CN104927319A - 一种新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法 - Google Patents

一种新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104927319A
CN104927319A CN201510146352.2A CN201510146352A CN104927319A CN 104927319 A CN104927319 A CN 104927319A CN 201510146352 A CN201510146352 A CN 201510146352A CN 104927319 A CN104927319 A CN 104927319A
Authority
CN
China
Prior art keywords
hydroxyapatite
polylactic acid
preparation
grafted polylactic
described step
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201510146352.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104927319B (zh
Inventor
于翔
王延伟
王娜
杨柳
田银彩
辛长征
魏媛
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Henan Institute of Engineering
Original Assignee
Henan Institute of Engineering
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Henan Institute of Engineering filed Critical Henan Institute of Engineering
Priority to CN201510146352.2A priority Critical patent/CN104927319B/zh
Publication of CN104927319A publication Critical patent/CN104927319A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104927319B publication Critical patent/CN104927319B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Materials For Medical Uses (AREA)

Abstract

本发明公开了一种新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法包括如下步骤：1）采用3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES）将-NH2修饰到HA表面；2）用N,N'-羰基二咪唑(CDI)活化聚乳酸分子链上的端羧基，形成反应中间体，然后将修饰过的HA与聚乳酸进行反应得到羟基磷灰石接枝聚乳酸（HA-PLLA），有效的解决了羟基磷灰石在聚乳酸基体中易团聚的问题。本发明工艺制备过程相对简单，未引入有毒的小分子物质，具有成本低、制备时间短、反应条件温和绿色环保等优点，应用前景广阔。

