CN104961798A

CN104961798A - 作为parp抑制剂的化合物

Info

Publication number: CN104961798A
Application number: CN201510361359.6A
Authority: CN
Inventors: 杨洋
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2015-06-28
Filing date: 2015-06-28
Publication date: 2015-10-07

Abstract

本发明涉及作为PARP抑制剂的式(I)化合物，其能用于治疗一种或多种聚(ADP-核糖)合成酶介导的疾病的药物，进一步的，其能够用于治疗癌症，特别是黑色素瘤癌。

Description

作为PARP抑制剂的化合物

技术领域

本发明属于化学领域，具体地说，本发明涉及抗癌的化合物。

背景技术

PARP (EC2. 4. 2. 30)，也称为PARS (对于聚(ADP-核糖)合成酶)，或ADPRT，是116kDa的主要核内蛋白。它主要存在于几乎所有的真核生物中。该酶合成聚（ADP-核糖），一种由超过200个来自NAD的ADP-核糖单元组成的分支聚合物。聚（ADP-核糖）的蛋白受体直接或间接地参与维持DNA完整性。这些受体包括：组蛋白、拓扑异构酶、DNA和RNA聚合酶、DNA连接酶以及Ca2+和Mg2+依赖性内切核酸酶。

PARP-抑制剂增强细胞毒试剂致死的能力，无论通过放射增敏肿瘤细胞以增强电离辐射还是通过化学增敏肿瘤细胞以增强化疗剂的细胞毒作用。因此，本领域仍然需要有效而强效的PARP抑制剂，提高电离辐射和/或化疗剂对肿瘤细胞的致死作用，而引起的副作用最小。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种PARP-抑制剂的的化合物。

本发明根据一些与PARP相互作用的小分子化合物，其在母体骨架上引入肽(氨基酸)链，得到与PARP相互作用的肽基取代化合物。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案实现上述目的：

（式I）

一种肽基取代的化合物，结构式如式I所示，

所述的R1为三肽或四肽。

所述的R1的氨基酸序列为GGR、GHK、GSR、GDD、GQQ、GGS、GAP、GEGL、GMSW、GSEK、GRKS。其中各个大写字母代表本领域熟知的氨基酸。

更进一步提供上述的肽基取代化合物的制备方法，包括以下步骤：

（1）合成S1所示的化合物，参照CN101223175A的合成方法;

（S1）

（2）将S1与氯乙酸在碱性环境中进行烃基化反应，而后再与氯化亚砜进行氯代反应，得到化合物S2或者采用本领域常用的其它的方式实现Cl的取代；

（S2）

（3）将S2与甘氨酸进行取代反应，得到化合物S3；

（S3）；

（4）将S3的化合物分别与通过Fmoc基团保护的不同的氨基酸连接到Rink Amide AM树脂进而发生缩合反应获得目的的化合物（如式I所示）。所述的缩合反应是通过多肽固相合成法进行缩合反应后，用三氟乙酸脱去树脂，最终获得所述的肽基取代化合物。

更进一步提供上述的肽基取代化合物在制备抗癌药物中的应用。

所述的抗癌药物的剂型为片剂、丸剂、胶囊、注射剂、悬浮剂或乳剂。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

1.本发明的化合物对ADPRT具有很好的抑制活性，显示对癌细胞的良好的抑制活性，从而对多种癌细胞株具有显著的抑制作用；

2.本发明的化合物对正常细胞毒性小，在制备抗癌药物的应用中安全性高；

3.本发明的化合物可以可制成各种剂型的抗癌药物，具有很高的医学价值和广阔的市场前景。

具体实施方式

实施例1 目标化合物的制备

（1）参照CN101223175A ，得到化合物S1；

（3）将S2与甘氨酸进行取代反应，得到化合物S3；

（4）将S3的化合物分别与通过Fmoc基团保护的不同的氨基酸（GGR、GHK、GSR、GDD、GQQ、GGS、GAP、GEGL、GMSW、GSEK、GRKS）连接到Rink Amide AM树脂进而发生缩合反应获得目的的化合物。所述的缩合反应是通过多肽固相合成法进行缩合反应后，用三氟乙酸脱去树脂，最终获得所述的肽基取代化合物。通过串联液质鉴定，化合物结构正确。

实施例2 肽基取代化合物的功能验证

人A375黑色素瘤细胞株，以RPMI1640培养液（含10%灭活小牛血清、100 U/mL青霉素和100 U/mL链霉素）培养，生长于37 ℃、5%CO2培养箱内。

消化制备细胞悬液 1×10⁵/mL，在96孔板中，每孔加100 μL细胞悬液，培养24 h贴壁。换液，加入含不同浓度药物的培养液，每孔100 μL，每一浓度设4个平行孔，化合物终浓度为3.0 mg/L。继续培养72 h。每孔加20 μL MTT（5 mg/mL），放回培养箱，继续孵育4 h。弃上清，每孔加入150 μL DMSO，轻微振荡15 min，使结晶充分溶解，空白对照孔调零，20 min内，选择490 nm波长，在自动荧光酶标仪上测定各孔的吸光度值（A）。实验重复3次，取平均值。计算细胞增殖抑制率：抑制率%=（1－实验组A值/对照组A值）×100%。抑制结果如下：

化合物种类	人A375黑色素瘤细胞株抑制率%	正常人表皮细胞抑制率%
			化合物S1	45.3%	12.8%
式I- GGR取代	85.7%	3.3%
			式I- GHK取代	88.3%	2.7%
式I- GSR取代	87.6%	1.9%
			式I- GDD取代	88.9%	2.2%
式I- GQQ取代	90.1%	2.5%
			式I- GGS取代	89.1%	2.9%
式I- GAP取代	90.5%	2.6%
			式I- GEKL取代	88.6%	2.9%
式I- GMSW取代	87.4%	2.4%
			式I- GSEH取代	84.6%	2.5%
式I- GRKS取代	89.1%	2.9%

本专利所述的化合物在浓度为3mg/L时，对癌细胞有明显抑制作用。

同时采用MCF-7细胞进行试验，得到基本一致的实验结果。说明化合物具有广谱的抗癌效果。

实施例3 肽基取代化合物的活体实验

参照CN101223175A中的方法；将B16细胞（2.5X10⁵)皮下接种到小鼠侧腹。卡尺测量肿瘤，根据公式[(宽度）²X长度]/2计算体积。接种后6天，当肿瘤根瘤体积达到100-150mm³时，开始药物处理。给予本发明肽基取代的这些化合物(40mg/kg 口服（po)), 20分钟后给予替莫唑胺（100mg/kg腹腔内注射（ip)),每天一次，持续5天。每3天测量肿瘤根瘤，监测黑色素瘤生长，持续3周。结果表明，肽基取代的化合物+TMZ联合治疗显著降低了 B16黑色素瘤的生长，在第三周末，其结果如下：

化合物种类	肿瘤体积（mm³）
		无添加对照	9700
使用S1+替莫唑胺	4500
		式I- GGR取代+替莫唑胺	560
式I- GHK取代+替莫唑胺	540
		式I- GSR取代+替莫唑胺	570
式I- GDD取代+替莫唑胺	560
		式I- GQQ取代+替莫唑胺	580
式I- GGS取代+替莫唑胺	530
		式I- GAP取代+替莫唑胺	530
式I- GEKL取代+替莫唑胺	540
		式I- GMSW取代+替莫唑胺	530
式I- GSEH取代+替莫唑胺	520
		式I- GRKS取代+替莫唑胺	570

从上述结果可以看出，本发明的化合物具有较好的抑制肿瘤繁殖的功能。具有较好的实用价值。

Claims

1.一种化合物，其特征在于，结构式如式I所示，式I，

所述的R1为GGR、GHK、GSR、GDD、GQQ、GGS、GAP、GEGL、GMSW、GSEK、GRKS或其它合适的取代。

2.根据权利要求1所述的化合物在制备抗癌药物中的应用。

3.根据权利要求2所述的化合物在制备抗癌药物中的应用，其特征在于，所述的抗癌药物的剂型为片剂、丸剂、胶囊、注射剂、悬浮剂或乳剂。

4.根据权利要求3所述的化合物在制备抗癌药物中的应用，其特征在于，所述的抗癌药物为抗黑色素瘤癌药物。