CN104877921A - 一种酵母菌培养基及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种酵母菌培养基，其成分由马铃薯浸出粉、葡萄糖、氯霉素、中药粉、pH值调节剂和水组成；其中，所述的中药粉至少包括谷精草药粉、玉竹药粉、当归药粉、山药药粉、麦冬药粉以及茯苓药粉中的两种以上的任意组合。本发明还公开一种酵母菌培养基的制备方法。本发明的有益效果是：1)将中药粉进行简单处理后用作酵母菌培养基原料成分，符合绿色天然的理念；2)取材方便、制备方法简单易行，适合大规模生产应用；3)有效提高酵母菌的存活率，加快生长繁殖速度；4)能有效抑制杂菌的生长，同时不会影响酵母菌的生长。

Description

一种酵母菌培养基及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种微生物培养基，具体地是涉及一种酵母菌培养基及其制备方法。

背景技术

培养基是人工配制的供微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，一般都含有碳源、氮源、无机盐(包括微量元素)和水等。在自然界中，微生物种类繁多，营养类型多异，不同种类的微生物对营养元素的要求有着较大差异。在配制培养基时，首先要考虑微生物的营养需求，选择针对性强的培养基。

酵母菌是单细胞真菌。酵母菌含有极为丰富的蛋白质、碳水化合物、核酸、矿物质、B族维生素和有机酸。很多行业都运用到酵母菌，如在食品行业用于酿酒、制作面包以及调味品等；在医药行业用于生产酵母片、核糖核酸以及核黄素等；在化工方面用于石油脱蜡；在农业方面作为生产饲料等。延展到化妆品行业，一些国际知名的化妆品也把目光转向了小小的酵母菌身上。市面上享誉盛名的化妆产品,如SK-II的神仙水，雅诗兰黛的ANR系列，以及兰蔻小黑瓶等，这些较为高端的化妆品都含有酵母菌相关的成分。研究发现，酵母发酵产生的液体代谢物蕴含丰富维生素、氨基酸、矿物质及有机酸，和肌肤的天然保湿因子(NMF)成分极为相似，它能明显地改善肌肤表皮层的代谢过程，是提升及维持肌肤透亮、柔嫩及细滑的重要元素。

酵母菌作为一种对人类有益的菌种，在许多时候，需要其快速生长繁殖，这就要求提供它所需要的生长环境，营养丰富的培养基正是其中的关键。酵母菌适合在糖量高、偏酸性的环境中生长，其培养基配方成分必须保证其营养需求。目前，被广泛使用的是麦芽汁培养液和马铃薯葡萄糖水。麦芽汁培养液是一种优良的酵母菌培养基，但配置麦芽汁培养基存在制作复杂、麦芽粉自行糖化难以控制且需滴定验证、滤液易浑浊等多方面的问题，不适于生产实践中的大批量酵母菌培养。而马铃薯葡萄糖水培养基营养成分单一，导致菌体生长速度缓慢，往往满足不了酵母菌种群数量快速增长的需求。同时，以上两种培养基还存在共同容易出现的缺陷——在培养酵母菌的同时易滋长杂菌。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种适合酵母菌生长的酵母菌培养基，通过在配方中添加中药粉为酵母菌生长繁殖提供了更有利的环境，能丰富培养基的各种营养成分，提供相应的微量元素，从而提高酵母菌形成的数量和比例，缩短培养时间。

