CN105001186A - 烟草中一种异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法和应用 - Google Patents

烟草中一种异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN105001186A
CN105001186A CN201510358219.3A CN201510358219A CN105001186A CN 105001186 A CN105001186 A CN 105001186A CN 201510358219 A CN201510358219 A CN 201510358219A CN 105001186 A CN105001186 A CN 105001186A
Authority
CN
China
Prior art keywords
medicinal extract
isopentene group
acetone
silica gel
lactone compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201510358219.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105001186B (zh
Inventor
刘春波
张天栋
申钦鹏
周博
赵英良
杨光宇
张凤梅
何沛
司晓喜
苏钟璧
刘志华
朱瑞芝
王昆淼
缪明明
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
China Tobacco Yunnan Industrial Co Ltd
Original Assignee
China Tobacco Yunnan Industrial Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by China Tobacco Yunnan Industrial Co Ltd filed Critical China Tobacco Yunnan Industrial Co Ltd
Priority to CN201510358219.3A priority Critical patent/CN105001186B/zh
Publication of CN105001186A publication Critical patent/CN105001186A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105001186B publication Critical patent/CN105001186B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/87—Benzo [c] furans; Hydrogenated benzo [c] furans
    • C07D307/88—Benzo [c] furans; Hydrogenated benzo [c] furans with one oxygen atom directly attached in position 1 or 3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B15/00—Chemical features or treatment of tobacco; Tobacco substitutes, e.g. in liquid form
    • A24B15/18—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes
    • A24B15/28—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances
    • A24B15/30—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances
    • A24B15/36—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances containing a heterocyclic ring
    • A24B15/40—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances containing a heterocyclic ring having only oxygen or sulfur as hetero atoms
    • A24B15/403—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances containing a heterocyclic ring having only oxygen or sulfur as hetero atoms having only oxygen as hetero atoms
    • A24B15/406—Treatment of tobacco products or tobacco substitutes by chemical substances by organic substances containing a heterocyclic ring having only oxygen or sulfur as hetero atoms having only oxygen as hetero atoms in a five-membered ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A24—TOBACCO; CIGARS; CIGARETTES; SIMULATED SMOKING DEVICES; SMOKERS' REQUISITES
