CN104971077A - 一种昆明杯冠藤总皂苷的新用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种昆明杯冠藤总皂苷的新用途。本发明还公开了一种抗肿瘤的药物组合物。本发明的昆明杯冠藤总皂苷具有毒副作用小、作用机制广、药理效应强等特点，从而避免了西医化学抗肿瘤药物毒副作用大，长期使用容易产生耐药性的缺点，在治疗肿瘤方面显现出很大的优势，特别是对于肝癌和肺癌的治疗作用更为显著。

Description

一种昆明杯冠藤总皂苷的新用途

技术领域

本发明属于制药领域，具体涉及一种昆明杯冠藤总皂苷的新用途。

背景技术

癌症已成为21世纪威胁人类生存的头号杀手，平均每年有600多万人死于各种癌症。中国已成为世界癌症高发国之一，每年新增200多万名癌症患者，占全球总数的20％，并且每年呈快速增长趋势。临床上目前治疗癌症的药物主要是化学药品，但由于化学药物毒性大，在杀死肿瘤细胞的同时也无选择性的杀死白细胞、淋巴细胞等自身免疫细胞，导致各种并发症和严重的不良反应，而且疗程长，费用高，在临床使用中有较大的局限性。中药在治疗癌症方面有独特的优势，以中药为代表的天然药物具有毒副作用小、作用靶点多样、耐受性好等特点，在治疗肿瘤方面越来越受到重视。

昆明杯冠藤(CynanchumwallichiiWight.)又名断节参，是萝藦科鹅绒藤属植物。产于我国四川、贵州、云南以及广西等地，并分布于印度。民间用其治疗风湿关节炎及跌打损伤，云南成药“虎力散”用其为主药。C21甾体类为昆明杯冠藤主要的组成成分之一，从以往研究发现，C21甾体类化合物在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、细胞毒性作用、逆转肿瘤细胞的多药耐药以及增强机体免疫力等方面有着较好的药理作用，而目前仍未见昆明杯冠藤C21甾体类化合物单体或有效部位的药理活性相关研究报道。

基于以上阐述，本发明的研究者，建立了体外细胞模型及体内动物模型来研究昆明杯冠藤总皂苷在抗肿瘤方面，尤其是治疗肝癌方面是否具有药理作用。

发明内容

发明目的：本发明的第一个目的是提供一种昆明杯冠藤总皂苷在制备抗肿瘤药物方面的用途。

本发明的第二个目的是提供一种抗肿瘤的药物组合物。

技术方案：为了解决上述技术问题，本发明的技术方案是：本发明提供了一种昆明杯冠藤总皂苷在制备抗肿瘤药物方面的用途。

上述的抗肿瘤药物应用于人肝癌HepG2细胞和肺癌A549细胞或人肝癌SMMC-7721细胞。

上述的抗肿瘤药物的剂型为片剂、胶囊剂或注射液。

一种抗肿瘤的药物组合物，所述的药物组合物含有昆明杯冠藤总皂苷。

上述的药物组合物应用于人肝癌HepG2细胞和肺癌A549细胞或人肝癌SMMC-7721细胞。

有益效果：本发明具有以下优点：本发明提供了昆明杯冠藤总皂苷的一种临床新用途。本发明的昆明杯冠藤总皂苷具有毒副作用小、作用机制广、药理效应强等特点，从而避免了西医化学抗肿瘤药物毒副作用大，长期使用容易产生耐药性的缺点，在治疗肿瘤方面显现出很大的优势，特别是对于肝癌和肺癌的治疗作用更为显著。

附图说明：

图1昆明杯冠藤总皂苷对HepG2细胞和肺癌A549细胞抑制率。

具体实施方式：

实施例1：昆明杯冠藤总皂苷小鼠急性毒性试验研究

急性毒性试验是指受试动物在一次大剂量给药或一日内多次给药后所产生的毒性反应和死亡情况。给药后立即观察反应，开始观察10分钟，15分钟，30分钟，1小时，2小时后的反应。其余各天观察一次，共七天。应严密观察，并记录动物的外观、行为活动、精神状况、食欲(饲料消耗量)、大小便及其颜色、皮毛、肤色、呼吸、鼻、眼、口腔有无异常分泌物，体重变化以及死亡等情况；死后及时解削进行肉眼观察和病理组织学观察。第七日全部动物测量体重处死并剖检，肉眼观察病变情况。有毒性反应、体重减轻或脏器有病变的动物应在剖检后立即进行主要脏器的病理组织学观察。通过试验观察结果并运用统计学方法计算半数致死量(LD50)，从而为昆明杯冠藤总皂苷的安全性评价以及药效学剂量设定提供依据。

