CN104940651A - 一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用。所述的药物组合物由重量份的龙血竭30~40份、银杏叶20~30份、天麻5~10份、回心草5~10份组成。制备方法为将银杏叶和回心草粉碎过筛,提取得到银杏叶和回心草提取物;龙血竭和天麻,粉碎过筛备用;将银杏叶和回心草提取物与龙血竭和天麻合并、混合均匀,超微粉碎得到目标物。制剂是在所述的药物组合物中加入药学接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或蜜丸剂,应用为所述的药物组合物在制备治疗老年痴呆症药物中的应用。本发明所述的药物组合物具有补益气血、化瘀除郁、醒脑安神、改善睡眠、防治老年痴呆等作用,具有效果好,毒副作用小,制备方法简便等特点,适于临床推广应用。
Description
技术领域
本发明属于药物技术领域,具体涉及一种药物组合物及其制备方法、制剂与应用。
背景技术
老年痴呆又称阿尔茨海默症,是慢性进行性中枢神经系统病变所导致的一种疾病,以缓慢发展记忆障碍、定向障碍、语言功能障碍等不同程度的认知功能障碍及人格异常等神经精神症状为特征。老年痴呆的发病随年龄的增长而增高,65 岁以上患病率为5-10% ,85岁以上为20-50%。随着我国人口的老龄化,老年痴呆的发病率呈不断上升趋势。目前治疗老年痴呆症的药物主要为胆碱酯酶抑制剂如盐酸多奈呱齐( 安理申Aricept)、重酒石酸卡巴拉丁( 艾斯能Exelon) 、石杉碱甲( 哈伯因Huperzine) 、加兰他敏( galantamine)等,这些药物只能改善痴呆患者的症状,而不能阻止疾病的发展,存在作用靶点单一,疗效差,作用不持久,毒副作用大等问题。因此,开发毒副作用小、疗效好的防治老年痴呆的药物具有十分重要的意义。
按照中医理论,老年痴呆属于“健忘”、“神散”、“呆滞”等证,其病机可归纳为“虚、瘀、郁、湿”,以脑髓和五脏之亏虚为本,以瘀、郁、湿为标。其病位虽在脑, 但与心肝脾肾等脏器的功能密切相关。中药具有作用靶点多、毒副作用小、标本兼治的显著特色,治疗老年性痴呆的中医药具有广阔的应用前景。因此,开发一种治疗老年性痴呆的中医药是非常必要的。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种药物组合物;第二目的在于提供所述药物组合物的制备方法;第三目的在于提供所述药物组合物的制剂;第四目的在于提供所述药物组合物的应用。
本发明的第一目的是这样实现的,所述的药物组合物由重量份的龙血竭30~40份、银杏叶20~30份、天麻5~10份、回心草5~10份组成。
本发明的第二目的是这样实现的,包括以下步骤:
A、称取配方量的银杏叶和回心草,粉碎过筛,提取得到银杏叶和回心草提取物;
B、称取配方量的龙血竭和天麻,粉碎过筛备用;
C、将A步骤提取得到的银杏叶和回心草提取物与B步骤粉碎过筛的龙血竭和天麻合并、混合均匀,超微粉碎得到目标物。
本发明的第三目的是这样实现的,是在所述的药物组合物中加入药学接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或蜜丸剂。
本发明的第四目的是这样实现的,所述的药物组合物在制备治疗老年痴呆症药物中的应用。
本发明中,各组方药物的基源和作用如下:
龙血竭: 系百 合 科 龙血 树 属 植 物 剑 叶龙 血 树 Dracaenacochinchinensis ( Lour. ) S. C. Chen的含脂木材经提取得到的干燥树脂 。具有活血散瘀、定痛止血、敛疮生肌等功效 ,民间常用于治疗跌打损伤、瘀血作痛、妇女气血凝滞 、外伤出血等症。
银杏叶:系银杏科植物银杏(Ginkgo biloba L. )的干燥叶。秋季叶尚未黄时采收。本品味甘、苦、涩, 性平, 归心、肺经,具有敛肺、 平喘、 活血化瘀、止痛的功效, 临床常用于冠心病, 心绞痛, 高血脂症的治疗。
天麻:天麻又名赤箭、定风草、独摇兰、离母、合离草,为兰科植物天麻 (Gastrodia elata Bl. ) 的干燥块茎。《本草纲目》载: “赤箭辛,温,无毒,久服益气力,长阴肥健,轻身增年 ” 。《神农本草经》将其列为上品,认为其具有 “主杀鬼精物、蛊毒恶气”之功效。临床常用于治疗头痛、失眠等症。
回心草:回心草为真藓科大叶藓属植物暖地大叶藓 Rhodobryum giganteum(Hoo.)Par. 及大叶藓 R.roseum (Weis.) Limpr.的干燥全草。性平,味淡,微苦,具清热明目、养心安神等功效, 民间常用于治疗心脏病、神经衰弱和阳痿等症。