    • A24B—MANUFACTURE OR PREPARATION OF TOBACCO FOR SMOKING OR CHEWING; TOBACCO; SNUFF
    • A24B3/00—Preparing tobacco in the factory
    • A24B3/12—Steaming, curing, or flavouring tobacco

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Manufacture Of Tobacco Products (AREA)

Abstract

本发明公开了一种如式（Ⅰ）所示的异戊烯基苯并内酯类化合物及其制备方法和应用，，式（Ⅰ），属于烟草化学技术领域。以烟叶为原料，以高浓度甲醇水溶液、高浓度乙醇水溶液或高浓度丙酮水溶液作为提取溶剂进行提取，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏；浸膏用硅胶干法装柱进行硅胶柱层析；以氯仿-丙酮的混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩；将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮的混合溶剂洗脱收集浓缩得到的部分进一步用高压液相色谱分离纯化即得所需的异戊烯基苯并内酯类化合物。卷烟添加实验表明：该化合物能柔和卷烟烟气、增加烟气的细腻性，赋予卷烟烟气果香的效果，烟气润感明显。

Description

烟草中一种异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法和应用
技术领域
本发明属于烟草化学技术领域，具体涉及一种从烟草中首次提取得到的异戊烯基苯并内酯类化合物。同时，本发明还涉及该化合物的制备方法和在改善卷烟抽吸品质中的应用。
背景技术
烟草是世界上化学成分最为复杂的植物，次生代谢产物非常丰富，经过几十年的研究，人们目前从烟草中鉴定出来的单体化学物质就超过3000多种，而且还有许多成分尚未鉴定出来。随着我国经济的快速发展，卷烟消费者对产品内在质量的要求越来越高，虽然吸烟有害健康已得到广泛认可，但烟草仍然对成千上万的消费者有着强大的吸引力，除尼古丁的成瘾性外，烟草中丰富的香味物质也发挥着重要作用。
内酯是指同一分子中的羧基与羟基相互作用脱水而形成的酯类化合物，该类化合物在天然植物中普遍存在，在烟草中也有存在该类化合物的文献报道，除具有广泛的药理作用，内酯还是一类重要的香气化合物，，能够对烟草起到增香保润的效果。其天然存在于各种水果和香料植物中,该类化合物现已广泛用于各种饮料、焙烤食品等食用香精的配方中。本发明从烟草中分离得到了一种具有改善卷烟抽吸品质功能的异戊烯基苯并内酯类化合物，该化合物至今尚未见到相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的异戊烯基苯并内酯类化合物。
本发明的另一个目的是提供一种制备所述异戊烯基苯并内酯类化合物的方法。
本发明的目的还在于提供所述异戊烯基苯并内酯化合物在改善卷烟抽吸品质中的应用。
除非另有说明，本发明中所采用的百分数均为质量百分数。
本发明从烟草中分离出一种新的异戊烯基苯并内酯类化合物，其分子式为C14H16O3，具有如式(Ⅰ)所示的结构式：
该化合物命名为5-(羟甲基)-6-异戊烯基-异苯并呋喃-1(3H)-酮，英文名称为：5-(hydroxymethyl)-6-prenyl-isobenzofuran-1(3H)-one，为浅黄色胶状物。
制备上述异戊烯基苯并内酯类化合物的方法，该方法包括以下步骤：
步骤(1)，浸膏提取：将烟叶样品粉碎或切成小段(本发明对烟叶粉碎后的粒度没有要求，对切成的小段的具体长度没有限制)，用高浓度甲醇(w％：80％～100％)或高浓度乙醇(w％：80％～100％)或高浓度丙酮(w％：60％～90％)为提取溶剂进行浸泡提取，提取溶剂：烟草(重量比)＝2～4:1，浸泡24h～72h，提取3～5次，合并提取液，过滤浓缩成浸膏；
步骤(2)，硅胶柱层析：步骤(1)得到的浸膏用重量是其1.5～3倍量的纯甲醇、纯乙醇或纯丙酮溶解后，用重量是浸膏0.8～1.2倍的80～100目硅胶拌样，同时，用重量是其2～4倍量的160～300目硅胶干法装柱，然后干法上样，进行硅胶柱层析；以体积配比依次为(1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1和1:2)的氯仿-丙酮的混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩；其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂；
步骤(3)，高压液相色谱分离纯化：将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮的混合溶剂洗脱收集浓缩得到的部分进一步用高压液相色谱分离纯化即得所述的异戊烯基苯并内酯类化合物。
高压液相色谱分离纯化是采用柱长×内径为21.2mm×250mm，内膜厚度为5μm的C18色谱柱，流速为20mL/min，流动相为质量浓度为42％的甲醇水溶液，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干。
经所述高效液相色谱分离纯化后，一个优选的后续处理方案为，所得化合物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用凝胶柱层析分离，以进一步分离纯化。
