CN104996503A - 一种用于养殖场的中药复方空气消毒喷雾剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种用于养殖场的中药复方空气消毒喷雾剂及其制备方法，所述中药复方空气消毒喷雾剂以重量份数计，由艾叶200～250份、乌梅200～250份、诃子200份、姜黄200份，丁香100～200份制成。本发明还包括中药复方空气消毒喷雾剂的制备方法。本发明中药组方中诸药配伍相辅相成，共奏抑大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌之显著功效；同时本发明药液经喷雾器、雾化器而造成雾粒、气溶胶，粒子细小可达20～60μm，扩散作用更快更强，不仅能对空气起到安全、有效的消毒作用，还能使尘埃沉降，湿化、清新空气等多种效果，并且制备工艺简单合理，可广泛运用于养殖场的卫生防治，从而有利于开辟中药药源，扩大中药使用范围。

Description

一种用于养殖场的中药复方空气消毒喷雾剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种空气消毒喷雾剂及其制备方法，具体涉及一种用于养殖场的中药复方空气消毒喷雾剂及其制备方法。

背景技术

空气消毒是消除和杀灭人体外环境中各种致病微生物、切断流行途径、控制传染病传播、防止感染的重要措施。目前，人们常用的空气消毒方法大多都是采用化学制剂，如过氧乙酸、戊二醛、过氧化氢、甲醛、乳酸等化学方法以及紫外线照射、臭氧发生器等物理方法，这些方法均存在一定的缺陷，如戊二醛制备成本较高，且对眼睛和黏膜有明显的刺激性；甲醛有高毒高刺激性和潜在致癌性；并且使用化学消毒剂时会有一定量的残留，影响环境和人的身体健康，紫外线照射消毒效果维持不长，停止照射后细菌数很快回升，且受灯管强度、洁净度、环境温湿度、遮挡物和距离影响，且对眼睛、皮肤等有一定伤害；臭氧对金属有腐蚀作用，对橡胶、塑料有加速老化作用，对人体也有一定副作用等。鉴于化学空气消毒剂对人体及环境的种种不利，中药空气消毒剂以其天然无毒、气味芳香、高效安全的优点成为研究的热点。

目前，养殖场是病毒性流行病、传染病的聚集区，严重威胁牲畜和人类的健康，尤其金黄色葡萄球菌无处不在，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌，但现有的养殖场用复方中草药消毒剂对金黄色葡萄球菌抑制效果不明显，并且使用量量大，药液浪费并且扩散慢。例如，现有技术CN201410527763.1公开了一种奶牛养殖场用复方中草药消毒剂，由五倍子26～34份、鱼腥草25～30份、黄连23～27份、黄芩22～26份、大青叶21～25份、穿心莲20～22份、板蓝根20～25份、野菊花20～23份、银杏18～22份、石菖蒲15～20份、厚朴12～16份、百里香10～15份、连线草8～12份、甘草5～10份14种中草药粉碎过筛，混匀，经超声波辅助乙醇提取、减压浓缩以及超声波辅助水煎，最后乙醇浸膏、吐温80、丙二醇按比例混匀，加入水煎液，放置，取其上清液即得复方中草药消毒剂。该发明由于采用的中草药甚多，原料成本较高；而且制备工艺采用超声波辅助提取、水煎，设备耗能成本较高，耗时也较长；同时在使用时生药材含药量为5％(w/v)较大，对金黄色葡萄球菌抑制不明显。因此，研制对病毒尤其是金黄色葡萄球菌的抑菌效果显著、制备工艺简单、使用安全的中药复方空气消毒剂成为当务之急。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种抑菌效果显著、使用安全的养殖场用中药复方空气消毒剂及其制备方法。

本发明进一步要解决的技术问题是，提供一种制备工艺简单的养殖场用中药复方空气消毒剂的制备方法。

本发明解决其技术问题采用的技术方案是：一种用于养殖场的中药复方空气消毒喷雾剂，以重量份数计，由艾叶200～250份、乌梅200～250份、诃子200份、姜黄200份，丁香100～200份制成。