本发明所述的药物组合物具有补益气血、化瘀除郁、醒脑安神、改善睡眠、防治老年痴呆等作用,具有效果好,毒副作用小,制备方法简便等特点,适于临床推广应用。
通过水迷宫实验显示,本发明药物组合物能使小鼠穿越水迷宫的次数、停留时间和游泳路程显著增加,表明其对APP 转基因小鼠的空间学习记忆能力有明显的提高、改善作用;本发明还通过跳台试验显示,本发明药物组合物能使小鼠跳台试验的错误次数减少,潜伏期明显延长,表明本发明药物组合物对APP 转基因小鼠的短期记忆中的较长时记忆功能有改善作用。本发明还通过进一步的药理实验表明,本发明药物组合物可以提高Ach 的含量,增强CHAT 的活性,抑制AchE 的活性,改善APP 转基因痴呆模型病理学、胆碱能系统及细胞凋亡等方面指标,这从作用机制和途径方面阐释了其防治老年痴呆症的内在机理。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明,但不以任何方式对本发明加以限制,基于本发明教导所作的任何变换或替换,均属于本发明的保护范围。
本发明所述的药物组合物,由重量份的龙血竭30~40份、银杏叶20~30份、天麻5~10份、回心草5~10份组成。
作为优选,所述的药物组合物由重量份的龙血竭35份、银杏叶25份、天麻10份、回心草10份组成。
本发明所述的药物组合物的制备方法,包括以下步骤:
A、称取配方量的银杏叶和回心草,粉碎过筛,提取得到银杏叶和回心草提取物;
B、称取配方量的龙血竭和天麻,粉碎过筛备用;
C、将A步骤提取得到的银杏叶和回心草提取物与B步骤粉碎过筛的龙血竭和天麻合并、混合均匀,超微粉碎得到目标物。
A步骤中粉碎过筛为过10目筛。
A步骤中所述的提取为渗漉提取。
所述的提取是将粉碎过筛的银杏叶和回心草中加入固液体积比8~10倍量的体积百分浓度70~80%的乙醇溶液于10~30℃浸泡6~10h,装入渗漉器中,再加入银杏叶和回心草固液体积比30~40倍的体积百分浓度70~80%的乙醇溶液进行渗漉,收集渗漉液体,于40~50℃真空喷粉干燥得到银杏叶和回心草提取物。
B步骤中所述的粉碎过筛为过10目筛。
C步骤中所述的超微粉碎的粒径为1~100μm。
本发明所述的药物组合物的制剂,是在所述的药物组合物中加入药学接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或蜜丸剂。
本发明的应用为所述的药物组合物在制备治疗老年痴呆症药物中的应用。
本发明所述的药物组合物的制备方法具体操作如下:
(1)称取配方量的银杏叶、回心草,粉碎至最粗粉(过10目筛),加入8~10倍量的75%乙醇室温浸泡8小时,装入渗漉器中,补加30-40倍量的75%乙醇进行渗漉,收集渗漉液体,于40~50℃真空喷粉干燥,得银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)备用;
(2)称取配方量的龙血竭和天麻,用粉碎机粉碎,过10目筛,得龙血竭和天麻粉末(B)备用;
(3)将上述银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)与龙血竭和天麻粉末(B)合并,混合,进行超微粉碎至1-100μm,即得目标物药物组合物。
下面以实施例对本发明作进一步说明:
实施例1
药物组合物1及其制备方法(龙血竭、银杏叶、天麻、回心草配比6:4:1:1)
药物组方:龙血竭30 kg、银杏叶20 kg,天麻5kg、回心草5kg。(6:4:1:1)
制备方法:
(1)称取银杏叶20 kg、回心草5kg,粉碎至最粗粉(过10目筛),加入250kg 的75%乙醇,室温浸泡8小时,装入渗漉器中,补加1000kg 的75%乙醇进行渗漉,收集渗漉液体,于40~50℃真空喷粉干燥,得银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)备用;
(2)称取龙血竭30 kg和天麻5kg,用粉碎机粉碎,过10目筛,得龙血竭和天麻粉末(B)备用;
(3)将上述银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)与龙血竭和天麻粉末(B)合并,混合,进行超微粉碎至1~100μm,即得药物组合物1。
实施例2
药物组合物2及其制备方法(龙血竭、银杏叶、天麻、回心草配比6:6:1:2)
药物组方: 血竭30kg、银杏叶30kg,天麻5kg、回心草10kg。(6:6:1:2)
制备方法:
(1)称取银杏叶30 kg、回心草10kg,粉碎至最粗粉(过10目筛),加入320kg 的75%乙醇,室温浸泡8小时,装入渗漉器中,补加1200kg 的75%乙醇进行渗漉,收集渗漉液体,于40-50℃真空喷粉干燥,得银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)备用;
(2)称取龙血竭30 kg和天麻5kg,用粉碎机粉碎,过10目筛,得龙血竭和天麻粉末(B)备用;
(3)将上述银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)与龙血竭和天麻粉末(B)合并,混合,进行超微粉碎至1-100μm,即得药物组合物2。
实施例3
药物组合物3及其制备方法(龙血竭、银杏叶、天麻、回心草配比8:4:2:1)
药物组方: 龙血竭40kg、银杏叶20kg,天麻10kg、回心草5kg。(8:4:2:1)
制备方法:
(1)称取银杏叶20 kg、回心草5kg,粉碎至最粗粉(过10目筛),加入230kg 的75%乙醇,室温浸泡8小时,装入渗漉器中,补加900kg 的75%乙醇进行渗漉,收集渗漉液体,于40-50℃真空喷粉干燥,得银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)备用;
(2)称取龙血竭40 kg和天麻10kg,用粉碎机粉碎,过10目筛,得龙血竭和天麻粉末(B)备用;
(3)将上述银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)与龙血竭和天麻粉末(B)合并,混合,进行超微粉碎至1-100μm,即得药物组合物3。
实施例4
药物组合物4及其制备方法(龙血竭、银杏叶、天麻、回心草配比3.5:2.5:1:1)
药物组方: 龙血竭35kg、银杏叶25kg,天麻10kg、回心草10kg。(3.5:2.5:1:1)
制备方法:
(1)称取银杏叶25 kg、回心草10kg,粉碎至最粗粉(过10目筛),加入320kg 的75%乙醇,室温浸泡8小时,装入渗漉器中,补加1350kg 的75%乙醇进行渗漉,收集渗漉液体,于40-50℃真空喷粉干燥,得银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)备用;
(2)称取龙血竭35 kg和天麻10kg,用粉碎机粉碎,过10目筛,得龙血竭和天麻粉末(B)备用;
(3)将上述银杏叶和回心草提取物干燥粉(A)与龙血竭和天麻粉末(B)合并,混合,进行超微粉碎至1~100μm,即得药物组合物4。
实施例5
取实施例1制备的药物组合物装袋成为散剂。
实施例6
取实施例2制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成片剂。
实施例7
取实施例3制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成胶囊剂。
实施例8
取实施例4制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成颗粒剂。
实施例9
取实施例2制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成滴丸剂。
实施例10
取实施例4制备的药物组合物加入药学上可以接受的辅料制成蜜丸剂。
实施例11
1、实验药物
药物组合物1:龙血竭、银杏叶、天麻、回心草组方配比为6:4:1:1,按本发明实施例1制备。
药物组合物2:龙血竭、银杏叶、天麻、回心草组方配比为6:6:1:2,按本发明实施例2制备。
药物组合物3:龙血竭、银杏叶、天麻、回心草组方配比为8:4:2:1,按本发明实施例3制备。
药物组合物4:龙血竭、银杏叶、天麻、回心草组方配比为3.5:2.5:1:1,按本发明实施例4制备。
对照药物盐酸多奈哌齐: 商品名安理申, 卫材(中国)药业有限公司产品。
2、实验动物
APP转基因小鼠90 只, 雌雄各半,3 月龄,体重17-23g,清洁级;相同遗传背景C57BL/6J 小鼠15 只为正常对照。
3、实验主要仪器和设备
DMS-2 型Morris 水迷宫仪数据自动采集及处理系统,STT-2 小鼠跳台仪( 或DT-200 跳台自动测试仪),BH-2 型生物显微镜,DpxView Pro 型计算机彩色图像处理系统。
4、实验方法
4.1 分组与给药
90只APP 转基因小鼠随机分为模型组、药物组合物1组(100mg/kg)、药物组合物2组(100mg/kg)、药物组合物3组(100mg/kg)、药物组合物4组(100mg/kg)和对照药物盐酸多奈哌齐组(100mg/kg),每组15 只;选取相同遗传背景的正常C57BL/6J 小鼠15 只为正常对照组。正常组和模型组给以等体积蒸馏水灌胃,每日1 次;其余各组小鼠灌胃给予试药24 周,至9 月龄时进行水迷宫试验和跳台试验。
