CN105028489A - 一种香菇扭结促进剂 - Google Patents

一种香菇扭结促进剂 Download PDF

Info

Publication number
CN105028489A
CN105028489A CN201510397414.7A CN201510397414A CN105028489A CN 105028489 A CN105028489 A CN 105028489A CN 201510397414 A CN201510397414 A CN 201510397414A CN 105028489 A CN105028489 A CN 105028489A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mushroom
supernatant
kink
kinking
solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201510397414.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105028489B (zh
Inventor
林勇
肖冬来
王宏雨
张迪
王泽生
欧阳桐娇
廖剑华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xu Hui
Original Assignee
INSTITUTE OF EDIBLE FUNGI FUJIAN ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by INSTITUTE OF EDIBLE FUNGI FUJIAN ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES filed Critical INSTITUTE OF EDIBLE FUNGI FUJIAN ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES
Priority to CN201510397414.7A priority Critical patent/CN105028489B/zh
Publication of CN105028489A publication Critical patent/CN105028489A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105028489B publication Critical patent/CN105028489B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开了一种香菇扭结促进剂，其是将双孢蘑菇子实体经匀浆、分级沉淀、透析后进一步分离、纯化得到的，所得扭结促进剂在香菇菌丝扭结形成原基的初期使用，可显著促进菌丝扭结，缩短菌丝扭结的时间，从而缩短香菇的出菇时间及香菇的生长周期，提高所栽培香菇的质量，明显提高香菇种植的经济效益，对促进食用菌产业发展具有重要意义。