以上述方法制备得到的异戊烯基苯并内酯类化合物的结构通过以下方法进行测定。本发明化合物为浅黄色胶状物；紫外光谱(溶剂为甲醇),λmax(logε)302(2.42)，270(3.63)，214(4.11)nm；红外光谱(溴化钾压片)νmax 3436，2926，1654，1610，1556，1459，1378，1259，1160，1037，868，786cm-1；高分辨质谱(HRESIMS)给出准分子离子峰m/z 231.1016[M-H]-(计算值231.1021)。结合图1和图2所示的1H和13C NMR谱给出一个分子式C14H16O3，不饱和度为7。从1H和13CNMR谱(数据归属见表1)信号可以看出化合物中有一个1,2,4,5-四取代的苯环、一个异戊烯基、两个氧化亚甲基、一个酯羰基。根据氧化亚甲基氢H-2'和C-3'的HMBC相关(图3)可证实C-2'和C-3'通过氧原子连接形成了内酯。根据H-8和C-1，H-7和C-1、C-2、C-6，H-6和C-7的HMBC相关可证实异戊烯基连接在苯环的-1位，根另一个据氧化亚甲基氢H-1'和C-1、C-2和C-3的HMBC相关可证实该氧化亚甲基取代在C-2位。至此本化合物的结构得以确定。
表1.化合物的1H NMR和13C NMR数据(C5D5N)
No. δC δH(m,J,Hz) No. δC δH(m,J,Hz)
1 133.7s 8 124.7d 5.40(t)6.8
2 146.1s 9 133.0s
3 125.9d 6.77s 10 16.1q 1.51s
4 145.0s 11 26.1q 1.67s
5 122.7s 1′ 63.3t 4.41s
6 120.7d 7.44s 2′ 69.0t 5.50s
7 28.9t 3.39(d)6.9 3′ 168.2s
本发明还进行了该化合物的卷烟的加香实验，供添加用卷烟为红云红河集团产品“紫云烟”，每支烟丝重量为0.65g。将上述异戊烯基苯并内酯类化合物用乙醇配成0.65％(m/v，g/mL)的溶液，用香精香料注射机添加，分5μL、10μL、15μL、20μL四个注射量，注射的异戊烯基苯并内酯类化合物分别占烟丝总量的0.05‰、0.1‰、0.15‰、0.2‰，以未添加异戊烯基苯并内酯类化合物为对照。注射完后，在室温下敞开摆放2h，让溶剂挥发。然后将卷烟样品在(22±1)℃、相对湿度60％±2％条件下平衡48h，供专家感官评吸用。评吸结果表明：在卷烟中添加该化合物，能柔和卷烟烟气、增加烟气的细腻性，赋予卷烟烟气果香的效果，烟气润感明显，最佳添加量在0.05‰～0.15‰之间。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明化合物是首次被分离出来的，通过上述核磁共振和质谱测定方法确定了为异戊烯基苯并内酯类化合物，并表征了其具体结构。经卷烟添加实验表明：该化合物能柔和卷烟烟气、增加烟气的细腻性，赋予卷烟烟气果香的效果，烟气润感明显。本发明化合物结构简单，能明显改善卷烟抽吸品质，可作为烟用香料研发的先导性化合物，并用于改善卷烟抽吸品质的新添加剂制备。
附图说明
图1为本发明异戊烯基苯并内酯类化合物的核磁共振碳谱；
图2为本发明异戊烯基苯并内酯类化合物的核磁共振氢谱；
图3为本发明异戊烯基苯并内酯类化合物的主要HMBC相关。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的详细说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或改进，均落入本发明的保护范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。
本发明中的溶液如果只给出了溶质，没有公开溶剂，则本领域技术人员应该知晓溶剂为水。本发明中纯甲醇指100％甲醇，纯乙醇是指100％乙醇，纯丙酮是指100％丙酮。
实施例1
制备异戊烯基苯并内酯类化合物C12H12O4，包括浸膏提取、硅胶柱层析、高压液相色谱分离，具体采用以下步骤：
步骤(1)，浸膏提取：取烟叶粉碎，用高浓度甲醇(w％：95％)或高浓度乙醇(w％：90％)或高浓度丙酮(w％：80％)为提取溶剂，提取溶剂：烟草(重量比)＝4:1，浸泡72h，提取5次，合并提取液，过滤浓缩成浸膏。
步骤(2)，硅胶柱层析：步骤(1)得到的浸膏用重量是其3倍量的纯甲醇、纯乙醇或纯丙酮溶解后，用重量是浸膏1倍的80～100目硅胶拌样，同时，用重量是浸膏2.5倍量的250目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析；以体积配比依次为(1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1和1:2)的氯仿-丙酮的混合溶剂作为洗脱剂进行梯度洗脱，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩；其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂；
步骤(3)，高压液相色谱分离：将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮的混合溶剂洗脱收集浓缩得到的部分进一步用高压液相色谱分离纯化即得所述的异戊烯基苯并内酯类化合物，高压液相色谱分离纯化是采用21.2mm×250mm，5μm的C18色谱柱，流速为20mL/min，流动相为42％的甲醇，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干。
高压液相色谱法分离纯化后的物质，一个优选的后处理方案为，所得化合物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用凝胶柱层析分离，以进一步分离纯化。