本发明的另一目的是提供上述一种酵母菌培养基的制备方法。

为达到上述目的，本发明采用了如下的技术方案：一种酵母菌培养基，由以下质量百分数的组分制成：

优选地，所述酵母菌培养基由以下质量百分数的组分制成：

更优选地，所述酵母菌培养基由以下质量百分数的组分制成：

其中，所述中药粉至少包括谷精草药粉、玉竹药粉、当归药粉、山药药粉、麦冬药粉、茯苓药粉中的两种以上的任意组合。

优选的，含量最低与含量最高的两种中药粉的质量比为1:1-4。

优选的，含量最低与含量最高的两种中药粉的质量比为1:1-2。

所述pH值调节剂至少包括柠檬酸铵、乙酸钾、乙酸钠中的一种或者两种以上任意组合。

所述酵母菌培养基的制备方法，包括步骤如下：

将中药粉中的各中药组分在烘箱中烘24-48小时，温度为40-80℃；然后分别用中药粉碎机，以10000-30000转/分钟的速率粉碎5-30秒；然后重复烘干、粉碎，重复上述操作1-3次，经粉碎后的中药粉用平筛过筛，取100-200目的细粉混合均匀；

取马铃薯浸出粉、葡萄糖、氯霉素、中药粉和pH值调节剂，在烧杯中简单混合后加水，升温至70-95℃，用搅拌器以200-2000转/分钟的速率搅拌3-5分钟后滤去不溶物，将所得溶液用高压灭菌锅灭菌，自然冷却后备用。

中药粉中有许多可利用的成分，如粗纤维、粗蛋白、粗脂肪、淀粉、多糖、氨基酸以及多种微量元素等。本发明所用的中药粉，是经过精心挑选、以最佳比例搭配的，特别适合酵母菌的繁殖培养。将中药粉用于制备培养基，一方面能丰富菌体的生长环境、使各种有益元素易得、易被酵母菌利用，从而提高出菌率；另一方面，采用特定的中药粉，可以抑制杂菌的繁殖，同时不会影响酵母菌的生长。

与现有培养基相比，本发明的有益效果是：

1)将中药粉进行简单处理后用作酵母菌培养基原料成分，符合绿色天然的理念；

2)取材方便、制备方法简单易行，适合大规模生产应用；

3)有效提高酵母菌的存活率，加快生长繁殖速度；

4)能有效抑制杂菌的生长，同时不会影响酵母菌的生长。

具体实施方式

以下结合具体实施例，进一步说明本发明的优点，但本发明并不受实施例的限制。以下实施例中的配方原料均可以在市场购买到。除非特别说明，实施例所述的含量均为质量百分含量。以下实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或厂商建议的条件进行。

对比例1

采用市售马铃薯葡萄糖水粉末，使用时称取24g该粉末于1L蒸馏水中，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后在高压灭菌锅121℃灭菌20分钟备用。

对比例2

采用市售麦芽汁液体培养基粉末，使用时称取130.1g该粉末于1L蒸馏水中，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装后在高压灭菌锅121℃灭菌20分钟备用。

实施例1和2

酵母菌培养基由下表质量百分数的组分制成：

上述酵母菌培养基的制备方法包括的步骤如下：

将各中药粉在烘箱中70℃烘24小时，然后在中药粉碎机中以18000转/分钟的速率粉碎10秒，将所得药粉在烘箱中70℃烘24小时、然后再在中药粉碎机中以18000转/分钟的速率粉碎10秒；将经烘干粉碎后的药粉用平筛过筛，取100-200目的细粉混合均匀；

按照配方称取中药粉及其他各个组分于烧杯中，加水搅拌混合，加热至90℃并搅拌5分钟，滤去不溶物；把上述溶液分装后在高压灭菌锅120℃灭菌20分钟，自然冷却至室温备用。

对比例1-2与实施例1-2的效果对比

使用的菌株为白色假丝酵母ATCC10231、啤酒酵母AS2.4、白地霉AS2.361，均为市购。

菌液制备：取白色假丝酵母、啤酒酵母和白地霉的新鲜斜面培养物制备成菌液，再比浊；各菌液分别按10倍稀释法稀释至1:10⁷、1:10⁸、1:10⁹。

出菌灵敏度测定：将1:10⁷、1:10⁸、1:10⁹三个稀释级别的菌液分别取1mL加至4种培养基中，每一个稀释级做5管对照样，均置20-28℃培养，逐日观察培养结果，重复进行三次试验，结果如下表：

