CN105125666A - 一种利用微生物发酵制备的中药足浴制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了利用微生物发酵制备的中药足浴制剂及其制备方法,属于非肠胃给药制剂领域。本发明中将37-40℃环境的酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌在银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的水溶液中厌氧培养得生物发酵足浴制剂工程菌菌液。采用该菌液发酵组方中药。银杏叶粉提取物对扩张毛孔与血管、提高给药速度均有促进作用。薄荷醇具透皮功效,能提高药物在足底皮层及角质层的通透率。小苏打、食盐、葡萄糖配制的足浴液的密度大于体液的密度,提高了足浴液的渗透压。组方中药经发酵后降解了有毒有害物质,利用有益菌与中药有效成分的协同作用,增强了中药活性素的吸收效果。本发明是祛病保健、科学给药的有效方法。
Description
技术领域
本发明涉及中药足浴制剂领域,特别涉及一种利用微生物发酵制备的中药足浴制剂及其制备方法。
背景技术
传统中药给药的保健方法有多种,均能有效的起到保健祛病的作用。
按剂型分:
(1)传统制剂分:有汤剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、酒剂、糖浆剂、浸出剂、冲剂及颗粒剂、油浸剂、锭剂、露剂、胶剂、茶剂、钉剂、棒剂、栓剂、曲剂、糊剂、糕剂、洗搽剂、油剂、线剂、条剂、熨剂、炙剂、烟剂、药香等;
(2)现代剂型分:片剂、冲剂、袋泡剂、口服液剂、胶囊剂、滴丸剂、合剂、酊剂、气雾剂、灌肠剂、膜剂、眼用制剂、鼻用制剂、海绵剂、针剂等。
按给药途径分为胃肠道给药与非胃肠道给药两种:
(1)胃肠道给药:包括口服、舌下给药和直肠给药;
(2)非胃肠道给药:包括静脉注射、肌内注射和皮下注射、肺吸收给药:如口鼻气雾吸剂与局部用药:如膏药、贴剂等,足浴给药属于非胃肠给药。
剂型与给药方法都很重要,剂型可改变药物的作用性质与作用速度。在作用性质上,经胃肠道给药剂型人有肝脏首过效应,如口服给药;胃肠给药要经过消化吸收,且给肝脏增加负担,有些药物在消化吸收过程中药物效力就会减少或消失。如胰岛素,就不能经胃肠给药。非胃肠道给药剂型人无肝脏首过效应,如皮肤给药、粘膜给药等。在作用速度上,速效制剂常用于急救;如注射剂、吸入气雾剂等,长效制剂也不可缺少,如缓释控制剂、植入剂等。改变剂型可降低(或消除)药物的毒副作用。给药方法可以改变药物的作用与用药量,给药方法的不同使相同组方的药物所起到的作用不同。
正确的给药方法能达到相同药量的数倍疗效,最大限度的减少人体用药的药物残留,避免人体“用药三分毒”的困扰,能充分发挥药物的治疗作用,降低或避免药物的不良反应,人们越来越重视非胃肠给药。目前足浴给药备受关注,但是现有技术中足浴给药吸收效果差。传统足浴法影响药物吸收的原因:1、由于足浴水的密度小于人体液的密度,药物的吸收利用率低;2、使用提高水温的物理法扩张毛孔与血管、增加体液与血液流速、流量,温度难控制,无法达到药物活性素快速、稳定吸收的目的;3、被动的加入促进透皮效果的辅助材料,一是不科学,二是增加了足浴准备材料的难度。例:足浴时另外加冰片,冰片具有透皮效果,但不溶于水;桉树油的穿透角质透皮效果好,但与足浴液的密度不同,难以与药物结合。
发明内容
为了从根本上破解足浴给药的壁垒,本发明提供了一种密度大于人体体液、扩张毛孔与血管、加快血液流速,透皮作用强,吸收效果好的生物发酵制备的中药足浴制剂及其制备方法。
本发明的技术方案为:
一种利用微生物发酵制备的中药足浴制剂,由生物发酵足浴制剂工程菌与组方中药混合后经发酵制成,所述生物发酵足浴制剂工程菌的菌液浓度为1-1000cfu/mL;所述生物发酵足浴制剂工程菌的菌液由酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌在银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的水溶液中厌氧培养而得;所述酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌经过驯化培养能够耐受37-40℃环境;所述银杏叶提取物的浓度为1-10g/L,海藻粉的浓度为2-15g/L,薄荷醇的浓度为5-40ml/L,小苏打的浓度为2-20g/L,食盐的浓度为2-18g/L,葡萄糖的浓度为3-40g/L。