本发明所用烟叶原料不受地区和品种限制，均可以实现本发明，下面以来源于云南中烟工业有限责任公司不同产地的烟叶原料，对本发明做进一步说明：
实施例2
烟草样品来源于云南玉溪，品种为玉溪K326。将烟草取样2.0kg粉碎以95％的甲醇浸泡提取5次，每次提取24h，提取溶剂：烟叶的重量比＝2:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏105g。浸膏用重量是其2.0倍量的纯甲醇溶解后，用120g的100目粗硅胶拌样，0.6kg的160目硅胶装柱，进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，Zorbax SB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干；所得产物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例3
烟草样品来源于云南大理，品种为云烟200，将烟草取样3.5kg切成小段，以95％的乙醇浸泡提取4次，每次提取48h，提取溶剂：烟叶的重量比＝4:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏250g。浸膏用重量是其2.0倍量的纯甲醇溶解后，用250g的80目粗硅胶拌样，0.8kg的200目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，Zorbax SB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例4
烟草样品来源于云南昆明，品种为红花大金元，将烟草取样5kg粉碎，以75％的丙酮用浸泡提取3次，每次提取72h，提取溶剂：烟叶的重量比＝3:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏380g。浸膏用重量是其1.6倍量的纯甲醇溶解后，用400g的90目粗硅胶拌样，1.5kg的180目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，Zorbax SB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干；所得产物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例5
烟草样品来源于云南大理，品种为云烟200，将烟草取样3.5kg切成小段，以80％的乙醇浸泡提取3次，每次提取72h，提取溶剂：烟叶的重量比＝2:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏250g。浸膏用重量是其1.5倍量的纯甲醇溶解后，用重量是浸膏1.2倍的的100目粗硅胶拌样，用重量是浸膏2倍量的300目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干；所得产物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例6
烟草样品来源于云南大理，品种为云烟200，将烟草取样3.5kg粉碎，以100％的乙醇浸泡提取5次，每次提取24h，提取溶剂：烟叶的重量比＝3:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏251g。浸膏用重量是其3.0倍量的纯甲醇溶解后，用重量是浸膏0.8倍的的90目粗硅胶拌样，用重量是浸膏4倍量的160目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干；所得产物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例7
烟草样品来源于云南大理，品种为云烟200，将烟草取样3.5kg切成小段，以80％的甲醇浸泡提取5次，每次提取24h，提取溶剂：烟叶的重量比＝3.5:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏248g。浸膏用重量是其1.5倍量的纯乙醇溶解后，用重量是浸膏0.85倍的的100目粗硅胶拌样，用重量是浸膏4倍量的160目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例8
烟草样品来源于云南大理，品种为云烟200，将烟草取样3.5kg粉碎，以90％的甲醇浸泡提取3次，每次提取72h，提取溶剂：烟叶的重量比＝2.5:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏252g。浸膏用重量是其3.0倍量的纯乙醇溶解后，用重量是浸膏1.2倍的的80目粗硅胶拌样，用重量是浸膏2倍量的300目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干；所得产物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例9
烟草样品来源于云南大理，品种为云烟200，将烟草取样3.5kg粉碎，以100％的甲醇浸泡提取4次，每次提取50h，提取溶剂：烟叶的重量比＝3:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏251g。浸膏用重量是其2.5倍量的纯乙醇溶解后，用重量是浸膏0.8倍的的90目粗硅胶拌样，用重量是浸膏2.6倍量的250目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配依次比为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干；所得产物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例10