各批培养基通过3种菌株3个稀释级别5管对比重复3次试验，试验结果表明：三种酵母菌在应用了本发明培养基的实施例1和实施例2中的平均生长管数均达到了最大值(15、15、15)，并且多于对比例1(12、13.7、13.3)和对比例2(13.3、14.7、14.7)。同时，对前三天的生长管数进行对比分析后可知，酵母菌在本发明的培养基中的生长繁殖速度均较快，表明本发明培养基能有效提高酵母菌的出菌率。

另外，还考察了三种菌株在四种培养基中的生长指数。每一个稀释级别菌液接种到5管培养基中，以生长4管以上的最高稀释级(1:10ⁿ稀释)为该批培养基的生长指数，表示为10^-n，结果如下表：

结果表明：采用本发明培养基的实施例1和实施例2的生长指数总和及平均值都达到了最高值(81、27)，并且均大于对比例1(76、25.3)和对比例2(80、26.7)。因此，实验数据显示采用本发明的培养基能有效提高酵母菌的存活率。

对比例3-4和实施例3-10

对比例3-4和本发明实施例3-10配方如下表：

对比例3-4和实施例3-10的效果对比:

使用的菌株为白色假丝酵母ATCC10231、大肠埃希氏菌ATCC8739、金黄色葡萄球菌ATCC 6538，均为市购。

菌液制备：取白色假丝酵母、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的新鲜斜面培养物制备菌液，并通过比浊法控制菌液浓度达到10³级(相当于每毫升含菌1000cfu)。

培养基专属性测试：将浓度级别为10⁴的三种菌液分别取1mL分别加至9mL对比例1-4和实施例1-10配方培养基中，得到含菌10³cfu/mL的培养基。将所得培养基在20-28℃培养，在第2天、第5天抽样稀释观察各菌种在培养基中的浓度变化，结果如下表：

实验结果表明，本发明培养基是一种对酵母菌有特定选择性的培养基，可抑制杂菌的繁殖，同时不会影响酵母菌的生长。

除非特别说明，本发明所述含量均指质量百分比含量。

以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不受限于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。

Claims (8)

1.一种酵母菌培养基，其特征在于，由以下质量百分数的组分制成：

2.按照权利要求1所述的一种酵母菌培养基，其特征在于，由以下质量百分数的组分制成：

3.按照权利要求1所述的一种酵母菌培养基，其特征在于，由以下质量百分数的组分制成：

4.按照权利要求1-3任一所述的一种酵母菌培养基，其特征在于，所述中药粉至少包括谷精草药粉、玉竹药粉、当归药粉、山药药粉、麦冬药粉以及茯苓药粉中的两种以上的任意组合。

5.按照权利要求4所述的一种酵母菌培养基，其特征在于，含量最低与含量最高的两种中药粉的质量比为1:1-4。

6.按照权利要求4所述的一种酵母菌培养基，其特征在于，含量最低与含量最高的两种中药粉的质量比为1:1-2。

7.按照权利要求4所述的一种酵母菌培养基，其特征在于，所述pH值调节剂至少包括柠檬酸铵、乙酸钾、乙酸钠中的一种或者两种以上的组合。

8.按照权利要求5任一所述的一种酵母菌培养基的制备方法，其特征在于，包括步骤如下：

将中药粉中的各中药组分在烘箱中烘24-48小时，温度为40-80℃；然后分别用中药粉碎机，以10000-30000转/分钟的速率粉碎5-30秒；然后重复烘干、粉碎，重复上述操作1-3次，经粉碎后的中药粉用平筛过筛，取100-200目的细粉混合均匀；

取马铃薯浸出粉、葡萄糖、氯霉素、中药粉和pH值调节剂，在烧杯中简单混合后加水，升温至70-95℃，用搅拌器以200-2000转/分钟的速率搅拌3-5分钟后滤去不溶物，将所得溶液用高压灭菌锅灭菌，自然冷却后备用。