Description

一种香菇扭结促进剂
技术领域
本发明属于农业研究技术领域，具体涉及一种香菇扭结促进剂。
背景技术
香菇从菌丝栽培成子实体的过程主要经过菌丝生长、菌丝扭结形成原基、转色、出菇这几个环节，其中，菌丝扭结形成原基对于提高香菇产量及香菇质量都有重要作用，而目前对于促进菌丝扭结成原基的研究还较少。
发明内容
本发明的目的在于提供一种香菇扭结促进剂，其可有效促进香菇菌丝扭结形成原基，从而缩短香菇的出菇时间及生长周期，提高所栽培香菇的质量，明显提高香菇种植的经济效益，对促进食用菌产业发展具有重要意义。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种香菇扭结促进剂是从双孢蘑菇子实体中经分离纯化得到的；其分离纯化方法具体包括如下步骤：
1）将双孢蘑菇子实体按质量体积比1:5加入质量浓度为0.9%的生理盐水，4℃下浸泡18h，然后用高速组织捣碎机进行匀浆后再次于4℃下放置4h；
2）将纱布叠成4层用于浆液过滤，所得滤液于4℃下9000r/min冷冻离心20min，取出上清液；按100mL上清液加固体硫酸铵22.6g的比例将硫酸铵加入到所取上清液中，然后将硫酸铵溶液加入到所取上清液中，搅拌混匀后进行盐析，并于4℃下放置18h使其充分沉淀，即为40%的饱和溶液部分；
3）将所得40%的饱和溶液于4℃下9000r/min冷冻离心20min，取出上清液；按100mL上清液加固体硫酸铵12.0g的比例将硫酸铵加入到所取上清液中，然后将硫酸铵溶液加入到所取上清液中，搅拌混匀后进行盐析，并于4℃下放置18h使其充分沉淀，即为60%的饱和溶液部分；
4）将所得60%的饱和溶液于4℃下9000r/min冷冻离心20min，取出沉淀，将沉淀溶于1mol/L的NaCl溶液中，装入透析袋中，用相同盐浓度的溶液透析至外透析液无SO4 2-检出为止；
5）将透析袋中的溶液加入聚乙二醇浓缩后，上DEAE-SepharoseFastFlow柱，用含有NaCl、pH为7.8的PBS缓冲液为洗脱剂进行梯度洗脱，在280nm的检测波长下对出现的色谱峰进行分管收集，以鸽子血检测各峰的凝血活性，收集活性部分；
6）将所收集的活性部分浓缩后上SephadexG-100柱进行纯化，流速为4mL/管、10min/管，以浓度为0.05mol/L、pH为8.0的PBS缓冲液作为洗脱液，在280nm的检测波长下对出现的色谱峰进行分管收集，以鸽子血检测各峰的凝血活性，收集活性部分，经冷冻干燥即得。
所述香菇扭结促进剂是一种凝集素，于香菇菌丝扭结形成原基的初期加入到培养基中，可促进香菇菌丝的扭结。
本发明的显著优点在于：本发明香菇扭结促进剂在香菇菌丝扭结形成原基的初期使用，可显著促进菌丝扭结，缩短菌丝扭结的时间，从而缩短香菇的出菇时间及香菇的生长周期，提高所栽培香菇的质量，明显提高香菇种植的经济效益，对促进食用菌产业发展具有重要意义。
附图说明
图1为未滴加香菇扭结促进剂与滴加香菇扭结促进剂后“武香1号”香菇菌块的菌丝扭结情况，其中A为未滴加香菇扭结促进剂，B为滴加香菇扭结促进剂。
图2为滴加不同浓度香菇扭结促进剂后“武香1号”香菇菌块的菌丝扭结情况，其中1为15mg/mL，2为10mg/mL，3为5mg/mL，4为0mg/mL。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
一种香菇扭结促进剂，其分离纯化方法具体包括如下步骤：
1）从-20℃冰箱中取出双孢蘑菇子实体，先将其解冻，然后将双孢蘑菇子实体按质量体积比1:5加入质量浓度为0.9%的生理盐水，4℃下浸泡18h，然后用高速组织捣碎机进行匀浆后再次于4℃下放置4h；
2）；将纱布叠成4层用于浆液过滤，所得滤液（全程要注意带一次性手套而防止染菌）于4℃下9000r/min冷冻离心20min，取出上清液；按100mL上清液加固体硫酸铵22.6g的比例将硫酸铵加入到所取上清液中，然后将硫酸铵溶液加入到所取上清液中，并用79-1磁力加热搅拌器搅拌混匀后进行盐析，并于4℃下放置18h使其充分沉淀，即为40%的饱和溶液部分；
3）将所得40%的饱和溶液于4℃下9000r/min冷冻离心20min，取出上清液；按100mL上清液加固体硫酸铵12.0g的比例将硫酸铵加入到所取上清液中，然后将硫酸铵溶液加入到所取上清液中，并用79-1磁力加热搅拌器搅拌混匀后进行盐析，并于4℃下放置18h使其充分沉淀，即为60%的饱和溶液部分；
4）将所得60%的饱和溶液于4℃下9000r/min冷冻离心20min，取出沉淀，将沉淀溶于1mol/L的NaCl溶液中，装入透析袋中，用相同盐浓度的溶液透析至外透析液无SO4 2-检出为止；
5）将透析袋中的溶液加入聚乙二醇浓缩后，上DEAE-SepharoseFastFlow柱（1.6cm×30cm），用含有0.05~0.5mol/LNaCl、pH为7.8的PBS缓冲液为洗脱剂进行梯度洗脱，在280nm的检测波长下对出现的色谱峰进行分管收集，以鸽子血检测各峰的凝血活性，收集活性部分；
6）将所收集的活性部分浓缩后上SephadexG-100柱（2.6cm×60cm）进行纯化，流速为4mL/管、10min/管，以浓度为0.05mol/L、pH为8.0的PBS缓冲液作为洗脱液，在280nm的检测波长下对出现的色谱峰进行分管收集，以鸽子血检测各峰的凝血活性，收集活性部分，经冷冻干燥即得。
以“武香1号”香菇品种进行试验：
1.分别在两个平板培养基中央接入一块大小为0.5cm2的“武香1号”香菇菌块（接种过程要全程保持不染菌），放在于25℃恒温培养箱培养，待菌丝布满菌块后，在其中一个培养基中滴加15μl、浓度为5mg/mL的香菇扭结促进剂作为实验组，另一个培养基滴加等量纯净水作为对照组，用透气袋固定，继续放在培养箱中倒置黑暗培养10d左右，然后将培养皿分别转移到10-15℃条件下，自然光照，80％湿度继续培养2d后观察结果，其结果见图1。
从图1可见，与未滴加香菇扭结促进剂的对照组相比，滴加香菇扭结促进剂的实验组中菌丝更粗壮、浓密，说明该香菇扭结促进剂可促进菌丝扭结。
2.在平板培养基中央接入一块大小为0.5cm2的“武香1号”香菇菌块（接种过程要全程保持不染菌），于25℃恒温培养箱培养，待菌丝布满菌块后，将培养基分为四个区域，将不同浓度（15、10、5、0mg/mL）的香菇扭结促进剂分别滴加到各区域，滴加剂量为15μl，继续放在培养箱中倒置黑暗培养10d，然后将培养皿转移到10-15℃条件下，自然光照，80％湿度继续培养20d后观察结果，其结果见图2。
从图2可见，滴加浓度为5、10、15mg/mL香菇扭结促进剂处理后的区域均有扭结现象出现，且随着浓度增加，扭结现象越明显，在15mg/mL浓度下的菌丝扭结现象最明显；而香菇扭结促进剂滴加浓度为15mg/mL的区域只有幼蕾形成。可以推测，随香菇扭结促进剂用量的增加可缩短出菇时间，从而缩短香菇的生长周期。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (2)

1.一种香菇扭结促进剂，其特征在于：所述扭结促进剂是从双孢蘑菇子实体中经分离纯化得到的；
其分离纯化方法具体包括如下步骤：
1）将双孢蘑菇子实体按质量体积比1:5加入质量浓度为0.9%的生理盐水，4℃下浸泡18h，经匀浆后再次于4℃下放置4h；
2）将浆液过滤，所得滤液于4℃下9000r/min冷冻离心20min，取出上清液；按100mL上清液加固体硫酸铵22.6g的比例将硫酸铵加入到所取上清液中，搅拌混匀后进行盐析，并于4℃下放置18h使其充分沉淀，即为40%的饱和溶液部分；
3）将所得40%的饱和溶液于4℃下9000r/min冷冻离心20min，取出上清液；按100mL上清液溶液加固体硫酸铵12.0g的比例将硫酸铵溶液加入到所取上清液中，搅拌混匀后进行盐析，并于4℃下放置18h使其充分沉淀，即为60%的饱和溶液部分；
4）将所得60%的饱和溶液于4℃下9000r/min冷冻离心20min，取出沉淀，将沉淀溶于1mol/L的NaCl溶液中，装入透析袋中，用相同盐浓度的溶液透析至外透析液无SO4 2-检出为止；
5）将透析袋中的溶液加入聚乙二醇浓缩后，上DEAE-SepharoseFastFlow柱，用含有NaCl、pH为7.8的PBS缓冲液为洗脱剂进行梯度洗脱，在280nm的检测波长下对出现的色谱峰进行分管收集，以鸽子血检测各峰的凝血活性，收集活性部分；
6）将所收集的活性部分浓缩后上SephadexG-100柱进行纯化，流速为4mL/管、10min/管，以浓度为0.05mol/L、pH为8.0的PBS缓冲液作为洗脱液进行洗脱，在280nm的检测波长下对出现的色谱峰进行分管收集，以鸽子血检测各峰的凝血活性，收集活性部分，经冷冻干燥即得。
2.根据权利要求1所述香菇扭结促进剂，其特征在于：用于香菇菌丝扭结形成原基的初期。
CN201510397414.7A 2015-07-09 2015-07-09 一种香菇扭结促进剂 Expired - Fee Related CN105028489B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510397414.7A CN105028489B (zh) 2015-07-09 2015-07-09 一种香菇扭结促进剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510397414.7A CN105028489B (zh) 2015-07-09 2015-07-09 一种香菇扭结促进剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105028489A true CN105028489A (zh) 2015-11-11
CN105028489B CN105028489B (zh) 2017-11-21

Family

ID=54435969

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510397414.7A Expired - Fee Related CN105028489B (zh) 2015-07-09 2015-07-09 一种香菇扭结促进剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105028489B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107090020A (zh) * 2017-06-09 2017-08-25 福建省平潭县水产良种实验有限公司 食用菌凝集素及其在抑制棕囊藻生长中的应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5739102A (en) * 1996-04-19 1998-04-14 British Technology Group Limited Wound healing
CN102911261A (zh) * 2011-08-01 2013-02-06 武汉奥力生物科技有限公司 杨树菇凝集素aal-2及其编码基因、其制备方法和应用
CN103275198A (zh) * 2013-06-13 2013-09-04 石河子大学 一种阿魏菇凝集素分离纯化的方法
CN103461471A (zh) * 2013-09-04 2013-12-25 福建省农业科学院食用菌研究所 真姬菇凝集素和脱蛋白多糖在枇杷保鲜中的应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5739102A (en) * 1996-04-19 1998-04-14 British Technology Group Limited Wound healing
CN102911261A (zh) * 2011-08-01 2013-02-06 武汉奥力生物科技有限公司 杨树菇凝集素aal-2及其编码基因、其制备方法和应用
CN103275198A (zh) * 2013-06-13 2013-09-04 石河子大学 一种阿魏菇凝集素分离纯化的方法
CN103461471A (zh) * 2013-09-04 2013-12-25 福建省农业科学院食用菌研究所 真姬菇凝集素和脱蛋白多糖在枇杷保鲜中的应用

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
吴恩奇 等: "蘑菇凝集素及其研究进展", 《菌物研究》 *
张迪 等: "双孢蘑菇2796凝集素的提取及其部分理化性质研究", 《福建农业学报》 *
林勇 等: "从发酵菌丝体中快速制备双孢蘑菇凝集素", 《2012年中国菌物学会学术年会会议摘要》 *
王海峰 等: "双孢菇同工凝集素的制备及性质研究", 《离子交换与吸附》 *
王霁 等: "双孢菇凝集素的纯化及其性质", 《真菌学报》 *
陈玉昆: "《脂肪族天然产物的提取及生产工艺》", 31 October 2009, 科学出版社 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107090020A (zh) * 2017-06-09 2017-08-25 福建省平潭县水产良种实验有限公司 食用菌凝集素及其在抑制棕囊藻生长中的应用
CN107090020B (zh) * 2017-06-09 2020-10-16 福建省平潭县水产良种实验有限公司 食用菌凝集素及其在抑制棕囊藻生长中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN105028489B (zh) 2017-11-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106135126B (zh) 一种养猪和种植结合的可持续式循环种养方法
CN102550311A (zh) 应用真菌发酵液诱导沉香树快速形成沉香的方法
CN101731097A (zh) 一种灰树花液体菌种及用其栽培灰树花的方法
CN107227263B (zh) 白色金针菇jk01菌株及其应用
CN1823571A (zh) 绣球菌人工栽培方法
CN100560599C (zh) 同时制备藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白的方法
CN104823703A (zh) 一种白灵菇栽培方法
CN104350954A (zh) 鹿茸菇栽培方法
CN102986449A (zh) 一种提高香菇品质的方法
CN103570440A (zh) 以香蕉皮为原料的食用菌培养基
CN103570411A (zh) 以火龙果皮为原料的食用菌培养基
CN102972206A (zh) 一种灵芝的人工栽培方法及其培养基
CN102204475B (zh) 一种合生离褶伞圈白蘑js39菌种及其应用
CN105028489A (zh) 一种香菇扭结促进剂
CN103304298B (zh) 一种猴头菇母种培养基及其制作方法
CN107235791A (zh) 一种茉莉花专用的植物营养液
CN103283493A (zh) 一种广东虫草子实体规模化栽培方法
CN105936603A (zh) 一种平菇栽培料及其制备方法
CN113549573B (zh) 一株伯克霍尔德氏菌菌株及其应用
CN104641930B (zh) 一种茶树菇工厂化栽培方法
CN104830665A (zh) 螺旋藻的培育方法及专用装置
CN104604557A (zh) Am真菌侵染棉花提高棉花产量的应用及其方法
CN105191718A (zh) 一种核桃树的栽培方法
CN103891519A (zh) 一种双孢蘑菇高效立体栽培的方法
CN107047067A (zh) 一种食用菌的栽培方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20190918

Address after: 110866 No. 19-1-1 No. 1-14-1 Middle School Road, Dadong District, Shenyang City, Liaoning Province

Patentee after: Xu Hui

Address before: Jinan District of Fuzhou City, Fujian province 350014 before the cross road 95 Lane 10

Patentee before: INSTITUTE OF EDIBLE FUNGI, FUJIAN ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20171121