Description

一种新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法
技术领域
本发明涉及一种新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，属于生物医用高分子材料技术领域。
背景技术
羟基磷灰石（HA），具有与人体骨组织相类似的组成和结构，并且具有很好的生物相容性，是公认的骨修复材料，但是其在生物体内不具备可降解性，且韧性较差。聚乳酸（PLA）是一种生物可降解材料，具有良好的机械性能和物理性能，在生物体内能够经过酶解作用而分解成对人体无害的小分子物质，具有良好的生物相容性。从20世纪80年代开始，HA/PLA复合材料就被认为是骨修复和骨替代的理想材料，它结合了两者之间的优良特性，从而具有良好的力学性能，生物相容性和可降解性能。
但是，通过研究发现，在无机纳米粒子/聚合物复合体系对的力学性能主要取决于两者之间的界面结合力，无机纳米粒子的分散性和两相之间的结合情况会显著影响到材料的各项性能。但是由于纳米羟基磷灰石表面活性较高会在聚乳酸基体中发生严重的团聚，在基体中形成缺陷，严重降低了复合材料的力学性能。因此，改善羟基磷灰石与聚乳酸之间的相容性是提高复合材料力学性能的关键。Zhongkui Hong等人以二甲苯为溶剂，通过Sn(Oct)2将PLA接枝在HA的表面(Polymer, 2004, 45:6699-6706)，改善了HA与PLA之间的相容性，提高了复合材料的力学性能，但是这种方法存在缺点是反应较为复杂，反应周期较长。本发明所有反应均在常温下进行，反应条件较为简单，可适用于大规模的生产，应用前景广阔。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对羟基磷灰石在聚乳酸基体中易团聚、且制备过程中体系复杂，成本高的问题，提供一种新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法。该制备方法得到的改性纳米羟基磷灰石改善了羟基磷灰石与聚乳酸基体之间的相容性，同时缩短了反应周期，材料表现出了良好的细胞和组织相容性，特别适用于在组织工程方面的应用。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：一种羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，步骤如下：
（1）将3-氨丙基三乙氧基硅烷加入到乙醇的水溶液中得到混合溶液，室温条件下水解0.5~2 h，然后将羟基磷灰石（HA）加入到混合溶液中，室温、转速800r/min的条件下搅拌反应6~8h，然后将反应后的产物进行离心分离、干燥，将干燥后的产物用乙醇进行洗涤、真空干燥，得到表面带有氨基的羟基磷灰石（SiHA）；
（2）将含有端羧基的聚乳酸溶解在无水二氯甲烷中，然后加入N,N'-羰基二咪唑（CDI），在0℃、搅拌速度为300r/min的条件下对聚乳酸的端羧基活化0.5~2h，然后加入表面带有氨基的羟基磷灰石，室温下搅拌反应8~12h，将反应后的产物进行离心、洗涤、干燥，得到羟基磷灰石接枝聚乳酸（HA-g-PLLA）。
所述步骤（1）中得到的表面带有氨基的羟基磷灰石的含水量小于20ppm。
所述步骤（1）中羟基磷灰石与3-氨丙基三乙氧基硅烷的摩尔比为1：1.5~2.5。
所述步骤（1）中乙醇的水溶液中乙醇和水的体积比为5:1。
所述步骤（2）中含有端羧基的聚乳酸与N,N'-羰基二咪唑的摩尔比为1:2~5。
所述步骤（2）中表面带有氨基的羟基磷灰石与含有端羧基的聚乳酸的摩尔比为1：1~3。
所述步骤（2）中的洗涤采用无水二氯甲烷和无水乙醇。
所述步骤（2）中的离心采用转速为10000r/min的离心机进行离心处理。
本发明的有益效果：（1）由于羟基磷灰石的表面能较高，在聚合物基体中极易团聚，而利用本发明的制备方法得到的改性纳米羟基磷灰石改善了羟基磷灰石与聚乳酸基体之间的相容性，有效的解决了羟基磷灰石在聚乳酸基体中易团聚的问题，提高了聚乳酸/羟基磷灰石复合材料的力学性能。（2）该方法还有效的解决了羟基磷灰石接枝聚乳酸制备过程中体系复杂，成本高的问题，同时缩短了反应周期，材料表现出了良好的细胞和组织相容性，特别适用于在组织工程方面的应用。（3）本发明的所有反应均可在常温下进行，条件温和，操作简单。（4）本发明中使用的有机溶剂种类较少，后处理简单，且不会残留，材料的生物相容性良好。（5）本发明所使用的方法较为简单，且都是在常温下进行，大大缩短了反应时间，提高了制备效率，有利于工业化的生产。
附图说明
图1 为实施例1中HA、SiHA和HA-g-PLLA的FT-IR谱图（a-HA； b-SiHA； c-HA-g-PLLA）。
具体实施方式
实施例1
本实施例的新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法如下：
（1）将3-氨丙基三乙氧基硅烷（3.5mL，0.015mol）溶于乙醇水的混合溶液（350mL）中，室温条件下水解0.5h，然后加入羟基磷灰石（HA）（4g，0.01mol），搅拌反应6h，然后将反应后的产物进行离心分离，50℃干燥12h，将干燥后的产物用乙醇进行洗涤，然后再将洗涤后的产物进行真空干燥至含水量<20ppm，得到表面带有-NH2的羟基磷灰石（SiHA）；
（2）将含有端羧基的聚乳酸（0.9g，0.01mol）溶解在无水二氯甲烷中，然后加入N,N'-羰基二咪唑（CDI）（3.2g，0.02mol），在0℃、搅拌速度为300r/min的条件下对羧基活化0.5h，然后将表面带有氨基的羟基磷灰石（5.1g，0.01mol）加入到聚乳酸溶液中，反应8h，将反应后的产物在转速为10000r/min的条件下离心，用无水二氯甲烷和无水乙醇洗涤，干燥，得到羟基磷灰石接枝聚乳酸（HA-g-PLLA）。
