CN105067693A - 一种单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置 - Google Patents

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吴振斌
田云
陈芝兰
刘碧云
周巧红
贺锋
徐栋
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Abstract

本发明公开了一种单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置,包括多样品芯片围栏、显微镜载玻片和显微镜盖玻片,多样品芯片围栏固定在显微镜载玻片的中间位置处。该载玻片装置结构简单,操作方便,成本低廉,大幅度减小了试验误差和节省了试验时间,从而提高了试验效率以及试验的准确率、精确度,而且该盖玻片装置可重复使用,大大减少了试验的成本。

Description

一种单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置
技术领域
本发明涉及单细胞凝胶电泳试验装置技术领域,具体涉及一种单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置。
背景技术
单细胞凝胶电泳SCGE(Singlecellgelelectrophoresis)又称彗星实验,是一种在单细胞水平上检测DNA单、双链断裂和碱性不稳定位点的方法,具有敏感、稳定、快速的优点。它是在载玻片上用少量低熔点琼脂糖凝胶包埋细胞,细胞经裂解、解旋和电泳后,断裂的DNA片段在电场力作用下向阳极移动,经荧光染料染色,在荧光显微镜下可观察彗星样图像—明亮的头部和弥散的彗尾,之后进行图形分析即可在单细胞水平判断DNA损伤程度。目前,单细胞凝胶电泳技术已广泛用于环境毒理学、生物监测、辐射生物学等领域。
载玻片是单细胞凝胶电泳技术中最基础、最关键的应用装置。但在试验过程中:(1)由于铺有凝胶的载玻片需要经过细胞裂解-解旋-电泳以及与之相应的多次重复洗涤等多个步骤,凝胶十分容易漂移、混淆;(2)在载玻片上铺胶,凝胶的厚度不易控制,导致在显微镜下观察时细胞形态有差异,影响试验结果分析;(3)试验时若涉及的样品较多,则需要在多个载玻片上铺胶,过程繁琐,电泳时易产生试验误差;(4)市场上虽有商品化的单细胞凝胶电泳技术专用载玻片,但多以试剂盒的形式出售,价格昂贵,且多为一次性使用,使得单细胞凝胶电泳技术的成本增加,同时不同批次的试剂盒有可能致使实验结果的可比性降低;(5)商品化的单细胞凝胶电泳试剂盒品种单一,不能适用于多样化的试验样品,应用受限。
发明内容
为了解决上述现有技术存在的问题,本发明提供了一种单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置,该载玻片装置结构简单,操作方便,成本低廉,大幅度减小了试验误差,节省了试验时间,提高了试验效率以及试验的准确率、精确度,而且该载玻片装置可重复使用,极大的减少了试验的成本。
实现本发明上述目的所采用的技术方案为:
一种单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置,包括多样品芯片围栏、显微镜载玻片和显微镜盖玻片,多样品芯片围栏固定在显微镜载玻片的中间位置处。
所述的多样品芯片围栏粘接在显微镜载玻片上。
多样品芯片围栏为4样品芯片围栏、10样品芯片围栏或12样品芯片围栏。
本发明与现有技术相比,其有益效果和优点在于:
1)显微镜载玻片、显微镜盖玻片为实验室中常用普通的显微镜玻璃载玻片、显微镜玻璃盖玻片,市场中有多个品牌售卖,价格便宜来源广泛,适合绝大多数实验室使用,无特殊要求且无需特别处理。
2)多样品芯片围栏为惰性材料,对生物样品无不良影响,多样品测试时多样品芯片围栏可确保不同样品之间无交叉污染,同时易于多样品分析条件的统一,减少试验误差,节约试验时间。
3)盖玻片用于推胶以保证凝胶的厚度,保证荧光显微镜下拍照时同一多样品芯片围栏内的样品在同一焦距面上。
4)多样品芯片围栏可以很好地固定在显微镜载玻片上,多次试验后多样品芯片围栏不会发生脱落,试验后样品便于清洗,无样品和凝胶残留。因此,该载玻片装置冲洗、干燥后可重复使用。
5)市面上售卖的单细胞凝胶电泳技术专用的载玻片,往往以整套试剂盒出售,附带其它装置和药品,不可长期储存,限制了使用时间;同时载玻片多为一次性使用,成本极高。而本发明的载玻片装置组成部件较少,各部件均可单独购买,且价格低廉,易于制作,可重复使用,极大的节约了成本。
6)本发明的载玻片装置中的单个样品区域表面积较小,样品凝固后,在试验过程中经过裂解、解旋和电泳以及相应操作后所必需的冲洗步骤后,样品不易脱落,成功率较高。
7)本发明的载玻片装置中试验样品区域表面积较小,实验过程中所需要的反应溶液体积较小,从而节约试验药品配制时间和购买成本。
8)本发明的载玻片装置首次将用于基因芯片试验的多样品芯片围栏与显微镜载玻片联合应用于彗星试验中,取得了不错的效果。
附图说明
图1为含4样品芯片围栏的单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置的结构示意图。
图2为含10样品芯片围栏的单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置的结构示意图。
图3为含12样品芯片围栏的单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置的结构示意图。
图中:1-显微镜载玻片、2-4样品芯片围栏,3-10样品芯片围栏、4-12样品芯片围栏、5-显微镜盖玻片。
具体实施方式
下面结合附图对本发明进行具体说明。
本发明提供的单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置的结构,包括多样品芯片围栏、显微镜载玻片1和显微镜盖玻片5。显微镜载玻片、显微镜盖玻片均为普通显微镜的载玻片、盖玻片,材质为普通玻璃,多样品芯片围栏为惰性材料。多样品芯片围栏4固定在显微镜载玻片1的中间位置处。本实施例中,显微镜载玻片、显微镜盖玻片均为帆船牌;多样品芯片围栏由博奥生物集团有限公司生产(产品编号:430033),多样品芯片围栏粘接在显微镜载玻片上,制作时该载玻片装置,撕去多样品芯片围栏后面的粘胶保护膜,将多样品芯片围栏直接居中粘接在显微镜载玻片上。显微镜盖玻片的大小保证完全覆盖多样品芯片围栏中的所有样品区域,而且操作方便。
多样品芯片围栏在实际生产过程中,一般分为4样品芯片围栏2、10样品芯片围栏3和12样品芯片围栏4。含4样品芯片围栏、10样品芯片围栏或12样品芯片围栏的单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置如图1、图2和图3所示,这三个装置的结构除了样品芯片围栏不同之外,其他的均相同。
本发明提供的单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置的使用方法如下(以12样品芯片围栏为例):
取该载玻片装置,向12样品芯片围栏中的样品区域加样,加样后将显微镜盖玻片从围栏一侧轻轻放下,使其完全覆盖样品区域,待其凝固后小心移去显微镜盖玻片从而保证所有样品厚度一致,后面的操作和使用普通的载玻片进行细胞凝胶电泳试验一样。
在试验过程中,为避免试验误差常常需要做平行实验,这就使得试验样品的成倍增加,在这样的情况下,样品区域个数相对较少的多样品芯片围栏(如4样品芯片围栏,10样品芯片围栏)的效率就明显小于样品区域个数较多的多样品芯片围栏(如12样品芯片围栏),而当样品较少时,12样品芯片围栏依然可以满足试验条件。因此,试验过程中12样品芯片围栏的实用性更强,应用更加灵活、广泛。
为保证该载玻片装置能重复使用,可在试验结束后,将载玻片装置置于37℃-65℃水中温浴30-60分钟,之后可直接挑去多样品芯片围栏样品区域中的凝胶,最后用无水乙醇浸泡15-30分钟,风干,为下一次试验做好准备。

Claims (3)

1.一种单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置,其特征在于:包括多样品芯片围栏、显微镜载玻片和显微镜盖玻片,多样品芯片围栏固定在显微镜载玻片的中间位置处。
2.根据权利要求1所述的单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置,其特征在于:所述的多样品芯片围栏粘接在显微镜载玻片上。
3.根据权利要求1所述的单细胞凝胶电泳试验的载玻片装置,其特征在于:多样品芯片围栏为4样品芯片围栏、10样品芯片围栏或12样品芯片围栏。
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