CN104873955A - 烧伤愈合水凝胶 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种烧伤愈合水凝胶，由以下重量份的成分组成：rh-EGF0.01～0.05份、三七5～15份、黄柏6～15份、虎杖8～15份、赶黄草6～10份、绿茶5～10份、槐米8～15份、侧柏叶5～12份。该水凝胶可有效抑菌，帮助rh-EGF迅速渗入创面并提高rh-EGF的生物活性，起到快速愈合创面的作用，对深度烧伤尤为有效。

Description

烧伤愈合水凝胶

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种烧伤愈合水凝胶。

背景技术

重组人表皮细胞生长因子(rh-EGF)是近年来开发并应用于烧伤创面治疗的一种生长因子，研究认为rh-EGF可刺激多种细胞的增殖，主要是表皮细胞、内皮细胞等，促进新生肉芽组织形成和创面的再上皮化。对于深Ⅱ度及以上程度的烧伤，由于伤及皮肤深层和部分网状层以及皮肤附件，创面在愈合过程中，坏死组织的持续存在，过度炎症反应以及创面继发感染，不仅阻碍了rh-EGF与肉芽组织的接触，同时感染分泌物中酶的降解作用也会降低rh-EGF的生物活性，阻碍了创面的愈合。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种将rh-EGF与多种中药材加以复配而成的烧伤愈合水凝胶，该水凝胶可有效抑菌，帮助rh-EGF迅速渗入创面并提高rh-EGF的生物活性，起到快速愈合创面的作用，对深度烧伤尤为有效。

本发明提供的技术方案是烧伤愈合水凝胶，由以下重量份的成分组成：rh-EGF 0.01～0.05份、三七5～15份、黄柏6～15份、虎杖8～15份、赶黄草6～10份、绿茶5～10份、槐米8～15份、侧柏叶5～12份。

各成分的重量份为：rh-EGF 0.02～0.03份、三七8～10份、黄柏8～12份、虎杖10～12份、赶黄草9～10份、绿茶6～8份、槐米10～12份、侧柏叶10～12份。

其制备方法包括以下步骤：

1)将配方量的三七、黄柏、虎杖、赶黄草、绿茶、槐米和侧柏叶粉碎，得到粗粉；

2)按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数3～5为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉10～20倍重量的水，加热至75～100℃，保温提取30～60分钟，收集提取液到储罐，经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

3)提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.05～1.08的浸膏；

4)将配方量的rh-EGF与步骤3)中的浸膏混合，加入适量甘油、氯化钙溶液及海藻酸钠，调匀，即为烧伤愈合水凝胶。

本发明具有以下有益效果：

1、本发明选用三七、黄柏、虎杖、赶黄草、绿茶、槐米和侧柏叶与rh-EGF复配制成烧伤愈合水凝胶，这些中草药组分中含有大量的槲皮素，在烫伤早期可较好地控制坏死组织，抑制炎细胞浸润，还可以通过减少坏死物中酶的降解作用，保持rh-EGF的生物活性，通过收敛降低烧伤烫伤早期高渗出，避免rh-EGF透过坏死组织间接作用于创面，使rh-EGF在直接切持续性接触中更好的发挥生物活性，从而起到加快创面愈合的效果。对于深Ⅱ度及以上程度的烧伤，尤为有效。

2、本发明采用罐组动态逆流提取工艺可充分提取三七、黄柏、虎杖、赶黄草、绿茶、槐米和侧柏叶中的槲皮素，可大大增强烧伤愈合水凝胶的药效，大幅缩短创面愈合周期。

3、本发明为水凝胶，能在创面形成凝胶基质，提供生理性湿润环境，改善组织微循环，阻止瘀滞组织进行性坏死，同时，中药组分的抗炎和抑菌作用，又弥补了湿润环境和组织坏死易致感染的缺陷，通过减轻创面炎症反应，减少创面氧耗，从而改善局部缺血情况。