图1 是实施例1中HA、SiHA和HA-g-PLLA的FT-IR谱图，其中a中在3426cm-1及1637cm-1处分别呈现-OH的伸缩振动及弯曲振动峰；在1094cm-1处呈现PO43-的反对称伸缩振动。在b中3400cm-1处-OH的伸缩振动峰与HA的相比明显变宽，这是由于-OH伸缩振动和N-H伸缩振动叠加的结果，且在红外光谱图中还可以观察到2925cm-1处出现了一个新的亚甲基伸缩振动峰，表明在第一步反应过程中，-NH2成功修饰到HA表面。在c中发现在1750cm-1处出现了一个新峰，是属于酰胺键中的羰基峰，而酰胺键中的N-H键则和-OH的弯曲振动峰发生了重合，至此可以说明端羧基活化后的聚乳酸（PLLA）成功的接枝到HA表面。
实施例2
本实施例的新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法如下：
（1）将3-氨丙基三乙氧基硅烷（4.7mL，0.02mol）溶于乙醇水的混合溶液（470mL）中，室温条件下水解2h，然后将羟基磷灰石（4g，0.01mol）加入到混合溶液中，搅拌反应8h，然后将反应后的产物进行离心分离，50℃干燥12h，将干燥后的产物用乙醇进行洗涤，然后再将洗涤后的产物进行真空干燥至含水量<20ppm，得到表面带有-NH2的羟基磷灰石（SiHA）；
（2）将含有端羧基的聚乳酸（1.8g，0.02mol）溶解在无水二氯甲烷中，然后将N,N'-羰基二咪唑（9.6g, 0.06mol）加入到聚乳酸溶液中，对羧基进行活化（活化温度0℃，活化时间2h），然后将表面带有氨基的羟基磷灰石（5.1g，0.01mol）加入到聚乳酸溶液中，室温下搅拌反应12h，将反应后的产物在转速为10000r/min的条件下离心，用无水二氯甲烷和无水乙醇洗涤，干燥，得到羟基磷灰石接枝聚乳酸（HA-g-PLLA）。
实施例3
本实施例的新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法如下：
（1）将3-氨丙基三乙氧基硅烷（5.80mL，0.025mol）溶于乙醇水的混合溶液（580mL）中，室温条件下水解1h，然后将羟基磷灰石（4g，0.01mol）加入到混合溶液中，搅拌反应7h，然后将反应后的产物进行离心分离，50℃干燥12h，将干燥后的产物用乙醇进行洗涤，然后再将洗涤后的产物进行真空干燥至含水量<20ppm，得到表面带有-NH2的羟基磷灰石（SiHA）；
（2）将含有端羧基的聚乳酸（2.7g，0.03mol）溶解在无水二氯甲烷中，然后将N,N'-羰基二咪唑（19.2g，0.012mol）加入到聚乳酸溶液中，对羧基进行活化（活化温度0℃，活化时间1h），然后将表面带有氨基的羟基磷灰石（5.1g，0.01mol）加入到聚乳酸溶液中，室温搅拌反应10h，将反应后的产物在转速为10000r/min的条件下离心，用无水二氯甲烷和无水乙醇洗涤，干燥，得到羟基磷灰石接枝聚乳酸（HA-g-PLLA）。
实施例4
本实施例的新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法如下：
（1）将3-氨丙基三乙氧基硅烷（5.80mL，0.025mol）溶于乙醇水的混合溶液（580mL）中，室温条件下水解1h，然后将羟基磷灰石（4g，0.01mol）加入到混合溶液中，搅拌反应6.5h，然后将反应后的产物进行离心分离，50℃干燥12h，将干燥后的产物用乙醇进行洗涤，然后再将洗涤后的产物进行真空干燥至含水量<20ppm，得到表面带有-NH2的羟基磷灰石（SiHA）。
（2）将含有端羧基的聚乳酸（1.8g，0.02mol）溶解在无水二氯甲烷中，然后将N,N'-羰基二咪唑（16.0g，0.1mol）加入到聚乳酸-无水二氯甲烷溶液中，对羧基进行活化（活化温度0℃，活化时间1.5h），然后将表面带有氨基的羟基磷灰石（5.1g，0.01mol）加入到聚乳酸溶液中，反应9h，将反应后的产物在转速为10000r/min的条件下离心，用无水二氯甲烷和无水乙醇洗涤，干燥，得到羟基磷灰石接枝聚乳酸（HA-g-PLLA）。
实施例5
本实施例的新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法如下：
（1）将3-氨丙基三乙氧基硅烷（4.7mL，0.02mol）溶于乙醇水的混合溶液（470mL）中，室温条件下水解1h，然后将羟基磷灰石（4g，0.01mol）加入到混合溶液中，搅拌反应6.5h，然后将反应后的产物进行离心分离，50℃干燥12h，将干燥后的产物用乙醇进行洗涤，然后再将洗涤后的产物进行真空干燥至含水量<20ppm，得到表面带有-NH2的羟基磷灰石（SiHA）。
（2）将含有端羧基的聚乳酸（0.9g，0.01mol）溶解在无水二氯甲烷中，然后将N,N'-羰基二咪唑（6.4g，0.04mol）加入到聚乳酸-无水二氯甲烷溶液中，对羧基进行活化（活化温度0℃，活化时间1.5h），然后将表面带有氨基的羟基磷灰石（5.1g，0.01mol）加入到聚乳酸溶液中，反应9h，将反应后的产物在转速为10000r/min的条件下离心，用无水二氯甲烷和无水乙醇洗涤，干燥，得到羟基磷灰石接枝聚乳酸（HA-g-PLLA）。
实施例6
本实施例的新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法如下：
（1）将3-氨丙基三乙氧基硅烷（3.5mL，0.015mol）溶于乙醇水的混合溶液（350mL）中，室温条件下水解1h，然后将羟基磷灰石（4g，0.01mol）加入到混合溶液中，搅拌反应6.5h，然后将反应后的产物进行离心分离，50℃干燥12h，将干燥后的产物用乙醇进行洗涤，然后再将洗涤后的产物进行真空干燥至含水量<20ppm，得到表面带有-NH2的羟基磷灰石（SiHA）。
（2）将含有端羧基的聚乳酸（0.9g，0.03mol）溶解在无水二氯甲烷中，然后将N,N'-羰基二咪唑（19.2g，0.12mol）加入到聚乳酸-无水二氯甲烷溶液中，对羧基进行活化（活化温度0℃，活化时间1.5h），然后将表面带有氨基的羟基磷灰石（5.1g，0.01mol）加入到聚乳酸溶液中，反应9h，将反应后的产物在转速为10000r/min的条件下离心，用无水二氯甲烷和无水乙醇洗涤，干燥，得到羟基磷灰石接枝聚乳酸（HA-g-PLLA）。