作为优选方案,所述生物发酵足浴制剂工程菌的菌液浓度为80-120cfu/mL;所述银杏叶提取物的浓度为5g/L,薄荷醇的浓度为20ml/L,小苏打的浓度为10g/L,食盐的浓度为12g/L,葡萄糖的浓度为18g/L。
所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,具体步骤为:
1)酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌分别进行反复驯化,使其能够耐受37-40℃的环境并在37-40℃的环境下生长良好;
2)配制银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的混合水溶液,其中,银杏叶提取物的浓度为1-10g/L,海藻粉的浓度为2-15g/L,薄荷醇的浓度为5-40ml/L,小苏打的浓度为2-20g/L,食盐的浓度为2-18g/L,葡萄糖的浓度为3-40g/L;
3)步骤1)所得酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌接种于步骤2)所配制的混合水溶液中,厌氧培养12-48h,得生物发酵足浴制剂工程菌菌液;
4)将组方中药粉碎,并加入步骤3)所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液,于37-40℃下厌氧发酵12-48h;
5)发酵完毕,滤除滤渣,得足浴液制剂。
作为优选方案,所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,将步骤5)所得足浴液制剂进行浓缩,然后喷雾干燥制备足浴粉制剂。
作为优选方案,所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,步骤1)中,所述酿酒酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初所述酿酒酵母的培养温度为28-30℃;所述产朊假丝酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初所述产朊假丝酵母的培养温度为28-30℃;所述罗伊氏乳杆菌的培养基为酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween801.0g、K2HPO42.0g、MgSO4.7H2O0.2g、MnSO4.H2O0.05g、CaCO320.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1.0L,pH6.8;起初所述酿酒酵母的培养温度为37℃;以每次接种升高0.5℃的方法分别对酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌反复接种、培养、提纯、复壮,直至酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌能够耐受37-40℃的温度。
作为优选方案,所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,步骤2)中所述银杏叶提取物的浓度为5g/L,海藻粉的浓度为8g/L,薄荷醇的浓度为20ml/L,小苏打的浓度为10g/L,食盐的浓度为12g/L,葡萄糖的浓度为18g/L。该条件下所得足浴液制剂或足浴粉制剂配制的足浴液(密度略大于1.054g/cm3)吸收效果最好。
作为优选方案,所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,步骤3)中,所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液的浓度为80-120cfu/mL。菌液浓度在该范围时,发酵效果好、发酵效率高,所得足浴液制剂或足浴粉制剂配制的足浴液吸收效果好。
作为优选方案,所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,步骤4)中,将中药粉碎至40-80目。将中药粉碎,利于提高发酵效率,粉碎至40-80目不影响发酵效果,而且后期容易过滤处理。
进一步地,步骤5)中,首先采用设有100目滤网的板框式过滤器过滤除渣,然后采用120-125目筛再次过滤,得足浴液制剂。先粗过滤,再精过滤,过滤速度快,且过滤效果好。
作为优选方案,所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,将足浴液制剂置于蒸发能力为350kg/h,真空度为-0.09Mpa的浓缩罐中进行浓缩。
卫生部公布药食同源物品,可用于保健食品物品名单中,明文规定了可用于保健食品的真菌菌种名单:酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)、产朊假丝酵母(Candidautilis)排在前二位;中华人民共和国卫生部公告(2003年第3号)根据《益生菌类保健食品评审规定》(卫法监发[2001]84号附件4),批准了罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)为可用于保健食品的益生菌菌种。
其中,所述的组方中药为日常生活中治疗各种疾病的常见组方中药,例如辅助增强免疫力、辅助治疗骨骼系统、辅助治疗生殖系统、辅助治疗肌肉系统、辅助治疗神经系统、辅助治疗循环系统、辅助治疗呼吸系统、辅助治疗泌尿系统、辅助治疗皮肤系统、辅助治疗内分泌系统、辅助治疗消化系统等组方的中药。
辅助增强免疫力的足浴中药配方
1)免疫力低下:金银花30g、枸杞20g、当归20g、川芎30g、五味子15g、红花20g、天麻15g、桂枝30g、甘草20g、陈皮15g。
2)眩晕、头痛的人群:磁石、石决明、党参、黄芪、当归、桑枝、枳壳、蔓荆子、白蒺藜、白芍、炒杜仲、牛膝各10克,独活20克。
3)感冒:生姜200克或海桐枝干或水松枝叶100g。
辅助治疗骨骼系统的足浴中药配方适应人群:
1)关节痛疼:当归10g、川芎10g、桂枝10g、川乌10g、红花10g、鸡血藤10g,白芷12g,苏木15g,仙鹤草9g,芥末粉10g、骨碎补(炒)15g、黄瓜种(炒)20g。
2)骨质增生:全虫15克,蜈蚣10条、透骨草50克、桂枝10克、虎杖30克、红花20克、没药10克。
3)腰痛、肾虚腰痛、腿膝无力:肉桂50g,吴茱萸100g,生姜150g,葱头50g,花椒80g。
4)腿疼:红花30克、牛膝30克、络石藤30克、虎杖30克、签草30克、延胡索30克,川椒10克。
5)股骨头坏死:鸡血藤60克,苦参60克,黄芩30克,骨碎补30克,泽兰30克,益母草60克,虎杖60克,夜交藤60克,伸筋草60克,枸杞子30克。
辅助治疗生殖系统的足浴中药配方
1)遗精、早泄:仙鹤草40克、黄芩10克、丹皮10克、芡实30克、女贞子30克、狗脊15克、桑葚30克、知母12克、黄柏12克。
2)痛经:蒲黄20克、五灵脂20克、香附20克、延胡索20克、当归20克、赤芍15克、桃仁10克、没药10克。
3)阳痿不举:巴戟天20g、淫羊藿20g、金樱子20g、葫芦巴20g、阳起石25g、柴胡15g。
辅助治疗肌肉系统的足浴中药配方
1)促进血液循环,舒筋活血,消除疲劳:当归15克,红花、苏木、泽兰、生地、桂枝各10克。
2)肌肉萎缩肌力康复:党参20g、草氏25g、雪川15g、苡仁15g、木主10g、枳壳10g、僵蚕10g、山萸10g、菟丝子10g、山药12g、杞子12g、陈皮8g、升麻8g、炙草6g、胎盘10g、麻黄1g、寸子10g、冬虫夏草3g、甲珠10g、马钱子0.2g。
辅助治疗神经系统的足浴中药配方
1)失眠:磁石30克、菊花15克、黄芩15克、夜交藤15克、生龙骨30克、合欢花l5克。
或丹参20克、远志20克、石菖蒲20克、珍珠母30克、酸枣仁(打碎)20克、黄连10克、白芍20克。
2)神经衰弱:夜交藤500g
3)足支动脉痉挛病:透骨草,元胡,归尾,姜黄,川椒,海桐皮,威灵仙,川牛滕,乳香,没药,羌活,白芷,苏木,五加皮,红花,土茯苓各10克。
辅助治疗循环系统的足浴中药配方
1)高血压:磁石、石决明、党参、黄芪、当归、桑枝、枳壳、乌药、蔓荆子、白蒺藜、白芍、炒杜仲、牛膝各10克,独活26克。
2)高血脂:山楂、泽泻、决明子、何首乌、茵陈、荷叶、丹参、银杏叶、当归、甘草各20g.
3)高血糖:冬桑叶、苦瓜、葛根、玉竹、杜仲叶、黄精、地骨皮、生地黄各30g;
4)血栓闭塞性脉管炎:桂枝、附片、伸筋草、苦参各15克
辅助治疗呼吸系统的足浴中药配方:
1)慢性支气管炎:鱼腥草15g,蝉蜕2g、麻黄5g、细辛5g。
2)下肢静脉曲张:生姜100g。
辅助治疗泌尿系统的足浴中药配方:
1)遗尿:川断、狗脊、女贞子各30克,党参、茯苓各20克,甘草6克。
2)肾病水肿:红花15g,赤芍15g,桃仁15g,桂枝15g,五加皮20g,木瓜20g,透骨草15g。
辅助治疗皮肤系统的足浴中药配方:
1)脚气、足胫肿痛:苏叶梗,防风,槟榔,羌活,当归,木瓜,乳香,没药各3克。
2)脚湿气、足癣脱屑、干裂者:白凤仙花30g、皂角30g、花椒15g。
3)足癣:木瓜30克,甘草30克;或藿香30克,黄精、大黄、皂矾各12克,米醋1000毫升。
4)美容:杏花、桃花、川芎各40g。
5)痤疮:苦杏仁45g,绿茶10g。
6)养颜:当归40g,桂圆肉25g。
7)黄褐斑:山楂、当归各16g,白藓皮、白蒺藜各15g。
8)面疣,粉刺,毛囊炎:鲜嫩丝瓜及新鲜叶藤;或白芷、白芨、瓜蒌、白蔹。
辅助治疗内分泌系统的足浴中药配方
1)糖尿病:金银花、紫丹参、乳香、没药、黄柏、苦参、川芎各30g。
2)痛经:小茴香400克。
3)肥胖症:冬瓜皮500克、茯苓300克、木瓜100克。
辅助治疗消化系统的足浴中药配方
1)暖脾胃:用生姜100克、陈皮20克、薄荷30克。
2)便秘:花椒10g、姜3片、盐30g、小茴香20g。
银杏叶所含成分多,药理活性大,其中仅是黄酮类成分就有20多种,另有萜类,酚类以及多种微量元素,维生素和氨基酸等。具有扩张毛孔与血管、增加血流量的功能外,银杏黄酮能促进脂肪细胞的脂解,在清除流离基方面的效率比维他命E还要高。因此,在发酵菌液中加入了银杏叶粉提取物,对于扩张毛孔与血管、增强血流量、提高给药速度与增强药效均有促进作用。
薄荷醇属于萜(烯)类渗透促进剂,与水无限比例互溶,其主要作用机理是破坏角质层中细胞的脂质屏障,增加药物从水溶性基质向角质层的分配。薄荷醇能够优先地分配进入细胞间隙的角质层,然后可逆地裂解细胞间脂质,从而增加药物的通透作用,提高药物的渗透率。天然海藻粉在足浴中防治皮肤过敏及瘙痒,提高免疫力,加强体能和耐力,抵抗疾病。
用小苏打、食盐、葡萄糖调节至略大于人体液密度(1.050-1.060×103kg/m3≤1.070-1.100×103kg/m3)的足浴液;足浴液密度稍大于体液密度,减少阻力,增强吸收,有利于药物的通透,从而使本足浴液增强了中药活性素的的透皮功效。
本发明利用微生物发酵制备的中药足浴制剂能够排毒除害,促进转化。发酵过程中,微生物产生的各种酶能将不易被人体吸收的大分子有效物质降解为易被人体吸收的小分子有效物质,同时能去除多种大分子杂质与毒素,从而增强药效。组方中药在发酵过程中,利用微生物有益菌(真菌与杆菌)使中药材内的铅、鉻、铝等重金属离子、种植中药的农药残留及有毒有害元素在酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌的生长、繁衍、代谢过程中,被大量的吞噬和降解。而有效的中药活性素就能够通过毛孔与透皮给药,然后被体液与血液吸收,靶向性至病灶处。达到安全有效的辅助理疗的保健目的。
使用时,将所制备的足浴粉制剂5g-10g或足浴液制剂10ml-30ml兑37-40℃温水4L,加入助剂以调节足浴液的密度略大于体液密度,足浴30分钟为一次给药量。运用微生物技术与仿生学原理,加入助剂以调节足浴液的密度略大于体液密度。助剂成分组成:用小苏打、食盐、葡萄糖。
本发明的有益效果为:
本发明中培养酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌耐受37-40℃环境,并将耐受37-40℃环境的酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌中在银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的水溶液中厌氧培养制得生物发酵足浴制剂工程菌的菌液。然后采用该菌液发酵组方中药。
银杏叶粉提取物对扩张毛孔与血管、增强血流量、提高给药速度均有促进作用。海藻粉在足浴中防治皮肤过敏及瘙痒,提高免疫力,加强体能和耐力,抵抗疾病。薄荷醇具有透皮作用,能促进药物的通透,提高药物的渗透率。组方中药经发酵后,药物的活性成分更容易与体液结合,进一步增强了药物的效力与速度,这就是生物发酵足浴液具备的生化作用效果。
另外,由于酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌耐受37-40℃环境,配制的足浴液为37-40℃,足浴液的温度高于人体温度,足浴液的密度大于体液密度,这也给有益菌与组方中药协同作用、增强效力提供了物理性的基础条件。
以微生物发酵工程提取有效的中药活性素,避开胃肠用药的首过效应,减轻肝脏的负担及中毒的风险,在安全有效、无毒副作用的条件下,通过足浴给药的方法,达到保健的目的,也更加符合社会发展与提高生活质量的需求。
具体实施方式
实施例1
一种利用微生物发酵制备的中药足浴制剂,由生物发酵足浴制剂工程菌与组方中药混合后经发酵制成,生物发酵足浴制剂工程菌的菌液浓度为100cfu/mL;生物发酵足浴制剂工程菌的菌液由酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌在银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的水溶液中厌氧培养而得;酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌经过驯化培养能够耐受40℃环境;银杏叶提取物的浓度为5g/L,海藻粉的浓度为8g/L,薄荷醇的浓度为20ml/L,小苏打的浓度为10g/L,食盐的浓度为12g/L,葡萄糖的浓度为18g/L。
利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,具体步骤为:
1)酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌分别进行反复驯化,使其能够耐受40℃的环境并在40℃的环境下生长良好;具体地,酿酒酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初酿酒酵母的培养温度为28-30℃;产朊假丝酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初产朊假丝酵母的培养温度为28-30℃;罗伊氏乳杆菌的培养基为酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween801.0g、K2HPO42.0g、MgSO4.7H2O0.2g、MnSO4.H2O0.05g、CaCO320.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1.0L,pH6.8;起初酿酒酵母的培养温度为37℃;其他条件不变,以每次接种升高0.5℃的方法分别对酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌反复接种、培养、提纯、复壮,直至酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌能够耐受40℃的温度;
2)配制银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的混合水溶液,其中,银杏叶提取物的浓度为5g/L,海藻粉的浓度为8g/L,薄荷醇的浓度为20ml/L,小苏打的浓度为10g/L,食盐的浓度为12g/L,葡萄糖的浓度为18g/L;
3)步骤1)所得酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌接种于步骤2)所配制的混合水溶液中,厌氧培养24h,得生物发酵足浴制剂工程菌菌液;所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液的浓度为100cfu/mL;
4)选取治疗足癣的组方中药:木瓜30克,甘草30克;将该组方中药粉碎至40-80目,并加入步骤3)所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液,于40℃下厌氧发酵24h;菌液的加入量以菌液没过中药为最低限;
5)发酵完毕,首先采用设有100目滤网的板框式过滤器过滤除渣,然后采用120-125目筛再次过滤,滤除滤渣,得足浴液制剂。
治愈病例:潍坊市青州肥料公司王某,男性,48岁,患足癣十三年,寻医买药费尽心思,口服药、外用药用了很多,常年忌口,不敢食用腥、辣食物。每年到大医院治疗终未果。使用实施例1利用微生物发酵制备的中药足浴制剂进行足浴治疗,坚持足浴60天,足癣甚至身上、两胳膊的牛皮癣病痊愈,不再忌口;一年后随访无复发。
实施例2
一种利用微生物发酵制备的中药足浴制剂,由生物发酵足浴制剂工程菌与组方中药混合后经发酵制成,生物发酵足浴制剂工程菌的菌液浓度为120cfu/mL;生物发酵足浴制剂工程菌的菌液由酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌在银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的水溶液中厌氧培养而得;酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌经过驯化培养能够耐受39℃环境;银杏叶提取物的浓度为8g/L,海藻粉的浓度为12g/L,薄荷醇的浓度为25ml/L,小苏打的浓度为8g/L,食盐的浓度为10g/L,葡萄糖的浓度为20g/L。
利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,具体步骤为:
1)酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌分别进行反复驯化,使其能够耐受39℃的环境并在39℃的环境下生长良好;具体地,酿酒酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初酿酒酵母的培养温度为28-30℃;产朊假丝酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初产朊假丝酵母的培养温度为28-30℃;罗伊氏乳杆菌的培养基为酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween801.0g、K2HPO42.0g、MgSO4.7H2O0.2g、MnSO4.H2O0.05g、CaCO320.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1.0L,pH6.8;起初酿酒酵母的培养温度为37℃;以每次接种升高0.5℃的方法分别对酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌反复接种、培养、提纯、复壮,直至酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌能够耐受39℃的温度;