4.2.水迷宫试验
Morris 水迷宫水池直径120cm,水池深50cm。实验时将水池以四个等距离点均分为四个象限区,在第四象限位于池壁和圆心中间,放置有机玻璃站台。向水池中加水,水深约20cm,水面高出站台表面0.5cm,水温25+1℃,注入奶粉,混匀,使水成不透明的乳白色,达到动物视觉无法辨别池内有无平台的目的,并使计算机能成功跟踪小鼠的活动。试验在隔音的房间内进行,水池位置、光源位置及强度等各种试验条件在整个实验过程中保持不变,以供小鼠来定位平台位置。
测试程序包括:(1)定位航行实验:用于测量动物在水迷宫中的学习和记忆能力。
每天进行1 次,连续训练5 天。第5 天下午撤去平台,任选一个入水点,将小鼠面向池壁放入水池中,摄像系统自动记录小鼠3min 内进出原平台区的次数及在原平台所在第四象限游泳时间和路程作为评价小鼠学习记忆成绩的指标。
4.3 跳台试验
跳台仪实验箱与计算机自动记录系统相连。实验时将小鼠放入跳台仪实验箱内,适应环境5min,之后将小鼠轻放于跳台上,并将铜栅通电,当小鼠从跳台上跳下四肢接触铜栅时会受到电击,正常回避反应是跳上跳台返回安全区,逃避电击,如此学习5min,并记录此5min 内的触电次数( 错误次数),以此为学习成绩。24h 后进行记忆能力测试,将小鼠置于跳台上,记录小鼠从停留在跳台上至第一次跳下受电击的时间即潜伏期和5min 内的错误次数( 小鼠四肢同时接触铜栅触电的次数),以此作为记忆功能的评价指标。
4.4 脑组织样品处理
小鼠于末次行为学测试后,禁食12h,进行脑组织及血清取材。各组小鼠麻醉后眼球取血,2500r/min离心15min,分离血清保持温度在4℃以备后续指标检测。在低温下快速断头取全脑,以冰冷生理盐水清理血迹,用滤纸吸干,称重。每组随机选取6 只投入4%多聚甲醛溶液中于4℃下固定24h,之后换后固定液,待脑组织下沉后冰冻切片,进行病理及免疫组化染色。其余小鼠分别迅速分离皮层和海马,加入2ml 生理盐水匀浆,低温高速离心,分离上清液,用于组织含量测定。
5、 实验结果
5.1 药物对APP 转基因小鼠空间学习记忆能力的影响
表1 药物对APP 转基因小鼠空间学习记忆能力的影响(x±s,n=15)
由表1可知,与正常组比较,模型组小鼠在Morris 水迷宫中穿越原平台位置次数、第四象限游泳时间和路程均显著减少。各给药组治疗后,APP小鼠在Morris 水迷宫中穿越原平台位置次数、第四象限游泳时间和路程均较模型组显著增多,表明各组药物对APP 转基因小鼠的空间学习记忆能力有明显提高改善作用,其中尤以药物组合物4的作用最为明显突出。
5.2 药物对APP 转基因小鼠一次性回避反应记忆功能的影响
表2 药物对APP 转基因小鼠一次性回避反应记忆功能的影响(x±s,n=15)
组别 | 剂量(mg/kg) | 错误次数(次) | 潜伏期(s) |
正常对照组 | —— | 1.19±0.57 | 254.28±57.29 |
模型组 | —— | 3.26±1.38 | 155.48±43.51 |
药物组合物1 | 100 | 1.82±0.93 | 195.84±44.36 |
药物组合物2 | 100 | 1.52±0.83 | 205.33±48.92 |
药物组合物3 | 100 | 1.37±0.79 | 231.65±50.68 |
药物组合物4 | 100 | 1.15±0.55 | 249.32±52.37 |
盐酸多奈哌齐 | 100 | 1.84±1.03 | 189.82±44.56 |
在跳台试验中,模型组APP小鼠错误次数较正常组明显增高,而各治疗组错误次数较模型组明显下降;与正常组比较,模型组APP小鼠的潜伏期明显缩短,而各治疗组潜伏期较模型组明显延长。上述实验结果表明,各治疗组药物对APP 转基因小鼠的一次性回避反应记忆能力均有明显提高和改善,其中尤其以药物组合物4的作用最为明显突出。
5.3 药物对APP 小鼠海马内乙酰胆碱、胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱酯酶含量的影响
表3 药物对APP 转基因小鼠海马Ach、AchE、CHAT 含量的影响(x±s,n=15)