烟草样品来源于云南大理，品种为云烟200，将烟草取样3.5kg粉碎，以60％的丙酮浸泡提取5次，每次提取72h，提取溶剂：烟叶的重量比＝2.4:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏250g。浸膏用重量是其2.8倍量的纯丙酮溶解后，用重量是浸膏1.1倍的的80目粗硅胶拌样，用重量是浸膏2倍量的160目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干；所得产物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例11
烟草样品来源于云南大理，品种为云烟200，将烟草取样3.5kg粉碎，以90％的丙酮浸泡提取3次，每次提取24h，提取溶剂：烟叶的重量比＝2:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏245g。浸膏用重量是其1.5倍量的纯丙酮溶解后，用重量是浸膏1.2倍的的100目粗硅胶拌样，用重量是浸膏4倍量的300目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干；所得产物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
实施例12
烟草样品来源于云南大理，品种为云烟200，将烟草取样3.5kg粉碎，以70％的丙酮浸泡提取4次，每次提取60h，提取溶剂：烟叶的重量比＝4:1，提取液合并，过滤，减压浓缩成浸膏，得浸膏255g。浸膏用重量是其3.0倍量的纯丙酮溶解后，用重量是浸膏0.8倍的的90目粗硅胶拌样，1用重量是浸膏3.5倍量的250目硅胶装柱进行硅胶柱层析，用体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1、1:2的氯仿-丙酮梯度洗脱，TLC监测合并相同的部分并浓缩，得到8个部分，其中将用体积配比为8:2的氯仿-丙酮洗脱浓缩得到的部分用安捷仑1100半制备高效液相色谱分离，以42％的甲醇为流动相，ZorbaxSB-C18(21.2×250mm,5μm)制备柱为固定相，流速为20ml/min，紫外检测器检测波长为302nm，每次进样200μL，收集25.6min的色谱峰，多次累加后蒸干，即得该新化合物。
其中，梯度洗脱时，每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
鉴定例1------化合物结构的鉴定
取实施例1制备的化合物，化合物为浅黄色胶状物；紫外光谱(溶剂为甲醇),λmax(logε)302(2.42)，270(3.63)，214(4.11)nm；红外光谱(溴化钾压片)νmax 3436，2926，1654，1610，1556，1459，1378，1259，1160，1037，868，786cm-1；高分辨质谱(HRESIMS)给出准分子离子峰m/z 231.1016[M-H]-(计算值231.1021)。结合图1和图2所示的1H和13C NMR谱给出一个分子式C14H16O3，不饱和度为7。从1H和13CNMR谱(数据归属见表1)信号可以看出化合物中有一个1,2,4,5-四取代的苯环、一个异戊烯基、两个氧化亚甲基、一个酯羰基。根据H-2'和C-3'的HMBC相关(图3)可证实C-2'和C-3'通过氧原子连接形成了内酯。根据H-8和C-1，H-7和C-1、C-2、C-6，H-6和C-7的HMBC相关可证实异戊烯基连接在苯环的-1位，根另一个据氧化亚甲基氢H-1'和C-1、C-2和C-3的HMBC相关可证实该氧化亚甲基取代在C-2位。至此本化合物的结构得以确定。
鉴定例2取实施例2-12制备的化合物，为黄色胶状物。测定方法与实施例5相同，确认实施例2-12制备的化合物为所述的异戊烯基苯并内酯类化合物——5-(羟甲基)-6-异戊烯基-异苯并呋喃-1(3H)-酮。
应用例1取实施例1-12制备的任一异戊烯基苯并内酯类化合物进行卷烟添加效果实验，试验情况如下：
供添加用卷烟为红云红河集团产品“紫云烟”，每支烟丝重量为0.65g。上述异戊烯基苯并内酯类化合物用乙醇配成0.65％(m/v，g/mL)的溶液，用香精香料注射机添加，分5μL、10μL、15μL、20μL四个注射量，注射的异戊烯基苯并内酯类化合物分别占烟丝总量的0.05‰、0.1‰、0.15‰、0.2‰，以未添加异戊烯基苯并内酯类化合物为对照。注射完后，在室温下敞开摆放2h，让溶剂挥发。然后将卷烟样品在(22±1)℃、相对湿度60％±2％条件下平衡48h，供专家感官评吸用。评吸结果表明：在卷烟中添加该化合物，能柔和卷烟烟气、增加烟气的细腻性，赋予卷烟烟气果香的效果，烟气润感明显，最佳添加量在0.05‰～0.15‰之间。本发明化合物能明显改善卷烟抽吸品质，可作为烟用香料研发的先导性化合物，并用于改善卷烟抽吸品质的新添加剂制备。

Claims (8)

1.如式（Ⅰ）所示的一种异戊烯基苯并内酯类化合物，
                                                 ，式（Ⅰ）；
该化合物的命名为：5-(羟甲基)-6-异戊烯基-异苯并呋喃-1(3H)-酮(5-(hydroxymethyl)-6-prenyl-isobenzofuran-1(3H)-one)。
2.权利要求1所述的异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤（1），浸膏提取:以烟叶为原料，将烟叶粉碎或切成小段，用重量百分浓度80%～100%的甲醇、重量百分浓度80%～100%的乙醇或重量百分浓度60%～90%的丙酮为提取溶剂进行浸泡提取，提取溶剂：烟叶的重量比 = 2～4:1，浸泡24 h～72 h，提取3～5次，合并提取液，过滤浓缩成浸膏；