2)配制银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的混合水溶液,其中,银杏叶提取物的浓度为8g/L,海藻粉的浓度为12g/L,薄荷醇的浓度为25ml/L,小苏打的浓度为8g/L,食盐的浓度为10g/L,葡萄糖的浓度为20g/L;
3)步骤1)所得酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌接种于步骤2)所配制的混合水溶液中,厌氧培养36h,得生物发酵足浴制剂工程菌菌液;所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液的浓度为120cfu/mL;
4)选取治疗便秘的组方中药:花椒10g、姜3片、盐30g、小茴香20g;将组方中药粉碎至50-60目,加入步骤3)所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液,于39℃下厌氧发酵36h;菌液的加入量以菌液没过中药为最低限;
5)发酵完毕,首先采用设有100目滤网的板框式过滤器过滤除渣,然后采用120-125目筛再次过滤,滤除滤渣,得足浴液制剂;
6)将步骤5)所得足浴液制剂进行浓缩,然后喷雾干燥制备足浴粉制剂;具体地,将足浴液制剂置于蒸发能力为350kg/h,真空度为-0.09Mpa的浓缩罐中浓缩,然后进行喷雾干燥。
潍坊高密高某,女,52岁,便秘严重,一周排便两次,大便发黑、发干,皮肤暗淡无光;初诊为:燥热内结、气机郁滞、津液不足和脾肾虚寒所引起;使用实施例2利用微生物发酵制备的中药足浴制剂进行足浴治疗,坚持足浴15天,每日排便一次,且时间规律,大便颜色发黄,趋于正常;半年后随访无复发。
实施例3
一种利用微生物发酵制备的中药足浴制剂,由生物发酵足浴制剂工程菌与组方中药混合后经发酵制成,生物发酵足浴制剂工程菌的菌液浓度为150cfu/mL;生物发酵足浴制剂工程菌的菌液由酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌在银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的水溶液中厌氧培养而得;酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌经过驯化培养能够耐受40℃环境;银杏叶提取物的浓度为5g/L,海藻粉的浓度为6g/L,薄荷醇的浓度为30ml/L,小苏打的浓度为10g/L,食盐的浓度为15g/L,葡萄糖的浓度为18g/L。
利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,具体步骤为:
1)酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌分别进行反复驯化,使其能够耐受40℃的环境并在40℃的环境下生长良好;具体地,酿酒酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初酿酒酵母的培养温度为28-30℃;产朊假丝酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初产朊假丝酵母的培养温度为28-30℃;罗伊氏乳杆菌的培养基为酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween801.0g、K2HPO42.0g、MgSO4.7H2O0.2g、MnSO4.H2O0.05g、CaCO320.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1.0L,pH6.8;起初酿酒酵母的培养温度为37℃;其他条件不变,以每次接种升高0.3℃的方法分别对酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌反复接种、培养、提纯、复壮,直至酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌能够耐受40℃的温度;
2)配制银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的混合水溶液,其中,银杏叶提取物的浓度为银杏叶提取物的浓度为5g/L,海藻粉的浓度为6g/L,薄荷醇的浓度为30ml/L,小苏打的浓度为10g/L,食盐的浓度为15g/L,葡萄糖的浓度为18g/L;
3)步骤1)所得酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌接种于步骤2)所配制的混合水溶液中,厌氧培养30h,得生物发酵足浴制剂工程菌菌液;所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液的浓度为150cfu/mL;
4)选取治疗高血压的组方中药:磁石、石决明、党参、黄芪、当归、桑枝、枳壳、乌药、蔓荆子、白蒺藜、白芍、炒杜仲、牛膝各10克,独活26克;将该组方中药粉碎至40-80目,并加入步骤3)所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液,于40℃下厌氧发酵30h;菌液的加入量以菌液没过中药为最低限;
5)发酵完毕,滤除滤渣,得足浴液制剂。