与正常组相比,模型组APP小鼠海马内的Ach、CHAT 的含量明显降低而AchE 含量明显提高;各药物治疗组与模型组相比,海马内Ach、CHAT 的含量明显提高,而AchE 含量明显降低。这说明各组药物都能够有效提高海马内Ach 的含量,增强海马内CHAT 的活性,抑制海马内AchE 的活性,从而改善APP 转基因痴呆模型病理学、胆碱能系统及细胞凋亡等方面指标。这可能是以上药物具有防治阿尔茨海默病的内在作用机理。
5.4 药物对皮层内乙酰胆碱、胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱酯酶含量的影响
表4 药物对皮层内乙酰胆碱、胆碱乙酰转移酶和乙酰胆碱酯酶含量的影响(x±s,n=15)
与正常组相比,模型组APP小鼠皮层内的Ach、CHAT 的含量明显降低而AchE 含量明显提高;各药物组与模型组相比,皮层内Ach、CHAT 的含量明显提高,而AchE 含量明显降低。这说明各组药物均能够有效提高皮层内Ach 的含量,增强皮层内CHAT 的活性,抑制皮层内AchE 的活性,从而改善APP 转基因痴呆模型病理学、胆碱能系统及细胞凋亡等方面指标。
6、结论
APP 转基因小鼠是利用显微注射的方法将APP 基因或基因片段整合入小鼠的基因组中,使得小鼠脑部表达APP 基因。通过APP 蛋白在大脑中过量表达,Aβ 产生增加,导致神经毒害作用,损伤小鼠学习记忆能力,并聚集和沉积形成老年斑,从而造成小鼠老年性痴呆症转基因动物模型。
本研究水密宫试验结果表明,本发明药物组合物可显著改善APP 转基因小鼠受损的学习记忆能力,其中,尤其以本发明药物组合物4的改善作用最为显著突出。
本研究跳台试验结果表明,本发明药物组合物对APP 转基因小鼠的短期记忆中的较长时记忆功能有明显改善作用,其中,尤其以本发明药物组合物4的改善作用最为显著突出。
本研究还表明,本发明药物组合物可以提高APP小鼠的Ach 的含量,增强CHAT 的活性,抑制AchE 的活性,从而改善APP 转基因痴呆模型病理学、胆碱能系统及细胞凋亡等方面指标,这可能是其防治老年痴呆的内在作用机理。
Claims (10)
1.一种药物组合物,其特征在于所述的药物组合物由重量份的龙血竭30~40份、银杏叶20~30份、天麻5~10份、回心草5~10份组成。
2.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于所述的药物组合物由重量份的龙血竭35份、银杏叶25份、天麻10份、回心草10份组成。
3.一种权利要求1或2所述的药物组合物的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
A、称取配方量的银杏叶和回心草,粉碎过筛,提取得到银杏叶和回心草提取物;
B、称取配方量的龙血竭和天麻,粉碎过筛备用;
C、将A步骤提取得到的银杏叶和回心草提取物与B步骤粉碎过筛的龙血竭和天麻合并、混合均匀,超微粉碎得到目标物。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于A步骤中粉碎过筛为过10目筛。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于A步骤中所述的提取为渗漉提取。
6.根据权利要求3或5所述的制备方法,其特征在于所述的提取是将粉碎过筛的银杏叶和回心草中加入固液体积比8~10倍量的体积百分浓度70~80%的乙醇溶液于10~30℃浸泡6~10h,装入渗漉器中,再加入银杏叶和回心草固液体积比30~40倍的体积百分浓度70~80%的乙醇溶液进行渗漉,收集渗漉液体,于40~50℃真空喷粉干燥得到银杏叶和回心草提取物。
7.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于B步骤中所述的粉碎过筛为过10目筛。
8.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于C步骤中所述的超微粉碎的粒径为1~100μm。
9.一种权利要求1或2所述的药物组合物的制剂,其特征在于是在所述的药物组合物中加入药学接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂或蜜丸剂。
10.一种权利要求1或2所述药物组合物的应用,其特征在于所述的药物组合物在制备治疗老年痴呆症药物中的应用。
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CN104940651B (zh) | 2017-12-29 |
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