昆明杯冠藤总皂苷，由江苏天晟药业有限公司提供，含量为95％。羧甲基纤维素钠(CMC-Na)，购自国药集团。

雌雄ICR小鼠，18-22g，SPF级别，购自上海斯莱克实验动物中心。动物购入后应在实验室观察1星期，口服给药前，禁食不禁水12h。灌胃给药，0.2mL/10g(体重)；药物用1％CMC-Na配成不同浓度的混悬液。

实验观察期间，部分高剂量组小鼠出现萎靡、低伏，活动减少，体重不增加或降低等现象；其他剂量组及阴性对照组小鼠饮食及饮水正常，体重有波动但总体差异不大且呈增长趋势，均无明显异常体征或活动异常。死亡的小鼠剖检后肉眼观察发现胃肠饱满，肠道粘膜充血扩张，部分可见较明显肝脾充血，少量有胃底粘膜或者肝脏局部的坏死，余脏器器官无明显病理变化。其他剂量组及阴性对照组小鼠观察期满后经剖检观察，胃肠道及肝肾无异常病变，其他脏器也均正常。具体实验结果如表1所示：

表1昆明杯冠藤总皂苷小鼠急性毒性试验结果统计

剂量组(mg/kg)	动物数(只)	死亡数(只)	死亡率
				阴性对照组	6	0	0％
1265	10	0	0％
				2000	10	1	10％
3162	10	4	40％
				5000	10	7	70％
7906	10	10	100％

根据实验结果，计算昆明杯冠藤总皂苷的半数致死量LD50＝3615.84mg/kg，可信区间为2889.13-4569.85mg/kg，结合观察结果可知，该药物毒性等级属于轻度毒性，安全性高，且在安全范围内无明显活动异常及器官脏器损伤。

实施例2：昆明杯冠藤总皂苷对人肝癌HepG2细胞和肺癌A549细胞增殖的影响

昆明杯冠藤总皂苷，由江苏天晟药业有限公司提供，含量为95％。药物按实验要求用无血清培养基配制成适宜浓度。人肝癌HepG2细胞和肺癌A549细胞细胞株均购自美国ATCC公司。

分别取昆明杯冠藤总皂苷分浓度梯度为0.1、1.0、5.0、10、25、50、75、100μM的药液作用于培养的HepG2细胞和A549细胞，通过细胞形态学和MTT法检测中药组合物对HepG2细胞和肺癌A549细胞增殖的影响，采用统计学方法对数据进行分析，计算出细胞抑制率，用平均值(Mean)±标准误(SEM)表示，并分别计算出半数抑制率IC₅₀，具体数据见附图1；

实验结果显示，昆明杯冠藤总皂苷对HepG2细胞和A549细胞的增殖有显著的抑制作用，呈现出剂量依赖性关系；半数抑制率IC₅₀分别为35.4μM和42.1μM。

实施例3：昆明杯冠藤总皂苷对裸鼠移植瘤凋亡的影响实验

昆明杯冠藤总皂苷，由江苏天晟药业有限公司提供，含量为95％。药物均按实验要求用溶剂配制成适宜浓度。人肝癌SMMC-7721细胞株购自美国ATCC公司。实验动物均购自于上海斯莱克实验动物中心。

用人肝癌SMMC-7721细胞建立裸鼠移植瘤模型，待皮下移植瘤形成后，将裸鼠随机分为药物组和模型组，每天分别灌胃给予低、中、高浓度昆明杯冠藤总皂苷(25、50、100mg/kg)和相应溶剂，3周后瘤块离体称重，计算抑瘤率，数据用平均值(Mean)±标准误(SEM)表示，见附表1；透射电镜观察实验组与模型组肝癌移植瘤超微结构；用TUNEL法检测移植瘤中人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的情况。

附表2昆明杯冠藤总皂苷对裸鼠移植瘤的影响

实验结果显示，药物组裸鼠经低、中、高不同浓度昆明杯冠藤总皂苷溶液灌胃后，皮下移植瘤体积、重量均显著性地小于模型组(P<0.05)，抑瘤率分别为18.46％、34.87％和41.03％，且呈剂量依赖性关系；透射电镜观察，药物组肝癌移植瘤组织均见不同时期凋亡细胞，部分形成凋亡小体；TUNEL法检测药物组移植瘤中人肝癌SMMC-7721细胞凋亡明显均多于模型组(P<0.05)。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (5)

1. 一种昆明杯冠藤总皂苷在制备抗肿瘤药物方面的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，所述的抗肿瘤药物应用于人肝癌HepG2细胞和肺癌A549细胞或人肝癌SMMC-7721细胞。

3.根据权利要求1所述的用途，所述的抗肿瘤药物的剂型为片剂、胶囊剂或注射液。

4.一种抗肿瘤的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有昆明杯冠藤总皂苷。

5.权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物应用于人肝癌HepG2细胞和肺癌A549细胞或人肝癌SMMC-7721细胞。