具体实施方式

以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。

实施例1

配方：rh-EGF 0.01份、三七5份、黄柏6份、虎杖8份、赶黄草6份、绿茶5份、槐米8份、侧柏叶5份。

制备方法：

1)将配方量的三七、黄柏、虎杖、赶黄草、绿茶、槐米和侧柏叶粉碎，得到粗粉；

2)按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数3为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉10倍重量的水，加热至75℃，保温提取30分钟，收集提取液到储罐，经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

3)提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.05的浸膏；

4)将配方量的rh-EGF与步骤3)中的浸膏混合，加入适量甘油、氯化钙溶液及海藻酸钠，调匀，即为烧伤愈合水凝胶。

实施例2

配方：rh-EGF 0.05份、三七15份、黄柏15份、虎杖15份、赶黄草10份、绿茶10份、槐米15份、侧柏叶12份。

制备方法：

1)将配方量的三七、黄柏、虎杖、赶黄草、绿茶、槐米和侧柏叶粉碎，得到粗粉；

2)按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数5为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉20倍重量的水，加热至100℃，保温提取60分钟，收集提取液到储罐，经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

3)提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.08的浸膏；

4)将配方量的rh-EGF与步骤3)中的浸膏混合，加入适量甘油、氯化钙溶液及海藻酸钠，调匀，即为烧伤愈合水凝胶。

实施例3

配方：rh-EGF 0.02份、三七8份、黄柏8份、虎杖10份、赶黄草9份、绿茶6份、槐米10份、侧柏叶10份。

制备方法：

1)将配方量的三七、黄柏、虎杖、赶黄草、绿茶、槐米和侧柏叶粉碎，得到粗粉；

2)按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数4为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉15倍重量的水，加热至95℃，保温提取50分钟，收集提取液到储罐，经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

3)提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.06的浸膏；

4)将配方量的rh-EGF与步骤3)中的浸膏混合，加入适量甘油、氯化钙溶液及海藻酸钠，调匀，即为烧伤愈合水凝胶。

实施例4

配方：rh-EGF 0.03份、三七10份、黄柏12份、虎杖12份、赶黄草10份、绿茶8份、槐米12份、侧柏叶12份。

制备方法：

1)将配方量的三七、黄柏、虎杖、赶黄草、绿茶、槐米和侧柏叶粉碎，得到粗粉；

2)按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数4为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉15倍重量的水，加热至95℃，保温提取50分钟，收集提取液到储罐，经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

3)提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.06的浸膏；

4)将配方量的rh-EGF与步骤3)中的浸膏混合，加入适量甘油、氯化钙溶液及海藻酸钠，调匀，即为烧伤愈合水凝胶。

为了验证本发明药物的疗效，进行以下动物实验。

1、实验动物

健康成年新西兰大白兔20只，体重为2.0±0.5kg，雌雄不计，于25℃、50％湿度环境下分笼饲养。

2、实验方法

2.1动物烧伤模型的建立

实验前一周，于25℃、50％湿度环境下单笼饲养，自由摄食饮水。新西兰大白兔称重后以2％戊巴比妥钠(30mg/kg)耳缘静脉注射麻醉，起效后，剪短背部毛，8％硫化钠脱毛，温热水冲洗残留于皮肤上的硫化钠，以35层医用纱布为热载体，恒温热水浴中加热至99℃保持15s，分别于兔脊柱两侧各制作1个圆形、深Ⅱ度烫伤创面，创面直径3.0cm，创缘间距保持2cm，使创面与创周正常皮肤形成明显分界。伤后病例学观察证实为深Ⅱ度烫伤，烫伤后1h腹腔注射生理盐水30ml/kg抗休克，分组用药，予以凡士林纱布疯爱，无菌敷料包扎后麻醉复苏。

2.2实验分组与给药方案

采用自身对照研究方法，将20只新西兰大白兔脊柱左侧的创面分为实验组，将右侧的创面分为对照组。实验组使用实施例3的药物，对照组使用重组人表皮生长因子凝胶(配方：重组人表皮生长因子10～100μg/g，卡波姆2.8％，甘油20％，聚乙二醇10％、羟苯乙酯0.8％、甘露醇2％，注射用水至100％)。每组均匀涂抹药物厚度约2～3mm，凡士林纱布覆盖后无菌敷料包扎，外用胶布缠绕固定，每天下午3点定时更换一次，观察并记录创面情况。

3、检测指标及方法

3.1创面大体观察

每天下午3点更换药物时，肉眼观察并记录实验动物各组创面渗出、创缘红肿等反应、痂壳脱落及上皮形成情况。

3.2创面愈合率

麻醉状态下，以透明网格纸描出所有烫伤模型分组创面用药前的图形，计算原创面面积，于烫伤后第4d、第7d、第10d、第14d，分别再次用透明网格纸描出被随机选取的10只新西兰大白兔处死后的分组创面图形并计算面积，为剩余创面面积。创面愈合率＝(原创面面积-剩余创面面积)/原创面面积×100％。

3.2组织学观察及痂下细菌定量分析

于烫伤后第4d、第7d、第10d、第14d，随机选取5只兔子，采用无菌术取痂下组织1g，置于无菌试管中，加入1ml无菌生理盐水，以电动组织匀浆器，将组织制成匀浆液，100倍梯度稀释，取0.1ml稀释液与熔融状态的营养琼脂混匀，37℃孵育24h，计算平板上生长的总菌落，计算公式：每g组织细菌含量(cfu/g)＝菌落数(cfu)×稀释倍数(100)÷组织重量(1g)。以每g组织细菌含量＞1×10⁵cfu/g判定为阳性，以每g组织细菌含量＜1×10⁵cfu/g判定为阴性进行比较。

4、结果

表1：两组创面观察结果

表2：两组创面不同时间愈合面积百分率(％，n＝10)

	实验组	对照组
			第4d	5.24±3.10*	4.07±2.68
第7d	56.7±2.94**	19.6±2.61
			第10d	66.8±5.11*	49.1±5.18
第14d	86.5±9.32**	61.03±8.69

注：与对照组相比，*p＜0.05；**p＜0.01。

表3：两组痂下细菌定量分析(n＝10)

实验组烫伤后第4d时细菌数量开始减少，而对照组第7d才开始减少，烫伤后第14d，两组细菌大部分被机体自身清除。

Claims (3)

1.烧伤愈合水凝胶，其特征在于：由以下重量份的成分组成：rh-EGF0.01～0.05份、三七5～15份、黄柏6～15份、虎杖8～15份、赶黄草6～10份、绿茶5～10份、槐米8～15份、侧柏叶5～12份。

2.根据权利要求1所述的烧伤愈合水凝胶，其特征在于：各成分的重量份为：rh-EGF 0.02～0.03份、三七8～10份、黄柏8～12份、虎杖10～12份、赶黄草9～10份、绿茶6～8份、槐米10～12份、侧柏叶10～12份。

3.根据权利要求1或2所述的烧伤愈合水凝胶，其特征在于：其制备方法包括以下步骤：

1)将配方量的三七、黄柏、虎杖、赶黄草、绿茶、槐米和侧柏叶粉碎，得到粗粉；

2)按罐组动态逆流提取工艺提取，以罐数3～5为一批次，将上述粗粉投入每罐中，加入粗粉10～20倍重量的水，加热至75～100℃，保温提取30～60分钟，收集提取液到储罐，经过多级动态循环逆流提取后，合并提取液；

3)提取液经离心过滤后，浓缩至相对密度为1.05～1.08的浸膏；

4)将配方量的rh-EGF与步骤3)中的浸膏混合，加入适量甘油、氯化钙溶液及海藻酸钠，调匀，即为烧伤愈合水凝胶。