Claims (8)

1.一种新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，其特征在于步骤如下：
（1）将3-氨丙基三乙氧基硅烷加入到乙醇的水溶液中，室温条件下水解0.5~2 h，然后加入羟基磷灰石，室温条件下搅拌反应6~8h，将反应后的产物进行离心分离、干燥，将干燥后的产物用乙醇进行洗涤、真空干燥，得到表面带有氨基的羟基磷灰石；
（2）将含有端羧基的聚乳酸溶解在无水二氯甲烷中，然后加入N,N'-羰基二咪唑，在0℃的条件下对聚乳酸的端羧基活化0.5~2h，然后加入表面带有氨基的羟基磷灰石，室温下搅拌反应8~12h，将反应后的产物进行离心、洗涤、干燥，得到羟基磷灰石接枝聚乳酸。
2.根据权利要求1所述的羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中得到的表面带有氨基的羟基磷灰石的含水量小于20ppm。
3.根据权利要求1所述的羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中羟基磷灰石与3-氨丙基三乙氧基硅烷的摩尔比为1：1.5~2.5。
4.根据权利要求1所述的羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，其特征在于：所述步骤（1）中乙醇的水溶液中乙醇和水的体积比为5:1。
5.根据权利要求1所述的羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中含有端羧基的聚乳酸与N,N'-羰基二咪唑的摩尔比为1:2~5。
6.根据权利要求1所述的羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中表面带有氨基的羟基磷灰石与含有端羧基的聚乳酸的摩尔比为1:1~3。
7.根据权利要求1所述的羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中的洗涤采用无水二氯甲烷和无水乙醇。
8.根据权利要求1所述的羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）中的离心采用转速为10000r/min的离心机进行离心处理。
CN201510146352.2A 2015-06-29 2015-06-29 一种羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法 Active CN104927319B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510146352.2A CN104927319B (zh) 2015-06-29 2015-06-29 一种羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510146352.2A CN104927319B (zh) 2015-06-29 2015-06-29 一种羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104927319A true CN104927319A (zh) 2015-09-23
CN104927319B CN104927319B (zh) 2016-07-27