进一步，以重量份数计，由艾叶250份、乌梅250份、诃子200份、姜黄200份、丁香100份制成。

本发明进一步解决其技术问题采用的技术方案是：一种用于养殖场的中药复方消毒喷雾剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)过筛：按比例称取艾叶、乌梅、诃子、姜黄和丁香中药原料，分别粉碎、过50～70目筛，混合；

(2)水煎：将步骤(1)中药混合物加水煎煮提取1～3次，合并水煎液并浓缩到1g/ml，以生药含量计；

(3)醇沉：将步骤(2)中浓缩的水提液冷却至室温，加一定量无水乙醇搅拌，使含醇量达到20～40％，采用3000～5000r/min离心10～30min，取上清液，用30％乙醇定容至含药量0.5～1.5g/ml，分装入喷雾器中，即成。

进一步，所述用于养殖场的中药复方消毒喷雾剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)过筛：按比例称取艾叶、乌梅、诃子、姜黄和丁香中药原料，分别粉碎、过60目筛，混合；

(2)水煎：将步骤(1)中药混合物加水没过药材1～1.5cm，浸泡10～30min，加8～12倍于药量的水，加热煮沸20～40min，过滤，再加4～6倍于药量的水，煮沸20～40min，过滤，将两次滤液合并浓缩，得到水提液浓缩1g/ml，以生药含量计；

(3)醇沉：将步骤(2)中浓缩的水提液冷却至室温，加一定量无水乙醇搅拌，使含醇量达到30％，采用4000r/min离心20min，取上清液，用30％乙醇定容至含药量1g/ml，分装入喷雾器中，即成。

本发明中药组方中，艾叶在体外对炭疽杆菌、α-溶血链球菌、B-溶血链球菌、白喉杆菌、假白喉杆菌、肺类双球菌、金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、白色葡葡球菌、枯草杆菌等10种革兰氏阳性嗜气菌皆有抗菌作用。

乌梅提取液在体外对大肠杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、霍乱杆菌、百日咳杆菌、变形杆菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、类白喉杆菌、人型结核杆菌、脑膜炎球菌、金葡菌、肺炎球菌、溶血性链球菌等均有抑制作用，其醇浸渍液对沙门氏菌、绿脓杆菌作用敏感，其MBC为0.015g·mL^-1。

诃子用盐酸、乙醚提取的乙醇提取物具有抗菌及抗真菌作用。

姜黄体外试验，当姜黄素百分之一浓度时，对金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌、脑膜炎双球菌、痢疾杆菌、炭疽杆菌等致病菌与流感病毒、乙肝病毒等病毒具有较好的抑制作用。

丁香的水、醇、乙醚浸出液及挥发油对致病性真菌均呈非常明显的抗菌作用。

组方中艾叶和乌梅互相配伍相须而用，显著增强了对金黄色葡萄球菌的抑制作用。

本发明中药组方中诸药配伍相辅相成，共奏抑大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌之显著功效；同时本发明药液经喷雾器、雾化器而造成雾粒、气溶胶，粒子细小可达20～60μm，扩散作用更快更强，不仅能对空气起到安全、有效的消毒作用，还能使尘埃沉降，湿化、清新空气等多种效果。本发明采用纯中药制剂有效地克服了化学消毒剂的高刺激性、漂白性、腐蚀性和致癌性等缺点，并且制备工艺简单合理，可广泛运用于养殖场的卫生防治，从而有利于开辟中药药源，扩大中药使用范围。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进一步加以说明。