步骤（2），硅胶柱层析：步骤（1）得到的浸膏用重量是其2～4倍量的160～300目硅胶干法装柱进行硅胶柱层析；以氯仿-丙酮的混合溶剂为洗脱剂进行梯度洗脱，薄层层析法跟踪，合并相同的部分，收集各部分洗脱液并浓缩；梯度洗脱时，氯仿-丙酮的混合溶剂体积配比从1:0逐渐变化至1:2；
步骤（3），高压液相色谱分离纯化：将用体积配比为7:3的氯仿-丙酮的混合溶剂洗脱收集浓缩得到的部分进一步用高压液相色谱分离纯化即得所需的异戊烯基苯并内酯化合物。
3.根据权利要求2所述的异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，高压液相色谱分离纯化后的化合物再次用纯甲醇溶解，再以纯甲醇为流动相，用凝胶柱层析进一步分离纯化。
4.根据权利要求2所述的异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，所述的高压液相色谱分离纯化是采用21.2 mm × 250 mm，5 μm的C18色谱柱，流速为20 mL/min，流动相为质量浓度为42%的甲醇水溶液，紫外检测器检测波长为302 nm，每次进样200 μL，收集25.6 min的色谱峰，多次累加后蒸干。
5.根据权利要求2所述的异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，所述的浸膏在经硅胶柱层析前，用重量是浸膏1.5～3倍量的纯甲醇、纯乙醇或纯丙酮将浸膏溶解后，再用重量是浸膏0.8～1.2倍的80～100目硅胶拌样，混合均匀后，上样。
6.根据权利要求2所述的异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，所述的梯度洗脱时，氯仿-丙酮的混合溶剂体积配比依次为1:0、20:1、9:1、8:2、7:3、6:4、1:1和1:2；每个比例的混合溶剂洗脱时，洗脱到没有成分洗下为止，然后换下一个比例的混合溶剂。
7.权利要求1所述的异戊烯基苯并内酯类化合物在改善卷烟抽吸品质中的应用。
8.根据权利要求7所述的异戊烯基苯并内酯类化合物在改善卷烟抽吸品质中的应用，其特征在于，将所述的苯并内酯类化合物添加到烟丝中，添加的质量为烟丝质量的0.05‰- 0.15‰。
CN201510358219.3A 2015-06-25 2015-06-25 烟草中一种异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法和应用 Active CN105001186B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510358219.3A CN105001186B (zh) 2015-06-25 2015-06-25 烟草中一种异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510358219.3A CN105001186B (zh) 2015-06-25 2015-06-25 烟草中一种异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105001186A true CN105001186A (zh) 2015-10-28
CN105001186B CN105001186B (zh) 2017-07-18

Family

ID=54374096

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510358219.3A Active CN105001186B (zh) 2015-06-25 2015-06-25 烟草中一种异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105001186B (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106083781A (zh) * 2016-06-24 2016-11-09 云南中烟工业有限责任公司 一种具有卷烟增香效果的苯并内酯制备方法及其应用
CN106083782A (zh) * 2016-06-24 2016-11-09 云南中烟工业有限责任公司 一种苯并内酯类化合物、其制备方法及其在卷烟滤嘴加香中的应用
CN106117171A (zh) * 2016-06-29 2016-11-16 云南中烟工业有限责任公司 一种用超临界流体色谱制备烟草中具有抗菌活性的苯并异呋喃类化合物方法和应用
CN106565649A (zh) * 2016-10-18 2017-04-19 云南中烟工业有限责任公司 一种苯并内酯类化合物、其制备方法及在卷烟滤嘴加香中的应用
CN106916160A (zh) * 2017-02-14 2017-07-04 云南民族大学 葛根中一种能改善卷烟抽吸舒适性的异苯并呋喃类化合物制备方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101424675A (zh) * 2008-10-23 2009-05-06 红云烟草(集团)有限责任公司 一种对卷烟的香气风格进行测评的方法
EP2101598A2 (en) * 2007-01-17 2009-09-23 British American Tobacco (Investments) Limited Tobacco product, preparation and uses thereof
CN102267895A (zh) * 2011-08-04 2011-12-07 云南烟草科学研究院 一种苯丙素类化合物及其制备方法和用途
