CN104958778A - 一种口腔抑菌促愈合材料及其应用 - Google Patents
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Abstract
一种口腔抑菌促愈合材料,其特征是由水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物与金属离子及具有抑菌作用的抗菌肽及碘(I2)组成;该口腔抑菌促愈合材料为粉末状、海绵状、膜片状或胶体状;所述水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物为羟丙基甲壳素/壳聚糖,羟乙基甲壳素/壳聚糖,羧甲基甲壳素/壳聚糖,羧乙基甲壳素/壳聚糖,琥珀酰甲壳素/壳聚糖中的一种或两种衍生物的混合物;所述金属离子为水溶性锌盐/钙盐/铝盐/铁盐中的一种或任意两种的混合物。该材料具有良好的抑菌、促进损伤组织修复作用,用于牙周病、口腔溃疡的防治不易产生耐药性,避免口腔内正常菌群失调,与传统药物相比优势显著,是一种优于现有治疗方式的新材料,具有较高的应用开发价值。
Description
技术领域
本发明属于医疗用品领域,涉及一种口腔抑菌促愈合材料及其应用。
背景技术
牙周病、口腔溃疡都是极为常见的口腔疾病。牙周病主要诱因为细菌感染,细菌以菌斑的形式堆积在牙面和龈沟内,微生物及其代谢产物刺激牙周组织,引发牙周炎,它的主要症状表现为牙龈出血,红肿,化脓,牙龈萎缩,牙松动甚至脱落,从而造成牙齿缺失,影响咀嚼和消化功能,该病同时可做为感染病灶导致或加剧某些全身疾病,如糖尿病、心血管疾病、感染性心内膜炎、呼吸道疾病等,对健康有较大危害。口腔溃疡的发生与口腔内创伤后的细菌感染及免疫力低下等因素有关,创面愈合周期长,疼痛感较为强烈,影响人们的生活质量。
口腔抑菌、消炎,促进损伤组织修复是防治牙周病及口腔溃疡的重要治疗措施,目前口腔抑菌的方法多采用抗生素类药物,如硝基咪唑类、替硝唑或四环素类,但此类药物毒副作用较多,长期使用可能抑制口腔内正常菌群而导致菌群失调,并且可能发生耐药菌株,导致治疗效果不佳;市面上的口腔溃疡药物主要通过补充维生素、清热解毒、杀菌消炎等功效发挥作用,缺乏具有优异促进创面愈合功效的材料。
水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物具有较好的促进创面愈合的功能,同时具有一定抑菌、消炎功效,具有研制牙周病、口腔溃疡防治材料的潜力,但其抑菌功效性尚需通过活性物质的加入进一步加强,以更好的满足牙周病、口腔溃疡防治的需要。
发明内容
本发明的目的是提供一种口腔应用的抑菌促愈合材料及其应用,以克服目前应用抗生素治疗牙周病造成的耐药性及口腔正常菌群失调等问题,同时材料具有促进损伤组织愈合修复功效可加速病灶恢复,克服口腔溃疡药物促进创面愈合效果欠佳问题,是一种优于现有治疗方式的新材料。
一种口腔抑菌促愈合材料,其特征是由水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物与金属离子及具有抑菌作用的抗菌肽及碘(I2)组成;该口腔抑菌促愈合材料为粉末状、海绵状、膜片状或胶体状;所述水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物为羟丙基甲壳素/壳聚糖,羟乙基甲壳素/壳聚糖,羧甲基甲壳素/壳聚糖,羧乙基甲壳素/壳聚糖,琥珀酰甲壳素/壳聚糖中的一种或两种衍生物的混合物;所述金属离子为水溶性锌盐/钙盐/铝盐/铁盐中的一种或任意两种的混合物;水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物与抗菌肽的质量比为1~50:1;水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物与金属离子的摩尔比为1~200:1;水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物与碘的摩尔比为1~15:1。
上述抑菌促愈合材料在牙周病防治、口腔及身体其他部位溃疡创面抑菌、消炎、促进创面愈合中的应用。
本发明的口腔抑菌促愈合材料中的水溶性甲壳素/壳聚糖具有很好的促进细胞增殖、促进损伤组织修复作用,同时具有一定抑菌作用;抗菌肽具有带有正电荷是具有广谱抗菌性的一类小肽;碘是常用医用消毒杀菌剂碘伏的有效成分杀菌效果好。本发明的制剂中两种抑菌制剂同时作用,配合促进细胞及损伤组织修复的海洋生物多糖,可以有效抑制口腔牙周微生物繁殖附着、减轻炎症,促进损伤组织修复,加速病灶康复,具有较高的应用开发价值。
具体实施方式
实施例1。
口腔抑菌促愈合材料A的制备:将0.2g多肽倒入500ml烧杯中,加入1.5%的CaCl2溶液3ml,再加入167ml的纯化水,搅拌,至多肽完全溶解。缓慢加入8g羟乙基甲壳素,搅拌均匀,此时溶液呈胶状。加入30ml 1%的I2/KI溶液,搅拌均匀,此时胶液呈棕色,待胶液颜色完全退却后,分装于无菌注射器中,最后经辐照灭菌制得胶体状口腔抑菌促愈合材料A。
本实施例中羟乙基甲壳素与抗菌肽的质量比为1~50:1,与金属离子的摩尔比为1~200:1,与碘的摩尔比为1~15:1;羟乙基甲壳素还可以用下列甲壳素/壳聚糖衍生物中的一种:羟丙基甲壳素/壳聚糖,羟乙基壳聚糖,羧甲基甲壳素/壳聚糖,羧乙基甲壳素/壳聚糖,琥珀酰甲壳素/壳聚糖;CaCl2还可以用其他水溶性锌盐/钙盐/铝盐/铁盐;均可达到同样效果。
实施例2。
口腔抑菌促愈合材料B的制备:将0.15g多肽倒入500ml烧杯中,加入157ml纯化水,加入2%的CaCl2溶液3ml,搅拌至多肽完全溶解。缓慢加入7.5g羧甲基甲壳素,搅拌均匀,此时溶液呈胶状。加入40ml 1%的I2/KI溶液,搅拌均匀,此时胶液呈棕色,待胶液颜色完全退却后,将液体进行冷冻干燥,最后经辐照灭菌制得海绵状口腔抑菌促愈合材料B。
本实施例中羟乙基甲壳素与抗菌肽的质量比为1~50:1,与金属离子的摩尔比为1~200:1,与碘的摩尔比为1~15:1;羧甲基甲壳素还可以用下列甲壳素/壳聚糖衍生物中的一种:羟丙基甲壳素/壳聚糖,羟乙基甲壳素/壳聚糖,羧甲基壳聚糖,羧乙基甲壳素/壳聚糖,琥珀酰甲壳素/壳聚糖;CaCl2还可以用其他水溶性锌盐/钙盐/铝盐/铁盐;均可达到同样效果。
实施例3。
口腔抑菌促愈合材料C的制备:将0.05g多肽倒入200ml烧杯中,加入纯化水55ml,加入0.5%的ZnCl2溶液5ml,搅拌至多肽完全溶解。缓慢加入2g羧甲基壳聚糖,搅拌均匀,此时溶液呈胶状。加入40ml 0.25%的I2/KI溶液,搅拌均匀,此时胶液呈棕色,待胶液颜色完全退却后,将液体平铺于光滑玻璃板表面,经烘干、切割、辐照灭菌制得膜片状口腔抑菌促愈合材料C。
本实施例中羧甲基壳聚糖与抗菌肽的质量比为1~50:1,与金属离子的摩尔比为1~200:1,与碘的摩尔比为1~15:1;羧甲基壳聚糖还可以用下列甲壳素/壳聚糖衍生物中的一种:羟丙基甲壳素/壳聚糖,羟乙基甲壳素/壳聚糖,羧甲基甲壳素,羧乙基甲壳素/壳聚糖,琥珀酰甲壳素/壳聚糖;ZnCl2还可以用其他水溶性锌盐/钙盐/铝盐/铁盐;均可达到同样效果。
实施例4。
口腔抑菌促愈合材料D的制备:将5g羟丙基壳聚糖溶解于200ml无离子中,加入1%的ZnCl2溶液5ml,搅拌反应2h;反应液中缓慢加入无水乙醇直至再无沉淀物析出;过滤取固体沉淀,并经粉碎、过筛控制粒度。取上述固体粉末按照羟丙基壳聚糖:多肽质量比50:1,羟丙基壳聚糖:碘摩尔比5:1将三种固体混合均匀,最后经辐照灭菌值得粉末状口腔抑菌促愈合材料D。
本实施例中羟丙基壳聚糖与抗菌肽的质量比为1~50:1,与金属离子的摩尔比为1~200:1,与碘的摩尔比为1~15:1;羟丙基壳聚糖还可以用下列甲壳素/壳聚糖衍生物中的一种:羟丙基甲壳素,羟乙基甲壳素/壳聚糖,羧甲基甲壳素/壳聚糖,羧乙基甲壳素/壳聚糖,琥珀酰甲壳素/壳聚糖;ZnCl2还可以用其他水溶性锌盐/钙盐/铝盐/铁盐;均可达到同样效果。
实施例5。
口腔抑菌促愈合材料A、B、C、D促进创面愈合效果试验。
取Wistar大鼠42只雌雄兼半,体重250 ~ 300g,随即分成7组,每组6只,雌雄各半,分别为:1.生理盐水对照组(涂抹无菌生理盐水),2.水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物对照组(涂抹质量浓度为40g/L的无菌羧甲基壳聚糖生理盐水溶液),3.抗菌肽对照组(涂抹质量浓度为1g/L 的抗菌肽生理盐水溶液),4. 口腔抑菌促愈合材料A组,5. 口腔抑菌促愈合材料B组,6. 口腔抑菌促愈合材料C组,7. 口腔抑菌促愈合材料D组。
取各组大鼠,腹腔注射2.5%戊巴比妥钠(35mg/kg)麻醉,硫化钡脱毛。24h后再次麻醉,用直径3.2cm的玻璃管按在大鼠背部中央皮肤上,向管内倾倒50ml 热水(94±1℃),维持15s,在烧烫伤皮肤组织处均匀涂抹上述大肠杆菌悬液0.1ml 致炎,形成烧烫伤溃疡感染创面。1 小时后按照分组分别在大鼠溃疡创面上均匀涂抹相应实验材料,涂抹量以均匀覆盖创面为准。每天上药一次,每日详细记录动物创面的炎症反应、渗出物、组织新生和创面愈合情况。
结果显示,口腔抑菌促愈合材料A、B、C、D组创面愈合时间及炎症反应情况优于各对照组,可有效降低创面感染、加速创面愈合。试验结果见下表。
实施例6。
口腔抑菌促愈合材料抑菌效果试验:实验菌株包括牙龈卟啉单胞菌(P. gingivalis ATCC 33277)、中间普氏菌(P. intermedia ATCC 25611)、伴放线放线杆菌(A. actinomycetemcomitans Y4),各菌种接种于改良GAM血液琼脂培养基,置厌氧罐中37℃复苏培养48 h。从新鲜菌种斜面沾取少量菌苔,接种在改良GAM液体培养基中,在 37℃厌氧条件下培养48h。调节菌悬液浓的菌浓度约为300个/ml。
取灭菌培养皿(直径12cm)24个,分为1.生理盐水对照组;2.水溶性甲壳素/壳聚糖对照组(供试液为质量浓度20g/L的羟丙基甲壳素);3.抗菌肽对照组(供试液为质量浓度0.5g/L的抗菌肽生理盐水溶液);4.口腔抑菌促愈合材料A组,供试液用纯化水稀释一倍;每组6个平板。
将实验材料2ml与18ml改良GAM血液琼脂培养基混合,制备成各含药培养基平板。分别取菌悬液100μl涂布于培养基上,每组每种菌种涂布两个平板,37℃厌氧条件下培养24h,根据长出菌落数比较各组抑菌效果。
实验结果显示,口腔抑菌促愈合材料A组和抗菌肽组均具有良好抑菌性,显著优于生理盐水对照组及水溶性甲壳素/壳聚糖对照组。实验结果见下表。
本发明的制剂中两种抑菌制剂同时作用,配合促进细胞及损伤组织修复的海洋生物多糖,可以有效抑制口腔牙周微生物繁殖附着、减轻炎症,促进损伤组织修复,加速病灶康复,具有较高的应用开发价值。
Claims (4)
1.一种口腔抑菌促愈合材料,其特征是由水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物与金属离子及具有抑菌作用的抗菌肽及碘(I2)组成,所述水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物为羟丙基甲壳素/壳聚糖,羟乙基甲壳素/壳聚糖,羧甲基甲壳素/壳聚糖,羧乙基甲壳素/壳聚糖,琥珀酰甲壳素/壳聚糖中的一种或两种衍生物的混合物;所述金属离子为水溶性锌盐/钙盐/铝盐/铁盐中的一种或任意两种的混合物。
2.如权利要求1所述的口腔抑菌促愈合材料为粉末状、海绵状、膜片状或胶体状。
3.如权利要求1所述的口腔抑菌促愈合材料其特点在于,水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物与抗菌肽的质量比为1~50:1;水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物与金属离子的摩尔比为1~200:1;水溶性甲壳素/壳聚糖衍生物与碘的摩尔比为1~15:1。
4.上述抑菌促愈合材料在牙周病防治、口腔及身体其他部位溃疡创面抑菌、消炎、促进创面愈合中的应用。
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