实施例1

1、中药复方空气消毒喷雾剂的制备

艾叶200g、乌梅200g、诃子200g、姜黄200g、丁香200g，按照上述比例，将五种中药分别粉碎、过60目筛，混合，加蒸馏水没过药材1cm，浸泡20min，加10倍于药量的蒸馏水，加热煮沸30min，过滤，再加5倍于药量的蒸馏水，煮沸30min，过滤，将两次滤液合并浓缩至700mL，待冷却至室温，再加300mL无水乙醇，加乙醇时边加边搅拌，以转速为4000r/min离心20min，取上清液，用30％乙醇定容至1000mL，及时分装至喷雾器的容器中，装上雾化装置及帽盖，即得1000ml含药量1g/ml的中药复方空气消毒喷雾剂。

实施例1制备的种鸡养殖场用中药复方空气消毒喷雾剂为淡棕褐色澄清液体，微生物限度符合《中华人民共和国兽药典》2010版要求。

2、种鸡养殖场用中药复方空气消毒喷雾剂的体外抑菌试验

(1)试验材料与方法：体外药敏试验采用打孔法，在无菌工作台上将大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌在营养琼脂平板上画线培养后，挑单个的菌落接种于MH肉汤中培养12～16h，作为原菌液。将配好灭菌后的MH琼脂培养基在超净台中倒入灭菌后的若干平板中(每个平板里大约4mm厚)，待其自然冷却。将制成的MH平板用保鲜膜密封好置于，试验时选用无菌生长的平板。在无菌工作台上用无菌棉签蘸取菌液，涂布于MH平板上，用打孔器打孔，掏出琼脂块后底部在酒精灯上烤一下，放好后滴加实施例1中制备好的中药消毒剂药液，加至液面与孔表面平行即可，小心地将平板平放在37℃培养箱中，待12h～18h后取出用游标卡尺测量抑菌圈大小，反复测3次，取平均值。

(2)试验结果：通过打孔法得到表1-药敏试验结果。

表1药敏试验结果

菌种	抑菌圈直径(mm)	敏感度
			大肠杆菌	15.80	高敏
金黄色葡萄球菌	17.20	高敏
			沙门氏菌	17.10	高敏

注：抑菌效果判定标准均按《中药药理学》标准即：抑菌圈直径＜10mm为耐药(一)，10mm～15mm为中度敏感(+)，15mm以上为高度敏感(++)。

3、测定最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)

(1)试验材料与方法：用试管二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)，药液通过麦氏比浊管将菌液稀释到1.5×10⁸CFU/mL，操作全部在超净工作台内进行。①取加塞无菌小试管9支，每管中加入制好的普通肉汤培养基1mL，在第1管加实施例1中制备好的药液1mL，用移液枪混匀，吸取1mL至第2管混匀，依次到第7管，第8管做阳性对照(加菌液不加药液)，第9管做阴性对照(加中药不加菌液)，第8管加稀释好的菌液0.1mL，第9管不加菌液。此时1号到7号管内药液的浓度分另相当于500mg/mL、250mg/mL、125mg/mL、62.5mg/mL、31.25mg/mL、15.63mg/mL、7.81mg/mL生药浓度，8号管作阳性对照管，9号管作阴性对照管。②将各组试管置37℃恒温培养箱中培养18h，观察记录结果。与对照组比较，有絮状沉淀的管则为有细菌生长，无絮状沉淀的管为细菌生长受抑制管，以肉眼观察无絮状沉淀管的最低药物浓度作为该药的最低抑菌浓度(MIC)。③重复①～②步，试验结果取3次的平均值。测出最低抑菌浓度(MIC)后，再依次从没有长菌的各试管中用接种环沾取培养液，分别画线接种于不含药的普通琼脂平板上，37℃培养24h，观察有无细菌生长，在普通琼脂平板中，生长的菌落数小于5个菌落的药液最低浓度，即为最低杀菌浓度(MBC)。

(2)试验结果：见表2，表3

表2试管二倍稀释法结果

注：“-”为肉眼见无菌生长，“+”为肉眼见有菌生长。

表3最小杀菌浓度试验结果

由表2、3可知，实施例1制备的中药复方空气消毒剂最小抑菌浓度为125mg/mL，最小杀菌浓度为250mg/mL，由此说明将其稀释8倍仍有抑菌效果。

4、种鸡养殖场内消毒试验

(1)试验材料与方法：采用沉降平板法(自然沉降法)对空气消毒前后各采样一次，消毒时用喷雾器均匀喷洒中药消毒液，消毒前采样是检测消毒前的空气中微生物水平，消毒后采样是检测消毒后的空气中微生物的水平。将灭菌后配制好的普通营养琼脂培养基(每个约18～20mL)倒入无菌平皿内，盖好，置于无菌操作台上室温下冷却凝固后，用保鲜膜密封后置于4℃冰箱中冷藏备用。在种鸡养殖场鸡舍内设5个点，即四个角和室中央各设一采样点，采样高度一般为1.2～1.5m，四周各点距墙0.5～1m。将采样皿放置在相应的采样点上(每个点放三个平板做平行对照)，然后根据室内实际布局情况，由内向外(标记依次为前左、前右、中、后左、后右)，按次序打开采样皿，将采样皿盖扣放于采样皿端口边缘，切勿将盖口朝上，使其暴露于空气中，影响采样结果。采样应根据所暴露环境的实际情况决定，越洁净的地方采样暴露时间越长，以期得到更推确的结果。普通场所暴露5～30min，一般多采用15min；污染较严重的地方暴露5min即可。本试验暴露时间为5min，并注意消毒前后暴露时间的一致，待采样结束后，将平皿盖盖好，反转置于37℃培养箱中，待24～48h后，观察记录培养皿上菌落数(cfu)，杀灭率＝(消毒前菌落数-消毒后菌落数)/消毒前菌落数×100％。

(2)试验结果：见表4

表4室内消毒试验结果

注：“S_前”表示试验前菌落数，“S_后”表示试验后菌落数。

由表4可知，实施例1制备的消毒剂的杀菌率最小为84.62％，最高为90.31％，平均为87.02％，属实际应用有效的消毒剂。

Claims (4)

1.一种用于养殖场的中药复方空气消毒喷雾剂，其特征在于，以重量份数计，由艾叶200～250份、乌梅200～250份、诃子200份、姜黄200份，丁香100～200份制成。

2.根据权利要求1所述的用于养殖场的中药复方空气消毒喷雾剂，其特征在于，以重量份数计，由艾叶200份、乌梅200份、诃子200份、姜黄200份、丁香200份制成。

3.一种如权利要求1或2所述的用于养殖场的中药复方消毒喷雾剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)过筛：按比例称取艾叶、乌梅、诃子、姜黄和丁香中药原料，分别粉碎、过50～70目筛，混合；

(2)水煎：将步骤(1)中药混合物加水煎煮提取1～3次，合并水煎液并浓缩到1g/ml，以生药含量计；

(3)醇沉：将步骤(2)中浓缩的水提液冷却至室温，加一定量无水乙醇搅拌，使含醇量达到20～40％，采用3000～5000r/min离心10～30min，取上清液，用30％乙醇定容至含药量0.5～1.5g/ml，分装入喷雾器中，即成。

4.根据权利要求3所述的用于养殖场的中药复方消毒喷雾剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)过筛：按比例称取艾叶、乌梅、诃子、姜黄和丁香中药原料，分别粉碎、过60目筛，混合；

(2)水煎：将步骤(1)中药混合物加水没过药材1～1.5cm，浸泡10～30min，加8～12倍于药量的水，加热煮沸20～40min，过滤，再加4～6倍于药量的水，煮沸20～40min，过滤，将两次滤液合并浓缩，得到水提液浓缩1g/ml，以生药含量计；

(3)醇沉：将步骤(2)中浓缩的水提液冷却至室温，加一定量无水乙醇搅拌，使含醇量达到30％，采用4000r/min离心20min，取上清液，用30％乙醇定容至含药量1g/ml，分装入喷雾器中，即成。