CN102977059A (zh) * 2012-12-06 2013-03-20 云南烟草科学研究院 一种苯丙素化合物及其制备方法与应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2101598A2 (en) * 2007-01-17 2009-09-23 British American Tobacco (Investments) Limited Tobacco product, preparation and uses thereof
CN101424675A (zh) * 2008-10-23 2009-05-06 红云烟草(集团)有限责任公司 一种对卷烟的香气风格进行测评的方法
CN102267895A (zh) * 2011-08-04 2011-12-07 云南烟草科学研究院 一种苯丙素类化合物及其制备方法和用途
CN102977059A (zh) * 2012-12-06 2013-03-20 云南烟草科学研究院 一种苯丙素化合物及其制备方法与应用

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106083781A (zh) * 2016-06-24 2016-11-09 云南中烟工业有限责任公司 一种具有卷烟增香效果的苯并内酯制备方法及其应用
CN106083782A (zh) * 2016-06-24 2016-11-09 云南中烟工业有限责任公司 一种苯并内酯类化合物、其制备方法及其在卷烟滤嘴加香中的应用
CN106083781B (zh) * 2016-06-24 2018-08-17 云南中烟工业有限责任公司 一种具有卷烟增香效果的苯并内酯制备方法及其应用
CN106083782B (zh) * 2016-06-24 2018-09-28 云南中烟工业有限责任公司 一种苯并内酯类化合物、其制备方法及其在卷烟滤嘴加香中的应用
CN106117171A (zh) * 2016-06-29 2016-11-16 云南中烟工业有限责任公司 一种用超临界流体色谱制备烟草中具有抗菌活性的苯并异呋喃类化合物方法和应用
CN106117171B (zh) * 2016-06-29 2018-05-25 云南中烟工业有限责任公司 一种用超临界流体色谱制备烟草中具有抗菌活性的苯并异呋喃类化合物方法和应用
CN106565649A (zh) * 2016-10-18 2017-04-19 云南中烟工业有限责任公司 一种苯并内酯类化合物、其制备方法及在卷烟滤嘴加香中的应用
CN106916160A (zh) * 2017-02-14 2017-07-04 云南民族大学 葛根中一种能改善卷烟抽吸舒适性的异苯并呋喃类化合物制备方法
CN106916160B (zh) * 2017-02-14 2019-01-08 云南民族大学 葛根中一种能改善卷烟抽吸舒适性的异苯并呋喃类化合物制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105001186B (zh) 2017-07-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105017190A (zh) 烟草中一种苯并内酯类化合物的制备方法和应用
CN105001186A (zh) 烟草中一种异戊烯基苯并内酯类化合物的制备方法和应用
CN105061178B (zh) 烟草中一种倍半萜类化合物、其制备方法和用途
CN104945360B (zh) 烟草中一种苯丙素类化合物的制备方法和应用
CN106858710B (zh) 一种能改善卷烟抽吸效果的苯并异呋喃类化合物及其制备方法与应用
CN102304114B (zh) 一种二氢黄酮类化合物及其应用
CN105481818B (zh) 一种增香保润异香豆素类化合物及其制备方法和用途
CN106380473B (zh) 一种内酯类化合物、其制备方法和用途
CN106957322B (zh) 一种能改善卷烟抽吸喉部舒适性的异苯并呋喃类化合物及其制备方法与应用
CN104761526A (zh) 一种具有抗病毒活性的异黄酮类化合物及其制备方法和应用
CN107118195B (zh) 一种能延长烟草净油保质期的异黄酮类化合物及其制备方法与应用
CN105384609B (zh) 用超临界流体色谱制备烟草中倍半萜类化合物及其用途
CN106916160B (zh) 葛根中一种能改善卷烟抽吸舒适性的异苯并呋喃类化合物制备方法
CN107467712A (zh) 一种具有抗菌活性的烟草料液添加剂及其应用
CN101982467A (zh) 一种五味子所含木脂素类化合物及其制备方法和应用
CN105777678B (zh) 一种2‑甲酯基呋喃类增香剂化合物、其制备方法及其在卷烟保润中的应用
CN106083781B (zh) 一种具有卷烟增香效果的苯并内酯制备方法及其应用
CN107759554A (zh) 一种羟丙基异黄酮类化合物及其制备方法和应用
CN104650053B (zh) 一种黄酮类化合物及其制备方法和用途
CN105906491B (zh) 一种降倍半萜类化合物、其制备方法及其在卷烟保润中的应用
CN104262308B (zh) 一种骈六元环联苯类化合物及其制备方法和应用
CN107056800A (zh) 一种长苞铁杉中新成分及其分离方法和应用
CN107382938B (zh) 一种能改善卷烟抽吸喉部舒适性的黄酮类化合物及其制备方法与应用
CN107573313B (zh) 一种玫瑰废渣中的羟丙基黄酮类化合物及其制备方法与应用
CN104370874B (zh) 一种骈七元环联苯类化合物及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant