

实验结果表明，同一样品在不同解析温度条件下，当解析温度为220℃，检测响应值最高，测得蘑菇醇或香菇素含量最高，且RSD值较低，随着解析温度的提高，检测值反而降低。

对比实施例1手动人工萃取检测香菇鲜品中香菇素和蘑菇醇(参考文献杏鲍菇品种、栽培工艺及干制方式对其风味物质产生的影响研究，李晓贝，硕士论文；报道的测试方法)

参考文献中手动萃取进样检测香菇中香菇素和蘑菇醇的方法：准确称取3份1g香菇干粉于萃取瓶中，分别加入10μL262mg/L邻二氯苯溶液作为内标，萃取头插入萃取瓶中，于60℃水浴锅内恒温萃取45min。取出萃取头(65μmPDMS/DVB(聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯)，Supelco公司)插入GC-MS进样口，250℃解析5min。色谱条件：HP-INNDWAX(30m×25mm×25μm)毛细管柱；升温程序：进样口250℃，柱初温50℃，以3℃/min升至230℃，后运行温度240℃；载气：He，流速1.0mL/min，不分流进样。质谱条件：EI源，电离电压70eV；发射电流为35μA；离子源温度230℃；质量扫描范围50-550amu。根据公式定量计算，分析结果如下：检测到香菇鲜品中，蘑菇醇RSD值均在15.31％；香菇素RSD值为14.85％，精密度、重现性较差。

对比实施例2香菇鲜品中的香菇素和蘑菇醇添加回收试验

参考文献中手动萃取进样检测香菇中香菇素和蘑菇醇的方法：鲜品经过高速研磨匀浆，均匀混合后得到粉碎后的待测样品，准确称取3份5g粉碎后的待测样品，每份样品中准确加入香菇素标准溶液和蘑菇醇标准溶液，添加浓度为10μg/mL；同时准备未添加标品的空白样品。静置后在加入10μL262mg/L邻二氯苯溶液作为内标，萃取头插入萃取瓶中，于60℃水浴锅内恒温萃取45min。取出萃取头65μmPDMS/DVB(聚二甲基硅氧烷/二乙烯基苯)，Supelco公司)插入GC-MS进样口，250℃解析5min。色谱条件：HP-INNDWAX(30m×25mm×25μm)毛细管柱；升温程序：进样口250℃，柱初温50℃，以3℃/min升至230℃，后运行温度240℃；载气：He，流速1.0mL/min，不分流进样。质谱条件：EI源，电离电压70eV；发射电流为35μA；离子源温度230℃；质量扫描范围50-550amu。回收率分析结果如下：蘑菇醇平均回收率为69.78％，(回收率％＝(C_样品-C_空白)/C_添加×100％，C_样品为添加样品中香菇素或蘑菇醇的平均含量，单位为微克每克(μg/g)；C_空白为未添加样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克(μg/g)；C_添加为添加浓度，单位为微克每克(μg/g))；香菇素平均回收率为65.43％，回收率较低。

Claims

1.一种检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于其包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于：

步骤1中，所述的待测样品包括干品和鲜品。

3.如权利要求2所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于：步骤1中，所述的待测样品为香菇、花菇或金钱菇；

和/或，

当所述的待测样品为鲜品时，所述的“粉碎后的待测样品”经过高速研磨匀浆，均匀混合后得到；

和/或，

当所述的待测样品为干品时，所述的“粉碎后的待测样品”经过高速研磨、均匀混合后得到；

和/或，

当所述的待测样品为干品时，所述的“粉碎后的待测样品”的粒径不大于355μm。

4.如权利要求1所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于：步骤1中，所述的邻二氯苯内标标准溶液的浓度为100μg/mL～500μg/mL；

和/或，

步骤1中，所述的待测样品与所述的邻二氯苯的质量比值为100000～500000；

和/或，

步骤1中，所述的加热的温度为45℃～50℃；

和/或，

步骤1中，所述的加热的时间为30～35分钟；

和/或，

步骤1中，所述的加热在震荡的条件下进行；

和/或，

步骤1中，所述的顶空固相微萃取的固相微萃取头为SPME萃取头；

和/或，

步骤1中，所述的顶空固相微萃取的温度为45℃～50℃；

和/或，

步骤1中，所述的顶空固相微萃取的时间为30～35分钟；

和/或，

步骤1中，所述的顶空固相微萃取在震荡的条件下进行；

和/或，

步骤1中，所述的顶空固相微萃取采用自动顶空固相微萃取装置进行。

5.如权利要求4所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于：

步骤1中，所述的SPME萃取头的组成为50μm/30μm二乙烯基苯/碳分子筛/聚二甲基硅氧烷；

和/或，

步骤1中，当所述的顶空固相微萃取在震荡的条件下进行时，所述的震荡转速优选400转每分钟～600转每分钟；

和/或，

步骤1中，当所述的加热在震荡的条件下进行时，所述的震荡转速优选400转每分钟～600转每分钟；

和/或，

步骤1中，当所述的顶空固相微萃取采用自动顶空固相微萃取装置进行时，所述的自动顶空固相微萃取装置型号为G6500-CTC，厂家为安捷伦。

6.如权利要求1所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于：

步骤2中，所述的解析的温度为210℃～220℃；

和/或，

步骤2中，所述的解析的时间优选3～5分钟。

7.如权利要求1所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于：

步骤3中，所述的气相色谱串联质谱分析采用气相色谱质谱联用仪进行；

和/或，

步骤3中，所述的气相色谱的参数条件为：HP-5MS，30m×0.25mm内径，膜厚度0.25μm；进样口温度为220℃；气相程序升温：起始温度50℃，保持1min，以3℃/min的速率升温至180℃，保持5min，再以10℃/min的速率升温至280℃；不分流进样；恒流模式，流速为1mL/min；

和/或，

步骤3中，所述的串联质谱的参数条件为：EI离子源温度230℃，传输线温度280℃，碰撞能量70eV；溶剂延迟时间5.5～6.5min，全扫描模式范围为35-550amu；载气为纯度＞99.999％的高纯氦气。

8.如权利要求7所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于：

步骤3中，当所述的气相色谱串联质谱分析采用气相色谱质谱联用仪进行时，所述的气相色谱质谱联用仪型号为Agilent7890A-5975C，厂家为安捷伦。

9.如权利要求1所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于：

所述的香菇素的定性离子为m/z142，定量离子为m/z124和/或78；所述的蘑菇醇的定性离子为m/z57，定量离子为m/z43和/或72。

10.如权利要求1～9任一项所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法，其特征在于：按照权利要求1～9任一项所述的检测香菇素和/或蘑菇醇的方法测得待测样品中香菇素或蘑菇醇的质谱图之后，再按照下述公式计算得到待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量：

C_样品为待测样品中香菇素或蘑菇醇的含量，单位为微克每克；

C_标液为邻二氯苯内标标准溶液的浓度，单位是微克每毫升；

V为内标标准溶液的体积，单位为微升；

A_S为待测样品中香菇素或蘑菇醇的峰面积；

A₀为邻二氯苯内标的峰面积；

W为待测样品质量，单位为克。