潍坊张某,男性,45岁,患高血压三年有余,严重时110-190mmHg;使用实施例3利用微生物发酵制备的中药足浴制剂进行足浴治疗,坚持足浴50天,血压至85-130mmHg,基本趋于正常;半年后随访无复发。
Claims (10)
1.一种利用微生物发酵制备的中药足浴制剂,其特征在于:由生物发酵足浴制剂工程菌与组方中药混合后经发酵制成;所述生物发酵足浴制剂工程菌的菌液浓度为1-1000cfu/mL;所述生物发酵足浴制剂工程菌的菌液由酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌在银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的水溶液中厌氧培养而得;所述酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌经过驯化培养能够耐受37-40℃环境;所述银杏叶提取物的浓度为1-10g/L,海藻粉的浓度为2-15g/L,薄荷醇的浓度为5-40ml/L,小苏打的浓度为2-20g/L,食盐的浓度为2-18g/L,葡萄糖的浓度为3-40g/L。
2.如权利要求1所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂,其特征在于:所述生物发酵足浴制剂工程菌的菌液浓度为80-120cfu/mL;所述银杏叶提取物的浓度为5g/L,海藻粉的浓度为8g/L,薄荷醇的浓度为20ml/L,小苏打的浓度为10g/L,食盐的浓度为12g/L,葡萄糖的浓度为18g/L。
3.如权利要求1所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,其特征在于,具体步骤为:
1)酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌分别进行反复驯化,使其能够耐受37-40℃的环境并在37-40℃的环境下生长良好;
2)配制银杏叶提取物、海藻粉、薄荷醇、小苏打、食盐和葡萄糖的混合水溶液,其中,银杏叶提取物的浓度为1-10g/L,海藻粉的浓度为2-15g/L,薄荷醇的浓度为5-40ml/L,小苏打的浓度为2-20g/L,食盐的浓度为2-18g/L,葡萄糖的浓度为3-40g/L;
3)步骤1)所得酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌接种于步骤2)所配制的混合水溶液中,厌氧培养12-48h,得生物发酵足浴制剂工程菌菌液;
4)将组方中药粉碎,并加入步骤3)所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液,于37-40℃下厌氧发酵12-48h;
5)发酵完毕,滤除滤渣,得足浴液制剂。
4.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,其特征在于:将步骤5)所得足浴液制剂进行浓缩,然后喷雾干燥制备足浴粉制剂。
5.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,其特征在于:步骤1)中,所述酿酒酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初所述酿酒酵母的培养温度为28-30℃;所述产朊假丝酵母的培养基为5°Bé麦芽汁1.0L、琼脂15.0g,自然pH;起初所述产朊假丝酵母的培养温度为28-30℃;所述罗伊氏乳杆菌的培养基为酪蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0g、酵母粉5.0g、葡萄糖5.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸二铵2.0g、Tween801.0g、K2HPO42.0g、MgSO4.7H2O0.2g、MnSO4.H2O0.05g、CaCO320.0g、琼脂15.0g、蒸馏水1.0L,pH6.8;起初所述罗伊氏乳杆菌的培养温度为37℃;以每次接种升高0.5℃的方法分别对酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌反复接种、培养、提纯、复壮,直至酿酒酵母、产朊假丝酵母和罗伊氏乳杆菌能够耐受37-40℃的温度。
6.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,其特征在于:步骤2)中所述银杏叶提取物的浓度为5g/L,海藻粉的浓度为8g/L,薄荷醇的浓度为20ml/L,小苏打的浓度为10g/L,食盐的浓度为12g/L,葡萄糖的浓度为18g/L。
7.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,其特征在于:步骤3)中,所得生物发酵足浴制剂工程菌菌液的浓度为80-120cfu/mL。
8.如权利要求3所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,其特征在于:步骤4)中,将中药粉碎至40-80目。
9.如权利要求8所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,其特征在于:步骤5)中,首先采用设有100目滤网的板框式过滤器过滤除渣,然后采用120-125目筛再次过滤,得足浴液制剂。
10.如权利要求4所述利用微生物发酵制备的中药足浴制剂的制备方法,其特征在于:将足浴液制剂置于蒸发能力为350kg/h,真空度为-0.09Mpa的浓缩罐中进行浓缩。
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