Family

ID=54114757

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510146352.2A Active CN104927319B (zh) 2015-06-29 2015-06-29 一种羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104927319B (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105412983A (zh) * 2016-01-12 2016-03-23 河南工程学院 一种纳米羟基磷灰石表面接枝rgd肽的制备方法与应用
CN105536057A (zh) * 2016-01-12 2016-05-04 河南工程学院 一种聚乳酸羟基乙酸接枝rgd肽的制备方法及应用
CN106479967A (zh) * 2016-12-01 2017-03-08 中国科学院长春应用化学研究所 一种细胞微载体及其制备方法
CN106496600A (zh) * 2016-10-26 2017-03-15 河南工程学院 一种改性纳米羟基磷灰石/聚乙二醇复合水凝胶的制备方法
CN110624131A (zh) * 2019-10-14 2019-12-31 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 可降解椎间融合器表面生物活性涂层的制备方法及其产品
CN111498822A (zh) * 2020-05-25 2020-08-07 四川大学 一种功能性的纤维化杂化凝胶及其制备方法与应用
CN111793225A (zh) * 2020-06-19 2020-10-20 郑州大学 一种明胶/结冷胶/羟基磷灰石复合水凝胶及其制备方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101130110A (zh) * 2007-09-13 2008-02-27 暨南大学 聚乳酸/羟基磷灰石复合骨组织修复材料相容剂的制备方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101130110A (zh) * 2007-09-13 2008-02-27 暨南大学 聚乳酸/羟基磷灰石复合骨组织修复材料相容剂的制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ZHONGKUI HONG ET AL.: "Grafting polymerization of L-lactide on the surface of hydroxyapatite nano-crystals", 《POLYMER》 *
ZHONGKUI HONG ET AL.: "Nano-composite of poly(L-lactide) and surface grafted hydroxyapatite: Mechanical properties and biocompatibility", 《BIOMATERIALS》 *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105412983A (zh) * 2016-01-12 2016-03-23 河南工程学院 一种纳米羟基磷灰石表面接枝rgd肽的制备方法与应用
CN105536057A (zh) * 2016-01-12 2016-05-04 河南工程学院 一种聚乳酸羟基乙酸接枝rgd肽的制备方法及应用
CN106496600A (zh) * 2016-10-26 2017-03-15 河南工程学院 一种改性纳米羟基磷灰石/聚乙二醇复合水凝胶的制备方法
CN106479967A (zh) * 2016-12-01 2017-03-08 中国科学院长春应用化学研究所 一种细胞微载体及其制备方法
CN110624131A (zh) * 2019-10-14 2019-12-31 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 可降解椎间融合器表面生物活性涂层的制备方法及其产品
CN111498822A (zh) * 2020-05-25 2020-08-07 四川大学 一种功能性的纤维化杂化凝胶及其制备方法与应用
CN111793225A (zh) * 2020-06-19 2020-10-20 郑州大学 一种明胶/结冷胶/羟基磷灰石复合水凝胶及其制备方法
CN111793225B (zh) * 2020-06-19 2022-05-27 郑州大学 一种明胶/结冷胶/羟基磷灰石复合水凝胶及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN104927319B (zh) 2016-07-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104927319A (zh) 一种新型羟基磷灰石接枝聚乳酸的制备方法
Ajdary et al. Acetylated nanocellulose for single-component bioinks and cell proliferation on 3D-printed scaffolds
Spinella et al. Concurrent cellulose hydrolysis and esterification to prepare a surface-modified cellulose nanocrystal decorated with carboxylic acid moieties
Bhattarai et al. Controlled synthesis and structural stability of alginate-based nanofibers
Shang et al. Physical properties of silk fibroin/cellulose blend films regenerated from the hydrophilic ionic liquid
Du et al. Cellulose/chitosan hybrid nanofibers from electrospinning of their ester derivatives
Zhong et al. A facile bottom-up route to self-assembled biogenic chitin nanofibers
Anwer et al. State-of-the-art advances in nanocomposite and bio-nanocomposite polymeric materials: A comprehensive review
CN101899171B (zh) 一种壳聚糖/纤维素复合材料的制备方法
CN103214623B (zh) 一种表面接枝改性纳米纤维素晶体的制备方法
CN101921410B (zh) 纤维素微球的制备方法
Yixue et al. Modification of agarose with carboxylation and grafting dopamine for promotion of its cell-adhesiveness
Barhoum et al. Nanocelluloses as new generation materials: Natural resources, structure-related properties, engineering nanostructures, and technical challenges
Zhao et al. Synthesis and characterization of disulfide-crosslinked alginate hydrogel scaffolds
CN106435830A (zh) 一种高强度壳聚糖复合纤维及其制备方法
CN107118393B (zh) 改性纤维素/聚乳酸复合材料的制备方法
Ma et al. Functional chitosan-based materials for biological applications
Coseri et al. Mild and selective oxidation of cellulose fibers in the presence of N-hydroxyphthalimide
Norouzi et al. Electrospun nanofibers using β-cyclodextrin grafted chitosan macromolecules loaded with indomethacin as an innovative drug delivery system
CN109796606A (zh) 一种基于多重动态化学键的自愈合水凝胶及其制备方法
CN105001425A (zh) 一种基于壳聚糖-聚乳酸接枝共聚物的制备方法
Imre et al. From natural resources to functional polymeric biomaterials
CN105879111A (zh) 生物降解多孔phbv/ppc复合支架的新型构建方法
CN112999402A (zh) 一种静电纺丝凝胶纤维膜及其制备方法和应用
CN102926027B (zh) 静电纺丝制备改性魔芋葡甘露聚糖/生物降解聚酯共混纤维的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant